專(zhuān)利名稱(chēng)：小兒咳喘靈制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及小兒咳喘靈制劑的質(zhì)量控制方法，特別是涉及小兒咳喘靈口服液、糖漿、顆粒劑和膏滋的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
小兒咳喘靈口服液及小兒咳喘靈沖劑，對(duì)治療小兒上呼吸道感染，氣管炎、肺炎、咳嗽等癥有顯著效果，已列入《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》第四冊(cè)(WS3-B-0689-91)，但該制劑采用了傳統(tǒng)提取工藝，提取物中留存了大量的雜質(zhì)，給藥物應(yīng)用帶來(lái)了副作用，由此限制了藥效的發(fā)揮。又由于標(biāo)準(zhǔn)中只提出了相對(duì)密度、PH檢查及理化鑒別，并無(wú)定性鑒別和含量指標(biāo)。其質(zhì)量控制更是難于保證。因此本申請(qǐng)人于2000年8月25日申請(qǐng)了名稱(chēng)“一種小兒咳喘靈中藥制劑及其制備方法”的發(fā)明專(zhuān)利，申請(qǐng)?zhí)?0051003180.X，運(yùn)用新工藝新劑型對(duì)原制備工藝進(jìn)行了改進(jìn)，提高了制劑質(zhì)量。與此同時(shí)，提高小兒咳喘靈制劑的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已迫在眉睫，因此本申請(qǐng)人又對(duì)該中藥制劑的質(zhì)量控制方法進(jìn)行了定性定量探究。經(jīng)過(guò)一系列的方法學(xué)考察，得到了一種科學(xué)的質(zhì)量檢測(cè)方法。從而達(dá)到了提高小兒咳喘靈制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的目的，可以作為上述制劑的質(zhì)量控制方法。
中藥制劑長(zhǎng)期以來(lái)，質(zhì)量難以有效控制，有效控制中藥產(chǎn)品的質(zhì)量是一個(gè)重大的課題，現(xiàn)有技術(shù)中采用的方法不完整，少數(shù)針對(duì)性不強(qiáng)，使用這些方法難以達(dá)到真正控制質(zhì)量的目的。以上小兒咳喘靈制劑由于缺少質(zhì)量控制方法，難以控該制劑的質(zhì)量；給正常的生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)帶來(lái)了困難，利用已知的一些技術(shù)難以對(duì)該制劑產(chǎn)品提供好的質(zhì)量控制方法，本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，采用新的手段對(duì)小兒咳喘靈制劑的質(zhì)量進(jìn)行控制，特別是采用用高效液相色譜法測(cè)定該藥物中甘草酸單銨的含量和用薄層色譜法鑒別成品中中藥材，解決了該制劑質(zhì)量控制的難題。本發(fā)明針對(duì)小兒咳喘靈制劑的特點(diǎn)以及本發(fā)明配方，提供了一種實(shí)用的質(zhì)量控制方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供小兒咳喘靈制劑的質(zhì)量控制方法，該方法包括鑒別和含量測(cè)定的步驟。
本發(fā)明所述的制劑，具體包括口服液、糖漿劑、顆粒劑和膏滋等。
本發(fā)明所述的小兒咳喘靈制劑是由如下重量配比的中藥原料制成的麻黃25g、金銀花250g、苦杏仁125g、板藍(lán)根250g、石膏375g、甘草125g、瓜萎125g及適量輔料。
本發(fā)明所述的制劑，其制備方法可以采用以下方法
通過(guò)將上述配方的中藥原料經(jīng)過(guò)提取或其他方式加工，制成藥物活性物質(zhì)，隨后，以該物質(zhì)為原料，需要時(shí)加入藥物可接受的載體，按照制劑學(xué)的常規(guī)技術(shù)制成膠囊、顆粒劑、片劑。所述活性物質(zhì)可以通過(guò)選自以下方式的方法得到，如通過(guò)粉碎、壓榨、煅燒、研磨、過(guò)篩、滲漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、層析等方法得到、這些活性物質(zhì)可以是浸膏形式的物質(zhì)，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根據(jù)制劑的不同需要決定制成不同的濃度。
本發(fā)明的制劑，在制成制劑時(shí)根據(jù)需要可以加入藥物可接受的載體，這些載體可以是任何適合制成本發(fā)明制劑的載體。
本發(fā)明所述制劑，優(yōu)選的制備方法為以上原料，石膏、苦杏仁、甘草、板藍(lán)根、瓜萎加水，煎煮1小時(shí)，濾過(guò)。藥渣與麻黃、金銀花加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，靜置，取上清液，濃縮成相對(duì)密度約1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)65％，攪勻，靜置冷藏，濾取上清液，濾過(guò)，回收乙醇，濃縮至適量，然后按制劑學(xué)常規(guī)方法，加入適量輔料制成口服液、糖漿劑、顆粒劑和或膏滋。
以上制劑及其制備方法還包括本申請(qǐng)人申請(qǐng)的發(fā)明專(zhuān)利(《一種小兒咳喘靈中藥制劑及其制備方法》申請(qǐng)?zhí)?0051003180.X)，都可以通過(guò)本發(fā)明質(zhì)量控制方法進(jìn)行質(zhì)量保證。
本發(fā)明質(zhì)量控制方法包括鑒別和含量測(cè)定的步驟。
其中鑒別步驟選自以下方法中的一種或幾種(1)按重量或體積取本品，加入稀鹽酸，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)按重量或體積取本品，加入氨水，用乙醚-乙醇提取，取乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
(3)按重量或體積取本品，加氯仿，鹽酸，加熱回流，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?。另取甘草次酸?duì)照品，加乙醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
(4)按重量或體積取本品，用稀鹽酸調(diào)，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微熱攪拌，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材，加水微沸煎煮，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微熱攪拌，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為?duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)按重量或體積取本品，用氯仿提取，取氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌，再用蒸餾水洗滌，取氯仿層，揮干，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液，對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。
