專利名稱：一種調(diào)經(jīng)丸的質(zhì)量檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及中成藥的質(zhì)量控制方法，更具體地說，是一種通過改進的方法來控制調(diào)經(jīng)丸質(zhì)量標準的檢測方法。
背景技術：
本發(fā)明的調(diào)經(jīng)丸收載于《部頒標準中藥成方制劑》第九冊165頁，標準號 WS3-B-1820-94。由當歸、白芍(酒炒)、川芎、熟地黃、艾葉(炭)、香附(醋制)、陳皮、半夏(制)、茯苓、甘草、白術(炒)、吳茱萸(制)、小茴香(鹽炒)、延胡索(醋制)、沒藥(制)、益母草、牡丹皮、續(xù)斷、黃芩(酒炒)、麥冬、阿膠二十一味中藥組成。調(diào)經(jīng)丸是全國知名企業(yè)天津中新藥業(yè)集團股份有限公司達仁堂制藥廠生產(chǎn)的百姓放心藥品牌。已應用臨床多年，具有理氣和血，調(diào)經(jīng)止痛的功效。用于氣郁血滯，月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)來腹痛，崩漏白帶。盡管調(diào)經(jīng)丸具有見效快，療效顯著等特點，但由于中藥具有成分復雜多變、活性成分多、藥效成分和毒性成分不甚明確等特點，再加上缺乏更加科學全面的質(zhì)量評價體系，嚴重地制約其在國際市場的競爭力。中國藥典2010年版增補“調(diào)經(jīng)丸”中的質(zhì)量標準檢測步驟是1、顯微鑒別；2、薄層色譜法鑒別當歸、川芎；3、薄層色譜法鑒別酒白芍、牡丹皮；4、薄層色譜法鑒別制吳茱萸；5、薄層色譜法鑒別醋延胡索；6、薄層色譜法鑒別酒黃芩；7、薄層色譜法鑒別益母草；8、高效液相法測定芍藥苷。但對于調(diào)經(jīng)丸這樣一個由21味動植物藥組成的復方，其質(zhì)量控制的鑒定方法過于簡單，相對于目前中藥產(chǎn)品質(zhì)量控制的要求有較大的差距。目前，中國藥典規(guī)定的質(zhì)量標準檢測，不能準確全面反映產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，也無法用于生產(chǎn)過程中、以及產(chǎn)品質(zhì)量的有效控制。因而必須重視質(zhì)量控制與療效評價標準的研究相結合，這樣才能使我國的中藥走出國門，邁向世界。相對于調(diào)經(jīng)丸盡管中國藥典2010年版增補“調(diào)經(jīng)丸”中的質(zhì)量標準檢測，但對于薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮，沒見相關的描述。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明建立了一種調(diào)經(jīng)丸的質(zhì)量檢測方法，其目的在于提高產(chǎn)品質(zhì)量標準的可控性，進一步確保產(chǎn)品內(nèi)在含量和療效，保證患者用藥安全，增加了薄層色譜法鑒別醋香附； 薄層色譜法鑒別陳皮；高效液相法測定芍藥苷三部分內(nèi)容。本發(fā)明的檢測方法能夠定性定量檢測且檢測手段簡單、檢測結果準確。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術方案
一種調(diào)經(jīng)丸的檢測方法，其特征在于該方法包括薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮；高效液相法測定芍藥苷三部分內(nèi)容，其步驟如下 一.薄層色譜法鑒別醋香附
(1)供試品溶液的制備取本品15g，研細，加乙醚50ml，時時振搖1小時，濾過，濾液揮干，殘渣乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液；
(2)對照品溶液的制備取α-香附酮對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液， 作為對照品溶液；
(3)陰性對照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；
照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各2ul， 分別點于同一硅膠GF2M薄層板上，以體積比80 1 :1 二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干；
(4)置254nm紫外光燈下檢視供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同的深藍色斑點；噴以二硝基苯胼，放置片刻，斑點漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾。二.薄層色譜法鑒別陳皮
(1)供試品溶液的制備取本品10g，研細，加甲醇30ml，超聲處理30min，過濾，濾液蒸干，殘渣加Iml甲醇使溶解，作為供試品溶液；
(2)對照品溶液的制備另取橙皮苷對照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對照品溶液；
(3)陰性對照液制備按照工藝和處方制備不含陳皮的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；
照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各 3、ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水，體積比100 17 :13為展開劑 ，展開，取出，晾干；
(4)置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，且陰性顯示無干擾；
三.高效液相法測定芍藥苷
(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-乙腈-水-磷酸，體積比13:10: 77:0. 1為流動相；檢測波長為232nm;理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算為8352，與相鄰峰的分離度為1. 80 ；
(2)對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每Iml中含 50ug的溶液，即得；
(3)供試品溶液的制備取本品適量，研細，混勻，取約lg，精密稱定，加稀乙醇50ml， 超聲處理30分鐘，放冷，取續(xù)濾液即得；
