專利名稱：一種化妝品中甲硝唑的快速篩查方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及甲硝唑的檢測方法，具體涉及一種化妝品中甲硝唑的快速篩查 方法。
背景技術(shù)：
甲硝唑(英文名稱為Metronidazole, MNZ)，其化學名稱為2-甲基 -5-硝基咪唑-1-乙醇，分子式為C6H9N303，商品名為滅滴靈、甲硝噠唑、 甲硝基羥乙唑、滅滴唑。甲硝唑(MNZ)為硝基咪唑類藥物，是廣譜抗腸 蟲藥，能殺滅阿米巴原蟲，對厭氧桿齒及球菌也有效，也用于外科手術(shù)感 染，被世界衛(wèi)生組織(WHO)遴選為治療厭氧菌感染的基本藥物，此外， 甲硝唑?qū)牝休^好的殺滅作用，可治療疥瘡，殺滅引起炎癥性痤瘡的棒 狀桿菌，故對痤瘡有效，被廣泛用于化妝品中，尤其是一些消除"痘痘" 和"粉刺"的等化妝品中。
然而，甲硝唑雖然具有抗菌和消炎的作用，對消除"痘痘"、"粉刺"等 有一定效果，但長期使用會刺激皮膚，引起接觸性皮炎，表現(xiàn)為紅斑、水 腫、糜爛、脫屑、瘙癢、灼熱等，更嚴重的是導(dǎo)致對抗生素的耐藥性，造 成健康隱患。
目前我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范2002年版》制定的化學指標分析方法只有22 個標準僅涉及57項，很多添加到化妝品的物質(zhì)由于缺乏系統(tǒng)的成分、毒性、功 效檢測方法及評價要求，使得目前化妝品的衛(wèi)生質(zhì)量僅僅是現(xiàn)行標準規(guī)定的 "合格"，不能有效反映化妝品的真實衛(wèi)生質(zhì)量，特別是化妝品中藥物非法添加正受到越來越多的關(guān)注。我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》、歐盟化妝品規(guī)程
(CoucilDirective76/768/EEC)規(guī)定甲硝唑、氯霉素、林可霉素等抗生素類物 質(zhì)禁止在化妝品中使用。
北京市疾病預(yù)防控制中心環(huán)境衛(wèi)生所對在北京、江蘇、江西地區(qū)銷售的122 件祛痘除螨類化妝品進行了檢測，122件樣品檢出甲硝唑14件，超標率11.5%， 最大添加量達至1』3.9%，其中廣東28件中檢出甲硝唑5件，超標率達17.9%。
我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》已于2007年8月1日正式執(zhí)行，其中首次提出測定 了祛痘除螨類化妝品中鹽酸美滿霉素、二水土霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸金霉素、 鹽酸多西環(huán)素、氯霉素6種抗生素和甲硝唑的高效液相色譜法。
高效液相色譜法是常用的現(xiàn)代分析方法，它具有色譜分離效率高、靈敏度 高等優(yōu)點，在相同的色譜條件下，甲硝唑?qū)φ掌啡芤汉蜆悠诽崛∷玫墓┰嚻?溶液分別進樣，根據(jù)色譜保留時間可判斷待測樣品是否含有甲硝唑。
目前針對化妝品中甲硝唑的檢測，除了常用的液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜 聯(lián)用法以及薄層層析法外，還有的是采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔 條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中殘留的甲硝唑和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭 抗甲硝唑抗體，加入酶標二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其殘留物 甲硝唑的含量成負相關(guān)，與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出 樣品中甲硝唑的含量。
