專利名稱：一種用高效液相色譜法測(cè)定阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高效液相方法，特別是一種阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜法
測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
阿巴芬凈是噻唑類抗真菌藥物，用于殺菌，消炎，治療各種真菌引起的疾病。分子 式為C21H22N4S0，化學(xué)名為4- [2- (2， 4- 二甲基苯氧基)苯基]-2- [2- (1 ， 4， 5， 6-四氫嘧啶氨 基)噻唑，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
阿巴芬凈的主要中間體雜質(zhì)有4個(gè)，其中中間體-1 、中間體-2和中間體-3在阿巴 芬凈的合成過程中生成，另一個(gè)為反應(yīng)引進(jìn)物料。這些主要中間體對(duì)于最終產(chǎn)品的質(zhì)量生 產(chǎn)過程的質(zhì)量控制是非常重要的。 本法采用氰基色譜柱快速準(zhǔn)確的實(shí)現(xiàn)了阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定，從而實(shí)現(xiàn)了阿 巴芬凈中間體雜質(zhì)的控制，保證了阿巴芬凈的質(zhì)量可控，具有現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用高效液相色譜法分離測(cè)定阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的方 法，可用于阿巴芬凈的制備過程和最終產(chǎn)品的質(zhì)量控制。 本發(fā)明提供一種用高效液相色譜測(cè)定阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的方法，選用氰基硅烷鍵 合硅膠為填料的色譜柱，以乙腈為有機(jī)相，水相為緩沖鹽作為流動(dòng)相。
本發(fā)明方法的流動(dòng)相有機(jī)相選自乙腈、甲醇，優(yōu)選乙腈。 本發(fā)明的方法流動(dòng)相中，有機(jī)相為乙腈，乙腈與水相的比例為30 50 : 40 70，優(yōu)選35 : 65。 本發(fā)明的方法水相為磷酸鹽緩沖液，磷酸鹽選自磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫
二鈉或磷酸氫二鉀中的一種或其混合物，磷酸鹽優(yōu)選磷酸二氫鉀。 本發(fā)明提供一種用高效液相色譜測(cè)定阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的方法，可按以下方法實(shí) 現(xiàn) 1)取阿巴芬凈樣品適量用流動(dòng)相溶解，并配制成每lml含阿巴芬凈0. 5mg的樣品 溶液。
3
2)設(shè)置流動(dòng)相流速為0. 5 1. 5ml/min，流動(dòng)相的流速優(yōu)選為lml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng) 210 280nm，最佳檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm ;選用氰基色譜柱；色譜柱柱溫20 30°C ，柱溫最佳為 25°C。 3)取1)的樣品溶液5 50iil，優(yōu)選20ul，注入高效液相色譜儀，完成阿巴芬凈有
關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。
其中 高效液相色譜儀島津LC-10ATvp， SPD-10Avp色譜柱氰基硅烷鍵合色譜柱(250mmX 4. 6mm， 5 y m)流動(dòng)相乙腈-0. 05mol/L磷酸二氫鉀(10%磷酸調(diào)pH值為3. 0) = 35 : 65
流速1.0mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng)210nm
柱溫25t:
進(jìn)樣體積20iiL 本發(fā)明采用氰基色譜柱能夠有效的分離分析阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)，用流動(dòng)相溶解， 能夠消除溶劑對(duì)檢測(cè)的干擾，加入離子對(duì)試劑跟中間體和樣品進(jìn)行結(jié)合，從而達(dá)到更好的 分離，本發(fā)明能夠有效測(cè)定阿巴芬凈的有關(guān)物質(zhì)，方法簡(jiǎn)單快捷，分析靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確 可靠，可用于阿巴芬凈及含有阿巴芬凈的藥物組合物的質(zhì)量控制。


圖1阿巴芬凈及其中間體雜質(zhì)的液相色譜圖 圖2阿巴芬凈的高效液相色譜圖 圖3阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)高效液相色譜圖 圖4阿巴芬凈及其中間體雜質(zhì)系統(tǒng)耐用性高效液相色譜圖
具體實(shí)施例方式
以下實(shí)施例用于進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不限于本實(shí)施的范圍。
實(shí)施例1
儀器與條件 日本島津LC-10ATVP泵，島津SPD-10AVP紫外可見光多波長(zhǎng)檢測(cè)器，RHEODYNE 7725i進(jìn)樣器及TL9900色譜數(shù)據(jù)工作站，色譜柱氰基柱250X4. 6mm， 5 y m，紫外檢測(cè)波長(zhǎng) 220nm，流動(dòng)相0. 05mol/L磷酸二氫鉀(10%磷酸調(diào)pH值至3. O)-乙月青(65 : 35)
