專利名稱：一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物及其制備方法和用途。屬于藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種病因尚未明了的慢性全身性炎癥疾病，目前公認(rèn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是一種自身免疫性疾病，發(fā)病2 3年后致殘率極高，在我國至少有400萬患者?？赡芘c內(nèi)分泌、代謝、營養(yǎng)、地理、職業(yè)、心理和社會(huì)環(huán)境的差異、細(xì)菌和病毒感染及遺傳因素等方面有關(guān)系。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎屬于中醫(yī)痹證范疇，歷代醫(yī)家稱之為歷節(jié)、鶴膝風(fēng)、頑痹、筋痹、骨痹、腎痹等。其內(nèi)因是素體虛弱、氣血不足、腠理空虛、肝腎虧虛，外因是風(fēng)寒濕熱之邪人侵， 內(nèi)外之因相合而致本病。本病的病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，風(fēng)寒濕熱之邪乘虛而人，走竄經(jīng)絡(luò)、肌肉、 筋脈、關(guān)節(jié)，導(dǎo)致氣滯血瘀，痰濁阻滯關(guān)節(jié)絡(luò)脈，絡(luò)脈不通則導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼痛。久病則傷及脾、 肝、腎三臟，致關(guān)節(jié)、肌膚失養(yǎng)，而逐漸引起肌肉萎縮、筋脈拘攣、骨質(zhì)疏松，繼則關(guān)節(jié)變形， 最終關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，而導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼痛、屈伸不利等功能障礙。中醫(yī)藥治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎具有悠久的歷史，近年來，一些療效好、副作用少的藥物與方法不斷出現(xiàn)，顯示出了中醫(yī)藥治療本病的特色和優(yōu)勢(shì)，因此，利用中藥治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎已成為當(dāng)前治療RA的研究方向。黑骨藤,為蘿摩科杠柳屬植物黑骨藤Periploca forrestil Schltr.的根或全株, 性熱，味苦，具有祛風(fēng)除濕、舒筋活血、止痛的功效，主治風(fēng)濕麻木疼痛，跌打損傷、骨折、骨痛等。黑骨藤中含有杠柳苷、胡蘿卜苷、熊果酸、北五加皮苷以及大量的揮發(fā)油類化合物。現(xiàn)代藥理研究表明，黑骨藤具有強(qiáng)心、鎮(zhèn)痛及抗炎的作用。專利號(hào)02127953. 5，專利名稱一種治療痹證的藥物，該發(fā)明公開了一種治療痹癥的藥物，它是以青風(fēng)藤60份、黑骨藤40份、 追風(fēng)傘34份為原料，按常規(guī)制劑工藝制備成的中成藥，有祛風(fēng)除濕，通絡(luò)止痛的功能，對(duì)于風(fēng)寒濕痹和因其引起的肩臂腰腿疼痛有獨(dú)特的治療效果。秦究，為龍膽科植物秦究Gentiana macrophylla Pali.、麻花秦究Gentiana straminea Maxim.、粗莖秦究 Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.或小秦究 Gentiana dahurica Fisch.的干燥根,性平,味辛、苦,入胃、肝、膽經(jīng),具有祛風(fēng)濕,清濕熱， 止痹痛，主治風(fēng)濕痹痛，筋脈拘攣，骨節(jié)酸痛，日晡潮熱，小兒疳積發(fā)熱。秦艽中含有龍膽苦苷、齊墩果酸、β_谷留醇、獐牙菜苷、紅金白花酸等化學(xué)成分。現(xiàn)代藥理研究表明，秦艽具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗風(fēng)濕、保肝、利膽、抗菌等作用。勒皓文，等，甘肅秦艽提取物抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用及其機(jī)制探究，甘肅科技縱橫，2006年35卷2期，實(shí)驗(yàn)表明，秦艽提取物對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎及耳部紅斑、尾部結(jié)節(jié)具有明顯的預(yù)防和治療作用。元胡，又稱延胡索，為S粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W. T. Wang的干燥塊莖，性溫，味辛、苦，入肝、脾經(jīng)，具有活血，利氣，止痛的功效，主治胸脅、脘腹疼痛，經(jīng)閉痛
