專利名稱：靈敏的檢測配方奶粉中三聚氰胺的毛細(xì)管電泳方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，公開了采用簡單的樣品預(yù)處理方法聯(lián)用毛細(xì)管電泳在線富集技術(shù)檢測配方奶粉中三聚氰胺的方法。本發(fā)明采用了場放大進(jìn)樣聯(lián)用區(qū)帶毛細(xì)管電泳法檢測配方奶粉中的三聚氰胺及采用場放大進(jìn)樣聯(lián)用膠束掃集法檢測配方奶粉中三聚氰胺的方法。
背景技術(shù)：
三聚氰胺(Melamine)，是一種重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原料，由于三聚氰胺分子中含有大量氮元素，不法分子為了虛假提高蛋白質(zhì)含量而在飼料以及乳制品中添加三聚氰胺的現(xiàn)象是屢禁不止的，導(dǎo)致牛奶、蛋類等生活必需品可能含有超過限量值(雞蛋中的限量值2. 5mg/kg，嬰幼兒配方乳粉中限量值lmg/kg，液態(tài)奶、奶粉、其它配方乳粉中三聚氰胺的限量值2. 5mg/kg)。在2008年，中國有超過51900多個(gè)嬰幼兒因?yàn)槭秤昧撕腥矍璋返呐浞侥谭鄱忌厦谀蚣膊?。?008年發(fā)生三聚氰胺乳品事件后，2010年出現(xiàn)了封存的超過三聚氰胺臨時(shí)管理限量值乳粉同流市場的問題，三聚氰胺又引起公眾的強(qiáng)烈關(guān)注。研究建立快速測定食品、乳制品中三聚氰胺含量的高靈敏分析方法，就具有十分重要的實(shí)際意義和應(yīng)用價(jià)值。目前關(guān)于三聚氰胺測定方法有GC-MS、HPLC、LC-MS毛細(xì)管電動(dòng)色譜法和熒光光度法等方法。這些方法中，有的方法需要比較復(fù)雜的樣品預(yù)處理過程去除樣品中的基質(zhì)影響和比較特殊的填充柱，有的方法的檢測靈敏度比較低。這些方法的檢測靈敏度在 10. 9 μ g/kg 和 0. 25mg/kg 之間。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，本發(fā)明的首要目的在于提供樣品預(yù)處理手段簡單，檢測靈敏度高的毛細(xì)管電泳在線富集技術(shù)場放大進(jìn)樣聯(lián)用區(qū)帶毛細(xì)管電泳法 (FASS-C^E)，場放大進(jìn)樣聯(lián)用膠束掃集法(FASS-swe印MEKC)方法。本發(fā)明的目的通過下列的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)=FASS-C^E和FASS-swe印MEKC檢測三聚氰胺，該方法的檢測步驟如下(1)將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品溶解在20%甲醇水溶液中，配制成濃度為2. 000g/L的儲(chǔ)備液，避光4°C保存。使用時(shí)根據(jù)需要稀釋成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液。在普通的區(qū)帶毛細(xì)管電泳 (CZE) ,FASS-CZE和FASS-swe印MEKC模式下，在最佳檢測條件下，對三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析，得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖。(2)采用CZE、FASS_(^E和FASS-swe印MEKC方法在最佳檢測條件下，對樣品的提取液進(jìn)行分析，獲得樣品的毛細(xì)管電泳圖。(3)根據(jù)三聚氰胺的校正曲線方程，計(jì)算出步驟O)中不同樣品中三聚氰胺的含量。所述最佳檢測條件為CZE電泳條件壓力進(jìn)樣3kPa，進(jìn)樣時(shí)間15s，運(yùn)行緩沖液20mmol/L磷酸二氫鈉(NaH2PO4) 10% (體積分?jǐn)?shù))甲醇(pH 2. 2)，三聚氰胺溶液(8mg/L)配制在運(yùn)行緩沖液中。FASS-CZE電泳條件首先在毛細(xì)管內(nèi)充滿運(yùn)行緩沖液，然后在毛細(xì)管中加壓注入一段水柱(40%乙腈)(200s，3kPa)，樣品采用電動(dòng)進(jìn)樣(80s，20kV)，運(yùn)行緩沖液組成為 120mmol/L NaH2PO4緩沖液(ρΗ2· 2)-10% (體積分?jǐn)?shù))甲醇；分離電壓20kV，樣品基質(zhì)為 0. lmmol/L NaH2PO4 (pH 2. 