專(zhuān)利名稱(chēng)：定量檢測(cè)肌鈣蛋白i的熒光免疫層析試紙條及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及臨床免疫學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種定量檢測(cè)肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條及其制備方法。
背景技術(shù)：
心肌梗死是全球范圍內(nèi)致死和致殘的主要疾病之一?？焖僮R(shí)別出早期急性心肌梗死患者并及時(shí)治療是提高其存活率的關(guān)鍵。對(duì)于無(wú)典型胸痛和心電圖改變的AMI患者，檢測(cè)血清心肌標(biāo)志物是診斷AMI的必要依據(jù)。以往世界衛(wèi)生組織(WHO)定義的心梗標(biāo)準(zhǔn)包括缺血癥狀、心電圖(ECG)異常改變和血清心肌酶學(xué)變化。然而隨著敏感性和特異性更高的生化標(biāo)志物一肌鈣蛋白(cTn)的發(fā)現(xiàn)以及更精確的無(wú)創(chuàng)影像學(xué)技術(shù)的發(fā)展，使得檢測(cè)到更小的心梗病灶成為可能。如何快速正確診斷心肌梗死是醫(yī)學(xué)界的迫切需要解決的問(wèn)題。為此，歐洲心臟病學(xué)會(huì)(ESC)、美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)(ACC)、美國(guó)心臟學(xué)會(huì)(AHA)和世界心臟聯(lián)盟·(WHF)于2007年10月聯(lián)合頒布了全球心肌梗死的統(tǒng)-定義。滿(mǎn)足下列標(biāo)準(zhǔn)中的一項(xiàng)，即可診斷急性、進(jìn)展性或新近心肌梗死。心肌壞死的生化標(biāo)記物明顯升高并且逐漸下降(肌鈣蛋白)，或迅速上升與回落(CK-MB)，同時(shí)至少具備下列一項(xiàng)a.缺血癥狀；b.心電圖上出現(xiàn)病理性Q波；c.心電圖提示缺血(ST段抬高或壓低)；d.冠狀動(dòng)脈介入治療(即PTCA)。在諸多診斷急性心肌梗死的臨床生化指標(biāo)中，CK-MB曾一度被認(rèn)為是診斷AMI的“金標(biāo)準(zhǔn)”，已廣泛應(yīng)用多年。隨著對(duì)cTnl的深入研究，無(wú)論是對(duì)心肌的特異性還是診斷敏感性，CK-MB的地位都受到了嚴(yán)重的挑戰(zhàn)。在AMI初期，cTnl的敏感性略遜于CK-MB，但CK-MB的心臟特異性及靈敏度較低而且血清半衰期相對(duì)較短。在AMI出現(xiàn)癥狀后4-6小時(shí)cTnl開(kāi)始升高，15 24小時(shí)達(dá)峰值，持續(xù)6-8天。與傳統(tǒng)的心肌酶CK、CK-MB、LDH相比，cTnl在診治AMI方面有較高的敏感度，在發(fā)病12 72小時(shí)內(nèi)cTnl的敏感度達(dá)90%以上，72-150小時(shí)內(nèi)為70%;而Mb在發(fā)病12小時(shí)敏感度就已開(kāi)始開(kāi)始下降，到24小時(shí)已不能用于診斷；CK-MB的敏感度在48小時(shí)開(kāi)始下降，72-150小時(shí)內(nèi)僅為18% ;在AMI后4天內(nèi)LDHI/LDHZ敏感度為56% -59%，而cTnl敏感度為93-100 %。所以，cTnl不僅適于AMI早期診斷，也適于中、晚期診斷，尤其適用于就診時(shí)間晚，心肌酶已正常的AMI患者。cTnl不僅有助于早期診斷AMI，并對(duì)其預(yù)后估計(jì)和危險(xiǎn)分層也有一定的幫助。對(duì)于肌鈣蛋白I的檢測(cè)，目前臨床常用的方法包括膠體金免疫層析法、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、化學(xué)發(fā)光(CLIA)、飛行質(zhì)譜法等方法，但這些方法都有各自的特點(diǎn)及不足。膠體金免疫層析法由于操作簡(jiǎn)單，在臨床上應(yīng)用最為廣泛，缺點(diǎn)是只能實(shí)現(xiàn)半定量，無(wú)法實(shí)現(xiàn)精確定量；而ELISA法由于定量準(zhǔn)確，廣泛應(yīng)用于醫(yī)院檢驗(yàn)科；化學(xué)發(fā)光法和飛行質(zhì)譜法由于設(shè)備昂貴，并且不適合單人份和較小批量檢測(cè)用，目前在臨床應(yīng)用還是相對(duì)較少。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種定量檢測(cè)肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條及其制備方法。
