專利名稱：減少來自測量系統(tǒng)外部的成分的干擾的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及i) 一種減少來自測量系統(tǒng)外部的成分、特別是污染所述測量系統(tǒng)的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑對所述測量系統(tǒng)的干擾的方法，所述方法特征在于，在使用載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)或載有分析物的膠乳顆粒的膠乳凝集免疫測定(膠乳免疫凝集測定)中，在聚硅氧烷化合物的存在下進行膠乳免疫凝集反應(yīng)，ii) 一種用于所述減少干擾的方法中的試劑，和iii)具有減少的干擾的膠乳凝集免疫測定法。
背景技術(shù)：
膠乳免疫凝集測定(膠乳池度測定免疫凝集法)(latex turbidimetricimmunoagglutination method)(下文中也稱為LTIA法)通常在臨床檢驗領(lǐng)域中用作生物樣品中分析物(下文中也稱為靶成分)的測量(測定)方法。LTIA法是這樣的一種測量方法，其使用，例如，載有針對靶成分的抗體的膠乳顆粒(下文中也稱為載有抗體的膠乳顆粒)，以便利用光學方法(例如，測量透射光的池度測定法(turbidimetric method)、測量散射光的池度法(nephelometric method))等來檢測由于抗原(即，祀成分)與載有抗體的膠乳顆粒的結(jié)合所產(chǎn)生的膠乳顆粒的凝集程度(濁度)。已知表面活性劑類物質(zhì)干擾包括LTIA法在內(nèi)的免疫學測量系統(tǒng)。某種表面活性劑在免疫學測量系統(tǒng)中的存在可能引起問題，如抑制抗原-抗體反應(yīng)本身并且解離通過抗原-抗體反應(yīng)形成的抗原-抗體的結(jié)合。LTIA法是一種均質(zhì)測量法，其中抗原-抗體反應(yīng)在一個液相中進行，并且導(dǎo)致組成測量系統(tǒng)的物質(zhì)，如載有抗體的膠乳顆粒，在測量過程中持續(xù)暴露于表面活性劑的環(huán)境，并且因此，由于表面活性劑，這可能導(dǎo)致對測量系統(tǒng)的干擾以復(fù)合方式發(fā)生，諸如引起分析物本身結(jié)構(gòu)的改變，形成與分析物的復(fù)合物，對載有抗體的膠乳顆粒的非特異性吸附，和由膠乳顆粒載有的抗體和封閉蛋白的分離。當在血液(全血、血清或血漿)用作生物樣品的情形中，從受試者采集血液時，可以將預(yù)防性成分(下文中也稱為采血管處理劑)施用于采血管的內(nèi)壁和蓋上，以防止血液(血塊)粘在采血管的內(nèi)壁并在采血管和蓋部分中起泡，并且防止獲取血清的不充分的凝固和血清層與血細胞層的不充分分離。某種聚硅氧烷化合物本身被用作采血管處理劑，并且在一些情形中，被用作用于將除聚硅氧烷化合物外的其他采血管處理劑施用到內(nèi)壁和蓋上的介質(zhì)。已經(jīng)有一些關(guān)于來自施用到采血管內(nèi)壁上的成分對LTIA法的干擾的報道。非專利文獻I報道當用LTIA法測量用商購微量采血管得到的測量樣品時觀察到測量值減小。非專利文獻I指出由采血管內(nèi)壁釋放出的水溶性聚硅氧烷是一種起因物質(zhì)，并且描述了用多種LTIA試劑測量添加了水溶性聚硅氧烷的測量樣品的測量結(jié)果。在非專利文獻I中，還考慮當表面活性劑(Brij (注冊商標)35, Tween (注冊商標)20, Triton (注冊商標)X-100)添加到測量樣品時的干擾，并且報道了如與在水溶性聚硅氧烷的情形中一樣觀察到測量值的減小。非專利文獻2報道了將用多種采血管得到的測量樣品用多種LTIA試劑測量，并且在測量用微量采血管得到的測量樣品時，如非專利文獻I的情形一樣，觀察到測量值的減小，并且也指出在該情形中，由采血管內(nèi)壁釋放的水溶性聚硅氧烷是起因物質(zhì)。在從較成人具有較小體重的新生兒采集血液時，通常使用微量采血管。即使使用微量采血管，在一些情形中，也不能容易地采集到預(yù)定量的血液，這導(dǎo)致采集的血液少于預(yù)定的量。在這樣的情形中，測量樣品中的采血管處理劑的濃度增加，并且預(yù)測對測量系統(tǒng)的干擾是突出的。