專利名稱：一種柿葉質(zhì)量的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物質(zhì)量控制領(lǐng)域，特別是一種柿葉質(zhì)量的檢測方法。
背景技術(shù)：
柿葉用做藥物早在600多年前的《滇南本草》中就有記載，其良好的止咳喘、肺賬、 內(nèi)出血、以及降血壓的功效使得其在中藥大家庭中擁有重要的位置。在現(xiàn)有技術(shù)中，柿葉經(jīng) 過水提醇沉后，得到水提液再由乙酸乙酯萃取，得到柿葉提取物，再由柿葉提取物加輔料制 成的中藥制劑，是廣州白云山和記黃埔中藥有限公司獨家中藥保護(hù)品種，收載于《中華人民 共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二十冊第294頁。 與本發(fā)明最近似的實現(xiàn)方案，是1990版的《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》(1990版，第70-71 頁，廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳編，廣西科學(xué)技術(shù)出版社出版)中收載的柿葉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn) 主要內(nèi)容包括柿葉性狀、炮制、功能與主治、用法與用量等。其中，在柿葉性狀有如下定 義本品多皺縮或破碎，完整者展平后呈卵狀橢圓形至寬卵形或近圓形，長10cn 15cm，寬 6cm 10cm，先端漸尖或鈍，基部楔形至圓形，全緣，邊緣微反巻，上面灰綠色或黃棕色，較 光滑，下表面顏色稍淺，中脈及側(cè)脈上面凹下或平坦，下面隆起，側(cè)脈每邊5 7條，向上斜 生，將近葉緣網(wǎng)結(jié)，脈上有微柔毛。葉柄長8mm 20mm，質(zhì)脆。氣微、味微苦澀。其中，炮制
方法為除去雜質(zhì)，略洗，切碎，干燥。其中性味為苦、酸、澀、涼。其中，功能與主治為清
肺止咳，涼血止血，活血化瘀，降血壓。用于咳喘，肺氣脹，各種內(nèi)出血，高血壓，腦動脈硬化
癥，冠心病。其中用法與用量為5g 15g，重癥加倍。其中貯藏方法為置干燥處。 現(xiàn)有技術(shù)中主要體現(xiàn)了柿葉在藥物用途時的主要性狀、用法用量、貯藏方式等主
要性能特點，但是只是靠外觀和性味等無法有效地檢測及控制柿葉的質(zhì)量，而且在現(xiàn)有技
術(shù)中對柿葉的質(zhì)量控制沒有一個實用而有效的方法，導(dǎo)致了目前柿葉質(zhì)量的不穩(wěn)定性以及
柿葉在藥用時的規(guī)范性的缺失。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種柿葉質(zhì)量的檢測方法，通過該
檢測方法準(zhǔn)確的確定柿葉待測品中是否含有有效藥物成分山柰素和槲皮素。 為了解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種柿葉質(zhì)量的檢測方法，步驟包括 樣品溶液制備步驟取柿葉待測品粉末，與甲醇混合，所得的第一混合液用超聲波
處理，將所述第一混合液進(jìn)行過濾，得到的濾液進(jìn)行濃縮，濃縮后的第一混合液作為供試品
溶液；取山柰素和槲皮素與甲醇混合，得到的第二混合液作為對照品溶液； 檢測步驟按照薄層色譜法對所述樣品溶液進(jìn)行測定，觀察在供試品色譜中，在與
對照品色譜相同的位置上，是否顯示與對照品相同顏色的斑點，如果是，則確定所述柿葉待
測粉末中含有山柰素和槲皮素。 優(yōu)選的，所述檢測步驟具體為分別吸取所述待測樣品溶液，分別點于同一硅膠G 薄層板上，加入展開劑展開，晾干，噴以2. 5wt% 3. 5wt^的三氯化鋁乙醇溶液，然后加熱至10(TC 11(TC，觀察在硅膠G薄層板上的供試品色譜中，在與對照品色譜相同的位置上， 是否顯示相同顏色的斑點，如果是，則確定所述柿葉待測粉末中含有山柰素和槲皮素。
優(yōu)選的，所述樣品溶液制備步驟還包括 取柿葉對照藥材粉末，與甲醇混合，所得的第三混合液用超聲波處理，將第三混合