本發(fā)明提供的定量檢測(cè)肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條，一種定量檢測(cè)肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條，包括底板、附著于底板上依次相互交錯(cuò)的樣品吸收墊、標(biāo)記抗體墊、包被膜和吸水墊，所述的標(biāo)記抗體墊包被有分別用熒光微球和生物素標(biāo)記的識(shí)別不同抗原表位的肌鈣蛋白I單克隆抗體，所述的包被膜上包被有檢測(cè)帶和質(zhì)控帶，所述檢測(cè)帶固定有親和素，所述的質(zhì)控線(xiàn)固定有兔抗鼠IgG抗體。其中，所述的親和素可選用本領(lǐng)域公知的任何親和素，優(yōu)選為鏈霉親和素和中性親和素，如購(gòu)自Pierce公司的鏈霉親和素和中性親和素。其中，所述的包被膜優(yōu)選為硝酸纖維素膜。其中，熒光微球可選用本領(lǐng)域公知的用于標(biāo)記抗體的任何熒光微球，也可選用可市售獲得的熒光微球，如可購(gòu)自Bangslab公司。優(yōu)選的熒光微球的直徑為IOOnm 300nm。本發(fā)明還提供了一種制備上述試紙條的方法，其包括如下步驟 I)在包被膜的不同位置分別固定親和素和兔抗鼠IgG抗體，形成檢測(cè)帶和質(zhì)控帶;2)分別制備熒光微球標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I和生物素標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊II ；3)底板上依次相互交錯(cuò)地粘上制備的樣品墊、熒光微球標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I、生物素標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊II、包被膜、和吸水墊，然后在上面覆蓋透明塑料密封膜得到試紙。所述的包被膜的制備方法是使用包被液(含有I 10%蔗糖的O. 01 O. 02MPH7. 2-7.6的磷酸鹽緩沖液)，分別將兔抗小鼠IgG以及鏈霉親和素分別稀釋到Img/ml-1. 5mg/ml的濃度，使用定量噴膜儀以I μ 1/cm的量將二者以O(shè). 5cm-l. Ocm的間隔噴于硝酸纖維素膜上，35-38°C烘干lh，加入干燥劑封存?zhèn)溆?。所述的熒光?biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I的制備方法為將肌鈣蛋白I單克隆抗體用O. 05M，pH8. O 8. 5的硼酸鹽緩沖液4°C透析過(guò)夜，調(diào)整濃度為I. 5mg/ml 2mg/ml ;使用pH4. 5 5. O的MES活化緩沖液洗滌熒光微球，加入碳二亞胺和琥珀酰亞胺使二者終濃度均為20mmol，室溫反應(yīng)10 20分鐘，充分洗滌熒光微球，用O. 05MpH8. O 8. 5的硼酸鹽緩沖液復(fù)溶后加入透析過(guò)的肌鈣蛋白I單克隆抗體，使肌鈣蛋白I單克隆抗體與熒光微球的質(zhì)量比為I 4 : 50，室溫反應(yīng)2小時(shí)，加入終止液(終濃度為I 10% BSA的