(4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，本品含白芍、牡丹皮以芍藥苷(C23H28011)計，每Ig不得少于0. 60mg。本發(fā)明增加了薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮，這兩個檢測項目，主要是因為醋香附為該處方君藥，且處方量最大；陳皮的功效和該處方相符。因此，增加醋香附和陳皮的檢測更能反映產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量的可控性；而薄層色譜法具有簡單、迅速、靈敏高度、分離效能好等優(yōu)點，在藥品檢測中得到廣泛應用。因而本發(fā)明增加了薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮。本發(fā)明參考中國藥典2010版一部增補版中“調(diào)經(jīng)丸”含量測定項下所用的流動相為依據(jù)，將原標準乙腈-水(12. 587. 5)，調(diào)整為甲醇-乙腈-水-磷酸(13 10 77:0. 1) 為流動相。在此流動相條件下，分離效果好，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算為8352，與相鄰峰的分離度為1.80。最終確定的流動為甲醇-乙腈-水-磷酸(13:10: 77:0.1)為流動相
ο本發(fā)明建立的調(diào)經(jīng)丸質(zhì)量檢測方法與現(xiàn)有技術相比所具有的積極效果在于
(1)調(diào)經(jīng)丸處方由21味藥組成。主證為肝氣不疏，氣郁血滯之婦科諸癥。方以香附為君藥，疏肝解郁，氣行則血行，疏泄條達，則月經(jīng)自調(diào)，疼痛自止，為婦科調(diào)經(jīng)止痛的要藥。通過調(diào)經(jīng)丸中醋香附的薄層色譜法鑒別，更加準確地把握有關藥品的質(zhì)量。采用本發(fā)明的質(zhì)量控制方法，提高了調(diào)經(jīng)丸的質(zhì)量控制標準，從而有效確保了調(diào)經(jīng)丸的安全、有效、質(zhì)量可控，保證了工藝的規(guī)范化和質(zhì)量的穩(wěn)定一致。(2)本發(fā)明根據(jù)處方中陳皮具有理氣健脾的功效，與調(diào)經(jīng)丸理氣和血，調(diào)經(jīng)止痛的功效相符。通過增加調(diào)經(jīng)丸中陳皮的薄層鑒別，提高產(chǎn)品質(zhì)量標準的可控性，進一步確保產(chǎn)品內(nèi)在含量和療效，保證患者用藥安全，且檢測手段簡單、檢測結果準確。(3)本發(fā)明參考中國藥典2010版一部增補版中“調(diào)經(jīng)丸”含量測定項下所用的流動相為依據(jù)，進行試驗，但分離度低，雜質(zhì)峰與芍藥苷峰無法達到基線分離，故通過反復試驗摸索，將流動相調(diào)整為甲醇-乙腈-水-磷酸(13:10: 77:0.1)。在此流動相條件下，分離效果好。(4)本發(fā)明在中國藥典2010年版增補“調(diào)經(jīng)丸”標準的基礎上，增加了薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮；改進了高效液相法測定芍藥苷。修訂后的質(zhì)量標準， 提高了藥品標準的可控性，確保了產(chǎn)品的內(nèi)在含量，對促進產(chǎn)品銷售、增加產(chǎn)品的市場競爭力、保證患者用藥安全意義重大。


圖1從左至右分別為α-香附酮對照品、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930001)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930002)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930003)、醋香附陰性樣品；
圖2從左至右分別為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930001)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930002)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930003)、橙皮苷對照品、陳皮陰性樣品； 圖3為芍藥苷對照品色譜圖； 圖4為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930000)色譜圖； 圖5為調(diào)經(jīng)丸(缺白芍、牡丹皮)陰性樣品色譜圖； 圖6為芍藥苷標準曲線；
圖7為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930000)色譜圖(aglient eclipse-cl8)； 圖8為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930000)色譜圖(aglient extend-cl8)； 圖9為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號7930000)色譜圖(aglient zorbax sb_aq)。
具體實施例方式為了更充分的解釋本發(fā)明的實施，提供下述測定方法的實施實例。這些實施實例僅僅是解釋、而不是限制本發(fā)明的范圍。下面通過典型的實施例對本發(fā)明做進一步的說明。實施例1 調(diào)經(jīng)丸(水蜜丸)處方
當歸75g白芍(酒炒)75g 川芎50g熟地黃IOOg艾葉(炭)50g 香附(醋制)200g 陳皮50g半夏(制)50g
茯苓59g甘草15g白術(炒)75g 吳茱萸(制)25g
小茴香(鹽炒)25g延胡索(醋制)25g 沒藥(制)25g益母草IOOg
牡丹皮50g續(xù)斷50g黃芩(酒炒)50g 麥冬50g
阿膠IOOg ；
制法以上二十一味，粉碎成細粉，過篩，混勻。每IOOg粉末加煉蜜30-50g及適量的水，制丸，干燥，制成水蜜丸。性狀本品為深褐色至黑色水蜜丸，氣微，味苦、微甘辛。實施例2
薄層色譜法鑒別醋香附
硅膠G板，青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)，105°C活化1小時，備用；聚酰胺薄膜，上海東聯(lián)化學試劑有限公司生產(chǎn)。(1)供試品溶液的制備取本品15g，研細，加乙醚50ml，時時振搖1小時，濾過，濾液揮干，殘渣乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液。(2)對照品溶液的制備取α -香附酮對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。(3)陰性對照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各 2ul，分別點于同一硅膠GF2M薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(80:1 :1)為展開劑，展開，取出，晾干。三批供試品(批號為7930001、7930002、7930003)按上述方法鑒別。置紫外光燈 (2Mnm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同的深藍色斑點；噴以二硝基苯胼，放置片刻，斑點漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾。結果見圖1。實施例3
薄層色譜法鑒別陳皮