2)-20%乙腈；測量波長230nm ；樣品(2mg/L)配制在樣品基質(zhì)中。FASS-sweep MEKC電泳條件首先在毛細(xì)管內(nèi)充滿運(yùn)行緩沖液，然后在毛細(xì)管中加壓注入一段水柱(30s，P = 3kPa)，樣品采用電動(dòng)進(jìn)樣(60s，20kV)，水柱提供的高電場使樣品快速向出口端遷移，樣品離子遷移到水和背景緩沖液的界面，背景電解質(zhì)提供低電場使樣品離子的遷移速度降低，從而在界面處形成一段樣品區(qū)帶。進(jìn)樣完畢后進(jìn)出口端均換上低PH膠束背景電解質(zhì)，在負(fù)壓下，運(yùn)用膠束掃集樣品區(qū)帶，使樣品區(qū)帶更窄。樣品基質(zhì)為 0. ImmoVLNaH2PO4 (pH 2.幻-20%乙腈。三聚氰胺溶液(1. 5mg/L)配制在樣品基質(zhì)中。運(yùn)行緩沖液組成90mmol/L SDS、20mmol/L NaH2PO4(pH 2. 2)、10% 甲醇(ν/ν)為運(yùn)行緩沖溶液。步驟O)中配方奶粉中三聚氰胺的樣品預(yù)處理過程按照以下步驟進(jìn)行分別稱取 2. OOOg加入3mL乙腈，超聲lOmin，以7000r/min離心6min，吸出上清液，在下層沉渣中再加 3mL乙腈，操作方法同上，反復(fù)提取三次，合并上清液，并將其放入冰箱內(nèi)冷凍5min，取出后用普通濾紙過濾，然后用0.45 μ m過濾膜過濾得樣品溶液。所有溶液進(jìn)入毛細(xì)管前均經(jīng)過 0. 45 μ m過濾膜過濾，經(jīng)超聲脫氣后使用。對毛細(xì)管進(jìn)行如下處理毛細(xì)管在使用時(shí)，分別用0. lmol/L HC1、超純水、0. Imol/LNaOH、超純水、電泳緩沖液沖洗lOmin。兩次樣品分析運(yùn)行期間，分別用0. lmol/L NaOH、超純水、電泳緩沖液沖洗 5min,以獲得良好的分離檢測重現(xiàn)性。在最佳的富集檢測條件下，F(xiàn)ASS-CZE檢測三聚氰胺的富集倍數(shù)比UE提高了 700 倍，F(xiàn)ASS-swe印MEKC檢測三聚氰胺的富集倍數(shù)比QE提高了 1130倍。方法的線性范圍分別為 5-500 μ g/L 和 5-1000 μ g/L，檢出限分別為 2. 8 μ g/kg 和 1. 8 μ g/kg (S/N = 3)，遷移時(shí)間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別小于4. 6%和3. 7%。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果(1)本發(fā)明為配方奶粉中三聚氰胺的檢測提供技術(shù)支持；( 環(huán)境友好，經(jīng)濟(jì)環(huán)保，所用的緩沖液多為水相，無需消耗大量的有機(jī)溶劑，比液相色譜更環(huán)保，更有利于檢測者的身體健康；C3)分析成本低，所需樣品和溶劑都很少，檢測一個(gè)樣品消耗的緩沖溶液不到lmL，且不需要特殊的色譜柱，僅使用普通的空心毛細(xì)管柱，價(jià)格比一般的色譜柱要低好幾倍，使用方便；(4)本發(fā)明所采用的在線富集技術(shù)使三聚氰胺的檢測靈敏度提高了 2-3個(gè)數(shù)量級左右，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于一般常用的檢測手段；(5)運(yùn)用了電進(jìn)樣方式，時(shí)樣品是通過電泳作用力引入到毛細(xì)管中的，在正向電壓下，只有陽離子化合物才能進(jìn)入毛細(xì)管中，而基質(zhì)中一些中性分子或者陰離子化合物就不能進(jìn)入毛細(xì)管中，從而能克服測量樣品中存在的一部分干擾，不需要采用常規(guī)的較為繁瑣的預(yù)處理方法也可以達(dá)到靈敏的檢測效果


圖1為三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品的CZE2為三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品的FASS-QE圖
