專利名稱：一種玻片標本圖像采集的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種用于生物顯微鏡裝置，特別是用生物顯微鏡采集玻片標本的照片的方法。
背景技術：
隨著自動化程度不斷發(fā)展，越來越多的全自動生物顯微鏡平臺用于臨床檢測、教學、科研。全自動生物顯微鏡平臺能夠自動移動，配合顯微鏡采集系統(tǒng)，能夠采集檢測的樣本圖像，用于臨床的分析。這類研究多集中于動植物樣本切片，人體組織切片等，這些樣本有一個最主要的特征就是使用低倍鏡下觀測，同時切片的厚薄一致性好，自動全樣本采集及自動調焦后，過程中無需人工調焦即可得到清晰圖像。但是觀測染色血液涂片與其有很大區(qū)別，第一，樣本通常需要在高倍鏡下觀測(高倍鏡油鏡)，調焦誤差造成圖片模糊；第二，樣本面積大，厚薄一致性不好，厚度整體成梯度變化，造成圖形模糊。目前觀測染色血液涂片的調焦校正方法無法滿足血液樣本的觀測。
發(fā)明內容
本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種玻片標本圖像采集的方法，用于解決在玻片標本厚薄不均的情況下，顯微鏡在高倍鏡下能能夠獲得符合要求的清晰圖像。為解決上述問題，本發(fā)明提出一種玻片標本圖像采集的方法，包括
預先向生物顯微鏡的系統(tǒng)輸入玻片標本的屬性預先設置玻片標本的種類和質量類別，該類別供用戶操作選擇；
預先向系統(tǒng)輸入調焦等級預先設置生物顯微鏡在高倍鏡下執(zhí)行圖像采集的調焦等級，調焦等級包括四個等級根據低倍鏡下一幅視野圖像調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，再對視野內每個細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成兩部分，對該兩部分均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每部分圖像調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成三部分， 對每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成四部分，對每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；
預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系；切片的屬性決定了調焦等級。預先設置需要采集的細胞圖像的數(shù)量；
用戶根據玻片標本的屬性進行玻片標本的屬性選擇；
在生物顯微鏡的低倍物鏡下對玻片標本進行低倍圖像采集，形成低倍鏡視野圖像； 物鏡轉動到高倍鏡下粗調焦；
物鏡在高倍鏡下粗調后，系統(tǒng)根據用戶選擇的玻片標本的屬性和預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系，依照低倍鏡視野圖像自動按照對應的調焦等級執(zhí)行圖像采集工作；
采集的細胞的圖像的數(shù)量達到預先設置的需要采集的細胞圖像的數(shù)量后即停止圖像采集。視野相對中心是指在視野中心區(qū)域選擇的一個細胞作為視野的觀察中心。這個中心是以中心區(qū)域的細胞位置來確定的，其并不絕對位置固定，為一個相對位置，故定義為相對中心。優(yōu)選地所述種類為血液涂片。還可以是宮頸切片、骨髓片、痰切片和尿切片等均可。優(yōu)選地所述質量類別包括自動涂片、半自動涂片和人工涂片任一種。優(yōu)選地所述低倍鏡為10倍鏡。優(yōu)選地所述高倍鏡為油鏡。根據不同的玻片標本，高倍鏡可以選擇60倍等倍數(shù)。 低倍鏡和高倍鏡是相對的，根據觀察對象的不同來選擇低倍鏡和高倍鏡。有些組織結構觀察，先在10倍鏡下觀察，然后在20倍物鏡即可達到目的。優(yōu)選地所述物鏡轉動到高倍鏡下粗調，其中粗調焦的調焦中心為位于視野圖像中心區(qū)域的細胞。優(yōu)選地所述細胞為血液涂片中的白細胞。該發(fā)明的有益效果
本發(fā)明在顯微鏡的低倍鏡下完成視野拍照后，在高倍鏡下自行選擇根據設置的調焦等級，根據視野圖像對細胞按等級調焦。這種方式使系統(tǒng)可以自動根據涂片的屬性特點進行調焦調整，在一定范圍內，即使涂片厚薄不均也不會影響采集圖像的清晰程度。除了采集的圖像更清晰以外，采集的區(qū)域也更廣泛。
圖1是本發(fā)明的一個實施例的方框圖。圖2是血液涂片10倍鏡下A細胞的圖像。圖3是圖2中血液涂片油鏡下的調焦中心。圖4是圖2中血液圖片油鏡下的A細胞的圖像。
具體實施例方式本發(fā)明提出一種玻片標本圖像采集的方法，包括
預先向系統(tǒng)輸入玻片標本的屬性預先設置玻片標本的種類和質量類別，該類別供用戶操作選擇；
