專利名稱：用于構(gòu)筑生物分子微觀排列的與基質(zhì)結(jié)合的連接分子的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物分子排列，更具體地說，本發(fā)明涉及可用于利用有效的、高產(chǎn)率的技術(shù)制造生物分子排列的一系列可光活化的表面結(jié)合的連接分子。
背景技術(shù)：
公開在例如E.S.Lander，Nature Genetic Supplement 1999，21，3中的核苷酸微觀排列(所謂的“DNA芯片”)，和公開在例如G.Macbeth，et al.，Science 2001，289，1760中的與基質(zhì)結(jié)合的蛋白質(zhì)排列的制造和使用，在人類基因組第一次草圖在最近公布(參見，例如Science 2001，291，1145-1134)后就成為人們非常感興趣的領(lǐng)域。低聚核苷酸和cDNA的微觀排列可以利用多種技術(shù)來制造，包括機(jī)器人定位(robot spotting)和噴墨印刷，對(duì)于低聚核苷酸，可以原位平版印刷合成。這些現(xiàn)有技術(shù)中的有些方法還可以用于制造芯片。
上述所有現(xiàn)有技術(shù)方法都依賴于通過物理沉積或光描繪方法，以一定圖案的方式在某些類固體載體上共價(jià)結(jié)合核酸或多肽。盡管這些不同的“第一代”方法被用于制造用于科研目的的少量微觀排列，但是這些診斷設(shè)備的大規(guī)模實(shí)施將需要大量、有效的制造方法，所述制造方法優(yōu)選既能夠制造DNA排列又能制造蛋白質(zhì)排列。
G.Wallraff，et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.1996，93，13555中描述了一種基于用在化學(xué)增強(qiáng)的抗蝕劑(chemically amplified resists)中的光致酸(photoacid)化學(xué)過程的、平版印刷制造低聚核苷酸排列的技術(shù)。這種稱作“光致酸成圖排列(PPA)”的現(xiàn)有方法比可光脫除的保護(hù)基方法具有多個(gè)潛在的優(yōu)點(diǎn)，后一種方法公開在例如S.P.A.Fodor，etal.，Science 1991，251，767中，目前被Affymetrix用于制造GeneChipTM。PPA方法是基于標(biāo)準(zhǔn)的核酸合成化學(xué)過程(參見

圖1)，其中酸催化劑是在涂覆在結(jié)合有核酸前體的基質(zhì)上的帶圖案的聚合物膜中產(chǎn)生的(參見圖2)。通過PPA技術(shù)產(chǎn)生的光致酸隨后除去了對(duì)酸不穩(wěn)定的二甲氧基三苯甲基保護(hù)基團(tuán)(DMT)，并活化表面結(jié)合的連接分子來偶聯(lián)第一核酸堿。圖2中描述的現(xiàn)有方法可以被重復(fù)多次來構(gòu)筑所需長(zhǎng)度的低聚核苷酸排列。
盡管生物分子排列制造領(lǐng)域中取得了上述進(jìn)展，但是仍然需要提供一種制造生物分子排列的新型改進(jìn)技術(shù)。此外，需要提供一種現(xiàn)有技術(shù)沒法制造的蛋白質(zhì)排列的制造技術(shù)。
發(fā)明概述本發(fā)明提供一系列能夠用于制造生物分子排列的可光活化的表面結(jié)合的連接分子。具體地說，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種組合物，它包括固體基質(zhì)，一個(gè)末端連接到所述固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端含有醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)的有機(jī)連接基團(tuán)，和連接到醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)上的選自縮醛和縮酮的對(duì)酸不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)。本發(fā)明還設(shè)計(jì)了一種組合物，它包括大量這種帶有醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)的表面結(jié)合的連接基團(tuán)，所述醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)用縮醛或縮酮基團(tuán)保護(hù)。
本發(fā)明還提供了一種組合物，它包括固體基質(zhì)，一個(gè)末端結(jié)合到所述固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端含有醛基團(tuán)的有機(jī)連接基團(tuán)。本發(fā)明還設(shè)計(jì)了帶有大量這種結(jié)合到固體基質(zhì)表面上的有機(jī)連接基團(tuán)的組合物。
本發(fā)明還提供了一種組合物，它包括固體基質(zhì)，和至少一種結(jié)合到固體基質(zhì)上的光致酸生成劑或光敏劑。所述結(jié)合到組合物上的至少一種光致酸生成劑或光敏劑還可以包括結(jié)合到光致酸生成劑或光敏劑上的對(duì)酸不穩(wěn)定的選自縮醛和縮酮的保護(hù)基團(tuán)。這種光致酸生成劑或光敏劑還可以包括其中一個(gè)末端結(jié)合到固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端結(jié)合到光致酸生成劑或光敏劑上的有機(jī)連接基團(tuán)。
附圖的簡(jiǎn)要說明圖1是表示現(xiàn)有核酸合成技術(shù)的簡(jiǎn)圖。
圖2是表示稱作光致酸成圖排列(PPA)的低聚核苷酸現(xiàn)有合成技術(shù)的簡(jiǎn)圖。
發(fā)明詳述下面將更詳細(xì)地描述本發(fā)明，它提供了用于構(gòu)筑生物分子排列和蛋白質(zhì)排列的與基質(zhì)結(jié)合的連接分子。