圖 3 為 FASS-swe印 MEKC 圖
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。所需的儀器裝置為CAPEL105高效毛細(xì)管電泳系統(tǒng)，配有紫外檢測器；未涂層石英毛細(xì)管(Φ75 μ mX65cm，有效長度50cm)。所需試劑三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，十二烷基硫酸鈉(SDS)，磷酸二氫鈉(NaH2PO4)，磷酸，乙腈，甲醇，0. lmol/L HCl, 0. lmol/L NaOH,超純水，所用緩沖液及樣品溶液均經(jīng)過0. 45 μ m過濾膜過濾后使用。1)最佳檢測條件的確定(1)運(yùn)行液和樣品基質(zhì)的配制用超純水分別配制濃度為150mmol/L NaH2PO4和150mmol/L十二烷基硫酸鈉母液；a.利用濃度為150mmol/L NaH2PO4和150mmol/L十二烷基硫酸鈉母液，配制十二烷基硫酸鈉濃度分別為30mmol/L、60mmol/L、90mmol/L和120mmol/L的15mmol/L磷酸二氫鈉-體積比10%甲醇緩沖液，用5mmol/L氫氧化鈉和磷酸調(diào)節(jié)pH為2. 2。b.利用濃度為150mmol/L NaH2PO4和150mmol/L十二烷基硫酸鈉母液，配制磷酸二氫鈉濃度分別為 5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L 和 30mmol/L 的 120mmol/L十二烷基硫酸鈉-體積比10%甲醇緩沖液，用5mmol/L氫氧化鈉和磷酸調(diào)節(jié)pH 為 2. 2。c.利用濃度為150mmOl/LNaH2P04母液配制磷酸二氫鈉溶液濃度分別為0. 10、 0. 50、1. 00,2. 00,5. 00 和 10. Ommol/L NaH2PO4-體積比 20% 乙腈樣品基質(zhì)溶液，用 5mmol/L 氫氧化鈉和磷酸調(diào)節(jié)pH為2. 2。d.利用濃度為150mmol/L NaH2PO4母液配制磷酸二氫鈉溶液濃度分別為30mmol/ L、50mmol/L、80mmol/L、120mmol/L、150mmoVLNaH2PO4-體積比 10% 甲醇非膠束背景緩沖溶液，用5mmol/L氫氧化鈉和磷酸調(diào)節(jié)pH為2. 2。(2)三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品的配制準(zhǔn)確稱取三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，用20%甲醇水溶液配制成濃度為2. 000g/L的儲(chǔ)備液。 避光4°C保存。使用時(shí)根據(jù)需要稀釋成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液。(3)區(qū)帶毛細(xì)管電泳法檢測三聚氰胺將步驟O)中的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行區(qū)帶毛細(xì)管電泳法分析，在進(jìn)樣壓力為 3kPa，進(jìn)樣時(shí)間15s、檢測波長230nm，檢測溫度為20°C和條件下，在5mmOl/L-30mmOl/L之間調(diào)節(jié)磷酸二氫鈉-體積比10%甲醇中磷酸二氫鈉的濃度，在體積百分含量為0-20%之間調(diào)節(jié)甲醇-20mmol/L磷酸二氫鈉緩沖液中甲醇的含量，在反向15_20kV之間調(diào)節(jié)分離電壓。綜合峰形對稱、靈敏度高、重現(xiàn)性好等檢測條件為最佳檢測條件，獲得最佳區(qū)帶毛細(xì)管電泳檢測三聚氰胺的條件為壓力進(jìn)樣3kPa，進(jìn)樣時(shí)間15s，運(yùn)行緩沖液20mmol/L磷酸二氫鈉(pH 2. 2) 10% (體積分?jǐn)?shù))甲醇，三聚氰胺溶液(8mg/L)配制在運(yùn)行緩沖液中，運(yùn)行壓力-20kV。(4) FASS-CZE在線富集檢測三聚氰胺