預先向系統(tǒng)輸入調焦等級預先設置生物顯微鏡在高倍鏡下執(zhí)行圖像采集的調焦等級，調焦等級包括四個等級根據低倍鏡下一幅視野圖像調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，再對視野內每個細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成兩部分，對該兩部分均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每部分圖像調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成三部分， 對每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成四部分，對每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；
預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系； 預先設置需要采集的細胞圖像的數(shù)量； 用戶根據玻片標本的屬性進行玻片標本的屬性選擇；
在生物顯微鏡的低倍物鏡下對玻片標本進行低倍圖像采集，形成低倍鏡視野圖像； 物鏡轉動到高倍鏡下粗調焦；
物鏡在高倍鏡下粗調后，系統(tǒng)根據用戶選擇的玻片標本的屬性和預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系，依照低倍鏡視野圖像自動按照對應的調焦等級執(zhí)行圖像采集工作；
采集的細胞的圖像的數(shù)量達到預先設置的需要采集的細胞圖像的數(shù)量后即停止圖像采集。下面通過舉例來說明本發(fā)明的技術方案。本例選用血液涂片為例。選用的血液涂片的厚度差異為0. 0Γ0. 2mm。涂片的厚度差異不限于上述范圍。取半自動血液涂片樣本，先向生物顯微鏡系統(tǒng)預設的系統(tǒng)可選項有自動血液涂片、半自動血液涂片以及手工血液涂片三種選擇。用戶選擇玻片標本為半自動血液涂片。預先向系統(tǒng)輸入調焦等級預先設置生物顯微鏡在高倍鏡下執(zhí)行圖像采集的調焦等級，調焦等級包括四個等級調焦等級一、對低倍鏡下整幅視野圖像調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，然后對視野內的每個細胞進行調焦并在高倍鏡下采集圖像；調焦等級二、將低倍鏡下一幅視野分成左右兩部分，對該兩部分均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每部分圖像調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；調焦等級三、將低倍鏡下一幅視野分成左中右三部分，對每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；調焦等級四、將低倍鏡下一幅視野分成左上、左下、右上和右下四部分，根據每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集。每次調焦都是本區(qū)域視野中相對居中的細胞調焦。預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系，將半自動涂片的血液涂片設對應置為調焦等級二。如果作為樣本的血液涂片中存在5個白細胞，預計10倍鏡下采集視野圖像39幅，預設需要的白細胞數(shù)量為100個(或多個)。生物顯微鏡系統(tǒng)具備一些設置后即可進行運行。在10倍鏡下，拍下39幅(也可以是多幅)玻片標本的視野圖像，并將其存儲起來， 其中的一幅圖像參看圖2所示，是10倍鏡下A細胞的位置圖。系統(tǒng)然后調整物鏡到100倍油鏡下，轉換過程中系統(tǒng)會提醒用戶滴油。這時顯微鏡會等步長移動一個較大位移，簡稱粗調焦，粗調焦的目的是確定采集細胞的大致焦平面，鏡下觀測細胞處于較清楚狀態(tài)。粗調焦的時候，系統(tǒng)以視野圖像中心區(qū)域的一個白細胞為原點坐標，然后針對該原點坐標進行精確調焦，參見圖3為高倍鏡下調焦中心圖，然后系統(tǒng)識別視野圖像內的所有白細胞，參看圖4所示A細胞位置圖，例如，該視野內存在五個白細胞，并賦予每個白細胞相對原點白細胞的坐標值。然后系統(tǒng)對每一個白細胞逐一進行采集圖像，得到每個白細胞的清晰圖像。完成一幅視野圖像對應的白細胞圖像采集后，然后讀取第二幅視野圖像，系統(tǒng)重新粗調100倍鏡，然后精確調焦，賦予每個白細胞坐標，然后對每個白細胞進行圖像采集。依次類推，直到完成100個白細胞的圖像采集，由此可以算出，在完成第沈幅視野圖像的時候，就完成了 100個白細胞的圖像采集任務，因此，剩余的13幅用不上。視野圖像在這個過程中，作為白細胞的坐標導航圖的作用。系統(tǒng)也可以視野圖像的左上角為原點坐標，其它白細胞參考該原點賦予相應的坐標，但是系統(tǒng)需要以視野圖像的中心區(qū)域的一個白細胞作為視野的中心。對于涂片厚度差異更大的涂片，上述調焦等級二可能會顯得效果不佳。此時可以選用上述調焦等級三，將視野圖像分成左中右三個部分，分別對三個部分的區(qū)域進行精確調焦，然后逐個對范圍內的白細胞進行采集圖像。相同類型的血液涂片，原有方法可以適用 0. 0Γ0. Imm厚度差涂片，而本例可以明顯適用0. θΓθ. 2mm厚度差的涂片，該厚度差下，照樣可以獲得清晰的圖像。上述這種調焦等級的設置可以使顯微鏡系統(tǒng)適用不同的切片和質量類型，使顯微鏡的適用范圍更廣。玻片標本的種類除了為血液涂片外。還可以是宮頸切片、骨髓片、痰切片和尿切片等均可，本領域技術人員可以根據現(xiàn)行技術自行選擇高倍鏡和低倍鏡以及根據本發(fā)明的方法選用調焦的等級。上述結果顯示本發(fā)明相比現(xiàn)有技術，它們有如下表的特性差異
