專利名稱：：調(diào)味品中防腐劑含量的快速測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及調(diào)味品中成分組成的測定方法，尤其涉及調(diào)味品中防腐劑含量的快速測定方法。
背景技術(shù)：
：目前通用的才全測防腐劑的方法是《GB/T5009.29-2003食品中山梨酸、苯曱酸的測定》和《GB/T5009.31-2003食品中對羥基苯曱酸酯類的測定》。這兩種檢測方法的原理相同，皆為試樣酸化后，用有機(jī)溶劑提取、濃縮，再用氣相色語儀進(jìn)行分離測定，采用外標(biāo)法定量分析。該方法筒單、穩(wěn)定，已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用在防腐劑的檢測當(dāng)中。但是，采用這兩種方法，平均每個(gè)樣品耗費(fèi)的檢測時(shí)間約為90分鐘，而且不能實(shí)現(xiàn)多種防腐劑同時(shí)檢測，因此，總體檢測效率較低。對于品種多、產(chǎn)量大的調(diào)味品生產(chǎn)企業(yè)來說，如此低的檢測效率導(dǎo)致產(chǎn)品防腐劑;f全測工作量大、任務(wù)重，耗費(fèi)大量的檢測資源，而且檢驗(yàn)結(jié)果的嚴(yán)重滯后不利于生產(chǎn)過程的監(jiān)控。因此，如何對調(diào)味品中防腐劑含量進(jìn)行快速測定，成為一個(gè)重要的研究課題。目前，調(diào)味品中多種防腐劑快速測定方法的研究較少，只停留于醬油快速測定的研究，且均不適用于實(shí)際生產(chǎn)過程的防腐劑監(jiān)控中?，F(xiàn)有的研究主要有三種方法第一種方法為將樣品稀釋酸化后置于恒溫水浴中進(jìn)行頂空固相微萃取，吸附20min后進(jìn)氣相色譜分析，此方法的吸附時(shí)間長，不能實(shí)現(xiàn)快速測定，且檢測成本較高，不適用于企業(yè)生產(chǎn)控制使用；第二種方法為將樣品酸化后加入乙醇超聲提取30min后離心15min,然后進(jìn)樣分析，但前處理耗費(fèi)的時(shí)間過長，而且由于乙醇與醬油是互溶的，離心后的乙醇提取液可能含水，從而使色譜柱遭到損壞；第三種方法為將樣品酸化后加入氯化鈉、10ml的石油醚與乙醚混合溶液以及0.2ml無水乙醇，置旋渦上混合lmin后，取上層溶液，用飽和氯化鈉溶液洗滌后進(jìn)入氣相色譜分析，這種方法不能保證防腐劑被100%提取。由此可見，目前研究的多種方法均未能實(shí)現(xiàn)快速、廉價(jià)、準(zhǔn)確測定的目標(biāo)，而且均不適合蠔油和醬中苯曱酸、山梨酸、對羥基苯曱酸酯類的快速測定。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于，提供一種快速測定調(diào)味品中防腐劑含量的測定方法，解決了前處理時(shí)間長、提取率低、引入大分子干擾等問題，實(shí)現(xiàn)醬油、食醋、蠔油、醬等多種調(diào)味品中防腐劑的快速檢測。本發(fā)明的基本構(gòu)思是采用氣相色譜法進(jìn)行測定，以內(nèi)標(biāo)法定量，內(nèi)標(biāo)法在氣相色譜定量分析中是一種分析準(zhǔn)確的方法。使用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，在樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它可被色鐠柱所分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾，只要測定內(nèi)標(biāo)物和4寺測組分的峰面積與相對響應(yīng)值，即可求出待測組分在樣品中的含量。為了解決以上的技術(shù)問題，本發(fā)明提供以下的技術(shù)方案一種調(diào)味品中防腐劑含量的快速測定方法，以氣相色i普法測定，內(nèi)標(biāo)法定量，包括如下步驟a)稱取調(diào)味品樣品；b)對樣品進(jìn)行預(yù)處理，獲得樣品溶液；對于不同體態(tài)的調(diào)味品，要釆用不同的處理方式，以得到較稀的樣品溶液；c)在樣品溶液中加入內(nèi)標(biāo)物溶液及提取劑；d)搖勻，取上層清液；e)將上層清液進(jìn)行色譜分析，獲得色譜分析數(shù)據(jù)；f)將所述色譜分析數(shù)據(jù)與預(yù)定防腐劑標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)比對，得到調(diào)味品中防腐劑的含量。