非專利文獻I中所考慮的表面活性劑在包括ELISA在內(nèi)的免疫學測量方法中用作防止非特異性反應(yīng)的試劑和清潔劑，并且還通常在臨床測定所用的生化自動化分析儀中用作以下各項的清潔劑用于分散或攪拌測量樣品和試劑的探頭；試劑的流動通道；和重復(fù)使用的反應(yīng)池。因此，在自動化分析儀中必須使用的LTIA試劑的情形中，必須注意由于在測量系統(tǒng)中混入表面活性劑引起的干擾。除了這樣的情形外，沒有關(guān)于避免來自這些表面活性劑的干擾的報道，特別是沒有關(guān)于當用LTIA法測量通過微量采血管得到的測量樣品時減少來自表面活性劑的干擾的方法的報道。引用列表非專利文獻非專利文獻I Japanese Journal of Medical Technology,卷 49, No. 10 (2000)，pp.1399-1403；非專利文獻2 :0kayama Journal of Medical Technology,卷 40, No. 2 (2003),pp.6-10。發(fā)明概述技術(shù)問題本發(fā)明的目的是提供i)在使用載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)或載有分析物的膠乳顆粒進行的膠乳凝集免疫測定中減少來自從測量系統(tǒng)外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑對所述測量系統(tǒng)的干擾的方法，ii) 一種用于所述減少干擾的方法中的試劑，和iii)具有減少的干擾的膠乳凝集免疫測定法。問題的解決方案本發(fā)明人嘗試驗證各種觀點，并且已經(jīng)進行了廣泛的研究來解決LTIA法中的問題，并且完全出乎意料地發(fā)現(xiàn)當在聚醚-改性的硅油存在下進行膠乳免疫凝集反應(yīng)時，可以減少從測量系統(tǒng)外部混入并且來源于微量采血管的成分對測量系統(tǒng)的干擾，所述聚醚-改性的硅油被分類為與在非專利文獻I和2中被認為是干擾的原因的水溶性聚硅氧烷相同的聚硅氧烷化合物。本發(fā)明人還出乎意料地發(fā)現(xiàn)當在聚醚-改性的硅油存在下進行膠乳免疫凝集反應(yīng)時，也可以減少來自具有不同于水溶性聚硅氧烷的結(jié)構(gòu)的表面活性劑(Brij (注冊商標)35, Tween (注冊商標)20, Triton (注冊商標)X-100)的干擾,這使得完成了本發(fā)明。本發(fā)明包括下述(I) 一種減少從測量系統(tǒng)外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑對所述測量系統(tǒng)的干擾的方法，其中在膠乳凝集免疫測定中，在聚硅氧烷化合物的存在下進行膠乳免疫凝集反應(yīng)。(2)上述(I)的方法，其中所述聚硅氧烷化合物包含聚醚-改性的硅油。
(3)上述(I)或(2)的方法，其中通過允許膠乳試劑溶液包含所述聚硅氧烷化合物來提供所述聚硅氧烷化合物。(4)上述(I)至(3)的方法，其中允許膠乳試劑溶液包含所述聚硅氧烷化合物的步驟是基于封閉處理。(5)上述(I)至(4)的方法，其中在所述膠乳免疫凝集反應(yīng)時所述聚硅氧烷化合物的濃度是O. 0001至I %。(6) 一種減少來自膠乳凝集免疫測定中混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑的干擾的方法，所述方法包括下述步驟使得i)載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒和ii)聚硅氧烷化合物與包含來源于活體的所述分析物和所述混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑的樣品相接觸；和測量所述分析物和所述膠乳顆粒的凝集反應(yīng)。(7) 一種膠乳凝集免疫測定法，所述測定法包括下述步驟使得i)載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒和ii)聚硅氧烷化合物與包含來源于活體的所述分析物的樣品相接觸。(8) 一種用于膠乳凝集免疫測定法的試劑盒，所述試劑盒包括第一試劑,所述第一試劑包含緩沖劑；和第二試劑，所述第二試劑包含載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒，其中所述第一試劑和所述第二試劑中的至少一種包含聚硅氧烷化合物。