專利名稱：用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種在生物學(xué)或醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于病理組織冰凍切片制作的撈片、展片 (貼片)裝置及方法。
背景技術(shù)：
冰凍切片是組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的方法。冰凍切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，也是臨床、科研病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法，而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。在科學(xué)實(shí)驗(yàn)、臨床醫(yī)學(xué)與實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，光鏡下觀察切片標(biāo)本大多數(shù)是通過(guò)冰凍切片法制備的。 活的細(xì)胞或組織多為無(wú)色透明，各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差，在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出；組織離開(kāi)機(jī)體后很快就會(huì)死亡和產(chǎn)生組織腐敗，失去原有正常結(jié)構(gòu)， 因此，組織要經(jīng)介質(zhì)固定、冰凍切片、除去介質(zhì)及染色等步驟以免細(xì)胞組織死亡，而能清晰辨認(rèn)其形態(tài)結(jié)構(gòu)。冰凍切片制作過(guò)程包括取材、固定、洗滌和脫水、添加介質(zhì)、冰凍切片、撈片、展片、貼片、染色、脫水、透明、封片等步驟。然而，石蠟切片一般從取材固定到封片制成玻片標(biāo)本需要數(shù)日，制作過(guò)程較長(zhǎng)，步驟很多，一步不慎往往導(dǎo)致前功盡棄，而且這些處理引起組織塊或多或少地收縮，切片時(shí)受濕度影響比較大，這些不足之處必須在制片過(guò)程中認(rèn)真對(duì)待，盡量減小它的不良影響。但冰凍切片恰恰克服了時(shí)間長(zhǎng)這一缺點(diǎn)。冰凍切片的制片方法有兩種，一種方法是對(duì)比較薄的組織切片，一般用直接貼片法。另一種方法是對(duì)比較厚的組織切片(常用于免疫組織化學(xué)的漂染法)，制作中用撈片展片方法。前者方法比較簡(jiǎn)單，而后者程序比較復(fù)雜，要不斷的將切片撈到不同的液體中去。 以往的撈片方法都是鋼針制成彎鉤或用接種環(huán)等比較土的方法撈片，然后經(jīng)過(guò)數(shù)次轉(zhuǎn)片， 再用小毛筆將切片緩慢展開(kāi)鋪平。而這樣的撈片容易破壞組織，成功率相當(dāng)?shù)汀Ｕ蛊菀壮霈F(xiàn)爛片或者出現(xiàn)重疊現(xiàn)象。即使能染上色，組織切片內(nèi)部也因結(jié)構(gòu)被破壞而無(wú)法在顯微鏡下進(jìn)行有效觀察。迄今為止，撈片和貼片尚無(wú)高效簡(jiǎn)便的避免破壞組織切片的操作方法， 長(zhǎng)期以來(lái)使實(shí)驗(yàn)人員受到困擾，直接影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)背景技術(shù)所存在的問(wèn)題，提供了一種簡(jiǎn)單、方便、快速的用于病理組織冰凍切片制作的撈片展片裝置及方法，可大幅節(jié)省時(shí)間，減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的組織爛片和組
織重疊。為達(dá)到以上目的，本發(fā)明是采取如下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的一種用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置，包括一個(gè)水浴盒，其特征在于，還包括一個(gè)撈片器；所述水浴盒的一面靠近上邊設(shè)有一個(gè)進(jìn)液口，水浴盒的一面靠近下邊設(shè)有一出液口 ；水浴盒內(nèi)通過(guò)進(jìn)液口、出液口灌注有可循環(huán)或可更換的緩沖液，水浴盒內(nèi)吊掛一個(gè)可緩慢取出支架，支架水平面上設(shè)置載玻片，載玻片沉沒(méi)于緩沖液面下方；病理組織冰凍切片置于載玻片上方的緩沖液中；所述撈片器為帶柄剪刀結(jié)構(gòu)，其兩前叉端部連接有金屬絲與剪刀柄的夾角小于平角大于直角。