將步驟(2)中的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行FASS-QE，檢測波長230nm，檢測溫度為20°C 和條件下，在30mmOl/L-150mmOl/L磷酸二氫鈉-體積比10%甲醇之間調(diào)節(jié)緩沖液中磷酸二氫鈉的濃度，在0. 10mmol/L-10. Ommo 1/L NaH2PO4-體積比20%乙腈樣品基質(zhì)溶液中調(diào)節(jié)磷酸二氫鈉的濃度，在50-250秒之間調(diào)節(jié)水塞進(jìn)入時(shí)間，在30-100秒之間調(diào)節(jié)電動(dòng)進(jìn)樣時(shí)間，在電壓15-25kV之間調(diào)節(jié)分離電壓。根據(jù)峰形對稱、靈敏度高、分析時(shí)間短、重現(xiàn)性好等條件選擇了最佳富集檢測條件在毛細(xì)管中加壓注入一段水柱O00s，P = 3kPa)，樣品采用電動(dòng)進(jìn)樣(80s，20kV)。樣品基質(zhì)為0. lmmol/L NaH2PO4(pH 2. 2)-20%乙腈。運(yùn)行緩沖液組成:120mmoVLNaH2PO4(pH 2. 2)-10% 甲醇(ν/ν)。(5)FASS-sweep MEKC在線富集檢測三聚氰胺將步驟O)中的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行FASS-swe印MEKC，檢測波長230nm，檢測溫度為20°C條件下，在5mmol/L-30mmol/L磷酸二氫鈉-90mmol/LSDS-體積比10%甲醇之間調(diào)節(jié)運(yùn)行緩沖液中磷酸二氫鈉的濃度，在30mmol/L-120mmol/L之間調(diào)節(jié)SDS-15mmol/L磷酸二氫鈉-體積比10%甲醇運(yùn)行緩沖液中SDS的濃度，在體積百分含量為0-20%之間調(diào)節(jié)甲醇-20mmol/L磷酸二氫鈉緩沖液中甲醇的含量，在0. 10mmol/L-10. Ommo VLNaH2PO4-體積比20%乙腈樣品基質(zhì)溶液中調(diào)節(jié)磷酸二氫鈉的濃度，在10-50秒之間調(diào)節(jié)水塞進(jìn)入時(shí)間， 在30-80秒之間調(diào)節(jié)電動(dòng)進(jìn)樣時(shí)間，在反向電壓15-25kV之間調(diào)節(jié)分離電壓。根據(jù)峰形對稱、靈敏度高、分析時(shí)間短、重現(xiàn)性好等條件選擇了最佳富集檢測條件在毛細(xì)管中加壓注入一段水柱(30s，P = 3kPa)，樣品采用電動(dòng)進(jìn)樣(60s，20kV)，進(jìn)樣完畢后進(jìn)出口端均換上低PH膠束背景電解質(zhì)，在負(fù)壓(_18kV)下，運(yùn)用膠束掃集樣品區(qū)帶。樣品基質(zhì)為0. lmmol/ LNaH2PO4 (pH 2. 2)-20 % 乙腈。運(yùn)行緩沖液組成:90mmol/L SDS_20mmo 1/LNaH2PO4(pH 2. 2)-10% 甲醇(ν/ν) ο2)三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品的CZE、FASS-CZE和FASS-swe印MEKC分析將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別在在最佳CZE、FASS_(^E和FASS-swe印MEKC下進(jìn)行分析，三聚氰胺的檢測靈敏度分別提高700和1130倍，如圖1、圖2和圖3所示。3)校正曲線的制定將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品溶液分別稀釋為1000 μ g/L,500 μ g/L, 100 μ g/L,25 μ g/L, 10 μ g/L、5 μ g/L、2 μ g/L的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)。在最佳檢測條件下，對上述系列標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析。以分析物濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制校正曲線，獲得校正曲線方程、線性相關(guān)系數(shù)，線性范圍和檢測下限如表1所示。表1三聚氰胺的線性范圍和檢出限
權(quán)利要求