本發(fā)明的一方面涉及一種組合物，它包括固體基質(zhì)，一個(gè)末端連接到所述固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端含有醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)的至少一個(gè)有機(jī)連接基團(tuán)，和結(jié)合到醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)上的選自縮醛和縮酮的對(duì)酸不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)。
本發(fā)明的這一方面利用常規(guī)有機(jī)連接基團(tuán)，提供了用于低聚核苷酸合成的改進(jìn)了的對(duì)酸不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)。與現(xiàn)有技術(shù)的二甲氧基三苯甲基(DMT)保護(hù)的醇相比，由于低溫下更高的合成產(chǎn)率和更高的反應(yīng)性，因此本發(fā)明這一實(shí)施方案中的本發(fā)明組合物去保護(hù)反應(yīng)中看到的高反應(yīng)性(低活化能)和高效的酸催化作用在排列構(gòu)筑中是有利的。在核苷酸砌塊中引入縮醛/縮酮保護(hù)的醇也是可能的。
本發(fā)明組合物中的一種組分是固體基質(zhì)。本發(fā)明所用的固體基質(zhì)的實(shí)例包括但不限于玻璃，攙雜玻璃，諸如氧化硅、氧化銦錫(ITO)和氧化鈦之類的氧化物，半導(dǎo)體基質(zhì)，如Au的金屬等。本發(fā)明所用的優(yōu)選固體基質(zhì)是玻璃基質(zhì)。
一般在使用前，將固體基質(zhì)用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)清潔技術(shù)進(jìn)行清潔。例如，當(dāng)固體基質(zhì)是玻璃時(shí)，在連接分子結(jié)合之前，利用多種處理方法例如硫酸、去離子(DI)水、異丙醇(IPA)、熱、NaOH、氧氣等離子體和鹽酸清潔該玻璃基質(zhì)。本發(fā)明還想到了上述清潔處理的組合。
任選在使用前被清潔的固體基質(zhì)，一般在與連接分子結(jié)合之前用合適的溶劑濕潤(rùn)?？梢杂糜跐駶?rùn)固體基質(zhì)表面的合適溶劑包括但不限于醇，例如甲醇、乙醇、丁醇、戊醇、己醇、庚醇、辛醇和壬醇；烴，例如戊烷、己烷和庚烷；二元醇醚乙酸酯；二元醇醚；芳香烴，例如甲苯和二甲苯；氯代烴，例如氯仿和二氯甲烷；和其它類似溶劑。在這些溶劑中，本發(fā)明特別優(yōu)選醇如乙醇來濕潤(rùn)固體基質(zhì)表面。
固體基質(zhì)表面的濕潤(rùn)一般在室溫下進(jìn)行，但是也可以采用最高達(dá)并包括溶劑沸點(diǎn)的升高的溫度。濕潤(rùn)步驟的時(shí)間可以變化，但是濕潤(rùn)一般進(jìn)行約1-約30分鐘，更優(yōu)選約2-約10分鐘。
然后，將含有基本上溶解在一種上述溶劑中的“連接化合物”的溶液涂覆在固體基質(zhì)表面上?！斑B接化合物”在固體基質(zhì)上的涂覆是用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)方法進(jìn)行的。例如，可以將固體基質(zhì)浸入含有“連接化合物”的溶液中，或者可以將含有“連接化合物”的溶液利用刷涂、浸涂、噴涂或其它類似涂覆方法進(jìn)行涂覆。
含有“連接化合物”的溶液在固體基質(zhì)上的涂覆可以在室溫下進(jìn)行，也可以采用最高達(dá)并包括溶劑沸點(diǎn)的升高的溫度?！斑B接化合物”涂覆步驟的時(shí)間可以根據(jù)固體基質(zhì)表面積改變，但是“連接化合物”在固體基質(zhì)上的涂覆一般進(jìn)行約5分鐘至約24小時(shí)，更優(yōu)選涂覆時(shí)間為約10-約30分鐘。
整個(gè)申請(qǐng)中所用的術(shù)語“連接化合物”表示有機(jī)連接基團(tuán)和能夠結(jié)合到固體基質(zhì)上的化合物之間形成的反應(yīng)產(chǎn)物。本發(fā)明這一點(diǎn)中所用的溶液一般含有約1-約20wt％，更優(yōu)選約2-約15wt％，甚至更優(yōu)選約3-約10wt％的溶解在100％溶劑中的連接化合物。
能夠結(jié)合到固體基質(zhì)上的化合物可以是鍵，碳原子，取代的碳原子，羧酸酰胺，Si原子，取代的Si原子例如三烷氧基甲硅烷基，離子鍵，羧酸，胺，硫醇，氯二烷氧基甲硅烷基，烷基二烷氧基甲硅烷基，或者二烷基烷氧基甲硅烷基。本發(fā)明中，當(dāng)固體基質(zhì)是由玻璃組成的時(shí)，優(yōu)選結(jié)合到固體基質(zhì)上的連接化合物的末端包括Si片段。本發(fā)明中可以采用的優(yōu)選連接基團(tuán)的一個(gè)實(shí)例是氨基丙基三乙氧基硅烷。
本發(fā)明中所用的術(shù)語“有機(jī)連接基團(tuán)”表示一種有機(jī)化合物，它包括能夠結(jié)合到有機(jī)化合物(該化合物能夠結(jié)合到固體基質(zhì)上)上的一個(gè)末端，一個(gè)橋連部分，和至少一個(gè)含有醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)的其它末端。該有機(jī)連接基團(tuán)可以是線性的、聚合的或樹枝狀的。
將各末端連接在一起的橋連部分是線性或支化的、取代或未取代的烷烴，鏈烯基，烷基羧酸酰胺，芳基，如乙氧化物和丙氧化物的烷氧化物，芳氧化物或它們的任意組合。有機(jī)連接基團(tuán)的橋連部分可以含有約3-約600個(gè)碳原子，優(yōu)選約10-約200個(gè)碳原子，更優(yōu)選約12-約100個(gè)碳原子。連接基團(tuán)中可以存在的取代基包括但不限于，烷基，鏈烯基，鹵原子，醚或酰胺。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，連接基團(tuán)的橋連部分是樹枝狀化合物，其中n為約3-約30的式-(CH2)-n的烷烴鏈，其中x為約1-約50的式-(CH2CH2O)-x的乙氧化物，和其中x為約1-約50的式-(C6H4O)x-的芳氧化物。本發(fā)明中所用的術(shù)語“樹枝狀的”表示高度支化的有機(jī)化合物。
