專利名稱：一種新型的血型和配血試驗(yàn)檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明旨在研制一項(xiàng)簡(jiǎn)捷快速、敏感性高、重復(fù)性好、結(jié)果判讀清晰客觀、易于標(biāo)準(zhǔn)化和自動(dòng)化的一種用于ABO血型分類、反向ABO血型分類、1 顯型分析、直接庫(kù)姆斯氏及交叉配血等一種凝膠柱過濾免疫實(shí)驗(yàn)方法，該發(fā)明屬醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
輸血是搶救和治療患者的一種緊急的必要手段之一。目前血型及配血等鑒定主要是應(yīng)用紅細(xì)胞抗原抗體凝結(jié)反應(yīng)原理。過去手工法血型配血鑒定常用的是玻片和試管凝結(jié)法，目前已發(fā)展為用半自動(dòng)或全自動(dòng)儀器完成的實(shí)驗(yàn)方法，此法可避免人為操作可能造成的差錯(cuò)并提高工作效率。全自動(dòng)血型配血檢測(cè)儀器的工作方法主要有兩種一種是凝膠柱法，另一種是微孔板法。凝膠柱法原理為凝膠分離的空隙只能讓未凝集的紅細(xì)胞通過。凝集的紅細(xì)胞則被阻隔于分離凝膠柱外。當(dāng)凝膠中含有特異性A、B、Rh血型的抗血清或其他抗人同種球蛋白抗體時(shí)，加入測(cè)試者紅細(xì)胞，經(jīng)離心后，如發(fā)生抗原抗體反應(yīng)則紅細(xì)胞發(fā)生凝集被阻隔于分離凝膠柱外，如無(wú)抗原抗體反應(yīng)，則單個(gè)的紅細(xì)胞經(jīng)過凝膠空隙被離心沉至管底。其結(jié)果肉眼觀察明顯，判斷也準(zhǔn)確。另一種是微孔板法，是根據(jù)紅細(xì)胞凝結(jié)和不凝結(jié)的圖像不同，由自動(dòng)化儀器根據(jù)透光率或圖象不同而分析結(jié)果，這種方法有時(shí)會(huì)因二者區(qū)別不明顯而判斷困難。因此凝膠柱法在半自動(dòng)或全自動(dòng)血型和配血儀器中使用較為普遍?，F(xiàn)各種全自動(dòng)血型和配血儀器均為專用設(shè)備，設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，價(jià)格昂貴，應(yīng)用成本較高， 不能普及。如能有一種通用性強(qiáng)，并能高通量用儀器判讀，快速準(zhǔn)確的血型鑒定和配血試驗(yàn)方法，無(wú)疑將大大減輕勞動(dòng)強(qiáng)度，提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。本發(fā)明可對(duì)半自動(dòng)和全自動(dòng)化血型配血系統(tǒng)提供一種低成本，并能實(shí)現(xiàn)高通量，結(jié)果快而準(zhǔn)獨(dú)特的凝膠柱結(jié)果判讀實(shí)驗(yàn)方法。

發(fā)明內(nèi)容
設(shè)計(jì)一排8孔，上部與96孔U型規(guī)格化酶標(biāo)板孔徑一致，底部延長(zhǎng)為12毫米，內(nèi)徑縮小為3毫米左右的柱狀板條，此板條可整排拆裝于96孔U型規(guī)格化的板架中。用脂溶性或非水溶性的藍(lán)色、紅色染料分別將凝膠顆粒染成藍(lán)色或紅色的凝膠體，也可由生產(chǎn)凝膠廠定制成藍(lán)色和紅色凝膠顆粒。柱管底部加藍(lán)色凝膠顆粒，上中部加紅色凝膠顆粒，形成底部藍(lán)色，上部紅色的凝膠柱狀體。該雙色凝膠柱狀體內(nèi)有A、B血型或其他抗體成分，當(dāng)加入紅細(xì)胞懸液，經(jīng)離心后，紅細(xì)胞凝結(jié)則在凝膠上面形成紅色圓點(diǎn)，若不發(fā)生凝結(jié)則在凝膠底部形成聚集的藍(lán)色圓點(diǎn)。