O.01 O. 02M，pH7. 2-7. 6的磷酸鹽緩沖液)室溫封閉30分鐘，洗滌熒光微球，加入復(fù)溶液(含有 O. 05 O. 5% BSA, O. 05 O. 25% Tween-20, pH7. 2-7. 6 的 O. 01 O. 02M 磷酸鹽緩沖液)復(fù)溶至原體積，使用定量噴膜儀以3 μ l/cm-5 μ Ι/cm的量噴涂于玻璃纖維墊上，避光35-38°C烘干lh，加入干燥劑封存?zhèn)溆?。所述的生物素?biāo)記的識(shí)別肌鈣蛋白I不同抗原表位的單克隆抗體墊II的制備方法是識(shí)別肌鈣蛋白I不同抗原表位的單克隆抗體用O. 02M PH7. 2-7. 6的磷酸鹽緩沖液4°C透析過(guò)夜，調(diào)整濃度為I. 5mg/ml 2mg/ml ;將預(yù)活化生物素用二甲基亞砜溶解，終濃度為50mmol，以25 1-20 I的摩爾比向抗體溶液中加入所需要量的生物素溶液，室溫反應(yīng)I小時(shí)，對(duì)O. 02M pH7. 2-7. 6的PBS 4°C透析過(guò)夜；透析過(guò)夜后的生物素化抗體使用定量噴膜儀以3 μ l/cm-5 μ Ι/cm的量噴涂于玻璃纖維墊上，35_38°C烘干lh，加入干燥劑封存?zhèn)溆?。使用時(shí)，在樣品墊上加入樣品液，在毛細(xì)作用下，樣品液向吸水墊一端泳動(dòng)，當(dāng)待測(cè)標(biāo)本中含有肌鈣蛋白I時(shí)，肌鈣蛋白I分別與熒光微球上的抗體和生物素化的抗體結(jié)合形成雙抗夾心復(fù)合物，隨著層析作用，復(fù)合物向前移動(dòng)到達(dá)鏈霉親和素檢測(cè)線(xiàn)T處，復(fù)合物中的生物素和鏈霉親和素結(jié)合聚集在T線(xiàn)處，未結(jié)合生物素的熒光微球會(huì)繼續(xù)前行，到達(dá)質(zhì)控線(xiàn)C時(shí)，兔抗小鼠IgG抗體與熒光微球上的鼠源性單抗結(jié)合，在C線(xiàn)處出現(xiàn)熒光微球的聚集。整個(gè)反應(yīng)在15分鐘內(nèi)完成，并進(jìn)行上機(jī)讀卡，T線(xiàn)和C線(xiàn)都會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的熒光信號(hào)，熒光檢測(cè)儀會(huì)根據(jù)定標(biāo)卡上的信息將實(shí)際檢測(cè)值代入預(yù)設(shè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中算出定量的結(jié)果。本發(fā)明將肌鈣蛋白I單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)在熒光微球上，將生物素化的識(shí)別肌鈣蛋白I不同抗原表位的單克隆抗體分別噴于玻璃纖維墊上后作為檢測(cè)的流動(dòng)相，將兔抗小鼠IgG和鏈霉親和素包被于硝酸纖維素膜上作為捕獲固相，按照常規(guī)免疫層析法的原理進(jìn)行標(biāo)本的檢測(cè)，通過(guò)引入生物素-親和素放大系統(tǒng)，并結(jié)合簡(jiǎn)便易行的熒光檢測(cè)儀進(jìn)行檢測(cè)，在實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測(cè)的同時(shí)又能大大縮短檢測(cè)的時(shí)間。通過(guò)對(duì)試紙條的改進(jìn)，將熒光免疫層析技術(shù)引入肌鈣蛋白I的檢測(cè)中，結(jié)合熒光檢測(cè)儀，實(shí)現(xiàn)了肌鈣蛋白I的單人份定量檢測(cè)，為臨床使用提供了極大便利。通過(guò)引入生物素親和素系統(tǒng)，大大提高了試紙條的靈敏度。本發(fā)明操作簡(jiǎn)便、適合大規(guī)模生產(chǎn)，檢測(cè)所需的便攜式設(shè)備也已經(jīng)上市，對(duì)于肌鈣蛋白I的定量診斷有著積極的意義。