本發(fā)明中所用的縮醛或縮酮包括公知的低活化能的脂族或環(huán)狀縮醛或縮酮。能夠用于本發(fā)明的縮醛或縮酮的一些實(shí)例包括但不限于，二甲基縮醛或縮酮，二氧戊環(huán)，四氫呋喃基，四氫吡喃基，甲氧基環(huán)己基，甲氧基環(huán)戊基，環(huán)己氧基乙基，乙氧基環(huán)戊基，乙氧基環(huán)己基，甲氧基環(huán)庚基，和乙氧基環(huán)庚基。優(yōu)選的對(duì)酸不穩(wěn)定的縮醛或縮酮包括四氫吡喃基縮醛，二甲基縮醛或縮酮，或二氧戊環(huán)。
在固體基質(zhì)上涂覆連接化合物之后，將含有結(jié)合的連接分子的固體基質(zhì)用一種上述溶劑漂洗，然后將該組合物(即含有結(jié)合的連接化合物的基質(zhì))在室溫下或者在最高達(dá)并包括110℃的升高的溫度下，在空氣中或在真空下干燥。干燥步驟進(jìn)行約5-約60分鐘，更優(yōu)選約10-約20分鐘。
干燥后，將包括結(jié)合的連接化合物的組合物在爐子中或熱板上烘烤。烘烤步驟的溫度和時(shí)間可以根據(jù)使用爐子或熱板而改變。當(dāng)采用熱板時(shí)，烘烤步驟在約80-約150℃的溫度下進(jìn)行約5-約60分鐘。更優(yōu)選的是，熱板烘烤步驟在約100-約110℃的溫度下進(jìn)行約10-約20分鐘。當(dāng)烘烤步驟中使用爐子時(shí)，烘烤步驟在約80-約150℃的溫度下進(jìn)行約5-約60分鐘。更優(yōu)選的是，爐子烘烤步驟在約100-約110℃的溫度下進(jìn)行約10-約20分鐘。
烘烤步驟之后，就可以以一定圖案的方式對(duì)結(jié)合的連接分子進(jìn)行去保護(hù)，得到用于生物分子排列的活性基質(zhì)。去保護(hù)可以利用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，通過加熱或者暴露于輻射下來進(jìn)行。
本發(fā)明該實(shí)施方案的一些優(yōu)選組合物的說明性實(shí)例包括 其中，R和R’各自獨(dú)立地是烷基，例如乙基、甲基等，或者R和R’連接在一起形成環(huán)烷烴，R”是H、烷基，或者R”與R或R’連接在一起形成環(huán)烷烴，R1是支化點(diǎn)如二取代乙酰胺，或三取代芳醚如三氧基取代苯甲酰胺，R2是烷基、烷氧基、烷氧化物、芳基或芳氧化物，n為0-20。
上述帶有保護(hù)的對(duì)酸不穩(wěn)定的官能團(tuán)的與基質(zhì)結(jié)合的連接分子，可以用于利用標(biāo)準(zhǔn)核酸合成方法的低聚核苷酸的合成，或者用于制備生物分子排列。帶有保護(hù)的對(duì)酸不穩(wěn)定的官能團(tuán)的與基質(zhì)結(jié)合的連接分子還可以用于蛋白質(zhì)排列的制備。將蛋白質(zhì)結(jié)合到基質(zhì)上的優(yōu)選方法是通過與表面結(jié)合的醛形成Schiff堿。這可以用上述結(jié)合了對(duì)酸不穩(wěn)定的縮醛或縮酮的連接分子，通過用醛位點(diǎn)簡(jiǎn)單代替醇連接位點(diǎn)來實(shí)現(xiàn)。該方法另外的優(yōu)點(diǎn)在于，結(jié)合之前官能化的醛和醇易于互相轉(zhuǎn)換，因此一種硅烷前體可被用于DNA和蛋白質(zhì)芯片二者。
下圖顯示了用于蛋白質(zhì)連接的帶有對(duì)酸不穩(wěn)定的醛保護(hù)的與基質(zhì)結(jié)合的連接分子 本發(fā)明還提供了一種組合物，它包括固體基質(zhì)，和結(jié)合到固體基質(zhì)上的至少一種光致酸生成劑或光敏劑。所述至少一種結(jié)合到組合物上的光致酸生成劑或光敏劑還可以包括結(jié)合到其上的對(duì)酸不穩(wěn)定的選自縮醛和縮酮的保護(hù)基團(tuán)。這種光致酸生成劑或光敏劑還可以包括其中一個(gè)末端結(jié)合到固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端結(jié)合到光致酸生成劑或光敏劑上的有機(jī)連接基團(tuán)。
在本發(fā)明的該實(shí)施方案中，聚合物抗蝕劑組分，即光致酸生成劑或光敏劑以上述有機(jī)連接化合物的一部分或者以單獨(dú)組分的形式結(jié)合到基質(zhì)表面上。
該實(shí)施方案中，含有連接基團(tuán)和光致酸生成劑的化合物可以按照下述方法制成通過使3-溴丙基三甲氧基硅烷或α-溴代-ω-三烷氧基甲硅烷基烷烴與二芳基硫(二苯硫)反應(yīng)，然后用所需的陰離子(即三氟甲磺酸根(triflate))交換溴陰離子，能夠合成連接分子锍鹽PAG?；蛘撸|(zhì)結(jié)合的光致酸生成劑可以這樣制成通過PAG上的芳羥基將PAG連接到α-溴代-ω-乙烯基烷烴上，隨后用三烷氧基硅烷進(jìn)行處理。
本發(fā)明中可以使用的合適的光致酸生成劑(PAG)包括三氟甲磺酸鹽(例如三苯基锍三氟甲磺酸鹽或雙-(叔丁基苯基)碘鎓三氟甲磺酸鹽)，連苯三酚(例如1，3，5-苯三酸鹽或連苯三酚)，鎓鹽例如三芳基锍和二芳基碘鎓六氟銻酸鹽、六氟砷酸鹽、三氟甲磺酸鹽和其它，碘鎓磺酸鹽和羥基胺的三氟甲磺酸酯，α-雙-磺酰基重氮甲烷，硝基取代的苯甲醇和萘醌-4-二疊氮化物的磺酸酯和烷基二磺酸鹽。本發(fā)明所用的其它合適的光致酸生成劑公開在例如Allen等人的美國(guó)專利5,045,431和5,071,730中，以及Reichmanis等人的綜述文章(Chemistryof Materials，第3卷，第395頁(1991))，它們的內(nèi)容通過引用而結(jié)合在本文中。
帶有光敏劑的連接分子可以這樣制備α-溴代-ω-乙烯基烷烴與羥基取代的光敏劑如9-蒽甲醇反應(yīng)，隨后用三烷氧基硅烷處理。
本發(fā)明可以使用的光敏劑的實(shí)例包括類、芘類、熒蒽類、蒽酮類、二苯酮類、噻噸酮類和蒽類如9-蒽甲醇(9-AM)。其它蒽衍生物光敏劑公開在美國(guó)專利4,371,605中。光敏劑可以包括氧或硫。
下面描述了本發(fā)明的一些組合物，它們包括帶有或不帶有對(duì)酸不穩(wěn)定的縮醛或縮酮保護(hù)基團(tuán)的光敏劑，和帶有或不帶有對(duì)酸不穩(wěn)定的縮醛或縮酮保護(hù)基團(tuán)的光致酸生成劑。