在調(diào)味品中，添加的防腐劑一般為苯曱酸、山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯，本步驟中所述的預(yù)定防腐劑標(biāo)準(zhǔn)凝:據(jù)，可采用以下方式獲得將苯曱酸、山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯分別作為標(biāo)準(zhǔn)物配置一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物溶液，再分別加入已知濃度的內(nèi)標(biāo)物溶液，分別進(jìn)樣，測出內(nèi)標(biāo)物峰面積及標(biāo)準(zhǔn)物峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積比及濃度比，制作待測組分標(biāo)準(zhǔn)曲線，一定條件下，標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積比及濃度比成正比。本步驟中，可將通過步驟e)獲得的色譜分析數(shù)據(jù)一防腐劑與內(nèi)標(biāo)物峰面積比與前述相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對照，即可查出樣品中防腐劑的濃度。其中，所述調(diào)味品為液體類調(diào)味品，所述預(yù)處理步驟為，對樣品進(jìn)行酸化處理。對于生抽醬油、老抽醬油、陳醋、米醋、調(diào)味汁等液體類，體態(tài)較稀的調(diào)味品，預(yù)處理只需進(jìn)行酸化即可。其中，所述調(diào)味品為蠔油類調(diào)味品，所述預(yù)處理步驟為，先在樣品中加入淀粉酶和/或糖化酶進(jìn)行酶解，再進(jìn)行酸化處理。對于蠔油類淀粉含量高、體態(tài)較粘稠的調(diào)味品，預(yù)處理過程中，要先加淀粉酶和/或糖化酶進(jìn)行酶解，使其稀化，再進(jìn)行酸化處理。其中，所述調(diào)味品為不含油脂醬類調(diào)味品，所述預(yù)處理步驟為，先在樣品中加入水和/或糖化酶，再進(jìn)行酸化處理。其中，對于蠔油類、不含油脂醬類的調(diào)味品，步驟d)中，搖勻步驟之后，取上層液之前，還進(jìn)行離心處理。其中，步驟c)中，所述內(nèi)標(biāo)物溶液由C7-C11有機(jī)酸中的任一種作為內(nèi)標(biāo)物，以甲醇或乙醇作為溶劑配成。其中，步驟c)中，所述提取劑為乙醚和環(huán)己烷的混合物，所述乙醚與環(huán)己烷的混合體積比為1:41:1。其中，步驟c)中，所述提取劑也可為乙醚和正己烷混合物，所述乙醚和正己烷的混合體積比為1:4~1:1。其中，上述方法中，色鐠分析過程的升溫模式為開始溫度8(TC~ll(TC，保持15min30min后，進(jìn)行一次升溫，升溫至180°C~220°C，再進(jìn)行二次升溫，升溫至250°C~300°C，保持0.5min~3min;所述一次升溫的升溫速度小于所述二次升溫的升溫速度。其中，所述一次升溫的升溫速度為15°C/min~30°C/min,所述二次升溫的升溫速度為40°C/min~60°C/min對于整個(gè)測定方法，簡而言之，首先稱取J羊品，對;陂測樣品進(jìn)行處理，提取含防腐劑及內(nèi)標(biāo)物的溶液，對其進(jìn)行色譜分析，由測得的各防腐劑的色譜數(shù)據(jù)，結(jié)合預(yù)先制作好的相應(yīng)的防腐劑標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)，即可計(jì)算出調(diào)味品中各防腐劑的含量，整個(gè)測定過程所需時(shí)間短，測定快速、準(zhǔn)確，且能同時(shí)測出多種防腐劑的含量，效率高。以上對本發(fā)明的各個(gè)步驟中的細(xì)節(jié)進(jìn)行了說明，其中也敘述了一些改進(jìn)和優(yōu)選的方案。本發(fā)明所述的調(diào)味品中防腐劑含量的快速測定方法，可以準(zhǔn)確、迅速地測定調(diào)味品中的防腐劑含量，且一次即可測出調(diào)味品中多種防腐劑的含量，因此效率高、結(jié)果準(zhǔn)確。圖1為防腐劑-山梨酸以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行色譜分析所得標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。圖2為防腐劑-苯曱酸以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行色譜分析所得標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。圖3為防腐劑-對羥基苯甲酸丙酯以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行色譜分析所得標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。圖4為本發(fā)明測定方法第一實(shí)施例的測定流程圖。圖5為本發(fā)明測定方法第二實(shí)施例的測定流程圖。圖6為本發(fā)明測定方法第三實(shí)施例的測定流程圖。