液進(jìn)行過濾，得到的濾液進(jìn)行濃縮，濃縮后的第三混合液作為對照藥材溶液； 所述檢測步驟為按照薄層色譜法對所述供試品溶液、對照品溶液、對照藥材溶液
進(jìn)行測定，觀察在供試品色譜中，在與對照品色譜、對照藥材色譜相同的位置上，是否顯示
相同顏色的斑點，如果是則確定所述柿葉待測粉末中含有柿葉，并且所述柿葉含有山柰素
和槲皮素。
優(yōu)選的，所述檢測步驟具體為 分別吸取所述待測樣品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，加入展開劑展開，晾
干，噴以2. 5wt % 3. 5wt %的三氯化鋁乙醇溶液，然后加熱至IO(TC 1 l(TC ，觀察在硅膠G 薄層板上的供試品色譜中，在與對照品色譜、對照藥材色譜相同的位置上，是否顯示相同顏 色的斑點，如果是，則確定所述柿葉待測粉末中含有柿葉，并且所述柿葉含有山柰素和槲皮素。 優(yōu)選的，所述展開劑為甲苯、乙酸乙酯、甲酸的混合液。 優(yōu)選的，所述展開劑中的甲苯、乙酸乙酉旨、甲酸按體積比為4.95 5.05 : 4. 45 4. 55 : 0. 45 0. 55。 優(yōu)選的，所述進(jìn)一步包括使用高效液相色譜法測定所述柿葉待測品中柿葉含量的 步驟 取山柰素和槲皮素與甲醇混合，得到的第四混合液作為高效液相色譜用對照品溶 液； 提供柿葉待測品的高效液相色譜用供試品溶液； 使用高效液相色譜法測定所述柿葉待測品中山柰素和槲皮素的含量。
優(yōu)選的，所述柿葉待測品的高效液相色譜用供試品溶液的步驟具體為
將所述柿葉待測品粉末用甲醇定容，得到第五混合液，過濾； 取過濾后得到的過濾液加入甲醇、鹽酸溶液得到第六混合液，搖勻并加熱回流，放 冷，所述第六混合液轉(zhuǎn)移至量瓶中，過濾取濾液，得到供試品溶液。
優(yōu)選的，所述將所述柿葉待測品粉末用甲醇定容具體為 將所述柿葉待測品粉末與甲醇混合并置于具塞容器中，密封瓶塞，將所述具塞容 器中的混合液稱定重量并經(jīng)過超聲處理，放冷，再次稱定重量，用甲醇補足所述具塞容器中 混合液缺失的重量，搖勻后過濾得到所述第五混合液。 優(yōu)選的，在所述使用高效液相色譜法測定所述柿葉待測品中柿葉的含量中，以 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0. 2wt^磷酸溶液為流動相。
優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的檢測波長為360nm。 優(yōu)選的，所述的高效液相色譜法的理論板數(shù)按槲皮素峰計算不低于2500。 本發(fā)明提供柿葉質(zhì)量的檢測方法，在該檢測方法中，將柿葉待測品用甲醇和超聲
波進(jìn)行處理作為供試品溶液，并將山柰素和槲皮素與甲醇混合作為對照品溶液，通過提供
所述的供試品溶液和對照品溶液，用薄層色譜法進(jìn)行檢測時，可以準(zhǔn)確的確定所述柿葉中是否含有有效藥物成分如山柰素和槲皮素。與現(xiàn)有技術(shù)中的只從性狀上來確定柿葉質(zhì)量的
方法相比，本發(fā)明提供的檢測方法可以準(zhǔn)確的確定柿葉待測品中的藥物有效成分。 在一種優(yōu)選的方式中，本發(fā)明進(jìn)一步提供將對照藥材與甲醇混合作為對照藥材溶
液，然后將供試品溶液、對照品溶液、對照藥材溶液同時進(jìn)行薄層色譜鑒定，這樣，可以確定
柿葉待測品是否與標(biāo)準(zhǔn)對照藥材溶液一致，并且準(zhǔn)確的確定柿葉待測品中的藥物有效成分。 在一種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明提供的檢測方法進(jìn)一步包括使用高效色譜測定 柿葉待測品的步驟，這樣可以進(jìn)一步確定所述柿葉待測品中的藥品有效含量，即對山柰素 和槲皮素的含量進(jìn)行定量測定。


圖1為本發(fā)明實施例公開的柿葉薄層色譜圖；。 圖2為本發(fā)明實施例公開的對照品溶液的HPLC圖； 圖3為本發(fā)明實施例公開的供試品溶液的HPLC圖； 圖4為本發(fā)明實施例公開的柿葉粉末非腺毛特征圖； 圖5為本發(fā)明實施例公開的柿葉粉末氣孔特征圖； 圖6為本發(fā)明實施例公開的柿葉粉末導(dǎo)管特征圖； 圖7為本發(fā)明實施例公開的柿葉粉末腺毛特征圖； 圖8為本發(fā)明實施例公開的柿葉粉末方晶特征圖； 圖9為本發(fā)明實施例公開的柿葉粉末柵欄組織特征圖。