利用與基質(zhì)結(jié)合的光致酸生成劑和光敏劑的優(yōu)點(diǎn)如下(1) 用于“完全干燥”模式的可能性由于光致酸生成劑(和光敏劑)結(jié)合到基質(zhì)上，因此如果連接化合物的單分子層為在曝光和去保護(hù)過程中發(fā)生的光化學(xué)反應(yīng)和熱反應(yīng)提供了合適的溶劑化作用的話，原則上就不需要聚合物抗蝕劑或其它溶劑的面漆層。預(yù)期聚醚樹枝狀體在這方面特別有用。去保護(hù)反應(yīng)的催化性質(zhì)和能夠產(chǎn)生的高濃度酸有利于使用較少量的與基質(zhì)結(jié)合的PAG。光生成的酸的擴(kuò)散仍是一個(gè)問題，可能必須要控制。隨后，低聚核苷酸和蛋白質(zhì)偶合反應(yīng)可以用常規(guī)方式進(jìn)行。聚合物涂覆步驟的缺省大大簡(jiǎn)化了排列的制備。
(2) 當(dāng)“完全干燥”方法不可行時(shí)，基質(zhì)結(jié)合的PAG和光敏劑還可以用在溶劑基方法中。在此酸擴(kuò)散問題將被最小化(要求較低的酸濃度并且它們?cè)诒砻嫔?。即使一種組分是在溶液中也是這樣的。溶劑基方法可以被用于高分辨率低聚核苷酸排列，或者優(yōu)選被用于采用直接書寫路線的低密度排列。
(3) 使用基質(zhì)結(jié)合的PAG的多次曝光和順序反應(yīng)將依賴于所采用的任何去保護(hù)反應(yīng)的催化性質(zhì)。因此，正確控制與基質(zhì)結(jié)合的PAG將確保在任何步驟中僅使用了部分PAG，并且允許順序曝光來催化其它去保護(hù)化學(xué)反應(yīng)。
下面實(shí)施例用于舉例說明本發(fā)明的方法，它被用于制備光化學(xué)活性的表面結(jié)合的連接分子，所述連接分子能夠用于制備生物分子排列。
實(shí)施例1用于制備蛋白質(zhì)排列的帶有縮醛保護(hù)的醛基的連接分子的合成該實(shí)施例中，二氧化硅活性基團(tuán)和生物活性基團(tuán)之間的間隔基是烷烴鏈(CH2)12。
將12-羥基十二酸(2.15g，9.93mmol)在160ml甲醇中用1.34ml1N鹽酸室溫下處理過夜，將其轉(zhuǎn)變?yōu)榧柞?。用稀氫氧化鈉中和后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，并將產(chǎn)物再次溶解在醋酸乙酯中，用去離子(DI)水和5％的碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鈉干燥，并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到2.00g8.68mmol的12-羥基十二酸甲酯(粗產(chǎn)率87.4％)。
醛是按照J(rèn).E.Baldwin，R.M.Adlington和S.H.Ramcharitar，Tetrahedron 1992，48，2963中描述的方法制備的。將草酰氯(1.27g，9.98mmol)和20ml二氯甲烷放入安裝有三個(gè)加料漏斗的3頸圓底燒瓶中，其中第一個(gè)漏斗中裝有在4ml二氯甲烷中的1.5mlDMSO，第二個(gè)漏斗中裝有在5ml二氯甲烷中的2.00g 12-羥基十二酸甲酯，第三個(gè)漏斗中裝有6ml三乙胺。將燒瓶冷卻到-50℃后，將DMSO溶液快速滴加。10分鐘后，將醇用10分鐘滴加進(jìn)去。45分鐘后，滴加三乙胺。再攪拌10分鐘后，燒瓶自然升溫到室溫并攪拌過夜。加入50ml二氯甲烷，并將溶液用水(3×50ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到2.03g 8.85mmol的12-氧代十二酸甲酯。
按照V.Pozsgay，J.Org.Chem 1998，63，5998中描述的方法保護(hù)醛基。將12-氧代十二酸甲酯(2.02g，8.85mmol)溶解在15ml 2，2-二甲氧基丙烷中，并加入對(duì)甲苯磺酸一水合物(0.17g，0.885mmol)。攪拌30分鐘后，將體積通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)減少大約1/2，用過量三乙胺處理，用二氯甲烷稀釋，用水洗滌，用硫酸鈉干燥，并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到2.11g 7.69mmol 12，12-二甲氧基十二酸甲酯。將其重新溶解在15ml甲醇中，并加入11.4ml1N的NaOH。45分鐘后，將甲醇通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去。將溶液用乙醚洗滌三次。向水溶液中加入固體檸檬酸，直到pH值達(dá)到3.5。將產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中(萃取三次)，將合并的有機(jī)相用水洗滌，用硫酸鎂干燥，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，真空箱中干燥，得到1.95g淡黃色油狀物，為7.49mmol 12，12-二甲氧基十二酸。
在100ml 1∶1的醋酸乙酯/二氯甲烷混合溶劑中，混合3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)(1.66g，7.49mmol)、12，12-二甲氧基十二酸(1.95g，7.49mmol)和DCC(1.85g，8.99mmol)，并攪拌過夜。過濾出固體，并將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到4.33g 12，12-二甲氧基-N-(3’-三乙氧基甲硅烷基丙基)十二酰胺，即一種用于蛋白質(zhì)排列制造的帶有縮醛保護(hù)的醛基的連接分子。
實(shí)施例2用于蛋白質(zhì)排列制備的帶有縮醛保護(hù)的醛基的連接分子的合成該實(shí)施例中，二氧化硅活性基團(tuán)和生物活性基團(tuán)之間的間隔基是聚乙二醇(PEG)，它能夠?yàn)樯锓肿犹峁┒栊员砻?。PEG具有兩個(gè)對(duì)稱的末端基團(tuán)(羥基)。該聚乙二醇必須通過部分官能化并分離不對(duì)稱取代的聚合物，進(jìn)行不對(duì)稱官能化，在一端上接上被保護(hù)的生物活性基團(tuán)并在另一端上接上二氧化硅活性基團(tuán)。