具體實(shí)施例方式為能進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合具體的實(shí)施方式對上述的技術(shù)方案做進(jìn)一步的闡述和說明。本發(fā)明的測定方法中，所釆用的色譜分析方法為氣相色譜法，氣相色譜條件如下用帶有氫火焰離子化4全測器的氣相色譜儀進(jìn)行檢測，以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。儀器條件是氣相色譜儀的載氣為高純氮?dú)猓菢O性毛細(xì)管色譜柱，分流比為1:10，載氣流量為1.17ml/min，進(jìn)樣口溫度為260。C,氣相色譜儀帶有的氫火焰離子化^r測器的4全測溫度為300°C，氫氣流量為40ml/min,空氣流量為400ml/min。本發(fā)明的測定方法中，在調(diào)味品樣品進(jìn)行防腐劑含量測定前作如下準(zhǔn)備1、配制標(biāo)準(zhǔn)物溶液分別準(zhǔn)確稱取防腐劑(以下稱標(biāo)準(zhǔn)物)苯曱酸、山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯各0.1000g，用乙醇定容至100.00ml,制成標(biāo)準(zhǔn)物溶液。2、配制內(nèi)標(biāo)物溶液準(zhǔn)確稱取正辛酸0.1000g作為內(nèi)標(biāo)物，用乙醇定容至100.00ml,獲得配制的內(nèi)標(biāo)物溶液。也可選用其他C7~Cl1有機(jī)酸中的任一種作為內(nèi)標(biāo)物。3、配制提取劑由10毫升乙醚加40毫升環(huán)己烷獲提取劑1;由15毫升乙醚加35毫升環(huán)己烷獲提取劑2;由20毫升乙醚加30毫升環(huán)己烷獲提取劑3;由25毫升乙醚加25毫升環(huán)己烷獲提取劑4;由10毫升乙醚加40毫升正己烷獲提取劑5;由15毫升乙醚加35毫升正己烷獲提:取劑6;由20毫升乙醚加30毫升正己烷獲提取劑7;由25毫升乙醚加25毫升正己烷獲提取劑8。4、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作先分別以苯曱酸、山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯等常用防腐劑作為標(biāo)準(zhǔn)物配置一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物溶液，再分別加入已知濃度的內(nèi)標(biāo)物溶液，分別進(jìn)樣，測出內(nèi)標(biāo)物峰面積及標(biāo)準(zhǔn)物峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積比及濃度比，制作苯曱酸、山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯標(biāo)準(zhǔn)曲線，一定條件下，標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積比及濃度比成正比。測定樣品中待測組分的含量時(shí)，以相同濃度的內(nèi)標(biāo)物加入到樣品中，進(jìn)樣分析，將得到的待測組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積比與前述標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對照，即可查出樣品中待測組分的濃度。具體制作過程如下分別準(zhǔn)確吸取制備好的標(biāo)準(zhǔn)物溶液2.00ml、1.00ml、0.50ml、0.10ml、0.01ml，分別置于10ml容量瓶中，然后各加入內(nèi)標(biāo)物溶液1.00ml，再用乙醇定容至10ml，分別進(jìn)樣lpl，可測得不同濃度標(biāo)準(zhǔn)物及內(nèi)標(biāo)物峰面積響應(yīng)值，由氣相色譜測得各標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物的濃度比及色譜峰面積比見表1。表1各標(biāo)準(zhǔn)物濃度與內(nèi)標(biāo)物的濃度比及色譜峰面積比<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>根據(jù)表1，以各標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值作為X軸，以標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物的濃度比值為y軸，作出山梨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖1;作出苯曱酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖2;作出對羥基苯曱酸丙酯標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖3。