具體實施例方式
為了進(jìn)一步了解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明優(yōu)選實施方案進(jìn)行描述，但是 應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為進(jìn)一步說明本發(fā)明的特征和優(yōu)點，而不是對本發(fā)明權(quán)利要求的 限制。 首先對專用名詞進(jìn)行一下解釋 對照藥材指通過權(quán)威機構(gòu)鑒定后，能用以鑒別其他藥材真?zhèn)蔚乃幉摹?
附錄指2005版中國藥典的附錄。 總灰分指藥材在一定條件下經(jīng)灼燒后，剩下的殘渣重量占藥材總重的百分?jǐn)?shù)。
含葉量在葉類的藥材中，葉子的重量占整個藥材重量的百分?jǐn)?shù)。
水分藥材中水的重量占藥材總重量的百分?jǐn)?shù)。 高效液相色譜法(HPLC，High Performance Liquid Chromatography)采用高效液
相色譜儀對樣品的化學(xué)成分進(jìn)行定性、定量分析的一種技術(shù)方法。 薄層色譜天然藥物化學(xué)及其他相關(guān)專業(yè)常用的一種定性鑒別、分析手段。 實施例1 由于柿葉中主要含黃酮類化合物，也是柿葉中的主要有效成分，而柿葉黃酮又以 槲皮素和山柰素的苷元及其苷類為主。因此，槲皮素和山柰素可以采用黃酮常規(guī)的鑒別方 法。
具體步驟為
6
取柿葉待側(cè)品粉末lg與甲醇25ml充分混合，混合液經(jīng)超聲處理30分鐘后濾過， 濾液濃縮至lml，作為供試品溶液。 另取柿葉對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。 再取山柰素、槲皮素對照品，與甲醇混合制成每1ml各含0. lmg的混合溶液，所述
混合液作為對照品溶液。 照薄層色譜法試驗 吸取實施例1得到的供試品溶液三個編號為①、②、③；對照藥材溶液各2ul編號 為④，對照品溶液lul編號為⑤，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸按 重量比為5 : 4.5 : 0.5混合作為展開劑，在所述硅膠G薄層板上展開，取出后晾干，在晾干 后的硅膠G薄層板上噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，在105t:加熱，置紫外光燈(365nm)下檢 視。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同紫色的熒光斑點，如 圖1所示，其中的①、②、③是供試品色譜，其中的④為對照藥材色譜，其中的⑤為對照品色 譜，結(jié)果表明，在與④和⑤相同的位置上，供試品色譜均顯示了相同顏色的斑點，可以確定， 該供試品為柿葉，并且該柿葉中的有效藥物為山柰素和槲皮素。
實施例2 黃酮類化合物是柿葉中的主要有效成分，而柿葉黃酮又以槲皮素和山柰素的苷元 及其苷類為主。柿葉水解后的槲皮素和山柰素的苷元總量能基本反映柿葉中的總黃酮含 量，而總黃酮含量就可以反映柿葉待測品中有效成分一一柿葉的含量，所以在本發(fā)明中還 包括了使用高效液相色譜法測定柿葉待測品中柿葉含量的測定方法。具體步驟如下
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0.2%磷酸混合溶液(50 : 50)為流 動相，檢測波長為360nm，理論板數(shù)按槲皮素峰計算應(yīng)均不低于2500。 分別取山柰素和槲皮素，精密稱定，與甲醇混合，配置成每lml含山柰素和槲皮素 各50ii g的混合溶液，得到的混合液作為高效液相色譜用對照品溶液。
