專利名稱：：一種通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥物制劑的質(zhì)量控制方法，特別是涉及一種通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法。技術(shù)背景有關(guān)研究表明，冠心病患者多為中老年人，從疾病的發(fā)生發(fā)展看，原因很多，但總的看存在著血瘀、痰濁、氣滯、寒凝等實(shí)的一面，同時(shí)也存在虛的一面。有的人長(zhǎng)期工作勞累，有的人年老體衰，致使臟腑虛損，陰陽(yáng)失調(diào)，氣血不足，諸如元?dú)獠蛔?，氣陰不足等而?dǎo)致冠心病的發(fā)生；而且患病日久，也必將損傷人體的氣血陰陽(yáng)，加重身體的虛弱狀態(tài)。研究表明冠心病患者有本虛者占85%,因此中醫(yī)對(duì)冠心病的治療通法與養(yǎng)法(補(bǔ)法)是不可分割的兩大原則，應(yīng)通養(yǎng)結(jié)合或交替應(yīng)用以通的方法(行氣化瘀、芳香溫通、宣痹通陽(yáng))來(lái)治標(biāo)，解除血瘀、痰濁、氣滯、寒凝；以養(yǎng)的方法(主要是補(bǔ)氣養(yǎng)陰)以治本，以改善身體的虛弱狀態(tài)，從而使患者真正地得以康復(fù)。因此"通養(yǎng)結(jié)合"的方法受到越來(lái)越多的專家的關(guān)注。同時(shí)患者也逐漸注意到單用"通"的藥物雖能暫時(shí)緩解癥狀，但對(duì)有本虛癥的冠心病治療卻;f艮難進(jìn)一步提高療效或使療效鞏固。通脈養(yǎng)心丸是衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十冊(cè)(WS3-B-2027-95)中的產(chǎn)品，由地黃、雞血藤、制何首烏、阿膠、麥冬、龜甲(醋制)、黨參、桂枝、大棗、五味子、甘草組成。其中主藥甘草、黨參益氣養(yǎng)心.生地、麥冬、五味子、阿膠、龜板滋陰養(yǎng)血。桂枝、雞血藤溫陽(yáng)通脈、活血化癡。大棗補(bǔ)脾。通脈養(yǎng)心丸既補(bǔ)氣又補(bǔ)血、滋陰，針對(duì)了"胸痹"、"心痛"等發(fā)病的根本原因-氣陰兩虛；同時(shí)輔以雞血藤等活血化瘀的藥物，針對(duì)血癡、心痛的表癥，從而做到了虛實(shí)兼顧，具有補(bǔ)正而不戀邪的作用特點(diǎn)，適用于各種類型的冠心病患者。其制備方法將以上十一味，雞血藤、黨參、五味子、大棗、龜甲加水煎煮二次，每次3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濃縮成稠骨，其余地黃等六味粉碎成細(xì)粉，加入上述稠膏內(nèi)，攪勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，用水泛丸，干燥，包糖衣，即得。通脈養(yǎng)心丸已在臨床上普遍應(yīng)用，市場(chǎng)上已有銷售，主要用于胸痹心痛，心悸怔忡，心絞痛，心率不齊等疾病的治療。盡管通脈養(yǎng)心丸在臨床上已經(jīng)普遍應(yīng)用，但目前生產(chǎn)上通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法所采用的標(biāo)準(zhǔn)是WS3-B-2027-95部頒標(biāo)準(zhǔn)，多年的生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，在質(zhì)量檢驗(yàn)過(guò)程中存在如下的缺陷一是無(wú)定性定量控制方法，產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)過(guò)于簡(jiǎn)單；二是缺少對(duì)其中的有效成分進(jìn)行有針對(duì)性地質(zhì)量控制步驟，因此給生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制帶來(lái)很大的困難，從而直接影響了產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量.
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法。為控制通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量，針對(duì)其特點(diǎn)及配方，本發(fā)明提供的通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法包括定性鑒別和含量測(cè)定；其中對(duì)于鑒別方法步驟如下(1)制何首烏的薄層色譜鑒別取本品粉末l.5g,過(guò)80目篩，曱醇25mL，加熱回流l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，加8M鹽酸10ml，加熱回流30分鐘，放冷，置分液漏斗中，用乙醚提取三次，每次10ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)觢ml三氯甲烷使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含大黃素lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各5~10吣，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以30-60t:石油醚一曱酸乙酯一甲酸15:5:1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中在與對(duì)照品色鐠相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；置氨蒸氣中熏后斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。(2)五味子的薄層色譜鑒別取本品粉末3.5g，過(guò)80目篩，加三氯甲烷50mL，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訒醮糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含五味子醇甲lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色鐠法試驗(yàn)(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述溶液各2~5吣，分別點(diǎn)樣于同一GF^薄層板上，以30~60€石油醚一甲酸乙酯一甲酸15:5:1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置于紫外燈(254nm)下檢識(shí)；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。