雖然上述的色譜法和ELIS A方法都能準確地檢測出化妝品等中的甲硝唑， 然而這兩種方法都存在操作復(fù)雜、樣品處理時間長、對于大批量待檢測樣品無 法做到快速篩查，檢測工作量大等問題，此外色譜法還存在儀器價格昂貴，色 譜柱易受污染、分析成本高和不適合做流動性大的現(xiàn)場檢測等問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種無需大型檢測儀器，檢 測方法簡便快速，檢測成本低且檢測結(jié)果準確的針對化妝品中是否含有甲硝唑 的快速篩查方法，該方法有利于監(jiān)管部門現(xiàn)場快速篩査，尤其是針對大批量樣 品的快速篩査。
本發(fā)明的上述目的是通過如下方案予以實現(xiàn)的
芳香族硝基化合物易于被還原，甲硝唑被堿液還原后，會生成紫紅色的偶 氮苯和無色的氫化偶氮苯，因此可利用堿液顯色來鑒定待測樣品中是否含有甲 硝唑，如果堿液顯色結(jié)果為粉紅色或紫紅色，則說明待測樣品中含有甲硝唑， 甲硝唑被堿液還原后出現(xiàn)了顏色變化，如果堿液顯色結(jié)果為沒有顏色變化，則 說明待測樣品中無甲硝唑。
本發(fā)明的一種化妝品中甲硝唑的快速篩查方法，就是基于上述的原理，采 用向待測化妝品中加入堿液，然后水浴加熱進行顯色反應(yīng)，如果溶液顏色變?yōu)?粉紅色或紫紅色，則說明該待測化妝品中含有甲硝唑，如果溶液無顏色變化， 則說明該待測化妝品中不含有甲硝唑。
化妝品 一般分為溶液類和軟膏類 (1)當待測化妝品為溶液時，因為溶液類的化妝品不含有固體不溶雜質(zhì)， 所以溶液類化妝品可以直接加入堿液，水浴加熱進行顯色反應(yīng)，其間稍加振搖 并不斷觀察，如顯色反應(yīng)結(jié)果為溶液變成為紫紅色或粉紅色，則可判為懷疑陽 性，否則判為陰性；
(2)當待測化妝品為軟膏時，因為軟膏類化妝品中含有很多的不溶雜質(zhì)而 且添加劑成分復(fù)雜，所以需要先向軟膏類化妝品中加入酸液，然后加熱，待軟膏溶化后，過濾，取濾液加入堿液，水浴加熱進行顯色反應(yīng)，其間稍加振搖并 不斷觀察，如顯色結(jié)果為溶液變?yōu)樽霞t色或粉紅色判為懷疑陽性，否則判為陰 性；加入酸液后的加熱，其目的是使軟膏溶化，從而將甲硝唑釋放出來，因為
甲硝唑可溶于酸，所以這里采用加酸后加熱溶化，也可以使得一部分不溶于酸 或者不溶的物質(zhì)去除掉，只保留溶液，從而達到高比率提取軟膏類化妝品中甲
硝唑的目的；加酸后的加熱，其溫度只要使得軟膏溶化即可，實際操作時可選 擇5(TC 8(TC的加熱溫度。
上述的快速篩査方法中，向軟膏類化妝品中加入的酸液可以選擇任何一種 常用酸，如醋酸、鹽酸等，而出于對環(huán)保的考慮，優(yōu)選醋酸，因為醋酸不但環(huán) 保而且腐蝕性好，醋酸的濃度可以選擇《lmol/L，如0.3mol/L醋酸溶液。
本發(fā)明的快速篩查方法中，作為顯色試劑用的堿液可選擇本領(lǐng)域常用的堿 液，如氫氧化鈉、氫氧化鉀等，由于本發(fā)明在前面已經(jīng)加入了酸液，這里進行 顯色反應(yīng)的時候，部分的堿液可能會和前面的酸液進行中和反應(yīng)，因此為了保 證顯色反應(yīng)的較高靈敏度，這里堿液優(yōu)選高濃度的氫氧化鈉，20質(zhì)量％ 40 質(zhì)量％氫氧化鈉溶液，更加優(yōu)選30質(zhì)量％氫氧化鈉溶液。