如A.Dal Pozzo，A.Vigo，和G.Donzelli在Makromol.Chem.1989，190，2457-2461中所述，將分子量為600的PEG(21.70g，36.17mmol)用在90ml二氯甲烷中的三苯甲基氯(10.08g，36.17mmol)和5ml三乙胺(36.17mmol)處理，并在室溫下攪拌2小時(shí)。將淤漿用DI水洗滌(1×180ml，5×90ml)以去掉未反應(yīng)的PEG，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。將油狀物再溶解在甲苯(100ml)中，并用鹽水洗滌(1×50ml，5×25ml)，用硫酸鈉干燥，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，并在真空箱中干燥，得到22.98g油狀物，它是雙-三苯甲基化PEG和單-三苯甲基化PEG的混合物。
如T.Bigo，N.D.Sachinvala和O.A.Hamed在Polymer Prepr.2000，41(1)，144中所述，將NaH(5.73g，143.16mmol)用己烷洗滌，分散在100mlTHF中形成淤漿并加熱至回流。將溶解在60mlTHF中的三苯甲基化PEG的混合物在半小時(shí)內(nèi)滴加進(jìn)去，并在回流下攪拌4.5小時(shí)。將溶解在60mlTHF中的氯乙酸(2.25g，23.86mmol)在半小時(shí)內(nèi)滴加進(jìn)去。將淤漿在回流下攪拌過夜，冷卻到室溫并加入60ml水。將pH值用稀鹽酸調(diào)整到約為5，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去掉揮發(fā)物。將淤漿在乙醚中(3×60ml)搗碎以除去雙-三苯甲基化PEG和氯乙酸。將淤漿再次溶解在二氯甲烷中，用硫酸鎂干燥，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，并在真空箱中干燥，得到11.62g(12.91mmol)α-三苯甲基-ω-羧基-PEG。
將α-三苯甲基-ω-羧基-PEG在260ml甲醇中用2ml 12N的鹽酸室溫下處理過夜。用固體碳酸鈉中和后，將溶液過濾并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，再次溶解在鹽水中并用乙醚洗滌(5×100ml)。將水溶液用鹽酸中和，并將產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中(4×200ml)，用硫酸鎂干燥并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到α-羥基-ω-羧基-PEG的油狀物(7.04g，10.49mmol)。
按照實(shí)施例1中的方法，將α-羥基-ω-甲基羧基-PEG轉(zhuǎn)變?yōu)槿⒈Ｗo(hù)并進(jìn)一步與APTES反應(yīng)，以制備α，α-二甲氧基-ω-[N-(3’-三乙氧基甲硅烷基丙基)碳酰胺-PEG，即一種用于蛋白質(zhì)排列制造的帶有縮醛保護(hù)的醛基的連接分子。
或者，通過在回流THF中，用氫化鈉(2.00g，49.38mmol)和溴乙醛二甲基縮醛(2.78g，16.47mmol)處理α-羥基-ω-甲基羧基-PEG(8.23mmol)過夜，能夠一步法加上保護(hù)的醛官能團(tuán)。加入水之后，將溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去。用乙醚研磨除去過量的溴乙醛。通過加入固體檸檬酸將淤漿變?yōu)樗嵝裕a(chǎn)物萃取到二氯甲烷中，用水洗滌，用硫酸鎂干燥，過量并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到α，α-二甲氧基-ω-羧基-PEG，它能夠按照上述方法與APTES反應(yīng)制成所需的連接分子。
實(shí)施例3帶有環(huán)狀縮醛保護(hù)的醇的連接分子的合成使α-羥基-ω-甲基羧基-PEG(來自實(shí)施例2)(3mmol)與氫化鈉(1.44g，36mmol)和2-(2-氯乙氧基)四氫-2H-吡喃(0.99g，6.01mmol)在回流的THF中反應(yīng)過夜。加入水之后，將溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去。用乙醚研磨除去過量的2-(2-氯乙氧基)四氫-2H-吡喃。通過加入固體檸檬酸將淤漿變?yōu)樗嵝裕a(chǎn)物萃取到二氯甲烷中，用水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到α，α-二甲氧基-ω-甲基羧基-PEG，它能夠按照上述方法與APTES反應(yīng)以制備所需要的連接分子。
實(shí)施例4
帶有DMT保護(hù)醇的連接分子的合成通過用酸處理水解α-羥基-ω-甲基羧基-PEG(來自實(shí)施例2)，并將所得到的α-羥基-ω-羧基-PEG(3.04g，4.62mmol)用二甲氧基三苯甲基氯(DMTCI)(3.13g，9.24mmol)在100ml 1∶1的吡啶/二氯甲烷混合溶劑中室溫下處理過夜。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，并將產(chǎn)物再次溶解在乙醚中，過濾除去鹽，并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。然后將α-DMT氧-ω-羧基-PEG按照實(shí)施例1中的方法與APTES反應(yīng)，得到α-DMT氧-ω-[N-(3，-三乙氧基甲硅烷基丙基)碳酰胺-PEG，即一種用于生物分子排列制造的帶有DMT保護(hù)醇的連接分子。
實(shí)施例5用于生物分子連接的2-支化連接分子的合成按照實(shí)施例2所述方法，用二氯乙酸代替氯乙酸與單-三苯甲基化的PEG反應(yīng)，生成支化的連接分子，然后分離和純化該連接分子。
然后該支化的連接分子可以根據(jù)需要被改性和保護(hù)(P)，然后與APTES反應(yīng)生成官能化的支化的連接分子。
實(shí)施例6用于生物分子連接的3-支化連接分子的合成如S.J.Meunier，Q.Wu，S.-N.Wang和R.Roy，Can J.Chem.1997，75，1472-1482中所述，將對(duì)甲苯磺酰氯(6.88g，36mmol)在氮?dú)鈿夥障戮徛尤氲絹碜詫?shí)施例2的單-三苯甲基化PEG(33.3mmol)和50ml三乙胺在乙醚(300ml)中的0℃溶液中。將淤漿自然升溫到室溫并攪拌過夜。將溶劑旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉，并將殘留物溶解在二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)和水(2×50ml)洗滌。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥，得到α-三苯基甲氧基-ω-對(duì)甲苯磺酰氧基-PEG。