檢查方法本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部附錄(附錄IA)丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；對(duì)含有的成分進(jìn)行含量測(cè)定，步驟如下色鐠條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；甲醇-O.2mol/L醋酸銨溶液-水醋酸(67:33:l)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm;理論板數(shù)按甘草酸銨峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。對(duì)照品溶液的制備:稱取甘草酸單銨鹽對(duì)照品5mg,精密稱定，置50mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，每lmL含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.lmg折合甘草酸為0.09795mg。供試品溶液的制備取本品粉末l.Og，過(guò)80目篩，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，加流動(dòng)相25mL,稱定重量，超聲處理30分鐘，取出放冷，稱重并補(bǔ)足超聲處理過(guò)程中的減失量，搖勻，經(jīng)0.45陶濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別吸取上述兩種對(duì)照品溶液與供試品溶液各5ML，注入液相色鐠儀，測(cè)定即得；本品每克含甘草以甘草酸(C42H62016)計(jì)，不得少于2.Omg。本發(fā)明所述的通脈養(yǎng)心丸質(zhì)量控制方法，可檢測(cè)提取方法相同或相近含有通脈養(yǎng)心組成的任何一種劑型，優(yōu)選的劑型為丸劑。為了更加詳細(xì)的描迷本發(fā)明的質(zhì)量控制方法，現(xiàn)將起草通脈養(yǎng)心丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)問(wèn)題詳細(xì)說(shuō)明如下1.原料(藥材)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.1地黃本品為玄參科植物地黃Ae力鵬i/a^/f/〃/owZ76o"A.的新鮮或干燥塊根。秋季采挖，除去蘆頭、須根及泥沙，鮮用；或?qū)⒌攸S緩緩烘烙至約八成干。前者習(xí)稱"鮮地黃"，后者習(xí)稱"生地黃"。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第82頁(yè)地黃項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.2雞血藤本品為豆科植物密花豆5^a^fo/o6MStf6erecfzw""/m的干燥藤莖。秋、冬二季采收，除去枝葉，切片，曬干。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第134頁(yè)雞血藤項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定，1.3麥冬本品為百合科植物麥冬@力/0/^0/2干燥塊根。夏季采挖，洗凈，反復(fù)暴曬、堆置至七八成干，除去須根干燥。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第106頁(yè)麥冬項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.4甘草本品為豆科植物甘草677C7rr力/zawra/e/7^"尸/"A、脹果甘草67/c/rr力i.za/"/7"s勘L或光果甘草fiVyc/rrA/za^7adraZ,的干燥根及根莖。春、秋二季采挖，除去須根，曬干。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第59頁(yè)甘草項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.5制何首烏本品為何首烏的炮制加工品，應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第123頁(yè)制何首烏項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。何首烏為寥科植物何首烏戶o/7^o/咖邁tf/"77or咖的干燥塊根.秋、冬二季葉枯萎時(shí)采挖，削去兩端，洗凈，個(gè)大的切成塊，干燥。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第122頁(yè)何首烏項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.6阿膠本品為馬科動(dòng)物驢iB^/M"/'/7M厶的干燥皮或鮮皮經(jīng)煎煮、濃細(xì)制成的固體膠。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第130頁(yè)阿膠項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.7五味子本品為木蘭科植物五味^c力/sfl/wfrsc力2'/2e/7"'^(Twrcz.,勘/7/.的干燥成熟果實(shí)。習(xí)稱"北五味子"。秋季果實(shí)成熟時(shí)采摘，曬干或蒸后曬干除去果梗及雜質(zhì)。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第44頁(yè)五味子項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.8黨參本品為桔?？浦参稂h參Co^w7o/7W5p27o〃tf/s^!r犯cA.jjVa//,、素花黨參Coffo/70/7"'s.//7o卯7a#3"http://*.M_r.邁Me"a^ao/".,厶7.幼e/7或川黨參CocTo/7o;^/V^i^^力e/7OhV.的干燥根。秋季采挖洗凈曬干。