本發(fā)明的快速篩查方法中，堿液加入后，需要采用水浴加熱進行顏色反應(yīng)， 這里顯色反應(yīng)水浴溫度控制比較重要，因為水浴溫度過高則顯色反應(yīng)后褪色太 快，可能影響觀察，如果水浴溫度過低，則顯色反應(yīng)時間會比較長，影響篩査 的快速性，同時顯色反應(yīng)的顏色也會比較淡，影響觀察，因此這里顯色反應(yīng)的 水浴溫度控制在5(TC 8(TC之間，從而可以保證快速顯色，同時也能保證顯色 時間足夠長，優(yōu)選顯色反應(yīng)的水浴溫度為6(TC 7(TC。
本發(fā)明的快速篩查方法主要是針對化妝品中是否違法添加了甲硝唑進行的初篩，只要是利用本發(fā)明方法進行顯色后，出現(xiàn)粉紅色或紫紅色的化妝品， 則可初步判斷該化妝品中可能添加有甲硝唑，如果顯色反應(yīng)為無變化，則說明 該化妝品中肯定沒有添加甲硝唑，然后將可能添加有甲硝唑的化妝品再進行質(zhì) 譜、色譜等更加精細的檢測。雖然只是初篩，但是本發(fā)明的方法操作簡便，而 且所用時間短， 一般3分鐘內(nèi)即可完成檢查，而且結(jié)果直觀通過看顏色就可以 從大批量的待測化妝品中挑出少量的可疑樣品，大大簡化了檢測的步驟，而且 只需要對少量可疑的樣品進行質(zhì)譜、色譜等精細檢測，也使得檢測成本大大降 低，適合于監(jiān)管部門快速檢査的需要，對提高監(jiān)管部門的運作效率、快速打擊 不法分子有著重大的社會效益。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果
1. 本發(fā)明的快速篩査方法采用加酸、加堿和水浴加熱的簡單步驟，既可以 檢測出待測樣品中是否含有甲硝唑，方法簡便，容易上手，不需要對檢測人員 進行特別培訓(xùn)；
2. 本發(fā)明的快速篩査方法其原料只需要用到酸、堿、以及水浴設(shè)備等，檢 測用料成本低廉，每批費用僅2元，且不需要大型分析儀器，適合于做流動性 大的檢測；
3. 本發(fā)明的快速篩查方法通過堿液顯色，3分鐘內(nèi)即可完成對化妝品中是 否添加甲硝唑的檢查，檢查結(jié)果直觀可靠，經(jīng)與公認準確性很高的液相色譜質(zhì) 譜聯(lián)用法比較驗證，結(jié)果正確率高于95%，假陰性率為0，達到了簡便快速價 廉準確的目的，符合監(jiān)管現(xiàn)場快速檢査的需要，對提高監(jiān)管部門的運作效率、 快速打擊不法分子有著重大的社會效益。
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步的描述，但具體實施例并不對本發(fā) 明做任何限定。
實施例l祛蠖潔面乳
本實施例的祛蠖潔面乳為軟膏類化妝品，首先準備實驗器具 燒杯、玻棒、滴管、試管、試劑瓶和電熱杯。
取祛蝮潔面乳約lg，置于小燒杯中，加入0.3mol/L醋酸溶液溶液2ml， 6(TC水浴中加熱攪拌煮溶，將煮溶后得到的液體倒入試管中，加入30質(zhì)量％ 氫氧化鈉溶液5滴，置于電熱杯中，5(TC水浴中加熱2分鐘，其間稍加振搖并 不斷觀察，顏色觀察發(fā)現(xiàn)溶液顏色變?yōu)榉奂t色，說明該祛幔潔面乳中可能添加 有甲硝唑。
實施例2祛痘益膚水
本實施例的祛痘益膚水為溶液類化妝品，首先準備實驗器具 燒杯、玻棒、滴管、試管、試劑瓶和電熱杯。
取祛痘益膚水2ml，置于試管中，加入30質(zhì)量％氫氧化鈉溶液8滴，60 "C水浴加熱2分鐘，其間稍加振搖并不斷觀察，顏色觀察發(fā)現(xiàn)溶液顏色變?yōu)樽?紅色，說明該祛痘益膚水中可能添加有甲硝唑。
實施例3強效暗瘡修復(fù)霜
本實施例的強效暗瘡修復(fù)霜為軟膏類化妝品，首先準備實驗器具 燒杯、玻棒、滴管、試管、試劑瓶和電熱杯。