硅膠G板，青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)，105°C活化1小時，備用；聚酰胺薄膜，上海東聯(lián)化學試劑有限公司生產(chǎn)。(1)供試品溶液的制備取本品10g，研細，加甲醇30ml，超聲處理30min，過濾，濾液蒸干，殘渣加Iml甲醇使溶解，作為供試品溶液。(2)對照品溶液的制備另取橙皮苷對照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對照品溶液。(3)陰性對照液制備按照工藝和處方制備不含陳皮的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各 3、ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100 17 13)為展開劑，展開，取出，晾干。三批供試品(批號為7930001、7930002、7930003)按上述方法鑒別。噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，且陰性顯示無干擾。結果見圖2。
實施例4
高效液相法測定芍藥苷 1.儀器和試藥 1.1儀器
Agilent Technologies 1200 Series高效液相色譜儀，美國Agilent公司生產(chǎn) Agilent Technologies 1200 Series G1314B 紫外檢測器，美國 Agilent 公司生產(chǎn) Agilent Technologies 1200 Series G1329A 自動進樣器，美國 Agilent 公司生產(chǎn) SART0RIUS BP211D電子天平，瑞士 SART0RIUS公司生產(chǎn) ZB-IB型智能崩解儀，天津大學精密儀器廠生產(chǎn) WFH-201型三用紫外儀，上海精科實業(yè)有限公司生產(chǎn)
1.2試劑及藥品
芍藥苷對照品(批號110736-200933)購自中國藥品生物制品檢定所、樣品為中試樣品， 批號為:7930001,7930002,7930003
藥材為天津中新藥業(yè)集團股份有限公司達仁堂制藥廠提供乙腈、甲醇為色譜純，水為純水，其它試劑均為分析純
2.性狀
本品為水蜜丸，除去包裝后觀察，結果見表1 表1 調(diào)經(jīng)丸(水蜜丸)性狀觀察結果
權利要求
1. 一種調(diào)經(jīng)丸的檢測方法，其特征在于該方法包括薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮；高效液相法測定芍藥苷三部分內(nèi)容，其步驟如下一.薄層色譜法鑒別醋香附(1)供試品溶液的制備取本品15g，研細，加乙醚50ml，時時振搖1小時，濾過，濾液揮干，殘渣乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液；(2)對照品溶液的制備取α-香附酮對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液， 作為對照品溶液；(3)陰性對照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2ul，分別點于同一硅膠GF2M薄層板上，以體積比80 :1:1 二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干；(4)置254nm紫外光燈下檢視供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同的深藍色斑點；噴以二硝基苯胼，放置片刻，斑點漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾；二.薄層色譜法鑒別陳皮(1)供試品溶液的制備取本品10g，研細，加甲醇30ml，超聲處理30min，過濾，濾液蒸干，殘渣加Iml甲醇使溶解，作為供試品溶液；(2)對照品溶液的制備另取橙皮苷對照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對照品溶液；(3)陰性對照液制備按照工藝和處方制備不含陳皮的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各3、ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水，體積比100 17 13為展開劑，展開，取出，晾干；(4)置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，且陰性顯示無干擾；三.高效液相法測定芍藥苷(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-乙腈-水-磷酸，體積比13:10: 77:0.1為流動相；檢測波長為232nm ；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算為8352，與相鄰峰的分離度為1. 80 ；(2)對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每Iml中含 50ug的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取本品適量，研細，混勻，取約lg，精密稱定，加稀乙醇50ml，超聲處理30分鐘，放冷，取續(xù)濾液即得；(4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定， 本品含白芍、牡丹皮以芍藥苷(C23H28011)計，每Ig不得少于0. 60mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種調(diào)經(jīng)丸的檢測方法，包括薄層色譜法鑒別醋香附、陳皮；高效液相法測定芍藥苷三部分內(nèi)容。其中取醋香附15g，研細，加乙醚50ml，經(jīng)處理，殘渣乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液;對照品溶液取α-香附酮對照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液；陰性對照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品。照薄層色譜法，以8011二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸展開，置254nm紫外光燈下檢視:供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同的深藍色斑點；噴以二硝基苯肼，放置片刻，斑點漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾。采用本發(fā)明的測定方法，能有效的控制調(diào)經(jīng)丸的內(nèi)在質(zhì)量，該方法具有精密度、穩(wěn)定性、重復性高的特點，確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定一致，從而保證產(chǎn)品的安全有效。
文檔編號G01N30/02GK102507836SQ20111033129
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月27日 優(yōu)先權日2011年10月27日
發(fā)明者張紅茹, 閆曉楠, 陳偉 申請人:天津中新藥業(yè)集團股份有限公司達仁堂制藥廠