專利名稱：一種液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于煙氣有害化學成分分析測定技術領域，具體涉及一種液相色譜-串聯(lián)質譜檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法。
背景技術：
芳香胺及其衍生物具有誘變因子，可以通過吸入、食入或透過皮膚吸收而導致中毒，能通過形成高鐵血紅蛋白，造成人體血液系統(tǒng)損害，也可直接作用于肝細胞，引起中毒性肝損害。其中一些芳香胺衍生物還具有致癌和致突變的作用，即使是在低濃度下，對動物和人體都具有致癌活性。芳香胺類物質在煙葉和煙氣中均有分布，但煙氣中的含量略高于煙葉中的含量。系統(tǒng)地研究煙氣中芳香胺類化合物的檢測方法，對于全面認識卷煙安全性及吸煙與健康問題都具有十分重要的意義。盡管芳香胺的分析檢測方法很多，但是由于該類化合物中部分高毒性芳香胺，如 I-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基聯(lián)苯和4-氨基聯(lián)苯等含量極低，且卷煙煙氣非常復雜，干擾較多，因此對芳香胺的分析研究仍然是一項極有挑戰(zhàn)性的工作。目前常用的方法是國家標準 “卷煙主流煙氣總粒相物中主要芳香胺的測定氣相色譜-質譜聯(lián)用法”。該方法用劍橋濾片捕集卷煙主流煙氣中的總粒相物，用鹽酸溶液萃取后，經(jīng)二氯甲烷洗滌、氫氧化鈉還原、 正己烷萃取后，使用五氟丙酸酐進行衍生化，所得溶液采用固相萃取柱純化，濃縮后通過氣相色譜-質譜聯(lián)用儀(GC-MS)定量測定芳香胺的含量。此方法的研究對象僅為四種芳香胺類化合物，即I-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基聯(lián)苯和4-氨基聯(lián)苯，且樣品前處理方法繁瑣費時，一次樣品分析周期約3天。因此，建立一種快速、靈敏、高通量的方法檢測卷煙煙氣中芳香胺類化合物十分必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的正是針對現(xiàn)有技術中芳香胺類化合物測定方法前處理繁瑣費時的問題，而提供一種液相色譜-串聯(lián)質譜檢測卷煙主流煙氣中芳香胺類化合物的方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的該方法利用劍橋濾片和含5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集主流煙粒相物和氣相物中的芳香胺類化合物，采用5%HC1溶液萃取濾片后，經(jīng)HLB固相萃取柱純化處理，采用液相色譜-串聯(lián)質譜聯(lián)用儀(LC-MS /MS)實現(xiàn)卷煙主流煙氣中10種芳香胺的測定。其具體步驟如下
a、卷煙主流煙氣中芳香胺的捕集、萃取與凈化采用劍橋濾片和裝有5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集卷煙主流煙粒相物和氣相物，然后將濾片置于收集容器中，將吸收瓶中的HCl溶液倒入其中，加入內(nèi)標，超聲萃取后，采用NaOH固體中和溶液至PH>13，取部分溶液上樣到經(jīng)甲醇活化的HLB固相萃取柱上，經(jīng)水洗滌，采用甲醇洗脫，洗脫液混勻后進LC-MS/MS分析；
b、煙氣樣品的分析
LC-MS/MS 分析所用色譜柱為 Waters C18 (100 mmX2. Imm i. d. , 2. 7 μ m)，柱溫30 V;流動相A為含O. 1%甲酸的水溶液，流動相B為含O. 1%甲酸的乙腈溶液；梯度洗脫，條件為 0 3 min :100% Α，3· Γ 6 min :75% A, 16. I 20 min :0% A, 20. 5 25 min :100% A ;流速 O 16 min :200 M-L/min, 16. I 25 min :400 M-L/min 進樣體積 10 μ L。離子源電噴霧電離源(ESI);掃描方式正離子掃描；檢測方式多反應監(jiān)測MRM ； 電噴霧電壓5500V ;氣簾氣壓力30 psi ;輔助氣I壓力70 psi ;輔助氣2壓力70 psi ； 離子源溫度500 °C。各化合物的定量離子對、定性離子對、駐留時間、碰撞能量(CE)及去簇電壓(DP)參見表I。表I :各化合物的定量離子對、定性離子對、駐留時間、碰撞能量及去簇電壓
權利要求