其原因是由于柱管底部有藍(lán)色凝膠將紅細(xì)胞蓋住，紅細(xì)胞被藍(lán)色凝膠遮蓋成非紅色的藍(lán)色圓點(diǎn)，而凝膠上面是紅色凝膠，加之紅細(xì)胞本色即為紅色，因此紅細(xì)胞成紅色圓點(diǎn)。判斷結(jié)果由上而下觀察，形成邊緣整齊藍(lán)色圓點(diǎn)的為紅細(xì)胞不凝結(jié)，判為陰性結(jié)果。形成邊緣不太整齊紅色、暗淡紅色圓點(diǎn)的表示紅細(xì)胞發(fā)生凝結(jié)，凝結(jié)的紅細(xì)胞在紅色凝膠的表面、中部或中下部，此現(xiàn)象用肉眼觀察或通過透光率或圖象分析很容易區(qū)別。


圖1是與現(xiàn)有96孔酶標(biāo)儀板規(guī)格一樣為一排8孔，并且孔底部延長(zhǎng)為12毫米，內(nèi)徑縮小為3毫米左右的柱狀板條。將管內(nèi)底部裝入含有藍(lán)色的過濾膠體或其他過濾顆粒，上部裝入紅色的過濾凝膠體或其他過濾顆粒，形成上部五分之三為紅色，底部五分之二為藍(lán)色的雙色過濾柱。
圖2是板架可插入12排上述雙色過濾柱，成與現(xiàn)有96孔酶標(biāo)儀板規(guī)格一樣的過濾柱比色板，并可根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目多少自由拆卸組裝。
具體實(shí)施例方式定制一排8孔可整排拆裝的與現(xiàn)有96孔酶標(biāo)儀板規(guī)格一樣，并且孔底部延長(zhǎng)為12 毫米，內(nèi)徑縮小為3毫米左右的柱狀板條。將圓柱狀管內(nèi)底部裝入30微升左右含有脂溶性藍(lán)色染料半固態(tài)狀的凝膠體(凝膠體的凝膠顆粒及濃度，緩沖鹽水對(duì)和防腐劑配制等均能達(dá)到血型配血的抗原抗體反應(yīng)要求，經(jīng)一定離心力離心后，能達(dá)到凝結(jié)紅細(xì)胞不能通過凝膠而停留在其表層，不凝結(jié)紅細(xì)胞能通過凝膠到達(dá)其底部等系列實(shí)驗(yàn)要求)，上部裝入含有脂溶性紅色染料的半固態(tài)狀凝膠體，形成上部五分之三為紅色，底部五分之二為藍(lán)色的雙色凝膠柱。柱管內(nèi)加有A、B血型抗血清或其他抗體以及受試者血槳，實(shí)驗(yàn)時(shí)加入一定濃度受試者、供血者紅細(xì)胞或標(biāo)準(zhǔn)A、B型紅細(xì)胞的生理鹽水混懸液，離心后，若紅細(xì)胞凝結(jié)則在凝膠上面形成紅色圓點(diǎn)，若不發(fā)生凝結(jié)則在凝膠底部形成藍(lán)色圓點(diǎn)，儀器自上而下掃描，根據(jù)在某波長(zhǎng)的透光率或拍攝圖像，根椐顏色及圖像來(lái)分析判讀結(jié)果；有紅色、暗紅的圓點(diǎn)的為陽(yáng)性，有藍(lán)色圓點(diǎn)的為陰性。具體實(shí)例1血型鑒定1. 1 方法將30份待檢受血者和30份供血者抗凝血離心，吸取各管抗凝血下層紅細(xì)胞，用生理鹽水制成3%紅細(xì)胞懸液。將雙色凝膠柱管內(nèi)加有A、B血型標(biāo)準(zhǔn)抗血清，每管柱內(nèi)加入50微升上述受血者和供血者的3%紅細(xì)胞懸液，1500r/min離心2min，由上而下肉眼觀察或儀器自上而下掃描或拍攝圖像，根椐管內(nèi)紅細(xì)胞圓點(diǎn)的顏色及圖像來(lái)分析判讀結(jié)果。若紅細(xì)胞凝結(jié)則在凝膠上面形成紅色圓點(diǎn)，若不發(fā)生凝結(jié)則在凝膠底部形成藍(lán)色圓點(diǎn)，有紅色、暗紅色圓點(diǎn)者為陽(yáng)性，有藍(lán)色圓點(diǎn)者為陰性。