優(yōu)選的鑒別步驟選自以下方法中的一種或幾種(1)按重量或體積取本品1-5g或1-5ml，加入稀鹽酸2-8ml，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)按重量或體積取本品15-30g或15-30ml，加入氨水1-10ml，用乙醚-乙醇(6-11∶1-4)提取，取乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉1.5-5g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?-3ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液5-10ul、對(duì)照品溶液2-5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(7-13∶1.4-2.2)為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)按重量或體積取本品15-30g或15-30ml，加氯仿15-45ml，鹽酸2-10ml，加熱回流15-45min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌1-3次，每次10-30ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉1-3g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?-3ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(1-6∶6-10∶2-6∶0.3-0.7)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)按重量或體積取本品15-30g或15-30ml，用稀鹽酸調(diào)PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微熱攪拌2-6min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?-3ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材1.0-4.0g，加水80-120ml微沸煎煮20-40min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微熱攪拌2-6min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(4-9∶1.1-1.5∶0.3-0.7∶0.3-0.7)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)按重量或體積取本品85-120g或85-120ml，用氯仿提取1-3次，每次15-50ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌2-4次，每次20-40ml，再用蒸餾水洗滌2-4次，每次20-40ml，取氯仿層，揮干1-2ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液15-30ul，對(duì)照品溶液2-10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(3-7∶2-6∶1.2-2.4)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
更優(yōu)選的鑒別步驟選自以下方法中的一種或幾種(1)按重量或體積取本品2ml或2g，加入稀鹽酸5ml，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)按重量或體積取本品20g或20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(8∶2)提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉3g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10ul、對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(10∶1.8)為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)按重量或體積取本品20g或20ml，加氯仿30ml，鹽酸5ml，加熱回流30min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌3次，每次20ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉2g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶8∶4∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)按重量或體積取本品20g或20ml，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(7∶1.2∶0.5∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)按重量或體積取本品100g或100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，再用蒸餾水洗滌3次，每次30ml，取氯仿層，揮干1ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液20ul，對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的質(zhì)量控制方法其中含量測(cè)定為對(duì)本發(fā)明制劑中甘草酸單銨含量的測(cè)定，其步驟為照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液(25-38∶51-73)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為253±3nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約11-15mg，精密稱(chēng)定，置90-110ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2-5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
上述色譜條件流動(dòng)相的數(shù)值范圍優(yōu)選的乙腈-2.5％醋酸水溶液比例(33∶67)為最佳；檢測(cè)波長(zhǎng)253nm為最佳。對(duì)照品溶液的制備最好取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約13mg，用甲醇溶解時(shí)，濃度最佳為50％，對(duì)照品溶液最佳定容至100ml，即每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.13mg，折合甘草酸為0.1273mg)；供試品溶液的制備最好選用50％甲醇溶解。
以上所述本品為口服液、糖漿、顆粒劑或膏滋制劑，對(duì)于口服液和糖漿，直接量取，進(jìn)行測(cè)定，對(duì)于顆?；蚋嘧蹋瑴y(cè)定時(shí)需要將其溶解于溶劑中，作為供試液，常規(guī)的方法是，取顆?；蚋嘧?-10g加10-100ml溶劑溶解。
與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明質(zhì)量控制方法對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量控制更為有效，精密度良好、重現(xiàn)性良好、穩(wěn)定性高。
本發(fā)明各個(gè)實(shí)驗(yàn)例供試品所用制劑均可采用實(shí)施例1、2和3所述的口服液、糖漿劑和顆粒劑，也可以與上述實(shí)施例所述的口服液、糖漿劑和顆粒劑具有相同原料組成的其他制劑。
以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)例說(shuō)明本發(fā)明的效果。