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第199頁(yè)黨參項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.9龜曱(醋制)本品為龜科動(dòng)物烏龜Cfi/加邁j^ree汀es/7《ra7,的背甲及腹曱。全年均可捕捉，以秋、冬二季為多，捕捉后殺死，或用沸水燙死，剝?nèi)”臣准案辜祝埲?，曬干。本品?yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第125頁(yè)龜曱(醋制)項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。1.10大棗本品為鼠李科植物棗力'z/;^m的干燥成熟果實(shí)。秋季果實(shí)成熟時(shí)采收，曬干。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第16頁(yè)大棗項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。l.ll桂枝本品為樟科植物肉桂C/o5a邁o邁咖ca《s/a^res/的干燥嫩枝。春、夏二季采收，除去葉，曬干，或切片曬干。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第195頁(yè)桂枝項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。2.輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)2.l滑石粉本品系滑石經(jīng)精選凈化、粉碎、干燥制成。本品為白色或類白色、微細(xì)、無(wú)砂性的粉末，手摸有滑膩感氣微無(wú)味。本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部第243頁(yè)滑石粉項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。2.2水本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第二部附錄167純化水項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定。通脈養(yǎng)心丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明處方地黃100g雞血藤100g麥冬60g60g制何首烏60g阿膠60g60g黨參60g龜甲(醋制)60g40g桂枝20g以上十一味，共計(jì)680g。制法以上十一味，雞血藤、黨參、五味子、大棗、龜曱加水煎煮二次，每次3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濃縮成稠骨，其余地黃等六味粉碎成細(xì)粉，加入上述稠骨內(nèi)，攪勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，用水制丸，為改善其外觀，加滑石粉適量，干燥，包衣，即得。性狀本品為濃縮包衣水丸，除去包衣后顯棕褐色；味甘、苦。鑒別薄層色譜鑒別l.儀器與試藥草子棗五1.1儀器超聲儀KUDOSSK8200LH(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)；電子天平SartoriusCP225D/CP224S(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);1.2試藥硅膠GF^薄層板、硅膠H薄層板、硅膠G薄層板(青島海洋化工廠分廠)；對(duì)照品大黃素(批號(hào)110756-200110)，五味子醇甲(批號(hào)110857-200405)，梓醇(批號(hào)0773-9910)以上對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；所用試劑為分析純，水為去離子水；通脈養(yǎng)心丸(批號(hào):020840、D107015、A107028);由天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司樂(lè)仁堂制藥廠提供。1.3通脈養(yǎng)心丸的薄層色譜鑒別1.3.1制何首烏的薄層色譜鑒別供試品溶液的制備取本品粉末(過(guò)80目篩)1.5g，甲醇25mL，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，加8。/。鹽酸10ml，加熱回流l小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用乙醚提取三次，每次10ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)觢ml三氯曱烷使溶解，作為供試品溶液。制何首烏藥材溶液的制備取藥材粉末(過(guò)80目篩)0.25g,甲醇25mL，加熱回流l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，加8。/。鹽酸10ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用乙醚提取三次，每次10ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)觢ml三氯甲烷使溶解，作為何首烏藥材溶液。對(duì)照品溶液的制備稱取大黃素對(duì)照品5mg,精密稱定，置5ml量瓶中，加曱醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液。陰性對(duì)照溶液的制備除制何首烏外，按處方配制諸藥，照供試品制法工藝操作，取l.5g按照供試品項(xiàng)下操作方法，制備為陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各5-10ML,分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以石油醚(30-601C)—曱酸乙酯一曱酸(15:5:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365mn)下檢視。供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。置氨蒸氣中熏后斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。而陰性對(duì)照色鐠中則無(wú)此斑點(diǎn)，說(shuō)明該方法專屬，可靠結(jié)果見(jiàn)附圖，圖1-1，圖l-2。