圖I :A本發(fā)明試紙條的正面示意圖；B本發(fā)明試紙條的側(cè)面示意圖。其中，I :樣品墊；2 :熒光標(biāo)記的肌鈣蛋白I的單克隆抗體墊；3 :生物素標(biāo)記的肌鈣蛋白I的單克隆抗體墊；4 :包被膜，包被T :鏈霉親和素檢測(cè)帶；C :兔抗鼠IgG抗體質(zhì)控線(xiàn)；5 :吸水墊；6 :反應(yīng)支持物。圖2 :檢測(cè)結(jié)果示意圖。其中，從左至右依次為T(mén)、C兩條線(xiàn)顯色為陽(yáng)性；C 一條線(xiàn)顯色為陰性；T、C兩條線(xiàn)均未顯色為無(wú)效。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例I肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條的制備(參見(jiàn)圖I)參見(jiàn)附圖1，本實(shí)施例的肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條包括底板6、底板上的包被有質(zhì)控帶(C)和檢測(cè)帶(T)的硝酸纖維素膜4、覆蓋于硝酸纖維素膜一側(cè)的高強(qiáng)度吸水紙5、覆蓋于硝酸纖維素膜的另一側(cè)的熒光標(biāo)記的肌鈣蛋白I的單克隆抗體墊2、生物素標(biāo)記的肌鈣蛋白I的單克隆抗體墊3和樣品墊I ;所述的檢測(cè)帶T包被有鏈霉親和素；所述的質(zhì)控帶包被有兔抗鼠IgG抗體。本實(shí)施例的試紙條制備方法包括以下步驟
A、抗體的制備選用商品化的肌I丐蛋白I單克隆抗體(Hytest公司，cat 4C2),用
O.05M pH8. 5的硼酸鹽緩沖液4°C透析過(guò)夜；選用商品化的肌I丐蛋白I單克隆抗體(Hytest,cat :19C7)，用 O. 02M ρΗ7· 4 的 PBS 4°C透析過(guò)夜；B、標(biāo)記肌鈣蛋白I單克隆抗體的熒光微球墊的制備選用直徑為190nm的熒光微球(Bangslab公司，Dragongreen),用O. 05M pH4. 5MES緩沖液調(diào)節(jié)微球濃度為I %，然后使用碳二亞胺(EDC)和琥珀酰亞胺(NHS)共價(jià)偶聯(lián)的方式將肌鈣蛋白I單克隆抗體(Hytest公司，cat 4C2)標(biāo)記到熒光微球上。將制備好的熒光微球使用定量噴膜儀以3 μ Ι/cm的量噴涂于突光微球墊上；C、生物素化肌鈣蛋白I單克隆抗體墊的制備抗體選用預(yù)活化生物素(購(gòu)自Pierce公司)對(duì)透析過(guò)的肌I丐蛋白I單克隆抗體(Hytest公司，cat 19C7)進(jìn)行標(biāo)記,標(biāo)記好的生物素化抗體以3 μ 1/cm的量噴涂于生物素化抗體墊上； D、硝酸纖維素膜的制備使用含有1%蔗糖的O. 02M pH7. 4PBS分別將鏈霉親和素和兔抗小鼠IgG抗體均稀釋到lmg/ml濃度，使用定量噴膜儀分別將二者以O(shè). 5cm的間隔噴涂于硝酸纖維素膜上，35-38°C烘干lh，加入干燥劑封存?zhèn)溆?；E樣品墊的處理將樣品墊放入樣品墊處理液(含有1% BSA和O. I % Triton X-100的O. IM pH7. 4磷酸鹽緩沖液或者含有1% BSA和O. 05% S9(表面活性劑，購(gòu)自杭州隆基生物技術(shù)有限公司)的O. IM Tris緩沖液)中浸泡處理I小時(shí)后，35-38°C烘干5h ；F試紙條的組裝下述操作必須在濕度小于38%，溫度20-25°C的房間內(nèi)進(jìn)行。在PVC底板上依次相互交錯(cuò)2mm粘貼上硝酸纖維素膜、結(jié)合了肌鈣蛋白I的熒光微球墊I、生物素標(biāo)記的識(shí)別不同抗原表位的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊II、樣品墊、吸水墊，然后切割成O. 6cm寬即得到試紙條。實(shí)施例2除了標(biāo)記肌鈣蛋白I單克隆抗體的熒光微球墊的制備步驟中選用直徑為210nm的熒光微球，其他步驟同實(shí)施例I。實(shí)施例3除了標(biāo)記肌鈣蛋白I單克隆抗體的熒光微球墊的制備步驟中，以4μ Ι/cm的量噴涂于熒光微球墊上，其他步驟同實(shí)施例I。實(shí)施例4除了生物素標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊的制備步驟中，以4μ Ι/cm的量噴涂于熒光微球墊上，其他步驟同實(shí)施例I。實(shí)施例5熒光免疫層析定量檢測(cè)血液中肌鈣蛋白I濃度I.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制將肌I丐蛋白I三元復(fù)合物標(biāo)準(zhǔn)品配制成100ng/ml、50ng/ml、25ng/ml、10ng/ml、lng/ml、0. 