專(zhuān)利名稱(chēng)：快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中的7種揮發(fā)酚的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及卷煙主流煙氣中7種揮發(fā)酚的快速檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
揮發(fā)酚是卷煙主流煙氣中的一類(lèi)重要有害成分，被列入加拿大政府46種有害成分名單和WHO “煙草制品管制研究小組”建議的管制成分清單，因而準(zhǔn)確測(cè)定卷煙煙氣中的揮發(fā)酚對(duì)于卷煙危害性評(píng)價(jià)有重要意義。很多種分析技術(shù)，通常包括復(fù)雜的液-液萃取、柱層析和衍生化，都曾經(jīng)應(yīng)用于卷煙煙氣中酚類(lèi)的分析，但由于卷煙煙氣是非常復(fù)雜的混合物，而且酚類(lèi)的含量很低，因此酚類(lèi)化合物的準(zhǔn)確定量一直都是很困難的工作。在早期的定性研究中，氣相色譜是卷煙煙氣中酚類(lèi)物質(zhì)分析中應(yīng)用較多的技術(shù)，但是由于酚類(lèi)成分容易被氧化，并且具有較強(qiáng)的活性， 應(yīng)此對(duì)其定量必須采用衍生化處理，操作較為繁瑣。近年來(lái)高效液相色譜法[HPLC]在酚類(lèi)成分的分析中得到了廣泛的應(yīng)用，該方法不需要衍生化，可以直接進(jìn)行樣品測(cè)定，簡(jiǎn)化了分析步驟，提高了定量的可靠性。由于酚類(lèi)成分可以產(chǎn)生熒光，采用熒光檢測(cè)可以大大提高分析的靈敏度。因此，高效液相色譜-熒光檢測(cè)法已經(jīng)成為測(cè)定卷煙煙氣中酚類(lèi)成分最為可靠的方法，加拿大政府目前已經(jīng)將其作為政府的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。但是，高效液相色譜法測(cè)定卷煙煙氣中的揮發(fā)酚存在兩個(gè)問(wèn)題(1)測(cè)試時(shí)間超過(guò)20min，不利于批量樣品分析；(2)由于異構(gòu)體間-甲酚和對(duì)-甲酚的結(jié)構(gòu)以及物理化學(xué)性質(zhì)極為相近，目前的高效色譜技術(shù)難以將其分離，只能獲得間甲酚和對(duì)甲酚混合物的測(cè)定結(jié)果。為解決以上問(wèn)題，研究人員已嘗試了多種方法，陳章玉等建立的快速分離測(cè)定揮發(fā)酚的方法，但其樣品前處理繁瑣耗時(shí)，多步轉(zhuǎn)移操作易引起檢測(cè)物損失，且流動(dòng)相采用 2mL/min的高流速，導(dǎo)致柱壓過(guò)高，對(duì)泵和分析柱使用壽命不利。劉芳等人建立了快速分離柱-高效液相色譜法測(cè)定卷煙主流煙氣中的苯酚、甲酚和苯二酚，分析時(shí)間僅需6min ；但該法不能分離間-甲酚和對(duì)-甲酚。近期，張婕等人[CN 101592638]在流動(dòng)相中加入β -⑶ 作為改性劑，實(shí)現(xiàn)了間-甲酚和對(duì)-甲酚異構(gòu)體分離，但該法分析時(shí)間需35min，不利于批量樣品分析。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述技術(shù)方案中存在的缺陷，本發(fā)明提供一種快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中的7種揮發(fā)酚的方法，其提高了分析效率。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明技術(shù)方案為快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中的7種揮發(fā)酚的方法，包括了主流煙氣的捕集、煙氣樣品的制備和超高效液相色譜檢測(cè)，所述的超高效液相色譜檢測(cè)采用超高效液相色譜柱，該超高效液相色譜柱流動(dòng)相含有β "CD水溶液、乙腈和醋酸。超高效液相色譜柱包括兩樣流動(dòng)相，流動(dòng)相A為冰醋酸0_^水溶液=1 99， 流動(dòng)相B為冰醋酸乙腈0_^水溶液=1 30 69 ；梯度洗脫流動(dòng)相設(shè)置為開(kāi)始時(shí)含流動(dòng)相AlOO % (體積)，2. 2min含流動(dòng)相AlOO % (體積)，4min含流動(dòng)相A40 % (體積)， 8min含流動(dòng)相A10% (體積)，9min含流動(dòng)相AlOO % (體積)；其柱流速為0. 3mL/min ；柱溫為30°C ；進(jìn)樣量為10 μ L。上述技術(shù)方案的有益之處在于與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明提供的快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中7種揮發(fā)酚的方法，是采用以β-CD為流動(dòng)相添加劑的UPLC法，9min內(nèi)可分離測(cè)定卷煙主流煙氣中7種簡(jiǎn)單酚的含量，且可以將難以分離的間-甲酚和對(duì)-甲酚異構(gòu)體分離；操作簡(jiǎn)便，測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確，分析時(shí)間短，適合批量試樣的快速檢測(cè)。