實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明質(zhì)控方法對(duì)制劑所含成分含量測(cè)定的選定“小兒咳喘靈制劑”系由七味中藥組方而成，經(jīng)對(duì)每一味藥材進(jìn)行資料查閱，并結(jié)合該藥的制備工藝，對(duì)麻黃中麻黃堿、金銀花中綠原酸、苦杏仁中苦杏仁苷和甘草中甘草酸進(jìn)行了含量研究。
麻黃中主要含麻黃堿及麻黃次堿等多種生物堿、揮發(fā)油及芹菜素、蘆丁、槲皮素等黃酮類(lèi)成分，此外，麻黃中還有肉桂酸、香豆酸、兒茶酚鞣質(zhì)等多種成分。對(duì)麻黃的含量測(cè)定，文獻(xiàn)報(bào)道較多的是麻黃中麻黃堿的含量測(cè)定，參考有關(guān)文獻(xiàn)資料對(duì)麻黃中麻黃堿的含量測(cè)定方法，進(jìn)行了麻黃堿的含量測(cè)定研究。經(jīng)多次多批樣品測(cè)定，確定麻黃堿含量非常低，不宜作含量控制指標(biāo)，故未將麻黃堿含量測(cè)定列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。
金銀花主要含綠原酸、異綠原酸、揮發(fā)油及微量元素等成分。在制劑的含量測(cè)定研究過(guò)程中，我們?cè)鴮?duì)多批樣品中綠原酸進(jìn)行含量測(cè)定，但測(cè)定結(jié)果均偏低，總收率約為25％，估計(jì)部分被處方中多種生物堿等堿性物質(zhì)中和所致，故未將綠原酸含量測(cè)定列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。
苦杏仁主要含苦杏仁苷、苦杏仁酶、油酸、亞油酸等脂肪酸、β-紫羅蘭酮等揮發(fā)性物質(zhì)、氨基酸等。在研究過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)苦杏仁苷的含量波動(dòng)較大，不甚穩(wěn)定。經(jīng)資料查閱，苦杏仁苷受苦杏仁酶和櫻葉酶等β-葡萄糖苷酶的作用可水解，依次生成野櫻皮苷和扁桃腈，再分解生成苯甲醛和氫氰酸?？紤]到上述不穩(wěn)定因素，未將苦杏仁苷含量測(cè)定列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。
綜合以上因素，采用高效液相色譜法測(cè)定甘草中甘草酸的含量。
實(shí)驗(yàn)例2甘草酸單銨測(cè)定的方法學(xué)研究據(jù)文獻(xiàn)資料報(bào)道，甘草中主要含三萜類(lèi)化合物如甘草甜素、甘草酸單銨鹽、甘草酸水解物甘草次酸、皂苷、黃酮類(lèi)化合物甘草苷、甘草素等成分。對(duì)甘草的含量測(cè)定，文獻(xiàn)報(bào)道較多的是甘草中甘草酸的含量測(cè)定，其含量測(cè)定方法有滴定法、電位滴定法、比色法、紫外分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法等。參考有關(guān)文獻(xiàn)資料對(duì)甘草中甘草酸的含量測(cè)定方法，對(duì)制劑中甘草酸的含量進(jìn)行了測(cè)定，并對(duì)測(cè)定的方法學(xué)進(jìn)行了考察。
7.1儀器 島津LC-10ATvp高效液相色譜儀，LC-10ATvp輸液泵；SPD-M10Avp二級(jí)陣列檢測(cè)器；SCL-10Avp系統(tǒng)控制器；CTO-10ASvp恒溫柱箱；CLASS-VP6.1工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；微量進(jìn)樣器(25μl)，HAMILTON公司。
7.2試藥 乙腈(色譜純)、冰醋酸(分析純)、注射用水、甘草酸單銨鹽對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用，批號(hào)0731-9704)。
7.3色譜條件色譜柱Hypersil ODS2(5.0×200mm)大連伊利特；流動(dòng)相乙腈-2.5％醋酸水溶液(33∶67)；檢測(cè)波長(zhǎng)253nm；流速1ml/min；柱溫30℃；進(jìn)樣量5μl。
7.4系統(tǒng)適用性試驗(yàn)分別取甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液、供試品溶液和缺甘草的陰性供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜，甘草酸單銨鹽的保留時(shí)間(tR)約為14.5分鐘，陰性樣品色譜圖在甘草酸單銨鹽峰位置處無(wú)假陽(yáng)性峰，甘草酸單銨鹽和相近的雜質(zhì)峰分離完全(分離度＞1.5)，即本試驗(yàn)條件下甘草酸單銨鹽與其他組分分離完全。理論塔板數(shù)以甘草酸單銨鹽峰計(jì)算為6200。
7.5線性關(guān)系考察7.5.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱(chēng)取甘草酸單銨鹽對(duì)照品13.4mg，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.125mg，折合甘草酸為0.1224mg)。
7.5.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜(見(jiàn)表2)，以峰面積A(μV·s)對(duì)質(zhì)量數(shù)x(μg)進(jìn)行線性回歸計(jì)算，得線性回歸方程為A＝884578.02×X-13495.70，r＝0.99991(見(jiàn)附

圖1甘草酸工作曲線圖)，精密量取對(duì)照品溶液5μl注入液相色譜儀，所得峰面積為527842，將一供試品溶液進(jìn)樣分析所得峰面積分別用回歸方程和一點(diǎn)法計(jì)算含量，結(jié)果的相對(duì)偏差為0.0014％，故本發(fā)明采用一點(diǎn)法計(jì)算含量。甘草酸線性范圍0.2448μg～1.224μg。
表2 甘草酸線性關(guān)系考察


7.6精密度試驗(yàn)按本發(fā)明中含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件，精密吸取甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.125mg，折合甘草酸為0.1224mg)5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，重復(fù)進(jìn)樣5次，結(jié)果列入表4，平均峰面積為528717.8，RSD為0.14％。
表4 甘草酸單銨鹽對(duì)照品的精密度試驗(yàn)

結(jié)果可見(jiàn)，該法精密度良好。
7.7重現(xiàn)性試驗(yàn)分別精密量取本品2ml，按本發(fā)明中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備5份供試液，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，計(jì)算結(jié)果列入表5，甘草酸平均含量為0.9392mg/ml，RSD為1.58％。結(jié)果可見(jiàn)，該法重現(xiàn)性良好。
表5 制劑供試品中甘草酸的重現(xiàn)性試驗(yàn)

7.8供試品溶液中甘草酸的穩(wěn)定性試驗(yàn)精密量取本品2ml，按本發(fā)明中中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備供試液，分別于0、2、4、6、8小時(shí)測(cè)定甘草酸峰面積(見(jiàn)表6，附圖1)，結(jié)果表明，供試品溶液中甘草酸在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
表6 制劑供試品中甘草酸的穩(wěn)定性試驗(yàn)