上述方案中，所述的撈片器兩前叉端部各有一個(gè)直徑為4mm，長(zhǎng)度為IOmm的螺絲， 螺絲的中間有一個(gè)1. 5mm的小槽，所述的金屬絲鑲在該小槽內(nèi)，通過(guò)螺母將金屬絲牢固的固定在叉體端部。金屬絲與剪刀柄的夾角為135度。用前述裝置實(shí)現(xiàn)病理組織冰凍切片撈片展片的方法，其特征在于，包括下述步驟，(1)將支架吊掛于水浴盒內(nèi)，支架水平面上放置洗干凈的載玻片；(2)堵住出液口，將緩沖液通過(guò)進(jìn)液口灌注到水浴盒內(nèi)；使載玻片沉沒(méi)于緩沖液面下方；(3)將病理組織冰凍切片置于載玻片上方的緩沖液中浸泡一定時(shí)間，完成在液體中的實(shí)驗(yàn)過(guò)程；(4)撈片展片，撈片時(shí)，將撈片器的兩前叉伸進(jìn)緩沖液中，并使兩前叉端部連接的金屬絲托住病理組織冰凍切片；展片時(shí)，通過(guò)剪刀手柄將撈片器兩前叉端部的金屬絲分開(kāi)， 將病理組織冰凍切片展開(kāi)；(5)貼片，將展開(kāi)的病理組織冰凍切片輕輕放在載玻片上，取出撈片器，最后將承載已貼好片的載玻片的支架從水浴盒中緩慢取出。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是，操作方便、簡(jiǎn)單；展片快速、貼片平整，可大幅節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間，減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的組織爛片和組織重疊。
以下結(jié)合附圖及具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。

圖1為本發(fā)明裝置水浴盒部分的結(jié)構(gòu)圖。圖2為本發(fā)明裝置撈片器的結(jié)構(gòu)圖。圖1-圖2中，1、水浴盒；2、載玻片；3、病理組織冰凍切片；4、進(jìn)液口 ；5、支架；6、緩沖液；7、出液口 ；8、前叉；9、前叉端部；10、金屬絲。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置包括一個(gè)耐腐蝕的撈片器；一個(gè)展片盒和一個(gè)展片架。此三者相互結(jié)合，最終構(gòu)成一個(gè)用于病理組織冰凍切片制作的撈片貼片裝置。如圖1所示，展片盒為一個(gè)水浴盒1，是一個(gè)80mmX ^mmX 25mm的長(zhǎng)方體盒子。距盒子一面上邊8mm處有一個(gè)進(jìn)液口 4，相對(duì)一面貼底部有一出液口 7。展片架為一個(gè)支架5， 支架水平上放一個(gè)載玻片2，因該支架5上設(shè)有四個(gè)掛鉤，可將載玻片2懸空掛在兩個(gè)面上邊沿水浴盒中，能從水浴盒1緩慢取出。通過(guò)進(jìn)液口 4，用加液瓶向水浴盒內(nèi)送磷酸鹽緩沖液，載玻片沉沒(méi)于緩沖液面下方；病理組織冰凍切片3置于載玻片上方的緩沖液中，使其成為展片撈片體系，以最大限度的減小組織片在液體中的流動(dòng)性，適應(yīng)展片撈片的需要。如圖2所示，撈片器為帶柄剪刀結(jié)構(gòu)，其兩前叉端部9連接有金屬絲10撈片器兩前叉端部各有一個(gè)直徑為4mm，長(zhǎng)度為IOmm的螺絲，螺絲的中間有一個(gè)1. 5mm的小槽，金屬絲10鑲在該小槽內(nèi)，通過(guò)螺母將金屬絲牢固的固定在叉體端部。金屬絲與剪刀柄的夾角小于平角大于直角，本實(shí)施例中為135度。
用前述裝置實(shí)現(xiàn)病理組織冰凍切片撈片展片的方法，包括下述步驟，(1)將支架5吊掛于水浴盒1內(nèi)，支架水平面上放置洗干凈的載玻片2 ；(2)堵住出液口 7，將緩沖液6通過(guò)進(jìn)液口 4灌注到水浴盒內(nèi)；使載玻片沉沒(méi)于緩沖液面下方；(3)將病理組織冰凍切片3置于載玻片上方的緩沖液中浸泡一定時(shí)間(根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求不少于10分鐘)，完成在液體中的實(shí)驗(yàn)過(guò)程；(4)撈片展片，撈片時(shí)，將撈片器的兩前叉8伸進(jìn)緩沖液中，并使兩前叉端部連接的金屬絲10托住病理組織冰凍切片；展片時(shí)，通過(guò)剪刀手柄將撈片器兩前叉端部的金屬絲分開(kāi)，將病理組織冰凍切片展開(kāi)；(5)貼片，將展開(kāi)的病理組織冰凍切片輕輕放在載玻片上，取出撈片器，最后將承載已貼好片的載玻片的支架從水浴盒中緩慢取出。以上撈片展片結(jié)束后，可打開(kāi)出液口 7，將緩沖液6放出，可更換不同種類的緩沖液。在步驟O)中也可以不用堵住出液口 7，將緩沖液6通過(guò)進(jìn)液口 4灌注到水浴盒內(nèi)，并通過(guò)出液口 7使緩沖液保持一定液面高度(高于載玻片)，在水浴盒內(nèi)循環(huán)流動(dòng)。
