專利名稱：一種干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，更具體涉及一種干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法。
背景技術(shù)：
唳蟲脒(Acetamiprid)屬硝基亞甲基雜環(huán)類化合物,是一種新型殺蟲劑，于1996年由日本曹達(dá)株式會(huì)社開發(fā)并商品化，是繼吡蟲啉、烯啶蟲胺之后的第三個(gè)新煙堿類殺蟲齊U。作用于昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)突觸部位的煙堿乙酰膽堿受體，干擾昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)的刺激傳導(dǎo)，弓丨起神經(jīng)系統(tǒng)通路阻塞，造成神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿在突觸部位的積累，從而導(dǎo)致昆蟲麻痹，最終死亡。另外，啶蟲脒對(duì)害蟲天敵殺傷力小、對(duì)魚毒性較低、對(duì)蜜蜂影響小。因此被廣泛用于水果、蔬菜以及茶葉上的半翅目、鞘翅目及鱗翅目害蟲的防治有研究報(bào)道指出，啶蟲脒低濃度下會(huì)影響蜜蜂對(duì)刺激的靈敏度以及損傷蜜蜂的長期記憶。另外，體外實(shí)驗(yàn)中啶蟲脒顯示出了對(duì)人體外周血淋巴細(xì)胞的基因毒性以及細(xì)胞毒性，表明了啶蟲脒會(huì)誘發(fā)DNA損傷。因而近年來世界各國紛紛發(fā)布了家產(chǎn)品中啶蟲脒的限量標(biāo)準(zhǔn)。2010年3月16日，美國環(huán)保署公布?xì)⑾x劑啶蟲脒限量最終法規(guī)，該最終法規(guī)規(guī)定以下作物表啶蟲脒的殘留許可限量小型水果、藤攀植物、亞組13 - 07F :0. 35ppm ;干茶葉50. Oppm。苜猜草料、苜猜干草的區(qū)域注冊(cè)許可限量分別是0. 10ppm、0. Olppm ；2011年12月16日，加拿大衛(wèi)生部蟲害防治管理局將瓜類果蔬中啶蟲脒的限量標(biāo)準(zhǔn)提高到了
O.5ppm ;歐盟此前對(duì)啶蟲脒的殘留許可限量為O. 01mg/Kg,近期對(duì)部分商品中啶蟲脒的限量有所放寬，但還是在必須檢測(cè)的列表當(dāng)中。鑒于上述原因，有必要研究掌握啶蟲脒的有效檢測(cè)方法，達(dá)到有效監(jiān)控其在環(huán)境中殘留，減少對(duì)于益蟲及人類危害的目的?，F(xiàn)階段對(duì)于啶蟲脒的檢測(cè)方法多樣，但都包含了樣品前處理過程。前處理方法多為使用有機(jī)溶劑萃取，之后使用層析柱或者具有吸附性填料的柱子進(jìn)行清洗。此類前處理技術(shù)的關(guān)鍵缺點(diǎn)是提取效率低、處理過程耗時(shí)較長。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法，經(jīng)該方法處理后的待測(cè)樣品能夠直接用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行檢測(cè)。該前處理方法與現(xiàn)有國標(biāo)方法相比，具有操作簡單有效、成本低、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，具有很強(qiáng)的可操作性。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案
一種干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法包括以下步驟
(1)稱取I.00 g(精確至O. 01 g)樣品于50 mL離心管中；
(2)往上述離心管中加入二次蒸餾水10毫升，浸泡5分鐘后，再加入乙腈20毫升，勻質(zhì)30秒；
(3)加入5克氯化鈉，均質(zhì)20秒；
(4)尚心管加蓋振蕩1-2分鐘，再于3500-4000轉(zhuǎn)/分鐘下尚心5分鐘；
(5)準(zhǔn)確吸取上清液8.O毫升于雞心瓶中，40°C下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；(6)用2mL乙腈溶液和2 mL正己烷，渦旋洗脫；所述的乙腈溶液中乙腈與水的體積比為 1:9 ；
(7)洗脫液于10000-15000轉(zhuǎn)/分鐘高速離心5分鐘，靜置分層，取下層清液用0.25 ii m微孔濾膜過濾，所得濾液即為待測(cè)液。本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)在于
(1)目前報(bào)導(dǎo)的大部分啶蟲脒提取方法是針對(duì)新鮮果蔬設(shè)計(jì)，而本方法是針對(duì)干果蔬中啶蟲脒的一種提取方法；
(2)目前報(bào)導(dǎo)的大部分提取方法均需色譜柱層析方法將樣品中的啶蟲脒與基質(zhì)分離，而本方法采用離心分離的方法同樣可以將啶蟲脒從基質(zhì)中分離出來，從而簡化了分離步驟，節(jié)省了分析時(shí)間；
(3)國標(biāo)方法需要用乙酸-乙腈混合溶液來提取啶蟲脒，而在本發(fā)明中我們直接用乙臆提取。


圖I是本發(fā)明所述的干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法的流程圖。