7.9回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，分別精密量取5份已測(cè)定含量的樣品(平均含量為0.9392mg/ml)1ml，置10ml量瓶中，精密加甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.181mg，折合甘草酸為0.1773mg)5ml，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)(0.45um)，制得供試液。分別精密吸取5ul注入液相色譜儀，記錄色譜，測(cè)定含量，計(jì)算回收率(結(jié)果見(jiàn)表7)，平均回收率為99.34％，RSD為2.02％。
表7 供試品溶液中甘草酸測(cè)定回收率試驗(yàn)

7.10樣品測(cè)定按本發(fā)明制備供試品溶液和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣5μl，記錄色譜，測(cè)定峰面積，按下式計(jì)算含量

式中Ai供試品溶液峰面積As對(duì)照品溶液峰面積Cs對(duì)照品(甘草酸)溶液濃度(mg/ml)10定容體積(ml)2取樣量(ml)根據(jù)嚴(yán)格按照生產(chǎn)工藝制備3批樣品，測(cè)定樣品中甘草酸含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表8。
表8 3批樣品中甘草酸含量測(cè)定結(jié)果

根據(jù)多批小試及三批中試樣品測(cè)定結(jié)果，樣品中甘草酸的煎煮收率、醇沉收率分別約在50％、70％，因此制劑中甘草酸含量限度計(jì)算如下
甘草酸含量限度＝制劑含甘草藥材(mg/ml)×藥材含甘草酸限度(藥典規(guī)定)×煎煮收率×醇沉收率×每支裝量(ml)＝125000/2000×2％×50％×70％×10＝4.38mg。
故制定本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于4.38mg。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制，下述實(shí)施例均可達(dá)到上述實(shí)驗(yàn)例的效果。
實(shí)施例1小兒咳喘靈口服液處方麻黃25g、石膏375g、苦杏仁125g、瓜萎125g、板藍(lán)根250g、金銀花250g、甘草125g制法以上七味，苦杏仁、石膏、板藍(lán)根、甘草、瓜萎加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)；藥渣與麻黃、金銀花再加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，靜置，取上清液，濃縮成相對(duì)密度約1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)65％，攪勻，靜置冷藏，濾取，回收乙醇，濃縮至適量，加入甜菊糖及防腐劑適量，攪拌均勻，濾過(guò)，加水至為2000ml，分裝，每支裝10ml，即得。
鑒別(1)取本品2ml，加入稀鹽酸5ml，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)取本品20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(8∶2)提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉3g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10ul、對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(10∶1.8)為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本品20ml，加氯仿30ml，鹽酸5ml，加熱回流30min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌3次，每次20ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉2g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶8∶4∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本品20ml，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(7∶1.2∶0.5∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)取本品100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，再用蒸餾水洗滌3次，每次30ml，取氯仿層，揮干1ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液20ul，對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定甘草酸單銨的含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液(33∶67)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為253nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約13mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
實(shí)施例2小兒咳喘靈糖漿處方麻黃25g石膏375g苦杏仁125g瓜萎125g板藍(lán)根250g金銀花250g 甘草125g制法以上七味，苦杏仁、石膏、板藍(lán)根、甘草、瓜萎加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)；藥渣與麻黃、金銀花再加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，靜置，取上清液，濃縮成相對(duì)密度約1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)65％，攪勻，靜置冷藏，濾取，回收乙醇，濃縮至適量與適量防腐劑一起加入到單糖漿中，混勻，攪拌均勻，濾過(guò)，加水至為2000ml，分裝，每支裝10ml，即得。
質(zhì)量控制方法鑒別、含量測(cè)定方法同實(shí)施例1，其中每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
實(shí)施例3小兒咳喘靈膏滋處方麻黃25g石膏375g苦杏仁125g瓜萎125g板藍(lán)根250g金銀花250g 甘草125g制法以上七味，苦杏仁、石膏、板藍(lán)根、甘草、瓜萎加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)；藥渣與麻黃、金銀花再加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，靜置，取上清液，濃縮成相對(duì)密度約1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)65％，攪勻，靜置冷藏，濾取，回收乙醇，濃縮至適量。取蔗糖，加適量水配成蔗糖液煮沸溶化，濾過(guò)，加酒石酸，保溫4小時(shí)，使之成為轉(zhuǎn)化糖。再將上述稠膏加入轉(zhuǎn)化糖內(nèi)，攪拌均勻，煮沸，低溫濃縮至60℃時(shí)的相對(duì)密度1.65時(shí)，加入苯甲酸鈉混勻，稍冷，及時(shí)置于罐裝桶中，密封冷卻至80℃，即得質(zhì)量控制方法鑒別、含量測(cè)定方法同實(shí)施例1，其中每克膏滋含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