權(quán)利要求
1.一種用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置，包括一個(gè)水浴盒，其特征在于，還包括一個(gè)撈片器；所述水浴盒的一面靠近上邊設(shè)有一個(gè)進(jìn)液口，水浴盒的一面靠近下邊設(shè)有一出液口 ；水浴盒內(nèi)通過(guò)進(jìn)液口、出液口灌注有可循環(huán)或可更換的緩沖液，水浴盒內(nèi)吊掛一個(gè)可緩慢取出支架，支架水平面上設(shè)置載玻片，載玻片沉沒(méi)于緩沖液面下方；病理組織冰凍切片置于載玻片上方的緩沖液中；所述撈片器為帶柄剪刀結(jié)構(gòu)，其兩前叉端部連接有金屬絲與剪刀柄的夾角小于平角大于直角。
2.如權(quán)利要求1所述的用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置，其特征在于，所述的撈片器兩前叉端部各有一個(gè)直徑為4mm，長(zhǎng)度為IOmm的螺絲，螺絲的中間有一個(gè)1. 5mm的小槽，所述的金屬絲鑲在該小槽內(nèi)，通過(guò)螺母將金屬絲牢固的固定在叉體端部。
3.如權(quán)利要求1所述的用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置，其特征在于，金屬絲與剪刀柄的夾角為135度。
4.一種實(shí)現(xiàn)病理組織冰凍切片撈片展片的方法，其特征在于，基于權(quán)利要求1所述的用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置，包括下述步驟(1)將支架吊掛于水浴盒內(nèi)，支架水平面上放置洗干凈的載玻片；(2)堵住出液口，將緩沖液通過(guò)進(jìn)液口灌注到水浴盒內(nèi)；使載玻片沉沒(méi)于緩沖液面下方；(3)將病理組織冰凍切片置于載玻片上方的緩沖液中浸泡一定時(shí)間，完成在液體中的實(shí)驗(yàn)過(guò)程；(4)撈片展片，撈片時(shí)，將撈片器的兩前叉伸進(jìn)緩沖液中，并使兩前叉端部連接的金屬絲托住已化開(kāi)的病理組織冰凍切片；展片時(shí)，通過(guò)剪刀手柄將撈片器兩前叉端部的金屬絲分開(kāi)，將已化開(kāi)的病理組織冰凍切片展開(kāi)；(5)貼片，將展開(kāi)的已化開(kāi)病理組織冰凍切片輕輕放在載玻片上，取出撈片器，最后將承載已貼好片的載玻片的支架從水浴盒中緩慢取出。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種用于病理組織冰凍切片的撈片展片裝置及方法，包括一個(gè)水浴盒、一個(gè)撈片器；水浴盒的一面靠近上邊設(shè)有一個(gè)進(jìn)液口，靠近下邊設(shè)有一出液口；通過(guò)進(jìn)液口、出液口灌注有可循環(huán)或可更換的緩沖液，水浴盒內(nèi)吊掛一個(gè)可緩慢取出支架，支架水平面上設(shè)置載玻片沉沒(méi)于緩沖液面下方；病理組織冰凍切片置于載玻片上方的緩沖液中。撈片器為帶柄剪刀結(jié)構(gòu)，其兩前叉端部連接有金屬絲。撈片時(shí)，兩前叉伸進(jìn)緩沖液中，并使兩前叉端部金屬絲托住病理組織冰凍切片；展片時(shí)，通過(guò)剪刀手柄將撈片器兩前叉端部的金屬絲分開(kāi)，將病理組織冰凍切片展開(kāi)；輕輕放在載玻片上，取出撈片器，最后將承載已貼好片的載玻片的支架從水浴盒中緩慢取出。
文檔編號(hào)G01N1/28GK102426124SQ201110349310
公開(kāi)日2012年4月25日 申請(qǐng)日期2011年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月8日
發(fā)明者于軍, 劉芳娥, 季樂(lè)樂(lè), 張學(xué)策, 張海鋒, 李嘉, 李榕, 邢文娟, 鐵茹, 陳寶瑩 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)