比較點原有方法新的方法圖片清晰度低采集區(qū)域小大調焦方式一次多次采集涂片厚度薄厚薄均可
由上表看出，本發(fā)明通過多次調焦的方式，產生了圖片清晰、采集區(qū)域廣和采集厚度差更大的良好效果。 圖1可以視為上述實施例的簡化描述用戶選擇半自動處理的血液涂片；然后在 10倍鏡下采集多幅視野圖像并存儲；再進行100倍油鏡粗調；然后讀取數(shù)據，系統(tǒng)將用戶選擇半自動處理的血液圖片信息與調焦等級進行匹配，產生采集圖像的數(shù)據，系統(tǒng)讀取該數(shù)據，根據該數(shù)據執(zhí)行后續(xù)動作；系統(tǒng)讀取一張10倍鏡拍攝的視野圖像按照調焦等級及白細胞區(qū)域分布情況調焦并采集圖像；如果采集的圖片總數(shù)小于預設要求的白細胞數(shù)量則繼續(xù)讀取10倍鏡下拍攝的視野圖像，直到所有的10倍鏡拍攝的視野圖像的白細胞讀取完成才結束；如果采集的圖片總數(shù)大于或等于預設要求的白細胞總數(shù)，則結束采集。
權利要求
1.一種玻片標本圖像采集的方法，包括預先向生物顯微鏡的系統(tǒng)輸入玻片標本的屬性預先設置玻片標本的種類和質量類別，該類別供用戶操作選擇；預先向系統(tǒng)輸入調焦等級預先設置生物顯微鏡在高倍鏡下執(zhí)行圖像采集的調焦等級，調焦等級包括四個等級根據低倍鏡下一幅視野圖像調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，再對視野內每個細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成兩部分，對該兩部分均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每部分圖像調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成三部分， 對每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡圖像采集；將低倍鏡下一幅視野分成四部分，對每一部分圖像均調焦一次，調焦是對視野相對中心的一個細胞調焦，在每一部分調焦完成后即對該部分內的細胞進行高倍鏡下圖像采集；預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系； 預先設置需要采集的細胞圖像的數(shù)量； 用戶根據玻片標本的屬性進行玻片標本的屬性選擇；在生物顯微鏡的低倍物鏡下對玻片標本進行低倍圖像采集，形成低倍鏡視野圖像； 物鏡轉動到高倍鏡下粗調焦；物鏡在高倍鏡下粗調后，系統(tǒng)根據用戶選擇的玻片標本的屬性和預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系，依照低倍鏡視野圖像自動按照對應的調焦等級執(zhí)行圖像采集工作；采集的細胞的圖像的數(shù)量達到預先設置的需要采集的細胞圖像的數(shù)量后即停止圖像采集。
2.根據權利要求1所述的玻片標本圖像采集的方法，其特征在于所述種類為血液涂片。
3.根據權利要求1所述的玻片標本圖像采集的方法，其特征在于所述質量類別包括 自動涂片、半自動涂片和人工涂片任一種。
4.根據權利要求1所述的玻片標本圖像采集的方法，其特征在于所述低倍鏡為10倍鏡。
5.根據權利要求1所述的玻片標本圖像采集的方法，其特征在于所述高倍鏡為油鏡。
6.根據權利要求1所述的玻片標本圖像采集的方法，其特征在于所述物鏡轉動到高倍鏡下粗調，其中粗調焦的調焦中心為位于視野圖像中心區(qū)域的細胞。
7.根據權利要求2所述的玻片標本圖像采集的方法，其特征在于所述細胞為血液涂片中的白細胞。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種玻片標本圖像采集的方法，涉及一種用生物顯微鏡采集玻片標本的照片的方法，用于解決在玻片標本厚薄不均的情況下，顯微鏡在高倍鏡下能能夠獲得符合要求的清晰圖像。該方法包括預設玻片標本屬性供選擇；預先設置生物顯微鏡在高倍鏡下執(zhí)行圖像采集的調焦等級，調焦等級包括四個等級。物鏡在高倍鏡下粗調后，系統(tǒng)根據用戶選擇的玻片標本的屬性和預先設置玻片標本的屬性與調焦等級的對應關系，依照低倍鏡視野圖像自動按照對應的調焦等級執(zhí)行圖像采集工作。
文檔編號G01N21/84GK102305791SQ20111020106
公開日2012年1月4日 申請日期2011年7月19日 優(yōu)先權日2011年7月19日
發(fā)明者伍柏青, 汪傳忠, 王士信, 袁俊, 趙雄鋒, 陳濤, 龍偉 申請人:南昌百特生物高新技術股份有限公司