專利名稱：一種治療冠心病心絞痛藥物的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及ー種治療冠心病心絞痛藥物的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
心血管疾病為目前發(fā)病率最高的四種疾病之一，其中冠心病和心絞痛較為常見。在老年人群中有較高的發(fā)病率。隨著我國(guó)進(jìn)入老齡化社會(huì)，對(duì)該類治療藥物的需求也越來越大。益心舒膠囊(標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS3-b-2620_97)在治療冠心病心絞痛方面有好的療效。其配方如下人參150g、麥冬150g、五味子100g、黃芪150g、丹參200g、川芎IOOg,山楂150g。制備方法如下以上七味，取人參粉碎細(xì)粉后備用。五味子、丹參用85%こ醇回流提取2次，第一次3小時(shí)，第二次I. 5小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度I. 15 I. 12(20°C )， 得醇浸膏。其余麥冬等加水煎煮2次，第一次2. 5小時(shí)，第二次I. 5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至約500ml，加入等量85%こ醇，充分?jǐn)嚢韬?，靜置過夜，濾去沉淀物，濾液回收こ醇并濃縮至相對(duì)密度I. 30 I. 36 (80°C )，得水提浸膏。將上述ニ種浸膏合并后，加入人參細(xì)粉及適量淀粉，混合均勻，制粒，干燥，裝膠囊，制成1000粒，即得。該藥物具有益氣復(fù)脈，活血化瘀，養(yǎng)陰生津的作用。用于氣陰兩虛，心肌脈結(jié)代，胸悶不舒、胸痛及冠心病心絞痛見有上述癥狀者。在現(xiàn)有的益心舒膠囊的檢測(cè)方法中，并未考察人參皂苷Re (C48H82O18)的含量。為進(jìn)ー步控制該產(chǎn)品的質(zhì)量，保證檢測(cè)人員的身體健康，減少環(huán)境污染，需要對(duì)該產(chǎn)品的檢測(cè)進(jìn)行改進(jìn)，從而更進(jìn)一歩保證該產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種治療冠心病心絞痛藥物的檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法能夠有效控制藥物的質(zhì)量，使藥物質(zhì)量達(dá)到穩(wěn)定、可控、高效及安全的標(biāo)準(zhǔn)，從而更好地滿足醫(yī)療需要。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。一種治療冠心病心絞痛藥物的檢測(cè)方法，該藥物由以下重量份的藥材制成人參100-500重量份，麥冬100-500重量份，五味子100-300重量份，黃芪150-450重量份，丹參200-600重量份，川芎100-300重量份，山楂200-400重量份，微晶纖維素300-500重量份，甘露醇50-200重量份；該檢測(cè)方法包括采用高效液相色譜法檢測(cè)所述藥物中的人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1，其中，所述高效液相色譜的條件包括采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱； 采用こ腈溶液為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫，所述梯度洗脫的過程為第0-25分鐘，流動(dòng)相Aこ腈溶液為15%體積，流動(dòng)相B水為85%體積；第25-70分鐘，流動(dòng)相Aこ腈溶液為15-22%體積，流動(dòng)相B水為85-78%體積 ’第70-80分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為22-30%體積，流動(dòng)相B水為78-70%體積；第80-105分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為30-40%體積，流動(dòng)相B水為70-60%體積；第105-120分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為40-15%體積，流動(dòng)相B水為60-85%體積。梯度洗脫(gradient elution)又稱為梯度淋洗或程序洗脫。在氣相色譜中，為了改善對(duì)寬沸程樣品的分離和縮短分析周期，廣泛采用程序升溫的方法。而在液相色譜中則采用梯度洗脫的方法。在同一個(gè)分析周期中，按一定程度不斷改變流動(dòng)相的濃度配比，稱為梯度洗脫。從而可以使一個(gè)復(fù)雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子達(dá)到良好的分離目的。本發(fā)明梯度洗脫的優(yōu)點(diǎn)1)縮短分析周期；2)提高分離能力；3)峰型得到改善，很少拖尾；4)增加靈敏度。由于本發(fā)明治療冠心病心絞痛藥物中化學(xué)成分比較多，采用梯度洗脫能明顯體現(xiàn)成分定量。在上述檢測(cè)方法中，所述高效液相色譜的條件還包括柱溫為25 40°C，優(yōu)選為30。。。在上述檢測(cè)方法中，所述高效液相色譜的條件還包括檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ;流速為 1mT, mirr1。在上述檢測(cè)方法中，對(duì)照品溶液的制備方法如下精密稱取人參阜苷Rb1、人參阜苷Rg1對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml各含0. 2mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。在上述檢測(cè)方法中，供試品溶液的制備方法如下取所述藥物適量，研細(xì)，取約4g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放至室溫，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml,蒸干,殘洛用水20ml分次轉(zhuǎn)溶至分液漏斗中，用三氯甲燒萃取3次,每次15ml,棄去三氯甲烷液，水層用水飽和的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用0. 5% NaOH溶液洗滌4次，每次15ml，合并堿洗液，用水飽和的正丁醇萃取2次，每次10ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗3次，每次15ml，分取正丁醇層，置水浴上蒸干，殘?jiān)?0%乙腈溶解，并定容至5ml，作為供試品溶液。在上述檢測(cè)方法中，所述藥物的制備方法如下I)將所述的人參粉成細(xì)粉，備用；2)將所述量的五味子、丹參加入6-12倍體積的85%乙醇回流提取，過濾，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度I. 10-1. 35的清膏，備用；3)將所述量的麥冬、黃芪、川彎、山楂加6-12倍體積的水煎煮，煎液濾過，加等體積的85%的乙醇，充分?jǐn)嚢韬螅o置過夜，得醇沉液；4)將步驟3)所得醇沉液，濾去沉淀物，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度
1.20-1.40的清膏，備用；5)將步驟2)和步驟4)所得的清膏合并，加入步驟I)所得人參細(xì)粉及300-500重量份的微晶纖維素和50-200重量份甘露醇混勻，制成微丸。在上述檢測(cè)方法中，所述藥物的制備方法如下I)將所述量的人參粉成細(xì)粉，備用；2)將所述量的五味子、丹參加入8倍體積的85%乙醇回流提取，過濾，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度I. 15-1. 12的清膏，備用；