實(shí)施例4小兒咳喘靈顆粒制法以上七味，苦杏仁、石膏、板藍(lán)根、甘草、瓜萎加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)；藥渣與麻黃、金銀花再加水煎煮1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，靜置，取上清液，濃縮成相對(duì)密度約1.10(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)65％，攪勻，靜置冷藏，濾取，回收乙醇，濃縮至適量。另將適量蔗糖與上述浸膏混勻，干燥，粉碎，制粒，烘干，混勻，制成顆粒1000g，分裝，即得。
質(zhì)量控制方法鑒別方法包括以下方法中的一種或幾種(1)取本品1g，加入稀鹽酸2，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)取本品15g，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(6∶1)提取，取乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉1.5g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液5ul、對(duì)照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(7∶1.4)為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本品15g，加氯仿15ml，鹽酸2ml，加熱回流15min，放冷，濾過(guò)，濾液加10ml水洗滌，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉1g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(1∶6∶2-6∶0.3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本品15g，用稀鹽酸調(diào)PH2，用15ml醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭2.0g，置水浴上微熱攪拌2min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材1.0g，加水80ml微沸煎煮20min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH2，用15ml醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭2.0g，置水浴上微熱攪拌2min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(4∶1.1∶0.3∶0.3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)取本品85g，用15ml氯仿提取，取氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌2次，每次20ml，再用蒸餾水洗滌2次，每次20ml，取氯仿層，揮干1ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液15ul，對(duì)照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(3∶2∶1.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液(25∶51)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約11mg，精密稱(chēng)定，置90ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用45％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
實(shí)施例5小兒咳喘靈口服液麻黃5g、金銀花50g、苦杏仁25g、板藍(lán)根50g、石膏75g、甘草25g和瓜萎25g、薄荷腦5g、阿斯巴甜100g。
制法1)取以上處方中石膏、苦杏仁、甘草、板藍(lán)根、瓜萎、金銀花六味藥，加9倍水，煎煮2.5小時(shí)，濾過(guò)。藥渣再加8倍水煎煮1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，靜置，取上清液，濃縮成相對(duì)密度約1.09(50℃)的流浸膏，加乙醇使含醇量達(dá)80％，攪勻，冷藏24小時(shí)，濾取上清液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度約1.22(60℃)的稠膏，備用。
2)麻黃粉碎，加入10倍量PH為2.8的鹽酸溶液，浸泡2小時(shí)后煎煮2次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，藥液調(diào)PH至7.45備用；上述原料藥，加入薄荷腦、阿斯巴甜，混合均勻，制成口服液，加水至為2000ml，分裝，每支裝10ml，即得。
鑒別(1)取本品2ml，加入稀鹽酸5ml，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)取本品20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇(8∶2)提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉3g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10ul、對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(10∶1.8)為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本品20ml，加氯仿30ml，鹽酸5ml，加熱回流30min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌3次，每次20ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉2g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶8∶4∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本品20ml，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(7∶1.2∶0.5∶0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)取本品100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，再用蒸餾水洗滌3次，每次30ml，取氯仿層，揮干1ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液20ul，對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(5∶4∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定甘草酸單銨的含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液(33∶67)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為253nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約13mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
