專利名稱：克咳膠囊的質量控制方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種克咳膠囊的質量控制方法，屬于對藥品進行質量控制的技術領域。
背景技術：
克咳膠囊早在1998年就刊登在《中藥成方制劑》十七冊中?？丝饶z囊主要由麻黃、罌粟殼、甘草、苦杏仁、萊菔子、桔梗、石膏組成，用于咳嗽，喘急氣短等。由于其療效確切，深受廣大患者的歡迎，是人們日常生活中的常備藥品。但克咳膠囊原有的質量標準中只收載了麻黃和甘草的薄層色譜鑒別，無含量測定指標，存在著質量控制標準簡單，不能很好地控制成品質量的缺點。罌粟殼為本方中的主藥，斂肺止咳；主要用于肺虛久咳，純虛無邪者。因其有效成分嗎啡類生物堿具有成癮性，不宜過量及持續(xù)服用。因此為更好地控制克咳膠囊的內在質量，對制劑中嗎啡的含量檢測顯得非常必要。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種克咳膠囊的質量控制方法。本發(fā)明針對現(xiàn)有質量控制標準的不足，對克咳膠囊的質量控制方法進行了研究，補充建立了嗎啡的含量測定方法，提高了克咳膠囊的質量控制標準，從而切實保證了該藥物的臨床療效和廣大患者的身體健康。
本發(fā)明所述克咳膠囊是這樣構成的按照重量組份計算它主要由麻黃120-240、罌粟殼120-240、甘草120-240、苦杏仁120-240、萊菔子30-80、桔梗30-80和石膏30-80制備而成。其制備方法為以上七味，麻黃和罌粟殼粉碎成細粉，過篩，各留細粉83g備用，剩余粗粉用酸性水溶液(用10％鹽酸溶液調PH值至5左右)煎煮二次，每次2小時，濾過，濾液用10％氫氧化鈉溶液調PH值至7，藥液備用；其余甘草等五味加水煎煮二次，每次1小時，濾過，濾液與上述溶液合并，濃縮至稠膏狀，加入麻黃和罌粟殼細粉，加入適量碳酸鈣或微晶纖維素，混勻，在60～70℃干燥，粉碎成細粉或制成顆粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
本發(fā)明所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括顯微觀察、麻黃和甘草的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中罌粟殼所含嗎啡的含量測定。
其中麻黃的鑒別方法是以鹽酸麻黃堿對照品為對照，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑的薄層色譜法。甘草的鑒別方法是以甘草次酸對照品為對照，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑的薄層色譜法鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀。
(2)取本制劑內容物，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑內容物，研細，加鹽酸與氯仿，置水浴中加熱回流，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀。
(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
罌粟殼中嗎啡的含量測定方法是以嗎啡對照品為對照，以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相的高效液相色譜法。
嗎啡的具體含量測定方法為照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000。
對照品溶液的制備 取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，置具塞錐形瓶中，加入二氯甲烷，氨水，超聲處理；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得。
本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
更具體的嗎啡含量測定方法為照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000。
對照品溶液的制備 取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得。
本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
本發(fā)明所述質量控制方法包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦。
鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物，研細，加鹽酸與氯仿，置水浴中加熱回流，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備 取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，置具塞錐形瓶中，加入二氯甲烷，氨水，超聲處理；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
申請人經研究發(fā)現(xiàn)，采用以下質量控制方法將更容易控制克咳膠囊的質量，更利于保證制劑的臨床療效。故所述質量控制方法還可包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦。
鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
經研究發(fā)現(xiàn)，以下質量控制方法為最優(yōu)選擇，更容易控制克咳膠囊的質量，保證其臨床療效。故所述質量控制方法還可以包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦。
鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝10∶2∶0.1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝19∶1混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝10∶20∶7∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝25∶74∶1為流動相；檢測波長為215nm；流速為1.0ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備 取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
本發(fā)明質量控制方法是經過大量的篩選試驗得到的最佳方案，以下實驗研究為本發(fā)明的優(yōu)選過程嗎啡含量測定方法研究1、供試品溶液制備方法研究方法1取克咳膠囊的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘。放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微了L濾膜(0.45um)濾過，取續(xù)濾液，即得。
方法2取克咳膠囊內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入1ml氨水，25ml氯仿，超聲處理1h。放冷，濾過，殘渣用少量氯仿洗滌3次，濾過，合并氯仿液，水浴揮干氯仿，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