4經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，跌撲腫痛。元胡中含有延胡索甲素、延胡索乙素、四氫黃連堿、去氫紫堇堿、原阿片堿等化學(xué)成分。現(xiàn)代藥理研究表明，延胡索具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠、動(dòng)脈擴(kuò)張、松弛肌肉等作用。“元胡止痛片”由延胡索、白芷配伍制成，具有理氣、活血、止痛的功效，主治氣滯血瘀的胃痛、脅痛、頭痛及痛經(jīng)。(《中國藥典》2005版一部362-363頁)目前，還未見將黑骨藤、秦艽、元胡組方治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種能夠有效治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物。本發(fā)明提供了一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，它是由以下重量配比的原料藥制備而成的制劑黑骨藤2. 5-10份,秦究1-4份,兀胡1-4份。進(jìn)一步地，它是由以下重量配比的原料藥制備而成的制劑黑骨藤2. 5份，秦艽I份，元胡I份；或黑骨藤2. 5份，秦艽2份，元胡2份；或黑骨藤2. 5份，秦艽4份，元胡4份；或黑骨藤5份，秦艽I份，元胡2份；或黑骨藤5份，秦艽2 份，元胡4份；或黑骨藤5份，秦艽4份，元胡I份；或黑骨藤10份，秦艽I份，元胡4份；或黑骨藤10份，秦艽2份，元胡I份；或黑骨藤10份，秦艽4份，元胡2份；或黑骨藤2. 5份， 秦艽2. 5份，元胡2. 5份。更進(jìn)一步地，它是由以下重量配比的原料藥制備而成的制劑黑骨藤2. 5份，秦艽I份，元胡I份；或黑骨藤2. 5份，秦艽2份，元胡2份；或黑骨藤5份，秦艽2份，元胡4份；或黑骨藤10份，秦艽I份，元胡4份；或黑骨藤10份，秦艽2 份，元胡I份。其中，它是由所述處方量的原料藥的水或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加上藥學(xué)上常用的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。所述制劑為口服制劑。進(jìn)一步地，所述提取物中，含有總黃酮2-4% w/w、總甾體阜苷3-6% w/w、總生物堿 O. 1-0. 3% w/w、龍膽苦苷 1-3% w/w、延胡索乙素 O. 04-0. 06% w/w、杠柳苷 O. 1-0. 2% w/w。進(jìn)一步優(yōu)選地，該提取物的HPLC指紋圖譜如圖2所示。本發(fā)明還提供了上述的藥物組合物的制備方法，它是采用以下步驟實(shí)施的(I)按重量配比稱取各藥材；(2)將藥材粉碎，加入水或有機(jī)溶劑提取，提取所得的活性成分備用；(3)取步驟(2)中的活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。其中，所述的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯或乙醇。進(jìn)一步地，所述乙醇的濃度為30-80% v/v。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述乙醇的濃度為50% v/v。其中，它是采用以下步驟實(shí)施的(I)按重量配比稱取各藥材；(2)取步驟(I)的藥材，粉碎，加入乙醇，固液比為I : 5-20W/V，超聲功率 60-1000W，超聲5-10s間隙3-5s，超聲提取1-3次，每次10_40min，提取溫度40_80°C，合并提取液，過濾，將濾液回收溶劑、濃縮、干燥后，所得提取物備用；
(3)取步驟(I)所得的提取物，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。本發(fā)明還提供了上述的藥物組合物在制備治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。本發(fā)明還提供了上藥物組合物質(zhì)量檢測(cè)方法，它是采用HPLC指紋圖譜進(jìn)行檢測(cè)， 具體檢測(cè)步驟如下a、供試品的制備方法將藥物組合物用水或有機(jī)溶劑提取后，定容，制備成供試品溶液；b、取龍膽苦苷、延胡索乙素和杠柳苷，精密稱定，制備成參照物溶液；C、分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；色譜條件如下色譜柱十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；流動(dòng)相0-10min甲醇2%。醋酸水溶液=35 65 ；ll-42min 甲醇2% 醋酸水溶液=65 35 ；檢測(cè)波長龍膽苦苷270nm ;延胡索乙素230nm ;杠柳苷230nm。本發(fā)明藥物組合物通過將黑骨藤與秦艽、元胡合理配伍后，對(duì)完全弗氏佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎有顯著治療作用，其抗炎、鎮(zhèn)痛效果良好，其藥效顯著優(yōu)于單味藥材和其他配伍組合，發(fā)揮了協(xié)同增效作用，且毒副作用較低，表明本發(fā)明藥物組合能夠安全有效地治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，為臨床用藥提供了一種新的選擇。