將它連同沒食子酸乙酯(1.65g，8.325mmol)和碳酸鉀(11.65g，83.25mmol)溶解在DMF(250ml)中，并在80℃下攪拌2天。冷卻到室溫后，過濾出固體，并將溶劑真空下除去，然后用叔丁醇共蒸發(fā)來輔助除去DMF。加入水并將產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中。將有機(jī)層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到棕色油狀物。
室溫下，將3，4，5-三-(ω-三苯基甲氧基-PEG)苯甲酸乙酯在甲醇(200ml)中與1.5N氫氧化鈉(200ml)攪拌過夜。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，并將殘留物用乙醚(3×100ml)研磨，以除去雙-三苯甲基化PEG。然后將殘留物溶解在二氯甲烷中，用硫酸鎂干燥并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到22.35g 3，4，5-三-(ω-三苯基甲氧基-PEG)苯甲酸。在250ml甲醇中與12N鹽酸(4ml)一起攪拌過夜后，用固體碳酸鈉中和，乙醚洗滌以除去三苯甲醇，并萃取到二氯甲烷中，制成了三官能化連接分子，其端羥基可以反應(yīng)/被保護(hù)，然后與APTES反應(yīng)，制成生物官能化/二氧化硅活性連接分子。
實(shí)施例7連接分子與二氧化硅基質(zhì)的結(jié)合在即將進(jìn)行連接分子結(jié)合之前清潔基質(zhì)，以確保表面上活性羥基的存在。這種清潔包括用硫酸、DI水、IPA、加熱、NaOH和鹽酸處理。然后將基質(zhì)浸泡在乙醇中5分鐘，隨后用溶解在乙醇中的5％連接分子溶液浸泡15分鐘，隨后在乙醇中再浸泡一分鐘。空氣流中干燥后，將基質(zhì)在110℃下烘烤15分鐘，得到結(jié)合有所需的連接分子的基質(zhì)，此時(shí)這種基質(zhì)可以以一定圖案的方式進(jìn)行去保護(hù)反應(yīng)，得到用于生物分子排列的活性基質(zhì)。
實(shí)施例8如流程圖1中所述，利用正交保護(hù)基團(tuán)，能夠制成多種支化的多羥基酸和酯。在此例中，由羧酸制成苯甲酸酯，并將羥基以叔丁基二甲基甲硅烷基醚的形式保護(hù)。該酯可以通過催化氫解被選擇性地切斷，并可以用三氟化硼乙醚去掉甲硅烷基。這些方法中的每一個(gè)都可以選擇性地進(jìn)行。用于合成的起始物是雙-(羥甲基)丙酸(DMPA)。利用流程圖1中描述的化學(xué)過程和簡(jiǎn)單的砌塊，能夠制備多種含有2、4、8、16和更多側(cè)羥基官能團(tuán)的多羥基酸和酯衍生物。利用選擇性保護(hù)/去保護(hù)流程，這些物質(zhì)可以結(jié)合到諸如APTES的連接分子和所述的其它分子上。另外，利用羥基官能團(tuán)來引發(fā)包括己內(nèi)酯在內(nèi)的多種內(nèi)酯的開環(huán)聚合反應(yīng)，可以加上脂族酯間隔基。采用多種金屬和有機(jī)催化劑，這些聚合是活性聚合，并得到帶有端羥基的多種結(jié)構(gòu)的支化聚酯。間隔基的引入在末端官能團(tuán)之間提供了額外的分隔。(M.Trollsas，J.L.Hedrick J.Am.Chem.Soc.1998，120，4644；M.Trollsas，H.Claesson，B.Atthoff，J.L.Hedrick Angew.Chem.Int.Ed.1998，37(22)，3132；M.Trollsas，J.L.Hedrick，D.Mecerreyes，Ph.Dubois，R.Jerome，H.Ihre，A.Hult Macromolecules，1998，31，2756)。
2，2-雙(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)丙酸芐酯G1(CO2Bz，TBDMS)將2，2-雙(羥甲基)丙酸芐酯(49.8g，222mmol)、叔丁基二甲基氯硅烷(TBDMSCl)(80.5g，535mmol)和咪唑(37.8g，533mmol)溶解在150ml二氯甲烷中。將該混合物室溫下攪拌12小時(shí)，并蒸發(fā)掉溶劑。將粗殘留物溶解在己烷中并用水萃取。蒸發(fā)有機(jī)相得到95.2g(94％)的無色液體。1H-NMR(CDCl3)δ0.00(s，12H)，0.83(s，18H)，1.12(s，3H)，3.64-3.77(q，4H)，5.10(s，2H)，7.32(s，5H)。
脫甲硅烷基的通用程序向氮?dú)鈿夥障碌臒恐屑尤?.52mmolTBDMS保護(hù)的物質(zhì)，30ml干燥的二氯甲烷和BF3-Et2O(92.6mmol)。將混合物40℃下攪拌12小時(shí)，并倒入冷甲醇中。將產(chǎn)物通過潷析或過濾分離，并且無需進(jìn)一步純化即可使用。
2，2-雙(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)丙酸G1(CO2H，TBDMS)和除去芐酯基團(tuán)的通用程序?qū)1(CO2Bz，TBDMS)(210mmol，95.2g)溶解在EtOAc(100ml)中，并加入Pd/C(10wt％)(1.5g)。在氫化瓶中充入氫氣(50psi)并在室溫下?lián)u晃6小時(shí)。停止反應(yīng)并過濾催化劑。蒸發(fā)溶劑得到94.2g(99％)的無色液體。1H-NMR(CDCl3)δ0.00(s，12H)，0.82(s，18H)，1.07(s，3H)，3.6-3.69(q，4H)。
