專利名稱：脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種脂蛋白檢測方法。
背景技術：
血清中存在大量的離子、小分子蛋白等干擾電信號的物質，現(xiàn)有的方法有采用先超速離心法分離脂蛋白，后再對其組分進行透析，再進行電泳確認脂蛋白組份，這樣的方法程序復雜，操作麻煩。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種易操作，步驟簡便的脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法。
本發(fā)明的技術解決方案是一種脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法，其特征是包括下列步驟①標本預處理將待側血清20μl與80μl雙蒸水、50μl 0.1mg/mlNBD-ceramide〔中文名硝基苯-環(huán)氧-偶氮-C6?；拾贝迹琒igma公司產(chǎn)品〕混合后37℃孵育1分鐘，避光、冰箱保存，使用前加入250μl電泳緩沖液，作為電泳待測標本，所述電泳緩沖液為0.2mol/L Tricine〔中文名N-三(羥甲基)甲基甘氨酸，Sigma公司產(chǎn)品〕20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸餾水至100ml，并用1NNaOH調至PH10.1；②將上述電泳待測標本加入芯片電泳儀中進行電泳處理，樣苯在進樣和分離時由負極至正極，進樣電壓為600V，進樣時間為30秒，分離電壓為2000V，運行溫度為20℃，得到脂蛋白檢測峰。
在電泳處理前，先對芯片進行處理先用電泳緩沖液進行預電泳。
本發(fā)明步驟簡便、易操作，檢測的信噪比達到15左右。


圖1是本發(fā)明實施例1的電泳結果圖譜。
圖2是實施例1的電泳結果圖譜。
具體實施例方式實施例1一種脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法，包括下列步驟①標本預處理將待側血清20μl與80μl雙蒸水、50μl 0.1mg/mlNBD-ceramide混合后37℃孵育1分鐘，避光、冰箱保存，使用前加入250μl電泳緩沖液，作為電泳待測標本，所述電泳緩沖液為0.2mol/L Tricine20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸餾水至100ml，并用1NNaOH調至PH10.1；②在電泳處理前，先對芯片進行處理先用電泳緩沖液進行預電泳。然后將上述電泳待測標本加入芯片電泳儀中進行電泳處理，樣苯在進樣和分離時由負極至正極，進樣電壓為600V，進樣時間為30秒，分離電壓為2000V，運行溫度為20℃，整個電泳時間2分鐘結束，得到脂蛋白檢測峰，如圖1所示。
實施例2一種脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法，包括下列步驟①標本預處理將待側血清20μl與80μl雙蒸水、50μl 0.1mg/mlNBD-ceramide混合后37℃孵育1分鐘，避光、冰箱保存，使用前加入250μl電泳緩沖液，作為電泳待測標本，所述電泳緩沖液為0.2mol/L Tricine20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸餾水至100ml，并用1NNaOH調至PH10.1；②在電泳處理前，先對芯片進行處理先用電泳緩沖液進行預電泳。然后將上述電泳待測標本加入芯片電泳儀中進行電泳處理，樣苯在進樣和分離時由負極至正極，進樣電壓為600V，進樣時間為30秒，分離電壓為2000V，運行溫度為20℃，連續(xù)進行5次電泳，得到脂蛋白檢測峰，如圖2所示。
權利要求
1.一種脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法，其特征是包括下列步驟①標本預處理將待側血清20μl與80μl雙蒸水、50μl 0.1mg/mlNBD-ceramide混合后37℃孵育1分鐘，避光、冰箱保存，使用前加入250μl電泳緩沖液，作為電泳待測標本，所述電泳緩沖液為0.2mol/LTricine20ml和0.1mol/L甲基葡胺40ml混合后加入蒸餾水至100ml，并用1NNaOH調至PH10.1；②將上述電泳待測標本加入芯片電泳儀中進行電泳處理，樣苯在進樣和分離時由負極至正極，進樣電壓為600V，進樣時間為30秒，分離電壓為2000V，運行溫度為20℃，得到脂蛋白檢測峰。
2.根據(jù)權利要求1所述的脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法，其特征是在電泳處理前，先對芯片進行處理先用電泳緩沖液進行預電泳。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種脂蛋白微流控芯片電泳檢測方法，標本預處理，得到電泳待測標本，將電泳待測標本加入芯片電泳儀中進行電泳處理，得到脂蛋白檢測峰等步驟。本發(fā)明步驟簡便、易操作，檢測的信噪比達到15左右。
文檔編號G01N27/447GK1712948SQ20051004029
公開日2005年12月28日 申請日期2005年5月27日 優(yōu)先權日2005年5月27日
發(fā)明者孫承龍, 王惠民, 叢輝, 王躍國, 曹金德, 金慶輝, 賈春平, 王忠慧, 鞠少卿, 宋宏偉 申請人:南通大學附屬醫(yī)院