1.場放大進(jìn)樣-區(qū)帶毛細(xì)管電泳條件下測定配方奶粉中的三聚氰胺的方法，其特征在于包括如下步驟(1)將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品溶解在20%甲醇水溶液中，配制成濃度為2.000g/L的儲(chǔ)備液。 避光4°C保存。使用時(shí)根據(jù)需要稀釋成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液。在普通的區(qū)帶毛細(xì)管電泳(CZE) 和場放大進(jìn)樣聯(lián)用CZE(FASS-aE)的模式下，在最佳檢測條件下，對三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析。得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖。(2)采用QE和FASS-sweepMEKC方法在最佳檢測條件下，對樣品的提取液進(jìn)行分析， 獲得樣品的毛細(xì)管電泳圖。(3)根據(jù)三聚氰胺的校正曲線方程，計(jì)算出步驟O)中樣品中三聚氰胺的含量。所述最佳檢測條件為CZE電泳條件壓力進(jìn)樣3kPa，進(jìn)樣時(shí)間15s，運(yùn)行緩沖液20mmol/L磷酸二氫鈉(pH 2. 2)-10% (體積分?jǐn)?shù))甲醇，三聚氰胺溶液(8mg/L)配制在運(yùn)行緩沖液中。權(quán)利要求1所述的FASS-QE方法FASS-aE電泳條件首先在毛細(xì)管內(nèi)充滿運(yùn)行緩沖液，然后在毛細(xì)管中加壓注入一段水柱(40%乙腈)(200s，3kPa)，樣品采用電動(dòng)進(jìn)樣(80s， 20kV)，運(yùn)行緩沖液組成為120mmOl/LNaH2P04緩沖液(pH 2. 2)-10% (體積分?jǐn)?shù))甲醇；分離電壓20kV，樣品基質(zhì)為0. ImmoVLNaH2PO4 (pH 2. 2)-20%乙腈；測量波長230nm ；樣品(^ig/ L)配制在樣品基質(zhì)中。根據(jù)權(quán)利要求1，步驟O)中配方奶粉中三聚氰胺的樣品預(yù)處理過程按照以下步驟進(jìn)行分別稱取2. OOOg配方奶粉，加:3mL乙腈，超聲lOmin，以7000r/min離心6min，吸出上清液，在下層沉渣中再加3mL乙腈，操作方法同上，反復(fù)提取三次，合并上清液，并將其放入冰箱內(nèi)冷凍5min，取出后用普通濾紙過濾，然后用0. 45 μ m過濾膜過濾得樣品溶液。所有溶液進(jìn)入毛細(xì)管前均經(jīng)過0. 45 μ m過濾膜過濾，經(jīng)超聲脫氣后使用。根據(jù)權(quán)利要求1所述FASS-UE測定配方奶粉中的三聚氰胺的方法，其特征在于在最佳的富集檢測條件下，F(xiàn)ASS-CZE檢測三聚氰胺的富集倍數(shù)比UE提高了 700倍，方法的線性范圍分別為5-500 μ g/L，檢出限為2. 8μ g/kg(S/N = 3), FASS-CZE日內(nèi)遷移時(shí)間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別小于5. 2%，4. 5%，日間精密度分別為8. 7^^Π5.3%。
2.場放大進(jìn)樣-膠束掃集毛細(xì)管電泳條件下測定配方奶粉中三聚氰胺的方法，其特征在于包括如下步驟(1)將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品溶解在20%甲醇水溶液中，配制成濃度為2.000g/L的儲(chǔ)備液。 避光4°C保存。使用時(shí)根據(jù)需要稀釋成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液。在場放大進(jìn)樣聯(lián)用膠束掃集 (FASS-sweep MEKC)的模式下，在最佳檢測條件下，對三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析。得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖。(2)FASS-sweepMEKC方法在最佳檢測條件下，對樣品的提取液進(jìn)行分析，獲得樣品的毛細(xì)管電泳圖。(3)根據(jù)三聚氰胺的校正曲線方程，計(jì)算出步驟O)中樣品中三聚氰胺的含量。