取強效暗瘡修復(fù)霜約1.5g，置于小燒杯中，加入lmd/L醋酸溶液溶液2ml， 50'C水浴中加熱攪拌煮溶，將煮溶后得到的液體倒入試管中，加入40質(zhì)量％氫氧化鈉溶液6滴，置于電熱杯中，7(TC水浴中加熱2分鐘，其間稍加振搖并 不斷觀察，顏色觀察發(fā)現(xiàn)溶液顏色沒有變化，說明該強效暗瘡修復(fù)霜中沒有添 加甲硝唑。
實施例4植物祛痘平疤精華液
本實施例的植物祛痘平疤精華液為溶液類化妝品，首先準備實驗器具 燒杯、玻棒、滴管、試管、試劑瓶和電熱杯。
取植物祛痘平疤精華液2ml，置于試管中，加入35質(zhì)量％氫氧化鈉溶液7 滴，8(TC水浴加熱2分鐘，其間稍加振搖并不斷觀察，顏色觀察發(fā)現(xiàn)溶液顏色 沒有變化，說明該植物祛痘平疤精華液中沒有添加甲硝唑。
權(quán)利要求
1、一種化妝品中甲硝唑的快速篩查方法，其特征在于該方法是向待測化妝品中加入堿液，50℃～80℃水浴加熱進行顯色反應(yīng)，根據(jù)顯色反應(yīng)結(jié)果判斷待測化妝品中是否添加有甲硝唑。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速篩查方法，其特征在于所述待測化妝品為軟 膏時，在加入堿液前需先向待測化妝品中加入酸液，加熱溶化后，取溶液加入 堿液。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速篩查方法，其特征在于所述水浴加熱顯色反 應(yīng)的溫度為60°C~70°C。 '
4、 根據(jù)權(quán)利要求2所述快速篩査方法，其特征在于所述加熱溶化溫度為 50°C 80°C。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述快速篩查方法，其特征在于所述堿液為氫氧化鈉 或氫氧化鉀。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述快速篩查方法，其特征在于所述堿液為20質(zhì)量 %~40質(zhì)量％氫氧化鈉溶液。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述快速篩查方法，其特征在于所述堿液為30質(zhì)量％ 氫氧化鈉溶液。
8、 根據(jù)權(quán)利要求2所述快速篩査方法，其特征在于所述酸液為醋酸或鹽酸。
9、 根據(jù)權(quán)利要求8所述快速篩査方法，其特征在于所述酸液為濃度小于 等于1 mol/L的醋酸。
10、 根據(jù)權(quán)利要求9所述快速篩査方法，其特征在于所述酸液為0.3mol/L
全文摘要
本發(fā)明公開一種化妝品中甲硝唑的快速篩查方法，該方法是向待測化妝品中加入堿液，50℃～80℃水浴加熱進行顯色反應(yīng)，根據(jù)顯色反應(yīng)結(jié)果判斷待測化妝品中是否添加有甲硝唑，如果是軟膏類化妝品，在加入堿液前需先向待測化妝品中加入酸液，加熱溶化后，取溶液加入堿液。本發(fā)明的快速篩查方法不需要大型的儀器，而且操作方法簡單，通過顏色判斷即可挑選出添加有甲硝唑的樣品進行后續(xù)的色譜精確檢測。本發(fā)明的快速篩查方法有利于監(jiān)管部門對大批量待測樣品的快篩，簡化了檢測步驟而且也降低了檢測成本，且可用于流動性大的檢測。
文檔編號G01N21/78GK101498671SQ200910037859
公開日2009年8月5日 申請日期2009年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月12日
發(fā)明者關(guān)日晴, 劉敏敏, 李晨輝, 祈 梁 申請人:廣東省藥品檢驗所