(9) 一種用于膠乳凝集免疫測定法的試劑，所述試劑包括i)緩沖劑；ii)聚硅氧烷化合物；和iii)載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒。發(fā)明的有益效果本發(fā)明提供一種減少由測量系統(tǒng)外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑對LTIA測量系統(tǒng)的干擾的方法。即使利用LTIA法使用通過微量采血管采集的測量樣品進行測量，本發(fā)明也能夠準確測量。實施方案描述(聚硅氧烷化合物)聚醚改性的硅油可以優(yōu)選地用作本發(fā)明的聚硅氧烷化合物。優(yōu)選的聚醚改性的硅油包括烷基(具有I至3個碳原子)硅氧烷和聚氧化烯(優(yōu)選在烯基中具有2至5個碳原子)的共聚物，并且特別優(yōu)選二甲基硅氧烷和聚氧化烯的共聚物。聚氧化烯是指聚氧乙烯、聚氧丙烯以及聚氧乙烯與聚氧丙烯的無規(guī)或嵌段聚合物。這樣的聚醚改性的硅油的實例包括由下述通式(I)表示的化合物[化學式I]
權(quán)利要求
1.一種減少從測量系統(tǒng)外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑對所述測量系統(tǒng)的干擾的方法，其中在膠乳凝集免疫測定中，在聚硅氧烷化合物的存在下進行膠乳免疫凝集反應(yīng)。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述聚硅氧烷化合物包含聚醚-改性的硅油。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中通過允許膠乳試劑溶液包含所述聚硅氧烷化合物來提供所述聚硅氧烷化合物。
4.權(quán)利要求1至3的方法，其中允許膠乳試劑溶液包含所述聚硅氧烷化合物的步驟是基于封閉處理。
5.權(quán)利要求1至4的方法，其中在所述膠乳免疫凝集反應(yīng)時所述聚硅氧烷化合物的濃度是O. OOOl至1%。
6.一種減少來自膠乳凝集免疫測定中混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑的干擾的方法，所述方法包括下述步驟 使得i)載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒和ii)聚硅氧烷化合物與包含來源于活體的所述分析物和所述混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑的樣品相接觸；和 測量所述分析物和所述膠乳顆粒的凝集反應(yīng)。
7.一種膠乳凝集免疫測定法，所述測定法包括下述步驟 使得i)載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒和ii)聚硅氧烷化合物與包含來源于活體的所述分析物的樣品相接觸。
8.一種用于膠乳凝集免疫測定的試劑盒，所述試劑盒包括 第一試劑，所述第一試劑包含緩沖劑；和 第二試劑，所述第二試劑包含載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒，其中 所述第一試劑和所述第二試劑中的至少一種包含聚硅氧烷化合物。
9.一種用于膠乳凝集免疫測定的試劑，所述試劑包含 i)緩沖劑；ii)聚硅氧烷化合物；和iii)載有對分析物具有高親和性的物質(zhì)的膠乳顆粒。
全文摘要
本發(fā)明的目的是提供一種在膠乳凝集免疫測定法中減少由測量系統(tǒng)外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性劑對所述測量系統(tǒng)的干擾的方法。在聚硅氧烷化合物存在下進行膠乳免疫凝集反應(yīng)可以減少從測量系統(tǒng)外部混入的來源于微量采血管的成分(水溶性聚硅氧烷)和/或表面活性劑對所述測量系統(tǒng)的干擾。
文檔編號G01N33/543GK103038641SQ201180026269
公開日2013年4月10日 申請日期2011年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月31日
發(fā)明者高橋弘至, 高橋由紀, 齋藤和典 申請人:積水醫(yī)療株式會社