專(zhuān)利名稱(chēng)：一種熒光免疫層析試紙條的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于免疫化學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種熒光免疫層析試紙條，即一種借助熒光物質(zhì)標(biāo)記的免疫層析反應(yīng)試紙條。
背景技術(shù)：
免疫分析技術(shù)發(fā)展至今已有百年歷史，其中免疫層析法(俗稱(chēng)試紙條)具有直觀、快速、操作簡(jiǎn)便、費(fèi)用低廉等特點(diǎn)，待測(cè)試液可以是血、尿、唾液等，因此在快速臨床診斷，野外以及實(shí)驗(yàn)條件不具備的場(chǎng)所使用中的應(yīng)用發(fā)展迅速。膠體金免疫層析試紙應(yīng)用最廣泛，借助于硝酸纖維素膜制造業(yè)的進(jìn)步和抗體制備以及其他支持技術(shù)的成熟，從上世紀(jì)八十年代晚期第一個(gè)免疫層析試劑盒推向市場(chǎng)開(kāi)始，免疫層析技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用在臨床監(jiān)測(cè)領(lǐng)域，包括妊娠檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、乙肝表面抗原、心肌肌鈣蛋白、幽門(mén)螺桿等的檢測(cè)；在環(huán)境領(lǐng)域的 應(yīng)用包括檢測(cè)鎘離子等有毒重金屬；在食品安全領(lǐng)域包括檢測(cè)農(nóng)藥殘留以及包括肉毒毒素在內(nèi)的各種毒素；免疫層析技術(shù)還廣泛應(yīng)用在獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，包括檢測(cè)禽流感，犬類(lèi)細(xì)小病毒和口蹄疫等方面；在濫用藥物檢測(cè)方面應(yīng)用于檢測(cè)甲基苯丙胺等毒品方面。除了納米金標(biāo)記物以外，研究開(kāi)發(fā)者探索使用的標(biāo)記物也發(fā)展到脂質(zhì)體，熒光探針，熒光聚合物微球，順磁性聚合物微球，上轉(zhuǎn)換發(fā)光探針和量子點(diǎn)等。正是基于這個(gè)平臺(tái)的快速簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，國(guó)內(nèi)外開(kāi)展了廣泛的免疫層析技術(shù)基礎(chǔ)和應(yīng)用方面的研究。近來(lái)，基于熒光或發(fā)光的檢測(cè)方式由于其可定量以及動(dòng)態(tài)范圍大的特點(diǎn)，熒光標(biāo)記的試紙條結(jié)合讀卡機(jī)的免疫層析技術(shù)有望實(shí)現(xiàn)定量或半定量的檢測(cè)。Choi等人用熒光免疫層析方法定量檢測(cè)了 C反應(yīng)蛋白和人全血樣品中的血清白蛋白含量，具有線性范圍寬，檢測(cè)靈敏度高和定量準(zhǔn)確的特點(diǎn)，相比于化學(xué)發(fā)光和酶聯(lián)免疫技術(shù)，充分體現(xiàn)了免疫層析技術(shù)方便快捷簡(jiǎn)便的特點(diǎn)；而相比于傳統(tǒng)膠體金免疫層析技術(shù)，熒光探針?lè)肿拥募ぐl(fā)和檢測(cè)需要借助儀器完成，因此可以最大限度地排除人為因素的干擾，從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化和定量檢測(cè)。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型的目的在于提供一種熒光免疫層析試紙條，并簡(jiǎn)單介紹其制備方法，以實(shí)現(xiàn)有效改善熒光背景信號(hào)。本實(shí)用新型的目的，將通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)一種熒光免疫層析試紙條，其特征在于，所述試紙條以表面粘貼有一層深色膠條的支撐固定粘襯板為基底，所述基底呈條狀結(jié)構(gòu)，且在基底的深色膠條表面從樣品端起依次設(shè)有樣品纖維層、熒光標(biāo)記纖維層、毛細(xì)管層析反應(yīng)層及吸水材料層；其中所述樣品纖維層一端蓋住熒光標(biāo)記纖維層的一端，所述熒光標(biāo)記纖維層的另一端蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層的一端，吸水材料層蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層的另一端，各層間的交疊寬度為1mm。