實(shí)驗(yàn)步驟 取阿巴芬凈及其中間體雜質(zhì)各約5mg，置于100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至 刻度，搖勻，作為供試品溶液。取供試品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相分析，記錄色譜圖， 結(jié)果見圖1。 圖1中保留時(shí)間為9. 589min的色譜峰為阿巴芬凈的色譜峰，3. 557min的色譜峰為 中間體_2色譜峰，4. 171min的色譜峰為中間體_1色譜峰，4. 492min的色譜峰為中間體_1 起始物料FA-0的色譜峰，5. 253為中間體-3的色譜峰，圖2中為阿巴芬凈的色譜圖。在上 述條件下阿巴芬凈及其中間體雜質(zhì)的色譜峰分離度良好，可以滿足中國(guó)藥典的要求。
實(shí)施例2
儀器與條件 日本島津LC-10ATVP泵，島津SPD-10AVP紫外可見光多波長(zhǎng)檢測(cè)器，RHEODYNE 7725i進(jìn)樣器及TL9900色譜數(shù)據(jù)工作站，色譜柱氰基柱250X4. 6mm， 5 y m，紫外檢測(cè)波長(zhǎng) 220nm，流動(dòng)相0. 05mol/L磷酸二氫鉀(10%磷酸調(diào)pH值至3. O)-乙月青(65 : 35)
實(shí)驗(yàn)步驟 取阿巴芬凈約5mg，置于10ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供 試品溶液。 取供試溶液，照上述條件進(jìn)行高效液相分析，記錄色譜圖，結(jié)果見圖3。 圖3中保留時(shí)間為10. 300分鐘的色譜峰為阿巴芬凈的色譜峰，其有關(guān)物質(zhì)單一雜
質(zhì)小于0.5%，總雜質(zhì)小于1.0%，結(jié)果表明阿巴芬凈的有關(guān)物質(zhì)達(dá)到原料藥要求，本法可
以用于阿巴芬凈的質(zhì)量監(jiān)測(cè)。 實(shí)施例3 儀器與條件 日本島津LC-1OATVP泵，島津SPD-1OAVP紫外可見光多波長(zhǎng)檢測(cè)器，RHEODYNE 7725i進(jìn)樣器及TL9900色譜數(shù)據(jù)工作站，色譜柱氰基柱250X4. 6mm， 5 y m，紫外檢測(cè)波長(zhǎng) 220nm，流動(dòng)相0. 05mol/L磷酸二氫鉀(10%磷酸調(diào)pH值至3. O)-乙月青(67 : 33)
實(shí)驗(yàn)步驟 取阿巴芬凈及其中間體雜質(zhì)各約5mg，置于100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至 刻度，搖勻，作為供試品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相分析，記錄色譜圖，結(jié)果見圖4。
圖4證明，在流動(dòng)相比例微調(diào)的條件下，阿巴芬凈和各中間體仍然有很好的分離， 本法可以用于阿巴芬凈的質(zhì)量監(jiān)測(cè)。
權(quán)利要求
一種用高效液相色譜測(cè)定阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于選用氰基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，以乙腈為有機(jī)相，水相為緩沖鹽作為流動(dòng)相，可用于阿巴芬凈和含有阿巴芬凈的藥物組合物的質(zhì)量控制。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是流動(dòng)相中的有機(jī)相選自乙腈、甲醇。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是流動(dòng)相中的有機(jī)相為乙腈，乙腈與水相的比 例為30 50 : 40 70。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1 3任一項(xiàng)所述的方法，其特征是所述水相為磷酸鹽緩沖液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征是所述磷酸鹽選自磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷 酸氫二鈉或磷酸氫二鉀中的一種或其混合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述磷酸鹽為磷酸二氫鉀。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1 6任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于取阿巴芬凈適量，用流動(dòng)相溶 解，配制成每lml含阿巴芬凈0. 5mg的樣品溶液，流速為lml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm，選用氰 基柱，柱溫25t:，取樣品溶液20ul，注入高效液相色譜儀，完成阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種阿巴芬凈有關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜法測(cè)定方法，選用氰基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，以乙腈為有機(jī)相，水相為緩沖鹽的混合溶劑作為流動(dòng)相，可用于阿巴芬凈和含有阿巴芬凈的藥物組合物的質(zhì)量控制。
文檔編號(hào)G01N30/60GK101769903SQ20081024655
公開日2010年7月7日 申請(qǐng)日期2008年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月29日
發(fā)明者艾莉 申請(qǐng)人:北京德眾萬全藥物技術(shù)開發(fā)有限公司