根據試驗結果可知，采用方法1制備供試品溶液，嗎啡提取更為完全。
2、流動相的選擇流動相1以0.012mol·L-1磷酸二氫鉀乙腈(90∶10，含0.05mmol·L-1三乙胺)為流動相流動相2以甲醇-0.5％醋酸銨水溶液-1％三乙胺(25∶74∶1)為流動相流動相3以0.1mol·L-1磷酸二氫鈉-甲醇(78∶22)為流動相流動相4以A為含0.15％的醋酸的0.01mol/L的庚烷磺酸鈉溶液，B為10％乙腈和90％甲醇的混合溶液，AB＝4060為流動相結果以甲醇-0.5％醋酸銨水溶液-1％三乙胺(25∶74∶1)為流動相；陰性樣品色譜圖在嗎啡位置處無干擾峰，嗎啡和相近的雜質峰分離完全(分離度＞1.5)，即在該條件下嗎啡與其他組分分離完全。因此最佳流動相為甲醇-0.5％醋酸銨水溶液-1％三乙胺(25∶74∶1)。
3、重復性實驗取克咳膠囊，按本發(fā)明所述質量控制方法含量測定項下供試液的制備方法制備5份供試液，按上述色譜條件進行測定，嗎啡平均含量0.0669mg/g，其中RSD％＝0.88％，方法重現(xiàn)性良好。
制劑供試品中嗎啡的重現(xiàn)性試驗

根據結果可見，該方法重現(xiàn)性良好。
4、回收率實驗取已知含量的樣品5份，每份約0.3g，精密稱定，置50ml具塞三角瓶中，分別精密添加嗎啡對照品溶液(0.0104mg/ml)2ml，照供試品溶液制備方法操作，制作加樣回收供試品液。測定嗎啡含量，測得平均加樣回收率為97.21％，RSD％＝1.55％。

本申請人還進行了如下的實驗嗎啡成癮性研究
1材料與方法(1)動物分組大鼠Wistar種，70只，♀♂各半，體重180～220g，分為7組，每組10只。一組為空白對照組，其余為實驗組，自由攝食、飲水。
(2)給藥方法灌胃實驗組大鼠40％的鹽酸嗎啡，1～6組每組每次分別灌胃5ul、10ul、25ul、50ul、100ul、125ul，每天2次，連續(xù)4d。對照組灌胃等體積生理鹽水。
(3)判斷大鼠嗎啡成癮的指標每只大鼠觀察戒斷癥狀20min。直接記錄戒斷癥狀咬牙的陣數(shù)、直立、理毛、濕狗樣抖動、伸展、舔陰等的次數(shù)。
2結果觀察嗎啡成癮大鼠與對照組戒斷癥狀的結果，見下表。
嗎啡成癮大鼠和對照組戒斷癥狀(x±s)