具體實(shí)施例方式按照本發(fā)明的發(fā)明內(nèi)容實(shí)施本發(fā)明，所需試劑溶液的配制方法如下4mmol/L醋酸銨水0. 154 g醋酸銨+0. 5mL甲酸于500mL去離子水中，超聲脫氣；乙腈-水(1+9) (V/V)100 mL乙腈與900 mL水混勻；標(biāo)準(zhǔn)工作液取I. 0 u g/mL標(biāo)準(zhǔn)中間液I. OmL用乙腈-水(1+9)稀釋至10 mL，得到0. I u g/mL工作液；定量曲線用10%乙腈水配制定量曲線標(biāo)液，各個(gè)組分的濃度 0. 002 V- g/mL、0. 004 u g/mL、0. 008 u g/mL、0. 02 u g/mL ;基質(zhì)混合校準(zhǔn)曲線:分別取 2. 00 mL 濃度為 0. 002 u g/mL,0. 004 u g/mL,0. 008 u g/mL,0. 02 y g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)空白樣品(前處理至步驟“40°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸干”)進(jìn)行洗脫，正己烷除雜，過濾得基質(zhì)混合校準(zhǔn)溶液。實(shí)施例I
以下實(shí)施例以枸杞中啶蟲脒的提取為例，結(jié)合附圖來敘述本發(fā)明的具體工作原理本發(fā)明所說的干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法的具體操作流程如圖I所示。包括樣品浸泡、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、渦旋洗脫等操作。具體步驟
(1)稱取I.00 g(精確至0.01 g)枸杞于50 mL離心管中；
(2)往上述離心管中加入二次水10毫升，浸泡5分鐘后，再加入乙腈20毫升，勻質(zhì)30
秒；
(3)加入5克氯化鈉，均質(zhì)20秒；
(4)尚心管加蓋振蕩I分鐘,在3800轉(zhuǎn)/分鐘尚心5分鐘；
(5)準(zhǔn)確吸取上清液8.0毫升于雞心瓶中，40 °C下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干；
(6)用2mL乙腈水(I 9)溶液和2 mL正己烷，渦旋洗脫；
(7)洗脫液于15000轉(zhuǎn)/分鐘高速離心5分鐘，靜置分層，取下層清液用0.25 y m微孔濾膜過濾，所得濾液即可上機(jī)測(cè)試。
注意事項(xiàng) (I)每批檢測(cè)樣做樣順序?yàn)樵噭┛瞻?、樣品空白、加?biāo)回收，樣品。(2)加標(biāo)回收添加O. 01 μ g/mL混合標(biāo)準(zhǔn)工作液I. O mL,相當(dāng)于O. 01 mg/kg添加水平。(3)初測(cè)時(shí)選用使用基質(zhì)的任一樣品加標(biāo)、加標(biāo)水平為O. 01 mg/kg,復(fù)測(cè)做平行樣、加標(biāo)水平與初測(cè)值相當(dāng)，樣品濃度較高時(shí)減小稱樣量或提高標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度，使檢測(cè)值在曲線范圍之內(nèi).
(4)使用基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液、檢測(cè)結(jié)果需校正回收率。(5)每次檢測(cè)結(jié)果應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照，回收率應(yīng)在質(zhì)控范圍內(nèi)，如回收率超出質(zhì)控范圍時(shí)查找原因。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
權(quán)利要求
1.一種干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法，其特征在于所述的前處理方法包括以下步驟 (1)稱取I.OO g樣品于50 mL離心管中； (2)往上述離心管中加入二次蒸餾水10毫升，浸泡5分鐘后，再加入乙腈20毫升，勻質(zhì)30秒； (3)加入5克氯化鈉，均質(zhì)20秒； (4)尚心管加蓋振蕩1-2分鐘，再于3500-3800轉(zhuǎn)/分鐘下尚心5分鐘； (5)準(zhǔn)確吸取上清液8.0毫升于雞心瓶中，40°C下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干； (6)用2mL乙腈溶液和2 mL正己燒，渦旋洗脫；所述的乙腈溶液中乙腈與水的體積比為 1:9 ； (7)洗脫液于10000-15000轉(zhuǎn)/分鐘高速離心5分鐘，靜置分層，取下層清液用0.25 ii m微孔濾膜過濾，所得濾液即為待測(cè)液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種干果蔬中啶蟲脒檢測(cè)的前處理方法,該方法包括待測(cè)樣品的稱量、浸泡、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、渦旋洗脫、離心、過濾等操作；所用儀器包括恒溫振蕩器、減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀和高速冷凍離心機(jī)等；用本前處理方法制備出的樣品溶液可以直接用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行檢測(cè)。該前處理方法與現(xiàn)有方法相比,具有操作簡單有效、成本低、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，具有很強(qiáng)的可操作性，有望在環(huán)保、商檢及出入境檢驗(yàn)檢疫等行業(yè)大規(guī)模推廣應(yīng)用，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)G01N30/06GK102621254SQ20121010088
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月9日
發(fā)明者林振宇, 邱彬, 郭隆華, 陳國南 申請(qǐng)人:福州大學(xué)