5ng/ml、0. lng/ml,用同一批次的試紙條,每個(gè)點(diǎn)測(cè)試6次。按照統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，以檢測(cè)線(xiàn)的熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，肌鈣蛋白三元復(fù)合物標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，建立方程并擬合成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
2.樣品的檢測(cè)I)從包裝盒中取出實(shí)施例I的檢測(cè)條，撕開(kāi)鋁箔袋包裝后，平放檢測(cè)條，量取100 μ I樣本血清加入加樣孔中，室溫避光反應(yīng)15分鐘。2)開(kāi)啟熒光檢測(cè)設(shè)備，并將 檢測(cè)條及校準(zhǔn)卡插入熒光檢測(cè)設(shè)備的插卡口，運(yùn)行儀器，儀器通過(guò)相應(yīng)的分析軟件自動(dòng)計(jì)算出待測(cè)樣本中的肌鈣蛋白三元復(fù)合物的濃度。其中，待測(cè)血清分為兩組，一組為正常血清樣品150例，另一組經(jīng)Dade Behring公司Stratus CSSTAT分析儀測(cè)定為陽(yáng)性的血清樣品150例。表I本發(fā)明所述的熒光免疫層析檢測(cè)條檢測(cè)臨床標(biāo)本的結(jié)果分析
權(quán)利要求
1.一種定量檢測(cè)肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條，包括底板、附著于底板上依次相互交錯(cuò)的樣品吸收墊、標(biāo)記抗體墊、包被膜和吸水墊，其特征在于，所述的標(biāo)記抗體墊為包被有熒光微球標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I和生物素標(biāo)記的識(shí)別不同抗原表位的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊II，所述的包被膜上包被有檢測(cè)帶和質(zhì)控帶，所述檢測(cè)帶固定有親和素，所述的質(zhì)控線(xiàn)固定有兔抗鼠IgG抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的試紙條，其特征在于，所述的親和素為鏈霉親和素或中和親和素。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的試紙條，其特征在于，所述的包被膜為硝酸纖維素膜。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的試紙條，其特征在于，所述熒光微球的直徑為100nm-300nm。
5.一種制備權(quán)利要求I 4任一項(xiàng)所述試紙條的方法，其包括如下步驟 1)在包被膜的不同位置分別固定親和素和兔抗鼠IgG抗體，形成檢測(cè)帶和質(zhì)控帶； 2)分別制備熒光微球標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I和生物素標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊II ； 3)底板上依次相互交錯(cuò)地粘上制備的樣品墊、熒光微球標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I、生物素標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊II、包被膜、和吸水墊，然后在上面覆蓋透明塑料密封膜得到試紙。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，包被膜的制備方法是使用0.02MPH7. 2-7.6的磷酸鹽緩沖液，分別將兔抗小鼠IgG以及鏈霉親和素分別稀釋到Img/ml-1. 