實(shí)施例6小兒咳喘靈口服液處方麻黃25g、石膏375g、苦杏仁125g、瓜萎125g、板藍(lán)根250g、金銀花250g、甘草125g制法同實(shí)施例質(zhì)量控制方法

鑒別方法包括以下方法中的一種或幾種(1)取本品5ml，加入稀鹽酸8ml，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)取本品30ml，加入氨水10ml，用乙醚-乙醇(11∶4)提取，取乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉5g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液8ul、對(duì)照品溶液4ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(13∶2.2)為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本品30ml，加氯仿45ml，鹽酸10ml，加熱回流45min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌3次，每次30ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉3g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各8ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(6∶10∶6∶0.7)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本品30ml，用稀鹽酸調(diào)PH4，用醋酸乙酯提取3次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭3.0g，置水浴上微熱攪拌6min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材4.0g，加水120ml微沸煎煮40min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH4，用醋酸乙酯提取3次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微熱攪拌6min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各8ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(9∶1.5∶0.7∶0.7)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)取本品ml，用氯仿提取3次，每次50ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌4次，每次40ml，再用蒸餾水洗滌4次，每次40ml，取氯仿層，揮干2ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液30ul，對(duì)照品溶液10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(7∶6∶2.4)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液(38∶51-73)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約15mg，精密稱(chēng)定，置110ml量瓶中，用55％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用55％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
實(shí)施例7小兒咳喘靈口服液處方麻黃25g、石膏375g、苦杏仁125g、瓜萎125g、板藍(lán)根250g、金銀花250g、甘草125g制法同實(shí)施例質(zhì)量控制方法鑒別方法包括以下方法中的一種或幾種(1)取本品4ml，加入稀鹽酸6ml，溶液顯鈣鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)與硫酸鹽(中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。
(2)取本品28ml，加入氨水8ml，用乙醚-乙醇(9∶2)提取，取乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉3.5g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?.5ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液6ul、對(duì)照品溶液3ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(9∶1.8)為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(3)取本品28ml，加氯仿35ml，鹽酸7ml，加熱回流35min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌2次，每次25ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉2.5g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?.5ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各6ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(4∶7∶5∶0.4)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本品28ml，用稀鹽酸調(diào)PH3，用醋酸乙酯提取2次，每次25ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭2.5g，置水浴上微熱攪拌5min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材2.5g，加水110ml微沸煎煮35min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH3，用醋酸乙酯提取2次，每次25ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭2.5g，置水浴上微熱攪拌5min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各7ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水(5∶1.4∶0.4∶0.4)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)取本品90ml，用氯仿提取2次，每次25ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次35ml，再用蒸餾水洗滌3次，每次35ml，取氯仿層，揮干2ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液28ul，對(duì)照品溶液7ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(4∶3∶1.9)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定本發(fā)明口服液的質(zhì)量控制方法，其中甘草酸單銨含量的測(cè)定方法為照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液(35∶70)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約14mg，精密稱(chēng)定，置105ml量瓶中，用48％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用48％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各4μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每支含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)不得少于4.38mg。
