專利名稱：免疫磁性微球熒光光纖流動分析儀的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及醫(yī)藥、環(huán)保、食品、國防、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)的免疫分析測定儀，特別是集熒光免疫分析、光纖傳感器、流動分析、免疫磁珠分離于一體的分析儀器。
在現(xiàn)有技術(shù)中(1)用于放射免疫法的γ-計數(shù)儀等放射性計量測定設(shè)備，價格昂貴，少則幾十萬，多則上百萬，所涉及的同位素有放射性污染，給操作人員及環(huán)境帶來極大的危害，國外對該方法及儀器已逐漸趨于淘汰。(2)用于酶聯(lián)免疫法的酶標儀，難于實現(xiàn)實時、在位，自動化，所用酶易失活，也有儀器昂貴的不足。(3)用于熒光免疫法的熒光儀，未能實現(xiàn)實時、在線、大批量檢測，自動進樣和自動檢測均未實現(xiàn)，且測定周期長。(4)新近發(fā)展起來的光纖免疫傳感器，多是將光纖探頭上固定有特異抗體或抗原，經(jīng)反應(yīng)、測定后需將探頭再生處理，這就限制了該類儀器使用的連續(xù)性和自動化。如一種可在位熒光光纖傳感器(Bright FV，et al.Anal Chem.，1990，621065-1069)，與毛細管進樣技術(shù)結(jié)合，雖可實行在位及遠距高遙測，但存在抗體進樣與抗原的結(jié)合與解離，即再生問題，難以普及。又如一種測定有機農(nóng)藥硫磷的熒光光纖傳感器(Bowyer JR，etal.Analyst，1991，116117-122)，同樣需對傳感器探頭進行再生處理，致使方法重現(xiàn)性不理想，檢測周期較長，通用性差，無法實現(xiàn)自動化，更難實現(xiàn)批量樣本的快速分析。
本實用新型正是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處而提供一種可自動、原位、在線分析的免疫磁性微球熒光光纖流動分析儀。
本設(shè)計流動注射分析儀、可控電磁場、反應(yīng)圈，熒光光纖流通池、激發(fā)光、光纖固定架、光纖傳感器、熒光分光光度計及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計算機或記錄儀組成。本設(shè)計解決的是連接流動注射分析儀和熒光分光光度計的可控電磁場、反應(yīng)圈、熒光光纖流通池、光纖固定架及光纖傳感器的結(jié)構(gòu)，且設(shè)計如下(1)可控電磁場的磁場安匝＝4000匝，電流I＝1.0A，磁場感應(yīng)強度變化幅度為0-9980(GS)；(2)反應(yīng)圈為樣品通道，可以是管形，也可以是螺旋形；(3)熒光光纖流通池由有墊圈的固定塞的流動池體、Y形光纖束及光纖固定螺母組成，而Y形光纖束的夾角為10°-20°；流動池可以是活塞式園柱形，也可以是園盤形和Z形；(4)光纖固定架由激發(fā)光、45°平面境，凸透鏡、激發(fā)光纖、光纖頭，樣品熒光、熒光光纖、柱型透鏡組成。光纖、平鏡、透鏡由螺釘固定。其工作原理是是由流動注射分析儀通過可控電磁場控制的反應(yīng)圈，與熒光光纖流通池相連，光源發(fā)出的激發(fā)光通過光纖固定架上的光纖傳感器與熒光分光光度計相連接，將熒光分光光度計的讀數(shù)轉(zhuǎn)換成數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)上的響應(yīng)值，其中流動注射分析儀、熒光分光光度計、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)如計算機或記錄儀為現(xiàn)有技術(shù)中的商品儀器，其操作按其說明書要求即可。
