專利名稱：去頭屑洗發(fā)類化妝品中非法添加酮康唑的快速篩查方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及測量領域，具體涉及利用物質(zhì)的化學物理性質(zhì)進行定性檢測。

背景技術(shù)：
酮康唑(Ketoconazole)，化學結(jié)構(gòu)如式1所示，易溶于三氯甲烷，微溶于乙醇，幾乎不溶于水，是一種抗真菌藥，臨床用于治療表皮和深部真菌病，包括皮膚和指甲癬(局部治療無效者)、胃腸道酵母菌感染、局部用藥無效的陰道白色念珠菌病，以及白色念珠菌、類球孢子菌、組織胞漿菌等引起的全身感染。

由于酮康唑具有一定的抗真菌作用，將其添加到洗發(fā)類化妝品中可達到較好的去屑效果，然而長期使用添加有酮康唑的洗發(fā)劑會使皮膚出現(xiàn)紅斑、丘疹、灼燒感、頭暈等不良反應，因此衛(wèi)生部于1998年在衛(wèi)監(jiān)發(fā)〔1998〕第21號文規(guī)定鑒于尚不能充分證實酮康唑作為化妝品原料使用的安全性，經(jīng)研究，酮康唑不能作為化妝品原料使用。盡管酮康唑已被禁止添加到化妝品中，但仍有不少不法商家為達宣傳效果，牟取暴利，將酮康唑加入到化妝品中，損害消費者利益。
衛(wèi)生部印發(fā)的《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載了采用高效液相色譜檢測去屑劑中酮康唑的方法，但是該方法需要特殊的儀器設備，操作繁瑣，不利于現(xiàn)場檢測。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種適用于現(xiàn)場檢測的去頭屑洗發(fā)類化妝品中非法添加酮康唑的快速篩查方法。
本發(fā)明解決上述問題的技術(shù)方案是 去頭屑洗發(fā)類化妝品中非法添加酮康唑的快速篩查方法，該方法由以下步驟組成 (1)取待檢樣品，加入到2～3體積倍的乙酸乙酯中，輕輕振搖使其充分混合，靜置至液體分層； (2)吸取上層液體，加入到1/2體積倍的濃度為4～6％(v/v)的鹽酸溶液中，搖勻，靜置至液體分層； (3)吸取下層液體，過濾，往濾液滴入2～3滴三硝基苯酚的飽和水溶液，若出現(xiàn)黃色沉淀，則說明樣品中含有酮康唑，反之則無。
本發(fā)明方法的原理是首先利用酮康唑既可溶于有機溶劑也可溶于無機酸溶液的特性將可能含有酮康唑的部分分離出來并盡量排除其他干擾物質(zhì)，再根據(jù)酮康唑與生物堿沉淀劑反應產(chǎn)生沉淀的現(xiàn)象判斷受檢的樣品中是否含有酮康唑。然而，僅根據(jù)上述原理要設計出本發(fā)明所述方案并獲得理想的技術(shù)效果仍有一些技術(shù)問題需要解決，因為洗發(fā)劑里有許多因素影響了有機溶劑的提取效果和沉淀劑的檢測準確性，如洗發(fā)劑里含有大量的乳化劑嚴重影響了有機溶劑提取后的分層效果，為酮康唑的分離增加了不少難度；再如洗發(fā)劑里含有不少植物提取成分，這些成分可能與酮康唑有相似的物性和化性，對最后一個步驟用沉淀劑指示檢測結(jié)果的準確性造成干擾。本發(fā)明人通過實驗發(fā)現(xiàn)，在眾多的有機溶劑和生物沉淀劑中，乙酸乙酯具有較好的提取和分層效果，三硝基苯酚對酮康唑的選擇性最佳?；谏鲜鲅芯拷Y(jié)果，本發(fā)明選擇乙酸乙酯作為提取酮康唑的有機溶劑，三硝基苯酚作為指示檢測結(jié)果的沉淀劑，使檢測準確率和靈敏度分別高達97.8％和100％，誤檢率低至2.2％，漏檢率為0％。
本發(fā)明方法操作簡便易行、專屬性強、檢驗結(jié)果可靠，不需專門的儀器，分析成本低，適用于現(xiàn)場化妝品中非法添加的酮康唑快速篩查。
以下為本發(fā)明所述方法的相關研究和效果實驗。
1、不同溶劑對提取乳液狀洗發(fā)劑中酮康唑效果的影響 (1)實驗材料 洗發(fā)劑添加了2.14％酮康唑的乳液狀洗發(fā)劑； 有機溶劑三氯甲烷(因毒性較大，不作為首選提取溶劑故未考察)，二氯甲烷，乙酸乙酯 (2)實驗方法 取洗發(fā)劑1.5g，加入到4ml的有機溶劑中，輕輕振搖1min，靜置3min，觀察分層效果； 吸取上層液體2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min，觀察分層效果； 吸取下層液體0.5ml，過濾，采用高效液相色譜法檢測濾液中酮康唑的含量。
(3)實驗結(jié)果結(jié)果如表1所示。
表1