該熒光免疫層析試紙條的進(jìn)一步特征，所述深色膠條為用于降低熒光背景的特氟龍耐高溫膠帶。[0008]該熒光免疫層析試紙條的進(jìn)一步特征，所述深色膠條與支撐固定粘襯板相粘連的一面為自身的非粘膠面。該熒光免疫層析試紙條的進(jìn)一步特征，所述毛細(xì)管層析反應(yīng)層為硝酸纖維素反應(yīng)膜或聚偏氟乙烯反應(yīng)膜。該熒光免疫層析試紙條的進(jìn)一步特征，所述吸水材料層為強(qiáng)吸水紙。本實(shí)用新型試紙條的應(yīng)用實(shí)施，較之于現(xiàn)有技術(shù)的突出效果為該試紙條極大地提高了檢測(cè)應(yīng)用的速度、準(zhǔn)確率和靈敏度，適用于各種組織、血液、體液、排泄物、飼料等之中的某些物質(zhì)進(jìn)行定量、定性的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。以下便結(jié)合實(shí)施例附圖，對(duì)本實(shí)用新型的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步的詳述，以使本實(shí)用新型技術(shù)方案更易于理解、掌握。
圖I是本實(shí)用新型試紙條的結(jié)構(gòu)示意圖；圖2是檢測(cè)結(jié)果示意圖；圖3是試紙條在黏貼深色膠條前后的ESE熒光檢測(cè)結(jié)果對(duì)比圖。
具體實(shí)施方式
如圖I所示，本實(shí)用新型所述提出的一種熒光免疫層析試紙條，以表面粘貼有一層深色膠條2的支撐固定粘襯板I為基底，該試紙條基底的整體呈條狀結(jié)構(gòu)，且在基底的深色膠條2表面從樣品端起依次設(shè)有樣品纖維層3、熒光標(biāo)記纖維層4、毛細(xì)管層析反應(yīng)層5及吸水材料層6 ;其中該樣品纖維層3 —端蓋住突光標(biāo)記纖維層4的一端,突光標(biāo)記纖維層4的另一端蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層5的一端，吸水材料層6蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層5的另一端，圖示可見(jiàn)各層間相互交疊形成一個(gè)類(lèi)“V”字形的疊膜結(jié)構(gòu)，且交疊寬度為1mm。進(jìn)一步地細(xì)化來(lái)看，上述深色膠條為用于降低熒光背景的特氟龍耐高溫膠帶，其與支撐固定粘襯板相粘連的一面為自身的非粘膠面。上述毛細(xì)管層析反應(yīng)層為硝酸纖維素反應(yīng)膜或聚偏氟乙烯反應(yīng)膜。上述吸水材料層為強(qiáng)吸水紙。上述熒光標(biāo)記纖維層的標(biāo)記物可多元化選擇，對(duì)于一種熒光二氧化硅納米粒子作為標(biāo)記物制成的熒光免疫層析試紙條，滴加不同量cTnl抗原(從左至右依次為I μ g/ml, 100ng/ml, 10ng/ml, O)后凝膠成像結(jié)果是變化的。而且，在毛細(xì)管層析反應(yīng)層5上形成有檢測(cè)線和質(zhì)控線兩條功能性示性線條。該試紙條制作過(guò)程為撕去支撐固定粘襯板的不干膠層，將日本電工的特氟龍高溫膠帶的不帶粘膠的一面粘貼在上面；先將劃好質(zhì)控線及檢測(cè)線的毛細(xì)管層析反應(yīng)層貼于距樣品端
2.Icm處，將熒光標(biāo)記纖維層貼于距樣品端I. 7cm處，再將樣品纖維層貼上，最后將吸水材料貼于毛細(xì)管層析反應(yīng)層的另一端。檢測(cè)樣品時(shí)，將樣品加入幾滴至樣品纖維層，由于毛細(xì)作用，樣品液體向跑樣區(qū)泳動(dòng)，在經(jīng)過(guò)熒光標(biāo)記纖維層時(shí)，帶著溶解的熒光物質(zhì)迅速在跑樣區(qū)內(nèi)往前泳動(dòng)，在特定的抗原或抗體區(qū)帶位置進(jìn)行特異性結(jié)合，在特定儀器的幫助下，觀察檢測(cè)結(jié)果，從而實(shí)現(xiàn)定性或定量的檢測(cè)，其檢測(cè)過(guò)程及檢測(cè)結(jié)果示意如圖2所示，在儀器下觀察可見(jiàn)，陽(yáng)性結(jié)果呈現(xiàn)兩條線，即檢測(cè)線和質(zhì)控線，陰性結(jié)果只呈現(xiàn)一條質(zhì)控線。