本實用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點1.本設(shè)計集熒光免疫分析、光纖傳感趨、流動分析、免疫磁珠分離于一體的儀器，操作簡單。
2.具有通用性(1)結(jié)合免疫磁珠的吸附、富集、分高功能可實現(xiàn)在流路中固相抗原抗體結(jié)合態(tài)和游離態(tài)標記物的自動在線分離，實現(xiàn)快速熒光測定；(2)若為均相的免疫測定，可不采用載體磁珠，作為普通熒光光纖流動分析；(3)若在光纖探頭上覆蓋一層特殊的敏感膜，又可成為熒光光纖免疫傳感流動系統(tǒng)，實現(xiàn)一機多能；(4)使用本設(shè)計，可對多種蛋白(抗原、抗體、藥物等)進行標記，可提供與本設(shè)計相匹配的測定藥盒。
3.本設(shè)計取樣、混合、反應(yīng)均可自動化，反應(yīng)可在流路中進行(可運行，可倍流)，準確控制反應(yīng)時間。
以下是本實用新型說明書附圖的圖面說明

圖1是本實用新型的各儀器的連接框圖。
圖2是本實用新型的各儀器的連接示意圖。
圖中R1、R2為試劑、C為截流、S為樣品。
圖3是本實用新型管形反應(yīng)圈的剖視圖。
圖4是本實用新型螺旋形反應(yīng)圈的示意圖。
圖5是本實用新型圓盤式流通池的剖視圖。
圖6是本實用新型圓盤式流通池體的局部左視圖。
圖7是本實用新型活塞式園柱式流通池的剖視圖。
圖8是本實用新型圓盤Z形通池的剖視圖。
圖9是本實用新型光纖固定架及光路示意圖。
本實用新型以下將結(jié)合附圖和實施例作進一步詳述實施例1.一種免疫磁性微球熒光光纖流動分析儀，由流動注射分析儀〔1〕、可控電磁場〔2〕、反應(yīng)圈〔3〕，熒光光纖流通池〔4〕、激發(fā)光〔5〕、光纖固定架〔6〕、光纖傳感器〔7〕、熒光分光光度計〔8〕及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)〔9〕計算機或記錄儀組成，其特別之處在于連接流動注射分析儀〔1〕和熒光分光光度計〔8〕的可控電磁場〔2〕、反應(yīng)圈〔3〕、熒光光纖流通池〔4〕、光纖固定架〔6〕及光纖傳感器〔7〕的結(jié)構(gòu)是(1)可控電磁場〔2〕的磁場安匝＝4000匝，電流I＝1.0A，磁場感應(yīng)強度變化幅度為0-9980(GS)。(2)反應(yīng)圈〔3〕為樣品通道，可以是管形，也可以是螺旋形。(3)熒光光纖流通池〔4〕由有墊圈〔11〕的固定塞〔12〕的流動池體〔13〕、Y形光纖束〔14〕及光纖固定螺母〔15〕組成，而Y形光纖束的夾角為10°-20°；流動池〔13〕可以是活塞式園柱形，也可以是園盤形和Z形。(4)光纖固定架〔6〕由激發(fā)光〔5〕、45°平面鏡〔16〕，凸透鏡〔17〕、激發(fā)光纖〔18〕、光纖頭〔19〕，樣品熒光〔20〕、、熒光光纖〔21〕、柱型透鏡〔22〕組成，光纖、平鏡、透鏡由螺釘固定。
本設(shè)計是將現(xiàn)有技術(shù)中的流動注射分析儀、熒光分光光度計及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計算機或記錄儀加設(shè)計部分組合成了可自動、原位、在線分析的免疫磁性微球熒光光纖流動分析儀。工作的原理如下流動注射分析儀〔1〕通過可控電磁場〔2〕控制的反應(yīng)圈〔3〕，與熒光光纖流通池〔4〕相連，光源發(fā)出的激發(fā)光〔5〕通過光纖固定架〔6〕上的光纖傳感器〔7〕與熒光分光光度計〔8〕相連接，將熒光分光光度計表頭讀數(shù)轉(zhuǎn)換成數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)〔9〕上的響應(yīng)值(1)流動注射分析儀〔1〕是由1個6通道10檔調(diào)速，速度5-80轉(zhuǎn)/分的蠕動泵〔10〕、一個多功能閥〔11〕和通用化學(xué)塊(儀器原有的集成電路)組成，完成試劑、試樣、免疫磁珠的自動注入、匯合、反應(yīng)、分離。