提供柿葉待測品的高效液相色譜用供試品溶液。 取柿葉待測品粉末0. 5g，精密稱定后之具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，密封 后稱定重量，經(jīng)功率250W、頻率40kHz的超聲處理30分鐘，然后室溫放置冷卻，再次稱定重 量，如有不足使用甲醇補足缺失的重量。 將定量的混合液搖勻，過濾后，精密量取續(xù)濾液10ml至錐形瓶，加入甲醇10ml、體 積百分?jǐn)?shù)為25%的鹽酸溶液5ml后，搖勻加熱回流30分鐘，室溫冷卻放置，轉(zhuǎn)移至50ml的 容量瓶中，用甲醇將所有配置溶質(zhì)洗滌后洗液轉(zhuǎn)移至所述容量瓶，加入甲醇至刻度，密封搖 勻過濾，取續(xù)濾液，記得到柿葉待測品的高效液相色譜用供試品溶液。 高效液相色譜測定方法為分別精密吸取實施例5中得到的供試品溶液和對照品 溶液各10yl，侏儒液相色譜儀，測定。所說得到的數(shù)據(jù)按干燥品計算，含黃酮以以槲皮素 (C15H1Q07)計不得少于O. 11%，以山柰素(C15H1Q06)計不得少于O. 12%。測試結(jié)果見圖2、圖 3。 實施例3 本發(fā)明除了對柿葉待測品進(jìn)行薄層色譜鑒別和高效液相色譜測定柿葉待測品中 柿葉的含量兩種測試方法以外，還可以包括柿葉粉末的鑒別。 柿葉粉末的特征為粉末棕黃色。表皮細(xì)胞為多邊形或不規(guī)則形。具有許多非腺
7毛，為單細(xì)胞，彎曲呈鉤狀或S型。氣孔為不定式氣孔。導(dǎo)管為螺紋或梯紋導(dǎo)管，有的導(dǎo)管 內(nèi)含棕色塊狀物。腺毛為多細(xì)胞，頭部呈棕黃色。葉肉中草酸鈣方晶大而多，有時含晶細(xì)胞 連接，方晶排列成行。有許多柵欄組織。 將柿葉待測品研磨，加入甲醇充分混合，混合液中加入展開劑展開，然后點在玻片 上制成試片，通過生物顯微鏡觀測得到的結(jié)果如圖4 圖9所示。
實施例4 本發(fā)明除了對柿葉待測品進(jìn)行薄層色譜鑒別和高效液相色譜測定柿葉待測品中 柿葉的含量兩種測試方法以外，還可以包括柿葉水分的測定。 具體步驟取柿葉粉末2 5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過 5mm，精密稱定(干燥前柿葉重量)，打開瓶蓋在100 105。C干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置 干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重(干燥后柿葉重 量)，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。按公式(干燥前柿葉重量_干燥后柿葉重 量)/干燥前柿葉重量X100X計算水分的含量。 取實測樣品10批，結(jié)果為7. lwt% 9. 2wt^，平均值為7. 9wt%。
按照水分測定法(附錄IX H第一法)測定，不得超過11. Owt% 。
實施例5 本發(fā)明除了對柿葉待測品進(jìn)行薄層色譜鑒別和高效液相色譜測定柿葉待測品中
柿葉的含量兩種測試方法以外，還可以包括柿葉含葉量的測定。 步驟具體為 隨機稱取總重為2g的柿葉，去除雜質(zhì)，棄去葉柄，稱定剩下的柿葉重量(葉重)，按 公式含葉量=(葉重/總重)X100X計算含葉量。 實測樣品10批，結(jié)果為94. 73wt% 97. 28wt^，平均值96. 19wt%。結(jié)果表明，各 批柿葉的含葉量相對穩(wěn)定，以含葉量最低的08批含葉量的95wt^ (94. 73wt% X95wt% = 90. 0)為保證含量，確定本品含葉量應(yīng)該大于90. Owt%。
實施例6 發(fā)明除了對柿葉待測品進(jìn)行薄層色譜鑒別和高效液相色譜測定柿葉待測品中柿 葉的含量兩種測試方法以外，還可以包括柿葉總灰分的測定 按照總灰分測定法(附錄IX K)測定。具體步驟測定用的柿葉粉碎，使能過二號 篩，混合均勻，取柿葉粉末2 3g，置灼燒至恒重的坩堝中，稱定重量(準(zhǔn)確至O. Olg)，緩緩 加熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500 600°C ，使完全灰化并至恒重。 根據(jù)殘渣重量，按公式總灰分(％)=(殘渣重量/粉末重量)X100X計算柿葉粉末中總 灰分的含量(％)。 實測樣品10批，結(jié)果為4. 8wt% 7. 9wt^，平均值為7. Owt%。根據(jù)實測結(jié)果確 定樣品總灰分應(yīng)少于10. Owt%。