由圖1、圖2、圖3可以看出，各標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比與濃度比成正比。實(shí)施例11)準(zhǔn)確稱取生抽醬油樣品、老抽醬油樣品、陳醋樣品、米醋樣品、調(diào)味汁樣品各1.000g,分別置于15ml離心管內(nèi)；2)向各個(gè)離心管內(nèi)依次加入5滴鹽酸、0.50ml內(nèi)標(biāo)物溶液、5ml提取劑5，搖勻，吸取各上層清液進(jìn)樣；3)按照前述儀器條件，將儀器柱溫箱溫度升至IO(TC的初始溫度，儀器穩(wěn)定后，分別將各上層清液進(jìn)樣分析。儀器進(jìn)行程序升溫，即開始溫度IO(TC，保持0.5min,以20°C/min升至220°C，再以60°C/min升至250°C，保持lmin，總共運(yùn)行8.0min。4)將得到的各待測組分峰面積與各內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值與圖1、圖2、圖3的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對照，計(jì)算出生抽醬油樣品中，苯曱酸含量為0.49g/kg，山梨酸、對羥基苯曱酸均未檢出；老抽醬油樣品中，苯曱酸含量為0.69g/kg,山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯均未4企出；陳醋樣品中，苯曱酸含量為0.71g/kg，山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯均未檢出；米醋樣品中，苯曱酸、山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯均未檢出；調(diào)味汁樣品中，苯曱酸含量為0.45g/kg,山梨酸、對羥基苯曱酸丙酯均未檢出。實(shí)施例21)準(zhǔn)確稱取蠔油1.000g,置于15ml離心管內(nèi)，加入O.lml淀粉酶，震蕩片刻；2)待樣品變稀后，依次加入5滴鹽酸、0.50ml內(nèi)標(biāo)物溶液、5.00ml提取劑1，搖勻，離心，吸取上層清液進(jìn)樣。3)按照前述的儀器條件，將儀器柱溫箱溫度升至110的初始溫度，儀器穩(wěn)定后，將上層清液進(jìn)樣分析。儀器進(jìn)行程序升溫，即開始溫度110。C,保持lmin,以15。C/min升至180°C，再以50°C/min升至280°C,保持lmin,總共運(yùn)行8.67min。4)將得到的各待測組分峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值與圖1、圖2、圖3的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比，計(jì)算出蠔油中，苯曱酸含量為0.62g/kg，對羥基笨曱酸丙酯含量為0.13g/kg,山梨酸未檢出。實(shí)施例31)準(zhǔn)確稱取不含油脂的醬1.000g，置于15ml離心管內(nèi)，加入0.5ml蒸餾水，振蕩片刻；2)依次加入5滴鹽酸、0.50ml內(nèi)標(biāo)溶液、5ml提取劑7，搖勻，離心，吸取上層清液進(jìn)樣。3)按照前述的儀器條件，將儀器柱溫箱溫度升至90的初始溫度，儀器穩(wěn)定后，將上層清液進(jìn)樣分析。儀器進(jìn)行程序升溫，即開始溫度90。C，保持lmin,以25°C/min升至220°C，再以40°C/min升至300°C，保持lmin,總共運(yùn)行9.2min。4)將得到的各待測組分峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值與圖1、圖2、圖3的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比，計(jì)算出該醬中山梨酸含量為0.38g/kg,苯曱酸和對羥基苯曱酸丙酯均未檢出。從以上實(shí)施例可以看出，利用本發(fā)明方法對樣品進(jìn)行防腐劑含量測定，整個(gè)測量過程，檢測時(shí)間由國標(biāo)法的90分鐘大大縮短至15分鐘，且一次即可測定出調(diào)味品樣品中多種防腐劑的含量，大大提高了檢測效率，有利于生產(chǎn)監(jiān)控以及貨物周轉(zhuǎn)速度；檢測成本只有國標(biāo)法的1/3左右，節(jié)省了企業(yè)的檢驗(yàn)成本，有利于防腐劑檢測的普及；片企測穩(wěn)定，即相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD控制在3%以下，準(zhǔn)確度達(dá)到90%以上。以上對本發(fā)明所提供的技術(shù)方案進(jìn)行了詳細(xì)介紹。