G2(CO2Bz，TBDMS)和用DCC酯化的通用程序?qū)?，2-雙(羥甲基)丙酸芐酯(23.3g，104mmol)、G1(CO2H，TBDMS)(79g，218mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶鎓-對(duì)甲苯磺酸鹽(DPTS)溶解在150ml二氯甲烷中。然后加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(55.7g，270mmol)，并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物12小時(shí)。將混合物過濾，并用柱層析純化濾液(硅膠，己烷，EtOAc95∶5洗脫劑)。得到30g(32％)的無色粘稠油狀物1H-NMR(CDCl3)δ0.00(s，24H)，0.84(s，36H)，1.09(s，6H)，1.23(s，3H)，3.56-3.70(q，8H)，4.15-4.30(q，4H)，5.13(s，2H)，7.33(s，5H)。
G2(CO2H，TBDMS)將G2(CO2Bz，TBDMS)(30.0g，32.9mmol)和Pd/C(1.5g)溶解在100mlEtOAc中，并按照上述方法用氫氣處理4小時(shí)。得到26.2g(97％)的無色粘稠液體。1H-NMR(CDCl3)δ0.00(s，24H)，0.84(s，36H)，1.06(s，6H)，1.25(s，3H)，3.57-3.72(q，8H)，4.06-4.29(m，4H)，5.28(s，2H)。
盡管參考其優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了具體描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，在不偏離本發(fā)明精神和范圍的前提下可以對(duì)其形式和細(xì)節(jié)作出多種變化。因此本發(fā)明決不限于所描述的準(zhǔn)確形式和細(xì)節(jié)上，而是要落在所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
反應(yīng)路線1
權(quán)利要求
1.一種組合物，它包括固體基質(zhì)，一個(gè)末端部分連接到所述固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端部分含有醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)的有機(jī)連接基團(tuán)，和連接到醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)上的選自縮醛和縮酮的對(duì)酸不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述固體基質(zhì)選自玻璃、攙雜玻璃、氧化物、半導(dǎo)體和金屬。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述固體基質(zhì)是玻璃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，還包括用所述縮醛或縮酮保護(hù)的大量有機(jī)連接基團(tuán)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述有機(jī)連接基團(tuán)選自線性連接基團(tuán)、聚合物連接基團(tuán)和樹枝狀連接基團(tuán)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述有機(jī)連接基團(tuán)包括在所述末端部分之間的橋連基團(tuán)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的組合物，其中所述橋連基團(tuán)是具有式-(CH2)-n的烷烴鏈，其中n為約3-約30。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的組合物，其中所述橋連基團(tuán)是具有式-(CH2CH2O)-x的乙氧化物，其中x為約1-約50。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中結(jié)合到所述固體基質(zhì)上的所述末端部分包含取代的Si原子。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述縮醛或縮酮是脂肪族或環(huán)狀化合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述縮醛或縮酮選自二甲基縮醛或縮酮，二氧戊環(huán)，四氫呋喃基，四氫吡喃基，甲氧基環(huán)己基，甲氧基環(huán)戊基，環(huán)己基氧乙基，乙氧基環(huán)戊基，乙氧基環(huán)己基，甲氧基環(huán)庚基，和乙氧基環(huán)庚基。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述縮醛或縮酮選自四氫吡喃基縮醛，二甲基縮醛或縮酮，或二氧戊環(huán)。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述縮醛或縮酮是通過加熱或暴露于輻射下而去保護(hù)的。
14.一種組合物，它包括固體基質(zhì)，一個(gè)末端部分結(jié)合到固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端部分含有醛基團(tuán)的有機(jī)連接基團(tuán)。
15.一種組合物，它包括固體基質(zhì)，和至少一種結(jié)合到固體基質(zhì)上的光致酸生成劑或光敏劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，還包括結(jié)合到光致酸生成劑或光敏劑上的選自縮醛和縮酮的對(duì)酸不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)。
17.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，還包括其中一個(gè)末端部分結(jié)合到固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端部分結(jié)合到光致酸生成劑或光敏劑上的有機(jī)連接基團(tuán)。
18.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中所述固體基質(zhì)選自玻璃、攙雜玻璃、氧化物、半導(dǎo)體和金屬。
19.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中所述固體基質(zhì)是玻璃。