實施例7 發(fā)明除了對柿葉待測品進(jìn)行薄層色譜鑒別和高效液相色譜測定柿葉待測品中柿 葉的含量兩種測試方法以外，還可以包括柿葉藥材的浸出物的檢測。 按照醇溶性浸出物曾頂法中的熱浸法(附錄X A)測定，用70wt^的乙醇做溶齊IJ。 具體步驟取柿葉粉末約2 4g，精密稱定，置100 250ml的錐形瓶中，精密加70wt^的乙醇50 100ml，密塞，稱定重量(柿葉重量)，靜置1小時候，連接回流冷凝管，加熱至沸 騰，并保持微沸1小時。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用70wt^的乙醇補足減失 的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，再水浴上 蒸干后，于105t:干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量(浸出物重量)。 按公式(浸出物重量/柿葉重量)X100X計算柿葉中70wt^的乙醇浸出物的含量。
實測樣品10批，結(jié)果為21.7wt^ 32. 4wt^，平均值為28. 8wt%。本品醇溶性浸 出物應(yīng)超過20. Owt%。
實施例8 將實施例7中的70wt^乙醇換為90wt^的乙醇按照醇溶性浸出物測定法中的熱 浸法(附錄X A)測定，實測樣品10批，結(jié)果表明，90wt^乙醇為溶劑的浸出物較低。
以上對本發(fā)明提供柿葉質(zhì)量的檢測方法的進(jìn)行了詳細(xì)的介紹。本文中應(yīng)用了具體 個例對本發(fā)明的原理及實施方式進(jìn)行了闡述，以上實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明 的方法及其核心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原 理的前提下，還可以對本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要 求的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
一種柿葉質(zhì)量的檢測方法，其特征在于，步驟包括樣品溶液制備步驟取柿葉待測品粉末，與甲醇混合，所得的第一混合液用超聲波處理，將所述第一混合液進(jìn)行過濾，得到的濾液進(jìn)行濃縮，濃縮后的第一混合液作為供試品溶液；取山柰素和槲皮素與甲醇混合，得到的第二混合液作為對照品溶液；檢測步驟按照薄層色譜法對所述樣品溶液進(jìn)行測定，觀察在供試品色譜中，在與對照品色譜相同的位置上，是否顯示與對照品相同顏色的斑點，如果是，則確定所述柿葉待測粉末中含有山柰素和槲皮素。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測步驟具體為分別吸取所述 樣品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，加入展開劑展開，晾干，噴以2. 5wt% 3. 5wt% 的三氯化鋁乙醇溶液，然后加熱至IO(TC 110°C ，觀察在硅膠G薄層板上的供試品色譜中， 在與對照品色譜相同的位置上，是否顯示相同顏色的斑點，如果是，則確定所述柿葉待測粉 末中含有山柰素和槲皮素。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述樣品溶液制備步驟還包括 取柿葉對照藥材粉末，與甲醇混合，所得的第三混合液用超聲波處理，將第三混合液進(jìn)行過濾，得到的濾液進(jìn)行濃縮，濃縮后的第三混合液作為對照藥材溶液；所述檢測步驟為按照薄層色譜法對所述供試品溶液、對照品溶液、對照藥材溶液進(jìn)行 測定，觀察在供試品色譜中，在與對照品色譜、對照藥材色譜相同的位置上，是否顯示相同 顏色的斑點，如果是則確定所述柿葉待測粉末中含有柿葉，并且所述柿葉含有山柰素和槲 皮素。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測步驟具體為分別吸取所述樣品溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，加入展開劑展開，晾干，噴以 2. 