1.3.2五味子的薄層色譜鑒別供試品溶液的制備取本品粉末(過(guò)8G目篩)3.5g，加三氯甲烷50mL，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訒醮糽ml使溶解，作為供試品溶液。五味子藥材溶液的制備取五味子藥材粉末0.5g,加三氯甲烷10ml，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為五味子藥材溶液。對(duì)照品溶液的制備稱取五味子醇曱對(duì)照品5mg，精密稱定，置5ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液。陰性對(duì)照溶液的制備除五味子外，按處方配制諸藥，照供試品制法工藝操作，取3.5g照供試品溶液制備方法項(xiàng)下操作，制備為陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述溶液各2~5吣，分別點(diǎn)樣于同一GFw薄層板上，以石油醚(30~600—甲酸乙酯一甲酸(15:5:l)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置于紫外燈(254nm)下檢識(shí)。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。而陰性對(duì)照色譜中則無(wú)此斑點(diǎn)，說(shuō)明該方法專屬，可靠結(jié)果見(jiàn)附圖，圖2-1,圖2-2。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VID)測(cè)定。一、儀器與試藥1.儀器條件儀器島津LC—2010AHT型高效液相色譜儀檢測(cè)器UV/VIS檢測(cè)波長(zhǎng)250nm柱溫30X:超聲儀KUDOSSK8200LH(上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司)電子天平SartoriusCP225D/CP224S(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)2.色譜條件色諉柱SymmetryC185Mm4.6xl50咖Column流動(dòng)相甲醇-O.2mol/L醋酸銨溶液-水醋酸(67:33:1)流速0.8mL/min進(jìn)樣量5HL3.試藥甘草酸銨對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所(供含量測(cè)定用)批號(hào)110731-200511。曱醇為色諉純，其它試劑為分析純，水為去離子水。通脈養(yǎng)心丸(批號(hào)020840、D107015、A107028)由天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司樂(lè)仁堂制藥廠提供。二、實(shí)驗(yàn)方法的考察1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-O.2mol/L醋酸銨溶液-水醋酸(67:33:1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250mn。理論板數(shù)按甘草酸銨峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。2.提取條件的考察由于甘草是原粉入藥，故本實(shí)驗(yàn)按照中國(guó)藥典2005年版第一部第59頁(yè)甘草含量測(cè)定供試品溶液制備項(xiàng)下制備供試品，選擇甲醇一0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(67:33:1)溶液為提取溶媒。3.測(cè)定條件的選擇3.1流動(dòng)相的選擇實(shí)驗(yàn)表明用甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-水醋酸(67:33:l)為流動(dòng)相，甘草酸銨色鐠峰與其他成分的色譜峰干擾較小。3.2波長(zhǎng)的選擇照中國(guó)藥典2005年版第一部第59頁(yè)甘草酸含量測(cè)定項(xiàng)下選擇250nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。3.3對(duì)照品溶液的制備稱取甘草酸銨對(duì)照品適量，精密稱定，置25mL容量瓶中，加甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(67:33:1)溶液溶解并稀釋至刻度，制成每lmL含甘草酸銨0.08528mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。3.4供試品溶液的制備取通脈養(yǎng)心丸粉末(過(guò)80目篩)1.0g，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，加甲醇25mL，稱定重量，超聲處理30分鐘，取出放冷，再稱重并補(bǔ)足超聲減失量，搖勻，經(jīng)O.45陶濾膜濾過(guò)，作為供試品溶液。3.5陰性對(duì)照溶液的制備除甘草外，按處方配制諸藥，照供試品制法工藝操作，取l.Og，照供試品溶液制備方法操作，制備為陰性溶液。3.6測(cè)定法照高效液相色鐠法(附錄VID)測(cè)定，分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液與陰性對(duì)照溶液各5吣，注入液相色譜儀測(cè)定，即得。4.方法學(xué)考察實(shí)驗(yàn)4.l線性關(guān)系考察甘草酸銨對(duì)照品溶液的制備稱取甘草酸銨對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相制成每lmL含甘草酸銨0.08528mg的對(duì)照品溶液。吸取上述溶液l.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.OML依次進(jìn)樣分析，測(cè)定峰面積。結(jié)果見(jiàn)表l。表l甘草酸銨的線性關(guān)系考察結(jié)果進(jìn)樣量(fig)0.085280.170560.341120.511680.682240.8528甘草酸銨峰面積75586158375324131492301657951824702以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)圖4。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算得到回歸方程Y=9.765xl05X-8.079x103r=0.9999984.2精密度試驗(yàn)精密吸取甘草酸銨對(duì)照(0.08528mg/mL)重復(fù)進(jìn)樣5次，按上述色譜條件測(cè)定峰面積積分值，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.66%。