權(quán)利要求
1.一種小兒咳喘靈制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于，該方法包括鑒別和含量測(cè)定的步驟。
2.權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述小兒咳喘靈制劑是口服制劑。
3.權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述口服制劑是小兒咳喘靈口服液、糖漿、顆粒劑或膏滋。
4.權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述鑒別方法選自以下方法中的一種或幾種a.按重量或體積取本品，加入稀鹽酸，溶液顯鈣鹽的中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV與硫酸鹽的中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV的鑒別反應(yīng)；b.按重量或體積取本品，加入氨水，用乙醚-乙醇提取，取乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；c.按重量或體積取本品，加氯仿，鹽酸，加熱回流，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖既芙?，作為供試品溶液。另取甘草次酸?duì)照品，加乙醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以60-90℃石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；d.按重量或體積取本品，用稀鹽酸調(diào)，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微熱攪拌，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材，加水微沸煎煮，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)，用醋酸乙酯提取，取醋酸乙酯提取液，加活性炭，置水浴上微熱攪拌，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓鳛閷?duì)照藥材溶液。照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；e.按重量或體積取本品，用氯仿提取，取氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌，再用蒸餾水洗滌，取氯仿層，揮干，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液，對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干；其中所述含量測(cè)定，步驟為照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液25-38∶51-73為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為253±3nm；理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備 取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約11-15mg，精密稱(chēng)定，置90-110ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，供試品溶液的制備 精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用45-55％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)0.45μm，即得；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2-5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每一劑量單位含甘草以甘草酸C42H62O16計(jì)不得少于4.38mg。
5.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述鑒別方法選自以下方法中的一種或幾種a.按重量或體積取本品1-5g或1-5ml，加入稀鹽酸2-8ml，溶液顯鈣鹽的中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV與硫酸鹽的中國(guó)藥典2000年版一部附錄IV的鑒別反應(yīng)；b.按重量或體積取本品15-30g或15-30ml，加入氨水1-10ml，用乙醚-乙醇6-11∶1-4提取，取乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉1.5-5g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?-3ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB試驗(yàn)，吸取供試品溶液5-10ul、對(duì)照品溶液2-5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇7-13∶1.4-2.2為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.按重量或體積取本品15-30g或15-30ml，加氯仿15-45ml，鹽酸2-10ml，加熱回流15-45min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌1-3次，每次10-30ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉1-3g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?-3ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以60-90℃石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸1-6∶6-10∶2-6∶0.3-0.7為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d.按重量或體積取本品15-30g或15-30ml，用稀鹽酸調(diào)PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微熱攪拌2-6min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?