5wt% 3. 5wt^的三氯化鋁乙醇溶液，然后加熱至100°C ll(TC ，觀察在硅膠G薄層板 上的供試品色譜中，在與對照品色譜、對照藥材色譜相同的位置上，是否顯示相同顏色的斑 點，如果是，則確定所述柿葉待測粉末中含有柿葉，并且所述柿葉含有山柰素和槲皮素。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的檢測方法，其特征在于，所述展開劑為甲苯、乙酸乙酯、甲 酸的混合液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測方法，其特征在于，所述展開劑中的甲苯、乙酸乙酯、甲 酸按體積比為4. 95 5. 05 : 4. 45 4. 55 : 0. 45 0. 55。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的檢測方法，其特征在于，進(jìn)一步包括使用高效液相色譜法 測定所述柿葉待測品中柿葉含量的步驟取山柰素和槲皮素與甲醇混合，得到的第四混合液作為高效液相色譜用對照品溶液； 提供柿葉待測品的高效液相色譜用供試品溶液；使用高效液相色譜法測定所述柿葉待測品中山柰素和槲皮素的含量。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述提供柿葉待測品的高效液相色 譜用供試品溶液的步驟具體為將所述柿葉待測品粉末用甲醇定容，得到第五混合液，過濾；取過濾后得到的過濾液加入甲醇、鹽酸溶液得到第六混合液，搖勻并加熱回流，放冷， 所述第六混合液轉(zhuǎn)移至量瓶中，過濾取濾液，得到供試品溶液。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測方法，其特征在于，所述將所述柿葉待測品粉末用甲醇定容具體為將所述柿葉待測品粉末與甲醇混合并置于具塞容器中，密封瓶塞，將所述具塞容器中 的混合液稱定重量并經(jīng)過超聲處理，放冷，再次稱定重量，用甲醇補足所述具塞容器中混合 液缺失的重量，搖勻后過濾得到所述第五混合液。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測方法，其特征在于，在所述使用高效液相色譜法測定所述柿葉待測品中柿葉的含量中，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0. 2wt^磷酸 溶液為流動相。
11. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測波長為 360歷。
12. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述的高效液相色譜法的理論板數(shù) 按槲皮素峰計算不低于2500。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種柿葉質(zhì)量的檢測方法，其特征在于，步驟包括樣品溶液制備步驟取柿葉待測品粉末，與甲醇混合，所得的第一混合液用超聲波處理，將所述第一混合液進(jìn)行過濾，得到的濾液進(jìn)行濃縮，濃縮后的第一混合液作為供試品溶液；取山柰素和槲皮素與甲醇混合，得到的第二混合液作為對照品溶液；檢測步驟按照薄層色譜法對所述樣品溶液進(jìn)行測定，觀察在供試品色譜中，在與對照品色譜相同的位置上，是否顯示與對照品相同顏色的斑點，如果是，則確定所述柿葉待測粉末中含有山柰素和槲皮素。與現(xiàn)有技術(shù)中的只從性狀上來確定柿葉質(zhì)量的方法相比，本發(fā)明提供的檢測方法可以準(zhǔn)確的確定柿葉待測品中的藥物有效成分。
文檔編號G01N30/02GK101700267SQ20091022569
公開日2010年5月5日 申請日期2009年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月27日
發(fā)明者利幼, 尹仁杰, 張小雪, 李楚源, 林挺, 梁敬儀, 王德勤, 羅杰, 陳薇 申請人:廣州白云山和記黃埔中藥有限公司