如一份測(cè)試血加A血型標(biāo)準(zhǔn)抗血清的管柱內(nèi)凝膠底部形成藍(lán)色圓點(diǎn)，加B血型標(biāo)準(zhǔn)抗血清的管柱內(nèi)凝膠上面形成紅色圓點(diǎn)則為A型血；如加A血型標(biāo)準(zhǔn)抗血清的管柱內(nèi)凝膠上面形成紅色圓點(diǎn)，加B血型標(biāo)準(zhǔn)抗血清的管柱內(nèi)凝膠內(nèi)底部形成藍(lán)色圓點(diǎn)為B型血；若二者凝膠上面均形成紅色圓點(diǎn)者為AB型血，如二者凝膠內(nèi)底部均形成藍(lán)色圓點(diǎn)者為0型血。1.2 結(jié)果:將30份待檢受血者和30份供血者抗凝血用雙色凝膠柱管法鑒定的血型結(jié)果與常規(guī)試管凝結(jié)法鑒定的血型結(jié)果作比較，二者鑒定結(jié)果符合率達(dá)成協(xié)議100 %。
權(quán)利要求
1.一種新型的血型和配血試驗(yàn)檢測(cè)方法，是一種新的血型及配血等鑒定用的凝膠柱過濾免疫實(shí)驗(yàn)方法。將過濾用的凝膠柱制成上層紅色和底層藍(lán)色的雙色凝膠柱。血型鑒定時(shí)， 凝集的紅細(xì)胞被阻隔在上面由紅色凝膠層襯托成紅色圓點(diǎn)，不凝集的紅細(xì)胞通過凝膠在底層被藍(lán)色凝膠遮蓋成非紅色的藍(lán)色圓點(diǎn)，判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果可由上而下觀察。
2.按照權(quán)利要求1所述，新型的血型和配血試驗(yàn)是在微柱管中進(jìn)行，微管8個(gè)一聯(lián)排， 并可放入現(xiàn)有規(guī)格化的比色板架中，可與平板離心機(jī)、半自動(dòng)和全自動(dòng)化酶標(biāo)儀器(增加一些軟件功能和設(shè)備)及全自動(dòng)血型配血系統(tǒng)配套使用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可由上而下或由下而上觀察，根據(jù)透光率或拍攝的顏色和圖象不同而分析其結(jié)果。
3.按照權(quán)利要求1所述，該凝膠柱為上下雙色層凝膠柱，雙層顏色可為不同顏色；凝膠顆?？捎萌玖匣蛏厝旧蔀橛猩z，也可事先由生產(chǎn)廠商定制成各種有色的凝膠顆粒。
全文摘要
一種新型的血型和配血試驗(yàn)檢測(cè)方法，是一種新的血型及配血等鑒定用的凝膠柱過濾免疫實(shí)驗(yàn)方法，屬醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域。凝膠柱的管底部加藍(lán)色凝膠顆粒，上中部加紅色凝膠顆粒，形成底部藍(lán)色，上部紅色的凝膠柱狀體。該雙色凝膠柱狀體內(nèi)有A、B血型或其他抗體成分，當(dāng)加入紅細(xì)胞懸液，經(jīng)離心后，紅細(xì)胞凝結(jié)則在凝膠上面形成紅色圓點(diǎn)，若不凝結(jié)則在凝膠底部形成聚集的藍(lán)色圓點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可由上而下或由下而上觀察，并可根據(jù)透光率或拍攝的顏色和圖象不同而分析其結(jié)果。本發(fā)明可對(duì)半自動(dòng)和全自動(dòng)化血型配血系統(tǒng)提供一種低成本，并能實(shí)現(xiàn)高通量，結(jié)果快而準(zhǔn)的凝膠柱結(jié)果判讀實(shí)驗(yàn)方法。
文檔編號(hào)G01N33/80GK102466731SQ201010550150
公開日2012年5月23日 申請(qǐng)日期2010年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月19日
發(fā)明者張文麗, 曹寧, 李曉蘭, 王禮文 申請(qǐng)人:南京神州英諾華醫(yī)療科技有限公司