本說明書中應(yīng)用了具體實(shí)施例對本發(fā)明的原理及實(shí)施方式進(jìn)行了闡述，對于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員，依據(jù)本發(fā)明的思想在具體實(shí)施方式及應(yīng)用范圍上可能在實(shí)施過程中會有改變之處。因此，本說明書記載的內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。權(quán)利要求1、一種調(diào)味品中防腐劑含量的快速測定方法，以氣相色譜法測定，內(nèi)標(biāo)法定量，其特征在于，包括如下步驟a)稱取調(diào)味品樣品；b)對樣品進(jìn)行預(yù)處理，獲得樣品溶液；c)在樣品溶液中依次加入內(nèi)標(biāo)物溶液及提取劑；d)搖勻，取上層清液；e)將上層清液進(jìn)行色譜分析，獲得色譜分析數(shù)據(jù)；f)將所述色譜分析數(shù)據(jù)與預(yù)定防腐劑標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)比對，得到調(diào)味品中防腐劑的含量。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述調(diào)味品為液體類調(diào)味品，所述預(yù)處理步驟為，對樣品進(jìn)行酸化處理。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述調(diào)味品為蠔油類調(diào)味品，所述預(yù)處理步驟為，在樣品中加入淀粉酶和/或糖化酶進(jìn)行酶解，再進(jìn)行酸化處理。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述調(diào)味品為不含油脂醬類調(diào)味品，所述預(yù)處理步驟為，在樣品中加入水和/或糖化酶，再進(jìn)行酸化處理。5、根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定方法，其特征在于，步驟d)中，搖勻步驟之后，取上層清液之前，還進(jìn)行離心處理。6、根據(jù)權(quán)利要求4所述的測定方法，其特征在于，步驟d)中，搖勻步驟之后，取上層清液之前，還進(jìn)行離心處理。7、根據(jù)權(quán)利要求l-6任一項(xiàng)所述的測定方法，其特征在于，步驟c)中，所述內(nèi)標(biāo)物溶液由C7-C11有機(jī)酸中的任一種作為內(nèi)標(biāo)物，以曱醇或乙醇作為溶劑配成。8、根據(jù)權(quán)利要求l-6任一項(xiàng)所述的測定方法，其特征在于，步驟c)中，所述提取劑為乙醚和環(huán)己烷的混合物，所述乙醚與環(huán)己烷的混合體積比為1:4~1:1。9、根據(jù)權(quán)利要求l-6任一項(xiàng)所述的測定方法，其特征在于，步驟c)中，所述提取劑為乙醚和正己烷混合物，所述乙醚和正己烷的混合體積比為1:4~1:1。10、根據(jù)權(quán)利要求l-6任一項(xiàng)所述的測定方法，其特征在于，色語分析過程的升溫模式為開始溫度80°C~ll(TC,保持0.5min~1min后，進(jìn)行一次升溫，升溫至180°C~220°C，再進(jìn)行二次升溫，升溫至250°C~300°C，保持0.5min3min;所述一次升溫的升溫速度小于所述二次升溫的升溫速度。11、根據(jù)權(quán)利要求10所述的測定方法，其特征在于，所述一次升溫的升溫速度為15°C/min~30°C/min，所述二次升溫的升溫速度為40°C/min~60。C/min。全文摘要本發(fā)明公開一種調(diào)味品中防腐劑含量的快速測定方法，包括如下步驟a)稱取調(diào)味品樣品；b)對樣品進(jìn)行預(yù)處理，獲得樣品溶液；c)在樣品溶液中依次加入內(nèi)標(biāo)物溶液及提取劑；d)搖勻，取上層清液；e)將上層清液進(jìn)行色譜分析，獲得色譜分析數(shù)據(jù)；f)將所述色譜分析數(shù)據(jù)與預(yù)定防腐劑標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)比對，得到調(diào)味品中防腐劑的含量。本發(fā)明所述的調(diào)味品中防腐劑含量的快速測定方法，可以準(zhǔn)確、迅速地測定調(diào)味品中的防腐劑含量，且一次即可測出調(diào)味品中多種防腐劑的含量，因此效率高、結(jié)果準(zhǔn)確。文檔編號G01N30/30GK101526509SQ20091013625公開日2009年9月9日申請日期2009年5月4日優(yōu)先權(quán)日2009年5月4日發(fā)明者俊吳,譚麗賢,黃文彪申請人:佛山市海天調(diào)味食品有限公司;佛山市海天(高明)調(diào)味食品有限公司