結(jié)果見(jiàn)表3表3精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果_次數(shù)_甘草酸銨峰面積峰面積平均值RSD%1408318241398134086764094280.6644092435_406922_4.3加樣回收試驗(yàn)稱取樣品(批號(hào)為D107015,含量為2.843mg/g)粉末(過(guò)80目篩)約O.5g，6份，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，分別加入濃度為0.8528mg/mLlml和2ml甘草酸銨對(duì)照品各三份，按供試品制備與測(cè)定項(xiàng)下操作，進(jìn)樣，測(cè)定，計(jì)算。結(jié)果平均回收率為96.78%，RSD為l.44%,結(jié)果見(jiàn)表4稱樣量樣品中加入甘(g)甘草酸草酸銨銨量量(mg)(mg)0.50821.4450.85282.26996.620.50981.4490.85282.27696.940.50881.4470.85282.26995.390.50981.4491.70563.14599.440.50371.4321.70563.07196.110.50454341.70563.07496.1796.781.444.4重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一批號(hào)的樣品(批號(hào)D107015)粉末(過(guò)80目篩)，稱取5份，每份約1.0g,按擬定的含量測(cè)定方法測(cè)定，分析，測(cè)得峰面積積分值，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.26%，結(jié)果見(jiàn)表5表5重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果稱樣量(g)甘草酸銨量(mg/g)平均值(mg/g)RSD%1.00972.8221.00802.8151.00901.00722.8102.8072.8100.261.00322.8021.00682.806測(cè)得量回收率平均回收率(mg)(%)(%)RSD%4.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)將制備好的供試品溶液進(jìn)樣分析，每隔1小時(shí)進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定峰面積積分值，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。經(jīng)實(shí)驗(yàn)考察，表明供試品在4小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.55%。結(jié)果見(jiàn)表2。_表2穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果_檢測(cè)時(shí)間(h)甘草酸銨峰面積峰面積平均值RSD%054614115423915449160.55254252435486084.6空白實(shí)驗(yàn):按樣品處方稱取除甘草以外的藥味適量，按供試品制備方法制成空白對(duì)照，用與樣品相同的色譜條件測(cè)定，同時(shí)測(cè)定樣品，檢測(cè)陰性樣品在甘草酸銨出峰處有無(wú)峰，結(jié)果見(jiàn)附圖，圖5-4。4.7不同批號(hào)通脈養(yǎng)心丸中甘草酸銨含量測(cè)定4.7.1對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品適量，加曱醇制成每lmL含8(mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。4.7.2供試品溶液的制備取不同批號(hào)本品粉末(過(guò)80目篩)1.0g，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，加甲醇25mL,稱定重量，超聲處理30分鐘，取出放冷，再稱重并補(bǔ)足超聲減失量，搖勻，經(jīng)0.45Min濾膜濾過(guò)后，注入液相色譜儀，測(cè)定即得。結(jié)果見(jiàn)表6表6供試品中甘草酸銨含量測(cè)定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注()中為甘草酸的含量(甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.lmg折合甘草酸為0.09795mg)。限度本品含甘草以甘草酸計(jì)，不得少于2.Omg/g。檢查本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部附錄(附錄IA)丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。功能與主治養(yǎng)心補(bǔ)血，通脈止痛。用于胸痹心痛，心悸怔忡，心絞痛，心律不齊等。用法與用量口服，一次40粒，一日1~2次。規(guī)格每10丸重lg貯藏密閉，防潮.本發(fā)明通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法與原有的部頒標(biāo)準(zhǔn)相比，其所具有的優(yōu)點(diǎn)和積極效果在于(1)本發(fā)明根據(jù)處方中甘草(主要有效成分為甘草酸)具有清熱解毒，補(bǔ)氣益脾胃，調(diào)和諸藥等作用。通過(guò)測(cè)定通脈養(yǎng)心丸有效成分甘草的含量測(cè)定，更加準(zhǔn)確地把握有關(guān)藥品的質(zhì)量。采用本發(fā)明的質(zhì)量控制方法，提高了通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，從而有效確保了通脈養(yǎng)心丸的安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控，保證了工藝的規(guī)范化和質(zhì)量的穩(wěn)定一致。(2)為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們?cè)谠型}養(yǎng)心丸部頒標(biāo)準(zhǔn)的^J之上建立了新的質(zhì)量控制方法，該方法采用薄層色譜鑒別制何首烏，五味子；HPLC法測(cè)定甘草中甘草酸的含量。