3)將所述量的麥冬、黃芪、川芎、山楂加8倍體積的水煎煮，煎液濾過，加等量的85%的こ醇，充分?jǐn)嚢韬螅o置過夜，得醇沉液；4)將步驟3)所得醇沉液，濾去沉淀物，濾液回收こ醇并濃縮至相對(duì)密度I. 30-1. 36的清膏，備用；5)將步驟2)和步驟4)所得的清膏合并，加入步驟I)所得人參細(xì)粉及400重量份的微晶纖維素和100重量份的甘露醇混勻，制成微丸。在ー個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明的檢測(cè)方法包括如下步驟一、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相A :こ腈，流動(dòng)相B :7jC，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ;柱溫30°C ;流速為ImL mirT1。理論板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計(jì) 算應(yīng)不低于6000。
權(quán)利要求
1.一種治療冠心病心絞痛藥物的檢測(cè)方法，該藥物由以下重量份的藥材制成 人參100-500重量份，麥冬100-500重量份，五味子100-300重量份，黃芪150-450重量份，丹參200-600重量份，川芎100-300重量份，山楂200-400重量份，微晶纖維素300-500重量份，甘露醇50-200重量份； 該檢測(cè)方法包括采用高效液相色譜法檢測(cè)所述藥物中的人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1，其中，所述高效液相色譜的條件包括 采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱； 采用乙腈溶液為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫，所述梯度洗脫的過程為 第0-25分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為15%體積，流動(dòng)相B水為85%體積；第25-70分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為15-22%體積，流動(dòng)相B水為85-78%體積；第70-80分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為22-30%體積，流動(dòng)相B水為78-70%體積；第80-105分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為30-40%體積，流動(dòng)相B水為70-60%體積；第105-120分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為40-15%體積，流動(dòng)相B水為60-85%體積。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜的條件還包括柱溫為25 40°C，優(yōu)選為30°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜的條件還包括檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ;流速為ImL · mirT1。
4.根據(jù)權(quán)利要求I至3中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，對(duì)照品溶液的制備方法如下 精密稱取人參皂苷Rbp人參皂苷Rg1、人參皂苷Re對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml各含O.2mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，供試品溶液的制備方法如下 取所述藥物適量，研細(xì)，取約4g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放至室溫，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)盟?0ml分次轉(zhuǎn)溶至分液漏斗中，用三氯甲烷萃取3次，每次15ml，棄去三氯甲烷液，水層用水飽和的正丁醇萃取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用O. 5% NaOH溶液洗滌4次，每次15ml，合并堿洗液，用水飽和的正丁醇萃取2次，每次IOml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗3次，每次15ml，分取正丁醇層，置水浴上蒸干，殘?jiān)?0%乙腈溶解，并定容至5ml，作為供試品溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求I至5中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述藥物的制備方法如下 1)將所述的人參粉成細(xì)粉，備用； 2)將所述量的五味子、丹參加入6-12倍體積的85%乙醇回流提取，過濾，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度I. 10-1. 35的清膏，備用； 3)將所述量的麥冬、黃芪、川芎、山楂加6-12倍體積的水煎煮，煎液濾過，加等體積的85%的乙醇，充分?jǐn)嚢韬螅o置過夜，得醇沉液； 4)將步驟3)所得醇沉液，濾去沉淀物，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度I.20-1. 40的清膏，備用；5)將步驟2)和步驟4)所得的清膏合并，加入步驟I)所得人參細(xì)粉及300-500重量份的微晶纖維素和50-200重量份甘露醇混勻，制成微丸。
7.根據(jù)權(quán)利要求I至6中任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述藥物的制備方法如下 1)將所述量的人參粉成細(xì)粉，備用； 2)將所述量的五味子、丹參加入8倍體積的85%乙醇回流提取，過濾，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度I. 15-1. 12的清膏，備用； 3)將所述量的麥冬、黃芪、川芎、山楂加8倍體積的水煎煮，煎液濾過,加等量的85%的乙醇，充分?jǐn)嚢韬?，靜置過夜，得醇沉液； 4)將步驟3)所得醇沉液，濾去沉淀物，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度I.30-1. 36的清膏，備用； 5)將步驟2)和步驟4)所得的清膏合并，加入步驟I)所得人參細(xì)粉及400重量份的微晶纖維素和100重量份的甘露醇混勻，制成微丸。
全文摘要
本發(fā)明提供一種治療冠心病心絞痛藥物的檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法包括采用高效液相色譜法檢測(cè)所述藥物中的人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1，其中，所述高效液相色譜的條件包括采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；采用乙腈溶液為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫，所述梯度洗脫的過程為第0-25分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為15％體積，流動(dòng)相B水為85％體積；第25-70分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為15-22％體積，流動(dòng)相B水為85-78％體積；第70-80分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為22-30％體積，流動(dòng)相B水為78-70％體積；第80-105分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為30-40％體積，流動(dòng)相B水為70-60％體積；第105-120分鐘，流動(dòng)相A乙腈溶液為40-15％體積，流動(dòng)相B水為60-85％體積。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102768247SQ201210106229
公開日2012年11月7日 申請(qǐng)日期2012年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月11日
發(fā)明者梁小平, 梁起臣 申請(qǐng)人:梁麗