在用有機溶劑提取酮康唑時，有機溶劑的選擇應符合以下條件1、可以溶解酮康唑；2、與無機酸溶液互不相容；3、對酮康唑有較好的選擇性以盡量排除其余干擾物質(zhì)對后面沉淀反應的影響；4、受乳化劑影響小以便分層。我們對眾多有機溶劑進行了篩選，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯、二氯甲烷可以較好地滿足以上條件(如表1所示)，其中乙酸乙酯是最人體健康的影響最小，且能提取出洗發(fā)劑中酮康唑的20％以上(含2.14％酮康唑的膏狀洗發(fā)劑樣品1.5g用乙酸乙酯提取出了7.16mg酮康唑，含2.14％酮康唑的乳液狀洗發(fā)劑樣品1.5g用乙酸乙酯提取出了7.22mg酮康唑)。
2、不同沉淀劑對檢測效果的影響 (1)實驗材料 洗發(fā)劑添加了0.74～2.14％酮康唑的洗發(fā)劑(5個樣品)；不含酮康唑的洗發(fā)劑(10個樣品)。
有機溶劑乙酸乙酯； 沉淀劑碘化鉍鉀試液取次硝酸鉍0.85g，加冰醋酸10mL與水40mL溶解后，加碘化鉀溶液(4→10)20mL，搖勻，三硝基苯酚試液(組成三硝基苯酚的飽和水溶液，經(jīng)本人試驗該飽和水溶液約為3～4％三硝基苯酚溶液)，硅鎢酸試液(取硅鎢酸10g，加水使溶解成100mL)，碘化汞鉀試液(取二氯化汞1.36g，加水60mL使溶解；另取碘化鉀5g，加水10mL使溶解，將兩液混合)。
(2)實驗方法 取洗發(fā)劑1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，輕輕振搖1min，靜置3min； 吸取上層液體2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min； 吸取上層液體約0.8ml，過濾，往濾液滴入沉淀劑。
(3)實驗結(jié)果結(jié)果如表2所示。
表2
由表2所示結(jié)果可以看出，三硝基苯酚與其他沉淀劑相比，對酮康唑有很好的選擇性。
3、本發(fā)明方法市售商品的效果實驗 (1)供試樣品共188批次，其中180批次，系2008年由汕頭、佛山、惠州、韶關、云浮、清遠、江門、汕尾、揭陽等共9個市局分別對所在地轄區(qū)內(nèi)的化妝品生產(chǎn)企業(yè)、批發(fā)市場、商場、藥店的宣稱具有去頭屑功能的洗發(fā)用化妝品進行抽查所得(20批次/市)，市場購買8個批次。
(2)實驗方法 采用本發(fā)明方法檢測，并同時按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載的高效液相色譜法檢測作為對照。
(3)實驗結(jié)果統(tǒng)計結(jié)果如表3所示。
表3 根據(jù)表3所示的統(tǒng)計結(jié)果進行下述計算 正確率AR＝(真陽性+真陰性)/總數(shù)＝(5+179)/188＝97.9％ 漏檢率OT(假陰性率)＝假陰性/(假陰性+真陽性)＝0/(0+5)＝0 誤檢率MT(假陽性率)＝假陽性/(假陽性+真陰性)＝4/(4+179)＝2.2％ 靈敏度Se＝真陽性/(真陽性+假陰性)＝5/(5+0)＝100.0％ 特異度Sp＝真陰性/(真陰性+假陽性)＝179/(179+4)＝97.8％ 正確指數(shù)AI＝1-OT-MT＝1-0-0.022＝0.978 由上述計算結(jié)果可見，本發(fā)明所述的方法雖然有2.2％的假陽性率，對有黃色沉淀產(chǎn)生的受檢產(chǎn)品還要帶回檢驗機構(gòu)采用更精準的方法(如高效液相色譜法)進一步確認，但是，其假陰性率為零，這說明不會出現(xiàn)漏檢，符合科學、公正的檢驗原則。

具體實施例方式 例1 待檢樣品編號為HZ080017海飛絲

新生去屑洗發(fā)露(怡神冰涼型)。
檢測方法取上述樣晶1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，輕輕振搖1min，靜置3min；吸取上層液體約2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min；吸取下層液體約0.8ml，過濾，往濾液滴入3滴三硝基苯酚的飽和水溶液，沒有沉淀產(chǎn)生。
同時取上述樣品按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載的高效液相色譜法檢測，結(jié)果顯示該樣品中不含酮康唑。
例2 待檢樣品編號為HZ080048澳雪