與對照組相比較*P＜0.05，**P＜0.01。
由結果可見，第6組大鼠鈉洛酮誘發(fā)戒斷癥狀結果與對照組結果統(tǒng)計學處理顯示組間差異很顯著P＜0.01；2、3、4、5組大鼠鈉洛酮誘發(fā)戒斷癥狀結果與對照組結果統(tǒng)計學處理顯示P＜0.05；第1組與對照組無顯著差異。
克咳膠囊藥效學研究1試驗受試藥物 本發(fā)明控制的克咳膠囊試驗對照藥(1)空白對照等體積生理鹽水。
(2)已知陽性對照藥原質量標準控制的克咳膠囊造模藥1％毛果蕓香堿溶液。
2受試動物昆明種小鼠，♀♂各半，體重為18～22g；大鼠Wistar種，體重150～200g，♀♂各半。
3試驗方法(1)小鼠氨水引咳法 將實驗小鼠按體重隨機均分為5組，每組10只，♀♂各半，按下列方法分組。生理鹽水組用與給藥同體積的生理鹽水灌胃給藥0.2ml/10g，連續(xù)14天，于末次給藥后1小時進行試驗，本發(fā)明控制的克咳膠囊和原質量標準控制的克咳膠囊各為一組，連續(xù)灌胃給藥14天，于末次給藥后1小時進行試驗，將各組小鼠分別依次放入裝有用0.5ml，25％～28％氫氧化銨注入的0.25g棉球的500ml倒置杯中，倒置燒杯時應迅速，以免氣體遺漏。立即觀察小鼠，以其腹肌收縮(縮胸)同時張大嘴為準，有時有咳聲的表現(xiàn)為咳嗽觀察指標。以放入氨水棉球開始直至首次發(fā)生咳嗽所需秒數(shù)作為咳嗽潛伏期。仔細觀察和詳細記錄小白鼠3分鐘內咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期，統(tǒng)計各組同生理鹽水組之間的差異，根據下列公式計算其鎮(zhèn)咳百分率和潛伏期延長率。
鎮(zhèn)咳百分率(％)＝(N-N0)/N0×100％(N0生理鹽水組咳嗽次數(shù)均值，N給藥組咳嗽次數(shù)均值)潛伏期延長率(％)＝(S-S0)/S0×100％(S0生理鹽水組潛伏期均值，S給藥組潛伏期均值)
(2)小鼠酚紅祛痰法試驗 小鼠共分5組，每組10只，♀♂各半，給藥方法同鎮(zhèn)咳試驗，生理鹽水對照組、本發(fā)明控制的克咳膠囊組和原質量標準控制的克咳膠囊組在末次給藥后30分鐘后腹腔注射0.5％酚紅溶液0.5ml/只，注射后30分鐘脫頸椎處死小鼠，仰位固定于手術板上，剪開頸正中皮膚，分離氣管，用1ml注射器、7號鈍針頭吸取5％的NaHC3C溶液0.5ml灌洗呼吸道，3回，每回灌洗呼吸道3次，將灌洗液注入一比色管中，如此共用1.5mlNaHC3C，抽洗9次，將每回3次的灌洗液合并，置比色管中，與標準酚紅比色管進行比色。
4試驗結果(1)小鼠氨水引咳法 試驗結果表明，本發(fā)明控制的克咳膠囊同原質量標準控制的克咳膠囊比較，經生物統(tǒng)計分析，結果表明其差異均有非常顯著的意義。止咳(P＜0.01)和延長咳嗽潛伏期作用(P＜0.01)，結果見下表。
克咳膠囊止咳作用(n＝10，X±sD)

*與原克咳膠曩組比較，P＜0.01。
克咳膠囊延長咳嗽潛伏期作用(n＝10，X±SD)

*與原克咳膠囊組比較，P＜0.01。
(2)小鼠酚紅祛痰法試驗 試驗結果表明，本發(fā)明控制的克咳膠囊同原質量標準控制的克咳膠囊比較，經生物統(tǒng)計分析，結果表明其差異均有非常顯著的意義(P＜0.01)。見下表。
克咳膠囊祛痰作用(n＝10，X±SD)