本實(shí)用新型該種熒光免疫層析試紙條與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)。[0020]I、檢測(cè)快速檢測(cè)時(shí)間只需5min，能夠滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的需求。2、檢測(cè)準(zhǔn)確率高，特異性強(qiáng)靈敏度高，背景干凈，效果對(duì)比如圖3所示。3、適用于各種熒光物質(zhì)的標(biāo)記，如熒光二氧化硅納米粒子、量子點(diǎn)、上轉(zhuǎn)換納米粒子等。4、工藝簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，適用于各類(lèi)人群。5、檢測(cè)試紙條在常溫下即可保存，無(wú)需特殊設(shè)備，保存期可達(dá)I年，且重復(fù)性好。6、可用于快速檢測(cè)各種組織、血液、體液、排泄物、飼料等中的某物質(zhì)的定性或定量檢測(cè)。
權(quán)利要求1.一種熒光免疫層析試紙條，其特征在于，所述試紙條以表面粘貼有一層深色膠條的支撐固定粘襯板為基底，所述基底呈條狀結(jié)構(gòu)，且在基底的深色I(xiàn)父條表面從樣品端起依次設(shè)有樣品纖維層、熒光標(biāo)記纖維層、毛細(xì)管層析反應(yīng)層及吸水材料層；其中所述樣品纖維層一端蓋住熒光標(biāo)記纖維層的一端，所述熒光標(biāo)記纖維層的另一端蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層的一端，吸水材料層蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層的另一端。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種熒光免疫層析試紙條，其特征在于各層間的交疊寬度為 Imm0
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種熒光免疫層析試紙條，其特征在于所述深色膠條為用于降低熒光背景的特氟龍耐高溫膠帶。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種熒光免疫層析試紙條，其特征在于所述深色膠條與支撐固定粘襯板相粘連的一面為自身的非粘膠面。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種熒光免疫層析試紙條，其特征在于所述毛細(xì)管層析反應(yīng)層為硝酸纖維素反應(yīng)膜或聚偏氟乙烯反應(yīng)膜。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種熒光免疫層析試紙條，其特征在于所述吸水材料層為強(qiáng)吸水紙。
專(zhuān)利摘要本實(shí)用新型揭示了一種熒光免疫層析試紙條，以表面粘貼有一層深色膠條的支撐固定粘襯板為基底，該基底呈條狀結(jié)構(gòu)，且在基底的深色膠條表面從樣品端起依次設(shè)有樣品纖維層、熒光標(biāo)記纖維層、毛細(xì)管層析反應(yīng)層及吸水材料層；其中該樣品纖維層一端蓋住熒光標(biāo)記纖維層的一端，該熒光標(biāo)記纖維層的另一端蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層的一端，吸水材料層蓋住毛細(xì)管層析反應(yīng)層的另一端，各層間的交疊寬度為1mm。本實(shí)用新型的應(yīng)用實(shí)施，在傳統(tǒng)的納米金試紙條的基礎(chǔ)上增加深色膠條，降低熒光背景的干擾，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、實(shí)用，使用效果好。
文檔編號(hào)G01N33/558GK202599957SQ20112055866
公開(kāi)日2012年12月12日 申請(qǐng)日期2011年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月28日
發(fā)明者賈俊麗, 費(fèi)浩 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院蘇州納米技術(shù)與納米仿生研究所