權(quán)利要求2所述的FASS-swe印MEKC方法首先在毛細(xì)管內(nèi)充滿運(yùn)行緩沖液，然后在毛細(xì)管中加壓注入一段水柱(30s，P = 3kPa)，樣品采用電動(dòng)進(jìn)樣(60s，20kV)，水柱提供的高電場使樣品快速向出口端遷移，樣品離子遷移到水和背景緩沖液的界面，背景電解質(zhì)提供低電場使樣品離子的遷移速度降低，從而在界面處形成一段樣品區(qū)帶。進(jìn)樣完畢后進(jìn)出口端均換上低PH膠束背景電解質(zhì)，在負(fù)壓下，運(yùn)用膠束掃集樣品區(qū)帶，使樣品區(qū)帶更窄。樣品基質(zhì)為0. ImmoVLNaH2PO4(pH 2. 2)-20%乙腈。三聚氰胺溶液(1. 5mg/L)配制在樣品基質(zhì)中。運(yùn)行緩沖液組成90mmol/L SDS、20mmol/LNaH2PO4(ρΗ 2·2)、10% 甲醇(ν/ν)為運(yùn)行緩沖溶液。分離電壓反向20kV，測量波長230nm。根據(jù)權(quán)利要求2所述場放大進(jìn)樣-膠束掃集毛細(xì)管電泳條件下測定配方奶粉中三聚氰胺的方法的，其特征在于步驟O)中配方奶粉中三聚氰胺的樣品預(yù)處理過程按照以下步驟進(jìn)行分別稱取2. OOOg配方奶粉，加3mL乙腈，超聲lOmin，以7000r/min離心6min，吸出上清液，在下層沉渣中再加3mL乙腈，操作方法同上，反復(fù)提取三次，合并上清液，并將其放入冰箱內(nèi)冷凍5min，取出后用普通濾紙過濾，然后用0. 45 μ m過濾膜過濾得樣品溶液。所有溶液進(jìn)入毛細(xì)管前均經(jīng)過0. 45 μ m過濾膜過濾，經(jīng)超聲脫氣后使用。根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種高靈敏度的毛細(xì)管電泳在線富集方法測定配方奶粉中的三聚氰胺的方法，其特征在于對毛細(xì)管進(jìn)行如下處理毛細(xì)管在使用時(shí)，分別用0. lmol/L HC1、超純水、0. Imol/LNaOH、超純水、電泳緩沖液沖洗lOmin。兩次樣品分析運(yùn)行期間，分別用0. lmol/L NaOH、超純水、電泳緩沖液沖洗5min， 以獲得良好的分離檢測重現(xiàn)性。根據(jù)權(quán)利要求2所述FASS-sweep MEKC測定配方奶粉中的三聚氰胺的方法，其特征在于在最佳的富集檢測條件下，F(xiàn)ASS-sweep MEKC檢測三聚氰胺的富集倍數(shù)比QE提高了 1130倍。方法的線性范圍為5-100(^8/1，檢出限為1.8“8/1^(5/^ = 3)，？435-8 6印 MEKC 遷移時(shí)間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別小于5. 2%和3. 7%，日間精密度分別為10% 和 6. 3%。
全文摘要
本發(fā)明屬于分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，公開了二種靈敏檢測配方奶粉中三聚氰胺的毛細(xì)管電泳方法。采用場放大進(jìn)樣聯(lián)用區(qū)帶毛細(xì)管電泳法及場放大進(jìn)樣聯(lián)用膠束掃集法檢測配方奶粉中三聚氰胺的方法。兩種方法使三聚氰胺的富集靈敏度與普通的區(qū)帶毛細(xì)管電泳相比提高了2～3個(gè)數(shù)量級，檢出限分別降低為2.8μg/kg和1.8μg/kg。本發(fā)明采用低電滲流下的電動(dòng)進(jìn)樣，對進(jìn)入毛細(xì)管中的樣品有選擇性，受樣品基質(zhì)影響小，不需要如液相色譜等方法中復(fù)雜的樣品預(yù)處理過程，適用于多種樣品中三聚氰胺的檢測；靈敏度高，比已有的液相色譜、熒光光譜法的檢出限降低了兩到三個(gè)數(shù)量級；所用的緩沖液主要是水溶液，無需大量使用有機(jī)溶劑，污染小，環(huán)境友好；所需溶劑和樣品用量小，使用的空心毛細(xì)管柱價(jià)格便宜，分析成本低。
文檔編號G01N27/447GK102565170SQ20101058161
公開日2012年7月11日 申請日期2010年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月10日
發(fā)明者劉瑛, 商少明, 陳新, 高海燕 申請人:江南大學(xué)