專利名稱：華支睪吸蟲免疫膠體金檢測(cè)盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種免疫膠體金檢測(cè)盒，尤其是華支睪吸蟲免疫膠體金檢測(cè)盒。
本實(shí)用新型是這樣實(shí)現(xiàn)的。
本實(shí)用新型采用一個(gè)小塑料盒，小塑料盒有盒蓋和底座，盒蓋的一側(cè)開有橢圓形或近圓形的加樣孔供加待檢樣品；盒蓋的中部開有長(zhǎng)條形的觀察窗；試紙條的底層為塑料薄片，其上層對(duì)應(yīng)盒蓋加樣孔的一側(cè)為有大容量吸水紙的吸附有指示劑為膠體金標(biāo)記的人的IgG的羊抗人或鼠抗人抗體(二抗)的加樣區(qū)，對(duì)應(yīng)盒蓋觀察窗的中部為反應(yīng)結(jié)合區(qū)，為層析模，其上設(shè)有檢測(cè)線和質(zhì)控線，其中檢測(cè)線在近加樣區(qū)側(cè)，質(zhì)控線在遠(yuǎn)加樣區(qū)側(cè)，檢測(cè)線上的檢測(cè)試劑是華支睪吸蟲成蟲的抗原成分，檢測(cè)線的孔徑是5～8μm，質(zhì)控線上的質(zhì)控試劑是人的IgG；試紙條的加樣區(qū)的對(duì)側(cè)一端可以設(shè)置有大容量吸水紙的吸水區(qū)。本實(shí)用新型的試紙條通過雙面膠帶或粘膠組成的粘膠層粘連在塑料盒底座上。
本實(shí)用新型在加樣區(qū)靠近層析膜的位置為吸附有指示劑為膠體金標(biāo)記的羊抗人或鼠抗人IgG二抗為佳。
本實(shí)用新型的反應(yīng)結(jié)合區(qū)可以是孔徑為5～8μm混合纖維素或硝酸纖維素層析膜。
使用時(shí)，在加樣區(qū)滴上一滴人唾液，等唾液全部吸入后，滴加兩滴PBS-Tween 20磷酸緩沖液，約2～3分鐘后，從觀察窗中可以觀察到，質(zhì)控線上出現(xiàn)一條紅線，陽性樣品在檢測(cè)線上還會(huì)出現(xiàn)一條紅線。
使用本實(shí)用新型的華支睪吸蟲免疫膠體金快速檢測(cè)盒檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)對(duì)象是人唾液中華支睪吸蟲成蟲特異的IgG，被檢測(cè)者不必有任何創(chuàng)傷，只需要一滴唾液即可。本實(shí)用新型同時(shí)還具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)快速、微量準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)實(shí)用、便于保存、適合現(xiàn)場(chǎng)使用等優(yōu)點(diǎn)。
圖2為本實(shí)用新型的示意圖。
圖中，(1)為盒蓋，(2)為底座，(3)為加樣孔，(4)為觀察窗，(5)為試紙條，(6)為粘膠層，(7)加樣區(qū)，(8)檢測(cè)線T，(9)質(zhì)控線C，(10)吸水區(qū)。
如

圖1所示，本實(shí)用新型的小塑料盒有盒蓋(1)和底座(2)，其中試紙條(5)通過雙面膠帶或粘膠組成的粘膠層(6)粘連在塑料盒底座(2)上，試紙條底層為塑料薄片，其上層對(duì)應(yīng)盒蓋加樣孔的一側(cè)為有大容量吸水紙的吸附有指示劑為膠體金標(biāo)記的羊抗人或鼠抗人IgG的二抗的加樣區(qū)(7)，對(duì)應(yīng)盒蓋的中部觀察窗部位為反應(yīng)結(jié)合區(qū)，為層析膜，其上設(shè)有檢測(cè)試劑為華支睪吸蟲成蟲的抗原成分的檢測(cè)線T(8)，以及加有質(zhì)控試劑為人的IgG的質(zhì)控線C(9)，在遠(yuǎn)加樣區(qū)(7)側(cè)。
本實(shí)用新型的檢測(cè)線的孔徑為5～8μm。
本實(shí)用新型的反應(yīng)結(jié)合區(qū)的孔徑為5～8μm。
本實(shí)用新型的試紙條的加樣區(qū)(7)的對(duì)側(cè)可設(shè)置有大容量吸水紙的吸水區(qū)(10)。