-3ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材1.0-4.0g，加水80-120ml微沸煎煮20-40min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH1-4，用醋酸乙酯提取1-3次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0-3.0g，置水浴上微熱攪拌2-6min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水4-9∶1.1-1.5∶0.3-0.7∶0.3-0.7為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；e.按重量或體積取本品85-120g或85-120ml，用氯仿提取1-3次，每次15-50ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌2-4次，每次20-40ml，再用蒸餾水洗滌2-4次，每次20-40ml，取氯仿層，揮干1-2ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液15-30ul，對(duì)照品溶液2-10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮3-7∶2-6∶1.2-2.4為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
6.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述鑒別方法選自以下方法中的一種或幾種a.按重量或體積取本品2ml或2g，加入稀鹽酸5ml，溶液顯鈣鹽與硫酸鹽的鑒別反應(yīng)；b.按重量或體積取本品20g或20ml，加入氨水1ml，用乙醚-乙醇8∶2提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，用無(wú)水硫酸鈉3g脫水，濾過(guò)，揮去乙醚，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB試驗(yàn)，吸取供試品溶液10ul、對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇10∶1.8為展開(kāi)劑，氨水飽和下展開(kāi)，取出，涼干，噴以0.5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.按重量或體積取本品20g或20ml，加氯仿30ml，鹽酸5ml，加熱回流30min，放冷，濾過(guò)，濾液加水洗滌3次，每次20ml，棄水層，氯仿液加無(wú)水硫酸鈉2g，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml溶解，作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以60-90℃石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸4∶8∶4∶0.5為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以10％磷鉬酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；d.按重量或體積取本品20g或20ml，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取金銀花對(duì)照藥材2.0g，加水100ml微沸煎煮30min，濾過(guò)，濾液放冷，用稀鹽酸調(diào)PH1-2，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，加活性炭1.0g，置水浴上微熱攪拌3min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的未活化的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-甲酸-水7∶1.2∶0.5∶0.5為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；e.按重量或體積取本品100g或100ml，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿層，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，再用蒸餾水洗滌3次，每次30ml，取氯仿層，揮干1ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液20ul，對(duì)照品溶液5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮5∶4∶2為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，涼干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
7.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述質(zhì)量控制方法，其中含量測(cè)定步驟為照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-2.5％醋酸水溶液33∶67為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為253nm；理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備 取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約13mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液的制備 精密量取裝量項(xiàng)下的本品2ml，置10ml量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(guò)0.45μm，即得；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每支含甘草以甘草酸C42H62O16計(jì)不得少于4.38mg。
8.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述本品為口服液、糖漿、顆粒劑或膏滋制劑。
9.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述每一劑量單位是口服液每支、糖漿每10ml、顆粒劑每克、膏滋每克。
10.權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述小兒咳喘靈制劑由如下重量配比的中藥原料制成的麻黃25g、金銀花250g、苦杏仁125g、板藍(lán)根250g、石膏375g、甘草125g、瓜萎125g。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了小兒咳喘靈制劑的質(zhì)量控制方法，該方法采用薄層色譜法含有一種或幾種藥材進(jìn)行鑒別；另外，該方法還提供了高效液相色譜法測(cè)定藥物中甘草酸成分的含量。各制劑以相當(dāng)每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含甘草酸不少于4.38mg。
文檔編號(hào)G01N33/15GK1785287SQ20051000329
公開(kāi)日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2005年11月21日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月21日
發(fā)明者葉湘武, 王澤坤 申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司