圖I對(duì)照品HPLC圖譜圖2供試品HPLC圖譜圖3致炎右足趾容積變化曲線
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I本發(fā)明藥物組合物膠囊劑的制備取黑骨藤25g、秦艽10g、元胡10g，分別粉碎過60目篩，用50 %乙醇，按料液比 I 8，60°C水浴回流提取2次，每次2h。提取液用離心機(jī)高速離心(離心條件為3600r/min， 10 15°C，IOmin)，上清液轉(zhuǎn)至圓底燒瓶，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓干燥(干燥條件為-O. 085MPa, 50°C )回收溶劑，至稠流浸膏狀，用減壓干燥箱(干燥條件為-O. 05MPa，60°C，24h)干燥，加入適量微晶纖維素，粉碎，混勻，制備膠囊劑。實(shí)施例2本發(fā)明藥物組合物顆粒劑的制備取黑骨藤100g、秦艽10g、元胡10g，分別粉碎過40目篩，加入20倍重量的50%乙醇，功率800W，超聲間隙時(shí)間8s/2s，溫度50°C，提取2次，每次30min。合并提取液，過濾， 濾液減壓回收溶劑，至稠流浸膏狀，加入適量的糊精，制粒，得本發(fā)明顆粒劑。實(shí)施例3本發(fā)明藥物組合物口服液的制備取黑骨藤25g、秦艽40g、元胡40g，分別粉碎過80目篩，加入10倍50%乙醇浸潰 48小時(shí)后，滲漉，收集滲漉液，再用適量50%乙醇繼續(xù)滲漉至漉液無色或微黃色為止，合并漉液，濾過，濾液減壓回收乙醇后，加入防腐劑和適量甜菊素，攪勻，即得本發(fā)明口服液。
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實(shí)施例4本發(fā)明藥物組合物的質(zhì)量檢測(cè)方法I、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制I. I對(duì)照品溶液的制備精密稱取延胡索乙素對(duì)照品，用甲醇配制成O. 998mg/ml的對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密稱取龍膽苦苷，用甲醇配制成濃度為554. 00mg/L的對(duì)照品溶液。精密稱取延胡索乙素，用甲醇配制成濃度為448. 00mg/L的對(duì)照品溶液。精密稱取杠柳苷，用甲醇配制成濃度為470. 00mg/L的對(duì)照品溶液。精密移取龍膽苦苷對(duì)照品溶液5ml，延胡索乙素對(duì)照品溶液lml，杠柳苷對(duì)照品溶液Iml至IOml容量瓶中，用甲醇定容，龍膽苦苷、延胡索乙素、杠柳苷濃度分別為277. OOmg/ L, 48. 40mg/L,47. 00mg/L。I. 2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制杠柳苷、龍膽苦苷、延胡索乙素標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制色譜條件色譜柱AlltechApollo C18 (250mmX 4. 6mm, 5 μ m)；流動(dòng)相0-10min甲醇水(2%。醋酸水溶液 pH = 5. 56) = 35 65 ；ll-42min 甲醇水(2% 醋酸水溶液 pH = 5. 56) = 65 35 ；流速1.0ml/min ；柱溫25°C;檢測(cè)波長龍膽苦苷270nm ;延胡索乙素230nm ;杠柳苷230nm ；進(jìn)樣量10μ I分別從“I. I”的對(duì)照品混合液中精密移取0. lml、0.2ml、0.4ml、L0ml、2.0ml、 4. Oml于IOml容量瓶中，用甲醇定容。在以上色譜條件下分別進(jìn)樣三針，進(jìn)樣量為10μ I。 以峰面積(A)為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣濃度(mg/L)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照品色譜圖見圖I。采用逐步稀釋法測(cè)得杠柳苷、龍膽苦苷、延胡索乙素檢測(cè)限。標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程、 相關(guān)系數(shù)、線性范圍、檢測(cè)限見表I。表I線性范圍及檢測(cè)限(η = 7)
權(quán)利要求