圖1是β -CD濃度對(duì)混合標(biāo)樣中7種酚成分的液相色譜分離影響比較示意圖；圖2是本發(fā)明方法(UPLC)與Y/C Τ255-2008標(biāo)準(zhǔn)方法(HPLC)混合酚標(biāo)準(zhǔn)樣品和卷煙樣品煙氣中7種酚的譜圖比較示意圖。
具體實(shí)施例方式發(fā)明人為了探索快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中的7種揮發(fā)酚的方法，進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)，具體如下1、材料和儀器醋酸(色譜純)、鄰-甲酚(純度> 99. 5 % )、間-甲酚和對(duì)-甲酚(純度> 99. 0 % ) (Fluka公司)；鄰-苯二酚、苯酚(AR，購(gòu)自于日本東京化工工業(yè)株式會(huì)社)；間-甲酚和對(duì)-苯二酚(AR，成都市科龍化工試劑廠)；乙腈(色譜純，百靈威化學(xué)試劑公司)；環(huán)糊精(BR，上海國(guó)藥)；去離子水(18. 2 Ω m，使用前經(jīng)0.45 μ m濾膜過(guò)濾)；烤煙型卷煙樣品 (煙支64mm+濾嘴20mm，由福建中煙提供)。Acqu ity超高效液相色譜儀(Waters)，配備熒光檢測(cè)器；Acquity Uplc : BEH C18 柱(Watrs，50mmX2. lmm，l. 7μπι) ；Luna HPLC C18 色譜柱(菲羅門(mén)，100mmX3. 9mm， 5ym) ；SM400直線型吸煙機(jī)(英國(guó)Filtrona公司)；AG104電子天平(感量0. OOOlg，瑞士 Mettler2Toledo儀器公司)；T660/H型超聲波振蕩器(德國(guó)ELMA公司)；Human型超純水系統(tǒng)(Pgeneral公司)。2、前處理2.1煙氣的捕集將卷煙樣品在22°C 士 1°C和相對(duì)濕度60% 士2%條件下平衡48h，用SM400吸煙機(jī)按照YC/T 29-1996規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)條件抽吸卷煙，每個(gè)孔道抽吸4支煙，用劍橋?yàn)V片捕集卷煙主流煙氣。吸畢，取出濾片。2. 2煙氣樣品的制備參照Y/C T255-2008標(biāo)準(zhǔn)方法，采用超聲萃取提取濾片中的揮發(fā)酚。將1張捕集煙氣粒相物的劍橋?yàn)V片折疊放入200mL錐形瓶中，加入50mL 1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))醋酸水溶液， 室溫下超聲萃取20min，靜置5min。取2mL萃取液，用0. 45 μ m微孔濾膜過(guò)濾，濾液取樣進(jìn)行UPLC分析(處理好的樣品液必須在3d內(nèi)分析)。2. 3超高效液相色譜檢測(cè)
為驗(yàn)證本發(fā)明方法(UPLC)的準(zhǔn)確性，比較了 UPLC方法與Y/C T255-2008標(biāo)準(zhǔn)方法(HPLC)對(duì)卷煙樣品主流煙氣中7中揮發(fā)酚的定量結(jié)果。以下是兩種方法的設(shè)置的色譜分析條件。表IUPLC色譜條件
權(quán)利要求
1.快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中的7種揮發(fā)酚的方法，包括了主流煙氣的捕集、煙氣樣品的制備和超高效液相色譜檢測(cè)，其特征在于所述的超高效液相色譜檢測(cè)采用超高效液相色譜柱，該超高效液相色譜柱流動(dòng)相含有β "CD水溶液、乙腈和醋酸。
2.如權(quán)利要求1所述的快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中的7種揮發(fā)酚的方法，其特征在于所述的β -CD水溶液在超高效液相色譜流動(dòng)相中的濃度為6Χ 10_3mOl/L。
3.如權(quán)利要求1或2所述的快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中的7種揮發(fā)酚的方法，其特征在于超高效液相色譜柱包括兩樣流動(dòng)相，流動(dòng)相A為冰醋酸0_^水溶液=1 99， 流動(dòng)相B為冰醋酸乙腈0_^水溶液=1 30 69 ；梯度洗脫流動(dòng)相設(shè)置為開(kāi)始時(shí)含流動(dòng)相AlOO % (體積)，2. 2min含流動(dòng)相AlOO % (體積)，4min含流動(dòng)相A40 % (體積)， 8min含流動(dòng)相AlO % (體積)，9min含流動(dòng)相AlOO % (體積)；其柱流速為0. 3mL/min ；柱溫為30°C ；進(jìn)樣量為10 μ L。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中7種揮發(fā)酚的方法，采用超高效液相色譜柱，并含有β-CD水溶液、乙腈和醋酸為流動(dòng)相，在9min內(nèi)快速分離測(cè)定卷煙主流煙氣中7種揮發(fā)酚，大幅度地提高了工作效率，節(jié)約分析檢測(cè)成本，具有廣泛的應(yīng)用和推廣價(jià)值。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102313782SQ20101022191
公開(kāi)日2012年1月11日 申請(qǐng)日期2010年7月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月9日
發(fā)明者吳清輝, 張建平, 白雪平, 蘇明亮, 趙藝強(qiáng), 連芬燕, 黃朝章 申請(qǐng)人:福建中煙工業(yè)公司