由于華支睪吸蟲是通過消化道感染的寄生蟲病，進(jìn)入消化道的成蟲經(jīng)過胃和小腸的消化作用，突破囊壁，經(jīng)小腸進(jìn)入肝膽管發(fā)育成熟。華支睪吸蟲成蟲的蟲體體表的脫落抗原和分泌排泄抗原進(jìn)入肝臟，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生IgG。因此，可以以華支睪吸蟲成蟲抗原成分作為檢測(cè)試劑，予以檢測(cè)。
使用時(shí)，在加樣區(qū)滴上一滴人唾液，等唾液全部吸入后，滴加兩滴加有PBS-TWEEN 20磷酸緩沖液，樣品中IgG與膠體金標(biāo)記的IgG的抗體結(jié)合成抗體一二抗一膠體金免疫復(fù)合物，并在毛細(xì)管作用下展開。經(jīng)展開，該復(fù)合物被固定在檢測(cè)線上的華支睪成蟲抗原特異結(jié)合，在檢測(cè)線處富集，這是由于形成了膠體金抗原抗體配體，因而如人抗華支睪成蟲的抗原的抗體為陽性，則檢測(cè)線顯紅色；而游離的膠體金標(biāo)記的二抗繼續(xù)前移，在含有人IgG的質(zhì)控線上富集，使得質(zhì)控線顯紅色；質(zhì)控線顯色，表明試劑盒的質(zhì)量合格。
權(quán)利要求1.一種華支睪吸蟲免疫膠體金檢測(cè)盒，盒蓋的一側(cè)開有橢圓形或近圓形的加樣區(qū)，盒蓋的中部開有一長(zhǎng)條形的觀察窗，小盒有盒蓋和底座，其特征在于有試紙條通過雙面膠帶或粘膠組成的粘膠層粘連在塑料盒底座上，試紙條底層為塑料薄片，其上對(duì)應(yīng)盒蓋加樣孔的一側(cè)為有大容量吸水紙的吸附有指示劑為膠體金標(biāo)記的人的IgG的羊抗人或鼠抗人抗體的加樣區(qū)，對(duì)應(yīng)盒蓋的中部觀察窗部位為反應(yīng)結(jié)合區(qū)，為層析膜，其上設(shè)有檢測(cè)試劑為華支睪吸蟲成蟲的抗原成分的檢測(cè)線T，以及加有質(zhì)控試劑為與人的IgG的質(zhì)控線C，其中檢測(cè)線T在近加樣區(qū)側(cè)，質(zhì)控線C在遠(yuǎn)加樣區(qū)側(cè)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的華支睪吸蟲免疫膠體金檢測(cè)盒，其特征在于檢測(cè)線的孔徑為5～8μm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的華支睪吸蟲免疫膠體金檢測(cè)盒，其特征在于反應(yīng)結(jié)合區(qū)的孔徑為5～8μm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的華支睪吸蟲免疫膠體金檢測(cè)盒，其特征在于加樣區(qū)的對(duì)側(cè)設(shè)置有大容量吸水紙的吸水區(qū)。
專利摘要一種華支睪吸蟲成蟲免疫膠體金檢測(cè)盒，盒蓋的一側(cè)開有橢圓形或近圓形的加樣區(qū)，盒蓋的中部開有一長(zhǎng)條形的觀察窗，試紙條通過雙面膠帶或粘膠組成的粘膠層粘連在塑料盒底座上，試紙條底層為塑料薄片，其上層對(duì)應(yīng)盒蓋加樣孔的一側(cè)為有大容量吸水紙的吸附有膠體金標(biāo)記的人的IgG的羊抗人或鼠抗人抗體的加樣區(qū)，對(duì)應(yīng)盒蓋的中部觀察窗部位為反應(yīng)結(jié)合區(qū)，其上設(shè)有加有檢測(cè)試劑為華支睪吸蟲成蟲的抗原成分的檢測(cè)線T，以及加有質(zhì)控試劑為人的IgG的質(zhì)控線C，其中檢測(cè)線T在近加樣區(qū)側(cè)，質(zhì)控線C在遠(yuǎn)加樣區(qū)側(cè)，本實(shí)用新型提供了一種敏感、特異、簡(jiǎn)便、快速、廉價(jià)、適合現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用的技術(shù)手段。
文檔編號(hào)G01N33/543GK2604687SQ03224469
公開日2004年2月25日 申請(qǐng)日期2003年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月24日
發(fā)明者余新炳, 胡旭初, 徐勁, 陳守義 申請(qǐng)人:中山大學(xué)