新的檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性較好，準(zhǔn)確可靠，精確度高可達(dá)到質(zhì)量控制的目的，1、圖1-1為通脈養(yǎng)心丸中制何首烏的薄層色譜圖。其中從左—右為1大黃素對(duì)照品(110796-200310)、2何首烏藥材、3通脈養(yǎng)心丸(D107015)、4陰性。2、圖1-2為通脈養(yǎng)心丸中制何首烏的薄層色鐠圖。其中左—右1大黃素對(duì)照品(110796-200310)、2通脈養(yǎng)心丸(020840)，3通脈養(yǎng)心丸(D107015)、4通脈養(yǎng)心丸(A107028)、5陰性。3、圖2-1為通脈養(yǎng)心丸中五味子的薄層色鐠圖。其中從左—右l五味子醇曱對(duì)照品(110857-200405)、2五味子藥材、3通脈養(yǎng)心丸(D107015)、4陰性。4、圖2-2為五味子的薄層色譜圖。其中從左—右l五味子醇甲對(duì)照品(110857-200405)、2通脈養(yǎng)心丸(020840)3通脈養(yǎng)心丸(D107015)、4通脈養(yǎng)心丸(A107028)、5陰性。5、圖3-1為甘草酸銨對(duì)照品(批號(hào)110731-200511);圖3-2為甘草藥材。6、圖4為甘草酸銨的線性關(guān)系圖。7、圖5-l為甘草酸銨對(duì)照品(批號(hào)110731-200511)。圖5-2為通脈養(yǎng)心丸(批號(hào)D107015)供試品。圖5-3為通脈養(yǎng)心丸(批號(hào)D107015)供試品樣加標(biāo)。圖5-4為陰性。具體實(shí)施方式以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步的說(shuō)明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1本發(fā)明的通脈養(yǎng)心丸質(zhì)量控制包括鑒別、檢查和含量測(cè)定；其中對(duì)于鑒別方法，步驟如下制何首烏的薄層色譜鑒別(1)供試品溶液的制備取本品粉末1.5g,過(guò)80目篩，曱醇25mL，加熱回流l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，加8。/。鹽酸10ml，加熱回流l小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用0.乙醚提取三次，每次10ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)觢ml三氯甲烷使溶解，作為供試品溶液；(2)制何首烏藥材溶液的制備取藥材粉末0.25g,過(guò)80目篩，曱醇25邁L,加熱回流O.5小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，加8y。鹽酸10ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用乙醚提取三次，每次10ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)觢ml三氯甲烷使溶解，作為何首烏藥材溶液；(3)對(duì)照品溶液的制備取大黃素對(duì)照品適量，加曱醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；(4)陰性對(duì)照溶液的制備除制何首烏外，按處方配制諸藥，照供試品制法工藝操作，取l.5g按照供試品項(xiàng)下操作方法，制備為陰性對(duì)照溶液；照薄層色鐠法(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各5~10吣，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以30-60"C石油瞇一甲酸乙酯一甲酸(15:5:l)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色鐠中在與對(duì)照品色鐠相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；五味子的薄層色譜鑒別(1)供試品溶液的制備取本品粉末3.5g過(guò)80目篩，加三氯曱烷50mL,加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽m^吏溶解，作為供試品溶液；(2)五味子藥材溶液的制備取五味子藥材粉末0.5g,加三氯甲烷10ml,加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)訒醮糽ml使溶解，作為五味子藥材溶液；(3)對(duì)照品溶液的制備取五味子醇甲對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；(4)陰性對(duì)照溶液的制備除五味子外，按處方配制諸藥，照供試品制法工藝操作，取3.5g，照供試品溶液制備方法項(xiàng)下操作，制備為陰性對(duì)照溶液；(5)照薄層色鐠法試驗(yàn)(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述溶液各2~5ML,分別點(diǎn)樣于同一GF254薄層板上，以石油醚(30~601C)—甲酸乙酯一甲酸(15:5:l)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置于紫外燈(254nm)下檢識(shí)；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；檢查方法本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部附錄(附錄IA)丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；對(duì)含有的成分進(jìn)行含量測(cè)定，步驟如下色鐠條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；曱醇-O.