1.一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，其特征在于它是由以下重量配比的原料藥制備而成的制劑黑骨藤2. 5-10份，秦究1-4份，兀胡1-4份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其特征在于它是由以下重量配比的原料藥制備而成的制劑黑骨藤2. 5份，秦艽I份，元胡I份；或黑骨藤2. 5份，秦艽2份，元胡2份；或黑骨藤2.5份，秦艽4份，元胡4份；或黑骨藤5份，秦艽I份，元胡2份；或黑骨藤5份，秦艽2份， 元胡4份；或黑骨藤5份，秦艽4份，元胡I份；或黑骨藤10份，秦艽I份，元胡4份；或黑骨藤10份，秦艽2份，元胡I份；或黑骨藤10份，秦艽4份，元胡2份；或黑骨藤2. 5份，秦艽2. 5份，元胡2. 5份。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物，其特征在于它是由所述處方量的原料藥的水或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加上藥學(xué)上常用的輔料或輔助性成分制備而成的制劑；優(yōu)選地，所述制劑為口服制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于所述提取物中，含有總黃酮2-4% w/w、總甾體阜苷3-6 % w/w、總生物堿O. 1-0. 3 % w/w、龍膽苦苷1-3 % w/w、延胡索乙素O.04-0. 06% w/w、杠柳苷 O. 1-0. 2% w/w。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于該提取物的HPLC指紋圖譜如圖2 所示。
6.權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于它是采用以下步驟實(shí)施的(1)按重量配比稱取各藥材；(2)將藥材粉碎，加入水或有機(jī)溶劑提取，提取所得的活性成分備用；(3)取步驟(2)中的活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、或乙醇；優(yōu)選地，乙醇的濃度為30-80% v/v。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的制備方法，其特征在于它是采用以下步驟實(shí)施的(1)按重量配比稱取各藥材；(2)取步驟(I)的藥材，粉碎，加入乙醇，固液比為I 5-20W/V，超聲功率60-1000W， 超聲5-10s間隙3-5s，超聲提取1-3次，每次10-40min，提取溫度40_80°C，合并提取液，過濾，將濾液回收溶劑、濃縮、干燥后，所得提取物備用；(3)取步驟(I)所得的提取物，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。
9.權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物中的用途。
10.權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的藥物組合物的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于它是采用 HPLC進(jìn)行檢測(cè)，具體檢測(cè)步驟如下a、供試品的制備方法將藥物組合物用水或有機(jī)溶劑提取后，定容，制備成供試品溶液；b、取龍膽苦苷、延胡索乙素和杠柳苷，精密稱定，制備成參照物溶液；C、分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液注入液相色譜儀，測(cè)定，即得； 色譜條件如下色譜柱十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；流動(dòng)相0-10min甲醇2%。醋酸水溶液=35 65 ； ll-42min甲醇2%。醋酸水溶液=65 35 ；檢測(cè)波長龍膽苦苷270nm ;延胡索乙素230nm ;杠柳苷230nm。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，它是由以下重量配比的原料藥制備而成的制劑黑骨藤2.5-10份，秦艽1-4份，元胡1-4份。本發(fā)明還公開了上述藥物組合物的制備方法、質(zhì)量檢測(cè)方法及用途。本發(fā)明藥物組合物通過將黑骨藤與秦艽、元胡合理配伍后，對(duì)完全弗氏佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎有顯著治療作用，其抗炎、鎮(zhèn)痛效果良好，其藥效顯著優(yōu)于單味藥材和其他配伍組合，發(fā)揮了協(xié)同增效作用，且毒副作用較低，表明本發(fā)明藥物組合能夠安全有效地治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，為臨床用藥提供了一種新的選擇。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102579601SQ20121009451
公開日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年4月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月6日
發(fā)明者劉剛, 張宏, 張曉喻, 胡曉榮 申請(qǐng)人:四川師范大學(xué)