20.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其中所述有機(jī)連接基團(tuán)選自線性連接基團(tuán)、聚合物連接基團(tuán)和樹枝狀連接基團(tuán)。
21.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其中所述有機(jī)連接基團(tuán)包括在所述末端部分之間的橋連基團(tuán)。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的組合物，其中所述橋連基團(tuán)是具有式-(CH2)-n的烷烴鏈，其中n為約3-約30。
23.根據(jù)權(quán)利要求21的組合物，其中所述橋連基團(tuán)是具有式-(CH2CH2O)-x的乙氧化物，其中x為約1-約50。
24.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中所述縮醛或縮酮是脂肪族或環(huán)狀化合物。
25.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中所述縮醛或縮酮選自二甲基縮醛或縮酮，二氧戊環(huán)，四氫呋喃基，四氫吡喃基，甲氧基環(huán)己基，甲氧基環(huán)戊基，環(huán)己基氧乙基，乙氧基環(huán)戊基，乙氧基環(huán)己基，甲氧基環(huán)庚基，和乙氧基環(huán)庚基。
26.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中所述縮醛或縮酮選自四氫吡喃基縮醛，二甲基縮醛或縮酮，或二氧戊環(huán)。
27.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中所述縮醛或縮酮是通過加熱或暴露于射線下而去保護(hù)的。
28.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中所述光致酸生成劑選自三氟甲磺酸鹽，連苯三酚，鎓鹽，碘鎓磺酸鹽，羥基胺的三氟甲磺酸酯，α-雙-磺酰基重氮甲烷，硝基取代的苯甲醇和萘醌-4-二疊氮化物的磺酸酯和烷基二磺酸鹽。
29.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中所述光致酸生成劑選自三氟甲磺酸鹽和鎓鹽。
30.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中所述光敏劑選自蔗類、芘類、熒蒽類、蒽酮類、二苯酮類、噻噸酮類和蒽類。
31.一種制備可光活化的表面結(jié)合的連接分子的方法，包括將含有連接化合物的溶液涂覆在固體基質(zhì)的濕潤(rùn)表面上，所述連接化合物包含結(jié)合到所述固體基質(zhì)上的組分；干燥含有結(jié)合的連接化合物的固體基質(zhì)；和烘烤干燥的固體基質(zhì)。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，還包括在所述涂覆之前清潔所述固體基質(zhì)。
33.根據(jù)權(quán)利要求32的方法，其中所述清潔處理選自硫酸處理、去離子水處理、異丙醇處理、熱處理、NaOH處理、氧等離子體處理和鹽酸處理。
34.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中所述濕潤(rùn)的固體基質(zhì)是通過將溶劑涂覆在所述固體基質(zhì)上形成的，所述溶劑選自醇、烴、二元醇醚乙酸酯、二元醇醚、芳烴和氯代烴。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述濕潤(rùn)是在室溫至最高達(dá)溶劑沸點(diǎn)的溫度下進(jìn)行的。
36.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中含有所述連接化合物的所述溶液含有約1-約20wt％的溶解在溶劑中的連接化合物。
37.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中所述連接化合物是有機(jī)連接基團(tuán)和能夠結(jié)合到所述固體基質(zhì)上的化合物之間的反應(yīng)產(chǎn)物。
38.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，還包括將所述連接化合物去保護(hù)。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的方法，其中所述去保護(hù)是通過加熱或暴露于輻射下進(jìn)行的。
全文摘要
本發(fā)明描述了一系列能夠用于制造生物分子排列的可光活化的表面結(jié)合的連接分子。具體地說，公開了一種組合物，它包括固體基質(zhì)，一個(gè)末端連接到所述固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端含有醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)的有機(jī)連接基團(tuán)，和連接到醇官能團(tuán)或羰基官能團(tuán)上的選自縮醛和縮酮的對(duì)酸不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)。本發(fā)明還描述了一種組合物，它包括固體基質(zhì)，一個(gè)末端結(jié)合到固體基質(zhì)上并且至少一個(gè)其它末端含有醛基團(tuán)的有機(jī)連接基團(tuán)。本發(fā)明還提供了一種組合物，它包括固體基質(zhì)，和至少一種結(jié)合到固體基質(zhì)上的光致酸生成劑或光敏劑。
文檔編號(hào)G01N33/543GK1510420SQ20031011801
公開日2004年7月7日 申請(qǐng)日期2003年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月20日
發(fā)明者P·J·布羅克, R·A·迪派特羅, N·S·芬德, R·D·米勒, S·A·斯旺森, G·M·沃爾拉夫, P J 布羅克, 斯旺森, 沃爾拉夫, 米勒, 芬德, 迪派特羅 申請(qǐng)人:國(guó)際商業(yè)機(jī)器公司