1.一種液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于該方法利用劍橋濾片和含5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集主流煙粒相物和氣相物中的芳香胺類化合物，采用5%HC1溶液萃取濾片后，經(jīng)HLB固相萃取柱純化處理，采用液相色譜-串聯(lián)質譜聯(lián)用儀(LC-MS /MS)實現(xiàn)卷煙主流煙氣中10種芳香胺的測定。
2.根據(jù)權利要求I所述的液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于其具體步驟如下a、卷煙主流煙氣中芳香胺的捕集、萃取與凈化采用劍橋濾片和裝有5%HC1溶液的吸收瓶分別捕集卷煙主流煙粒相物和氣相物，然后將濾片置于收集容器中，將吸收瓶中的HCl 溶液倒入其中，加入內(nèi)標，超聲萃取后，采用NaOH固體中和溶液至PH>13，取部分溶液上樣到經(jīng)甲醇活化的HLB固相萃取柱上，經(jīng)水洗滌，采用甲醇洗脫，洗脫液混勻后進LC-MS/MS分析；b、煙氣樣品的分析LC-MS/MS 分析所用色譜柱為 Waters C18 (100 mmX2. Imm i. d. , 2. 7 μ m)，柱溫30 °CV流動相A為含0. 1%甲酸的水溶液，流動相B為含0. 1%甲酸的乙腈溶液；梯度洗脫，條件為 0 3 min :100% Α，3· Γ 6 min :75% A, 16. I 20 min :0% A, 20. 5 25 min :100% A ;流速 O 16 min :200 M-L/min, 16. I 25 min :400 ML/min,進樣體積 10 μ L ；離子源電噴霧電離源(ESI);掃描方式正離子掃描；檢測方式多反應監(jiān)測MRM;電噴霧電壓5500V ;氣簾氣壓力30 psi ;輔助氣I壓力70 psi ;輔助氣2壓力70 psi ;離子源溫度500 °C。
3.根據(jù)權利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于步驟a中所述的5%HC1溶液的用量為25 mL。
4.根據(jù)權利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于步驟a中所述的內(nèi)標為D7-1-氨基萘、D9-4-氨基聯(lián)苯及D5-苯胺。
5.根據(jù)權利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于步驟a中所述的超聲萃取時間為30分鐘。
6.根據(jù)權利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于步驟a中HLB固相萃取柱為Agilent 0asis HLB SPE小柱， 6ml/200mgo
7.根據(jù)權利要求2所述的液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于步驟a中活化、洗滌、洗脫所用的水和甲醇體積均為10 mL。
8.根據(jù)權利要求I或2所述的液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物的方法，其特征在于在卷煙主流煙氣中芳香胺的捕集過程中，卷煙抽吸采用直線吸煙機按照YC/T29-1996規(guī)定的標準條件抽吸，每次實驗抽吸5支卷煙。
全文摘要
一種液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測卷煙主流煙氣中10種芳香胺類化合物(包括苯胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對甲苯胺、間苯二胺、間茴香胺、1-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基聯(lián)苯、4-氨基聯(lián)苯)的方法，其特征在于該方法利用劍橋濾片和含5%HCl溶液的吸收瓶分別捕集主流煙粒相物和氣相物中的芳香胺類化合物，采用5%HCl溶液萃取濾片后，經(jīng)HLB固相萃取柱純化處理，采用液相色譜-串聯(lián)質譜聯(lián)用儀實現(xiàn)卷煙主流煙氣中10種芳香胺的測定。本發(fā)明的分析測定方法與現(xiàn)有卷煙主流煙氣中芳香胺檢測的GC-MS分析方法相比，無需衍生化反應及液液萃取操作，大大簡化了樣品前處理步驟，提高了分析效率。能更全面的檢測卷煙主流煙氣中有害芳香胺類化合物。
文檔編號G01N30/02GK102608232SQ201210070388
公開日2012年7月25日 申請日期2012年3月17日 優(yōu)先權日2012年3月17日
發(fā)明者丁麗, 余晶晶, 劉克建, 張曉兵, 王昇, 秦亞瓊, 謝復煒, 趙閣 申請人:中國煙草總公司鄭州煙草研究院