中藥養(yǎng)發(fā)洗發(fā)露(皂角田七去屑精華)。
檢測方法取上述樣品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，輕輕振搖1min，靜置3min；吸取上層液體約2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min；吸取下層液體約0.8ml，過濾，往濾液滴入3滴三硝基苯酚的飽和水溶液，沒有沉淀產(chǎn)生。
同時取上述樣品按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載的高效液相色譜法檢測，結(jié)果顯示該樣品中不含酮康唑。
例3 待檢樣品編號為HZ080015霸王

皂角去屑天然植物洗發(fā)露。
檢測方法取上述樣品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，輕輕振搖1min，靜置3min；吸取上層液體約2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min；吸取下層液體約0.8ml，過濾，往濾液滴入3滴三硝基苯酚的飽和水溶液，沒有沉淀產(chǎn)生。
同時取上述樣品按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載的高效液相色譜法檢測，結(jié)果顯示該樣品中不含酮康唑。
例4 待檢樣品編號為HZ080018的碧彩

去屑王。
檢測方法取上述樣品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，輕輕振搖1min，靜置3min；吸取上層液體約2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min；吸取下層液體約0.8ml，過濾，3滴三硝基苯酚的飽和水溶液，有黃色沉淀產(chǎn)生。
同時取上述樣品按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載的高效液相色譜法檢測，結(jié)果顯示該樣品中含酮康唑。
例5 待檢樣品編號為HZ080103美晨

頂彩TM去屑養(yǎng)發(fā)洗劑。
檢測方法取上述樣品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，輕輕振搖1min，靜置3min；吸取上層液體約2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min；吸取下層液體約0.8ml，過濾，往濾液2滴三硝基苯酚的飽和水溶液，有黃色沉淀產(chǎn)生。
同時取上述樣品按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載的高效液相色譜法檢測，結(jié)果顯示該樣品中含酮康唑。
例6 待檢樣品編號為HZ080107百草堂去卸王TM洗發(fā)劑。
檢測方法取上述樣品1.5g，加入到4ml的乙酸乙酯中，輕輕振搖1min，靜置3min；吸取上層液體約2ml，注入到1ml的5％的稀鹽酸中，上下顛倒3次使其充分混勻，靜置2min；吸取下層液體約0.8ml，過濾，往濾液滴入3滴三硝基苯酚的飽和水溶液，有黃色沉淀產(chǎn)生。
同時取上述樣品按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版)記載的高效液相色譜法檢測，結(jié)果顯示該樣品中含酮康唑。
權(quán)利要求
1.去頭屑洗發(fā)類化妝品中非法添加酮康唑的快速篩查方法，該方法由以下步驟組成
(1)取待檢樣品，加入到2～3體積倍的乙酸乙酯中，輕輕振搖使其充分混合，靜置至液體分層；
(2)吸取上層液體，加入到1/2體積的濃度為4～6％(v/v)的鹽酸溶液中，搖勻，靜置至液體分層；
(3)吸取下層液體，過濾，往濾液滴入2～3滴三硝基苯酚的飽和水溶液，若出現(xiàn)黃色沉淀，則說明樣品中含有酮康唑，反之則無。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種洗發(fā)類化妝品中非法添加酮康唑的快速篩查方法，該方法首先利用酮康唑既可溶于有機溶劑也可溶于無機酸溶液的特性，采用乙酸乙酯從洗發(fā)劑產(chǎn)品中提取出可能含有酮康唑的部分，再用無機酸溶液萃取使酮康唑溶解在無機酸溶液里進一步將酮康唑與其他干擾物質(zhì)分開；然后根據(jù)酮康唑可與生物堿沉淀劑反應產(chǎn)生沉淀現(xiàn)象的特性，在可能溶有酮康唑的無機酸溶液里滴加三硝基苯酚的飽和水溶液，若有沉淀產(chǎn)生，則說明檢測的樣品中可能存在有酮康唑，反之則無。本發(fā)明方法具有較高的靈敏度和準確性，且操作簡便易行、專屬性強、檢驗結(jié)果可靠，不需專門的儀器，分析成本低，適用于現(xiàn)場化妝品中非法添加的酮康唑快速篩查。
文檔編號G01N30/00GK101762659SQ20101001920
公開日2010年6月30日 申請日期2010年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月5日
發(fā)明者于曉, 黃諾嘉, 黃奕濱, 羅麗娟 申請人:廣東省汕頭市藥品檢驗所