5mg/ml的濃度，使用定量噴膜儀以I μ 1/cm的量將二者以O(shè). 5cm-l. Ocm的間隔噴于硝酸纖維素膜上，35-38°C烘干lh，加入干燥劑封存?zhèn)溆谩?br> 7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，熒光標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I的制備方法為將肌鈣蛋白I單克隆抗體用O. 05M，pH8. 0-8. 5的硼酸鹽緩沖液4°C透析過(guò)夜，調(diào)整濃度為I. 5mg/ml-2mg/ml ;使用pH4. 5-5. O的MES活化緩沖液洗滌熒光微球，加入碳二亞胺和琥珀酰亞胺使二者終濃度均為20mmol，室溫反應(yīng)10 20分鐘，充分洗滌熒光微球，用O. 05M pH8. 0-8. 5的硼酸鹽緩沖液復(fù)溶后加入透析過(guò)的肌鈣蛋白I單克隆抗體，使肌鈣蛋白I單克隆抗體與熒光微球的質(zhì)量比為I 4 50，室溫反應(yīng)2小時(shí)，加入含有10% BSA的O. 02M, pH7. 2-7. 6的磷酸鹽緩沖液室溫封閉30分鐘，洗滌熒光微球，用含有O. 5% BSA,O.25% Tween-20,pH7. 2-7. 6的O. 02M磷酸鹽緩沖液保存液復(fù)溶至原體積，使用定量噴膜儀以3 μ l/cm-5 μ Ι/cm噴涂于玻璃纖維墊上，避光35_38°C烘干lh，加入干燥劑封存?zhèn)溆谩?br> 8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，生物素標(biāo)記的識(shí)別肌鈣蛋白I不同抗原表位的單克隆抗體墊II的制備方法是識(shí)別肌鈣蛋白I不同抗原表位的單克隆抗體用O. 02MPH7. 2-7. 6的磷酸鹽緩沖液4°C透析過(guò)夜，調(diào)整濃度為I. 5mg/ml-2mg/ml ;將預(yù)活化生物素用二甲基亞砜溶解，終濃度為50mmol，以25 1-20 I的摩爾比向抗體溶液中加入所需要量的生物素溶液，室溫反應(yīng)I小時(shí)，對(duì)O. 02MpH7. 2-7. 6的磷酸鹽緩沖液4°C透析過(guò)夜；透析過(guò)夜后的生物素化抗體使用定量噴膜儀以3 μ l/cm-5 μ Ι/cm噴涂于玻璃纖維墊上，35-38°C烘干lh，加入干燥劑封存?zhèn)溆谩?br> 9.權(quán)利要求I 4任一項(xiàng)所述的試紙條在檢測(cè)肌鈣蛋白I中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及臨床免疫學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種定量檢測(cè)肌鈣蛋白I的熒光免疫層析試紙條及其制備方法。本發(fā)明提供的試紙條，包括底板、附著于底板上依次相互交錯(cuò)的樣品吸收墊、標(biāo)記抗體墊、包被膜和吸水墊，所述的標(biāo)記抗體墊為包被有熒光微球標(biāo)記的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊I和生物素標(biāo)記的識(shí)別不同抗原表位的肌鈣蛋白I單克隆抗體墊II，所述的包被膜上包被有檢測(cè)帶和質(zhì)控帶，所述檢測(cè)帶固定有親和素，所述的質(zhì)控線(xiàn)固定有兔抗鼠IgG抗體。通過(guò)對(duì)試紙條的改進(jìn)，將生物素-親和素放大系統(tǒng)和熒光免疫層析技術(shù)引入肌鈣蛋白I的檢測(cè)中，結(jié)合熒光檢測(cè)儀，實(shí)現(xiàn)了肌鈣蛋白I的單人份定量檢測(cè)，為臨床使用提供了極大便利。
文檔編號(hào)G01N33/551GK102841207SQ201110173979
公開(kāi)日2012年12月26日 申請(qǐng)日期2011年6月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月24日
發(fā)明者邱笑違, 黃莎, 姚洪濤, 余占江 申請(qǐng)人:北京樂(lè)普醫(yī)療科技有限責(zé)任公司