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(67:33:l)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm，理論板數(shù)按甘草酸銨峰計(jì)算應(yīng)不低于2500;對(duì)照品溶液的制備稱取甘草酸單銨鹽對(duì)照品5mg，精密稱定，置50mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，每lmL含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.lmg折合甘草酸為0.09795mg;供試品溶液的制備取本品粉末l.Og,過(guò)80目篩，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，加流動(dòng)相25mL，稱定重量，超聲處理30分鐘，取出放冷，稱重并補(bǔ)足超聲處理過(guò)程中的減失量，搖勻，經(jīng)0.45陶濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別吸取上述兩種對(duì)照品溶液與供試品溶液各5ML，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每克含甘草以甘草酸(C42H62016)計(jì)，不得少于2.Omg。以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何筒單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。權(quán)利要求1、一種通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法，包括鑒別、檢查和含量測(cè)定；其中對(duì)于鑒別方法，步驟如下(1)制何首烏的薄層色譜鑒別取本品粉末1.5g，過(guò)80目篩，甲醇25mL，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，加8％鹽酸10ml，加熱回流30分鐘，放冷，置分液漏斗中，用乙醚提取三次，每次10ml，合并提取液，蒸干，殘?jiān)?ml三氯甲烷使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含大黃素1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各5～10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以30-60℃石油醚—甲酸乙酯—甲酸15∶5∶1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；置氨蒸氣中熏后斑點(diǎn)變?yōu)榧t色；(2)五味子的薄層色譜鑒別取本品粉末3.5g，過(guò)80目篩，加三氯甲烷50mL，加熱回流30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子醇甲對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)(中國(guó)藥典2005年版第一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述溶液各2～5μL，分別點(diǎn)樣于同一GF254薄層板上，以30～60℃石油醚—甲酸乙酯—甲酸15∶5∶1為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置于紫外燈(254nm)下檢識(shí)；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；檢查方法本品應(yīng)符合中國(guó)藥典2005年版第一部附錄(附錄IA)丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；(3)對(duì)含有的成分進(jìn)行含量測(cè)定，步驟如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(67∶33∶1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm；理論板數(shù)按甘草酸銨峰計(jì)算應(yīng)不低于2500；對(duì)照品溶液的制備稱取甘草酸單銨鹽對(duì)照品5mg，精密稱定，置50mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，每1mL含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.1mg折合甘草酸為0.09795mg；供試品溶液的制備取本品粉末1.0g，過(guò)80目篩，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，加流動(dòng)相25mL，稱定重量，超聲處理30分鐘，取出放冷，稱重并補(bǔ)足超聲處理過(guò)程中的減失量，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別吸取上述兩種對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每克含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于2.0mg。2、如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其中所述的通脈養(yǎng)心丸質(zhì)量控制方法可檢測(cè)提取方法相同或相近含有通脈養(yǎng)心組成的任何一種劑型。3、如權(quán)利要求2所述的質(zhì)量控制方法，其中所述的劑型為丸劑。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法，所述方法包括對(duì)內(nèi)容物制何首烏、五味子進(jìn)行鑒別，根據(jù)藥典的方法對(duì)內(nèi)容物進(jìn)行檢查，同時(shí)對(duì)含有的甘草進(jìn)行含量測(cè)定。通過(guò)測(cè)定通脈養(yǎng)心丸有效成分甘草的含量測(cè)定，更加準(zhǔn)確地把握有關(guān)藥品的質(zhì)量。從而有效確保了通脈養(yǎng)心丸的安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控。新的質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性較好，可達(dá)到質(zhì)量控制的目的。文檔編號(hào)G01N30/90GK101396519SQ20071006121公開(kāi)日2009年4月1日申請(qǐng)日期2007年9月28日優(yōu)先權(quán)日2007年9月28日發(fā)明者林李申請(qǐng)人:天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司樂(lè)仁堂制藥廠