通過上述實驗證明本發(fā)明對于克咳膠曩中嗎啡的含量檢測以及控制能夠達到非常有效的效果；本發(fā)明控制的克咳膠囊同原質量標準控制的克咳膠囊比較，經實驗分析，結果表明其差異均有非常顯著的意義。通過本發(fā)明可以控制產品從生產原料的購進、生產工藝的要求、質量控制等環(huán)節(jié)，從而保證克咳膠囊的質量。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明質量控制方法精密度高，重現(xiàn)性好，回收率高，測量結果準確，提高了克咳膠囊的質量控制標準，可有效地控制產品質量，從而確切保證了其臨床療效和廣大患者的身體健康。
具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發(fā)明，但不作為對本發(fā)明的限制。
本發(fā)明的實施例1克咳膠囊的質量控制方法包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦。
鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀。
(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝10∶2∶0.1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝19∶1混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝10∶20∶7∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝25∶74∶1為流動相；檢測波長為215nm；流速為1.0ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000。
對照品溶液的制備 取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得。
本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
本發(fā)明的實施例2克咳膠囊的質量控制方法可以包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦。
鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀。
(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5∶4∶0.05為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15∶2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20∶80∶0.5為流動相；檢測波長為150nm；流速為0.5ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000。
對照品溶液的制備 取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得。
本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
本發(fā)明的實施例3克咳膠囊的質量控制方法可以包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦。
鑒別取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5∶30∶3∶0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝30∶60∶2為流動相；檢測波長為280nm；流速為3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000。
對照品溶液的制備 取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得。
本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
本發(fā)明的實施例4克咳膠囊的質量控制方法可以包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦。
鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀。
(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝15∶0.5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝25∶0.5混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝15∶10∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。
權利要求
1.一種克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括顯微觀察、麻黃和甘草的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中罌粟殼所含嗎啡的含量測定。
2.按照權利要求1所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于麻黃的鑒別方法是以鹽酸麻黃堿對照品為對照，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑的薄層色譜法；甘草的鑒別方法是以甘草次酸對照品為對照，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑的薄層色譜法。
3.按照權利要求1或2所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物，研細，加鹽酸與氯仿，置水浴中加熱回流，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
4.按照權利要求3所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
5.按照權利要求1所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于罌粟殼中嗎啡的含量測定方法是以嗎啡對照品為對照，以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相的高效液相色譜法。
6.按照權利要求1或5所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于嗎啡的含量測定方法為照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，置具塞錐形瓶中，加入二氯甲烷，氨水，超聲處理；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
7.按照權利要求6所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于具體的嗎啡含量測定方法為照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
8.按照權利要求1所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦；鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物，研細，加鹽酸與氯仿，置水浴中加熱回流，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定；含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的內容物，研細，置具塞錐形瓶中，加入二氯甲烷，氨水，超聲處理；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
9.按照權利要求1或8所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦；鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝5-15∶0.5-4∶0.05-1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝15-25∶0.5-2混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝5-15∶10-30∶3-10∶0.2-0.8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定；含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝20-30∶60-80∶0.5-2為流動相；檢測波長為150-280nm；流速為0.5-3ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
10.按照權利要求9所述克咳膠囊的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀內容物為棕黃色至棕褐色的粉末或顆粒；味微苦；鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察外果皮細胞呈五角形或類長方形，壁呈念珠狀增厚，保衛(wèi)細胞側面觀呈啞鈴狀；(2)取本制劑內容物3g，研細，加氨試液數(shù)滴，拌勻，加氯仿20ml，冷浸過夜，濾過，濾液加稀鹽酸5ml，振搖，分取酸水層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶濃氨試液＝10∶2∶0.1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.3％茚三酮正丁醇溶液∶醋酸＝19∶1混合溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑內容物2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，置水浴中加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以30～60℃石油醚∶苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸＝10∶20∶7∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查照中國藥典附錄IX H水分測定法第一法測定，不得超過12.0％；其它各項應符合中國藥典附錄IL膠囊劑項下有關的各項規(guī)定；含量測定照中國藥典附錄VI D高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶0.5％醋酸銨水溶液∶1％三乙胺＝25∶74∶1為流動相；檢測波長為215nm；流速為1.0ml/min；理論板數(shù)按嗎啡峰計，應不低于3000；對照品溶液的制備取嗎啡對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40ug的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的內容物，研細，取0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入30ml二氯甲烷，1ml氨水，超聲處理30分鐘；放冷，濾過，殘渣用少量二氯甲烷洗滌三次，濾過，合并二氯甲烷液，水浴揮干二氯甲烷，殘渣加甲醇使溶解，并定量轉移至5ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，計算，即得；本膠囊劑每粒含嗎啡C17H19O3N為0.03～0.30mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種克咳膠囊的質量控制方法，所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括顯微觀察、麻黃和甘草的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中罌粟殼所含嗎啡的含量測定。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明質量控制方法精密度高，重現(xiàn)性好，回收率高，測量結果準確，提高了克咳膠囊的質量控制標準，可有效地控制產品質量，從而確切保證了其臨床療效和廣大患者的身體健康。
文檔編號G01N30/90GK1969983SQ20061020123
公開日2007年5月30日 申請日期2006年12月7日 優(yōu)先權日2006年12月7日
發(fā)明者葉湘武, 李磊, 韋瑩 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司