(2)熒光分光光度計〔8〕是將被測物產(chǎn)生的熒光光強信號通過光電轉(zhuǎn)化為電信號，被微電流計檢測。(3)可控電磁場〔2〕的磁場安匝＝4000匝，電流I＝1.0A，磁場感應(yīng)強度變化幅度為0-9980(GS)，通過1個可調(diào)電路對電流的調(diào)節(jié)，使電磁場強度對反應(yīng)圈〔3〕中的免疫磁殊的吸附、富集、分離可控。(4)反應(yīng)圈〔3〕為樣品通道，可以是管形也可以是螺旋形。(5)熒光光纖流通池〔4〕由進、出帶墊圈〔11〕的固定塞〔12〕的流動池體〔13〕、Y形光纖束〔14〕及光纖固定螺母〔15〕組成，被測物在此受激發(fā)光〔4〕照射，發(fā)出熒光；其中Y形光纖束的夾角為10°-20°。流動池可以是活塞式園柱形，也可以是園盤形和Z形。(6)光纖固定架〔6〕是使激發(fā)光〔5〕垂直射入到45°的平面鏡〔16〕，通過凸透鏡〔17〕聚焦于激發(fā)光纖〔18〕中，送到樣品光纖頭〔19〕，再將樣品產(chǎn)生的熒光〔20〕通過樣品光纖頭導(dǎo)入熒光光纖〔21〕，通過柱型透鏡〔22〕得到熒光信號，光纖、平鏡、透鏡由螺釘固定。(7)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)〔9〕是將熒光分光光度計上的讀數(shù)進行處理，并記錄保存；該系統(tǒng)可以是計算機，也可以是記錄儀。
本設(shè)計還可以有如下的結(jié)構(gòu)改變?nèi)鋭颖每梢允侵鞅脝为毷褂?，可以主泵與1個4通道，其速度為10-60轉(zhuǎn)/分的副泵同時使用。
實施例2.使用本設(shè)計對以下樣品進行了檢測(1)肺炎支原體IgG抗體進行測定42人次臨床血清樣本，標準曲線r＝0.9930，血清樣本稀釋64倍后，仍能測得陰、陽性，且與FLISA法、熒光顯微鏡法比較，陰陽性符合第均＞94％。
(2)對人血清白蛋白(HSA)的測定(生物制劑)檢測下限為10-4g/ml，上限為40mg/ml，回收率為90.86～119.86％，精密度日內(nèi)RSD 2.17～6.31％，日間RSD 2.25～9.44％，與臨床現(xiàn)用方法(染料法)結(jié)果比較，r＝0.9847。
權(quán)利要求1.一種免疫磁性微球熒光光纖流動分析儀，由流動注射分析儀〔1〕、可控電磁場〔2〕、反應(yīng)圈〔3〕，熒光光纖流通池〔4〕、激發(fā)光〔5〕、光纖固定架〔6〕、光纖傳感器〔7〕、熒光分光光度計〔8〕及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)〔9〕計算機或記錄儀組成，其特征在于連接流動注射分析儀〔1〕和熒光分光光度計〔8〕的可控電磁場〔2〕、反應(yīng)圈〔3〕、熒光光纖流通池〔4〕、光纖固定架〔6〕及光纖傳感器〔7〕的結(jié)構(gòu)是1.1可控電磁場〔2〕的磁場安匝＝4000匝，電流I＝1.0A，磁場感應(yīng)強度變化幅度為0-9980(GS)；1.2反應(yīng)圈〔3〕為樣品通道，可以是管形，也可以是螺旋形；1.3熒光光纖流通池〔4〕由有墊圈〔11〕的固定塞〔12〕的流動池體〔13〕、Y形光纖束〔14〕及光纖固定螺母〔15〕組成，而Y形光纖束的夾角為10°-20°；流動池〔13〕可以是活塞式園柱形，也可以是園盤形和Z形；1.4光纖固定架〔6〕由激發(fā)光〔5〕、45°平面鏡〔16〕，凸透鏡〔17〕、激發(fā)光纖〔18〕、光纖頭〔19〕，樣品熒光〔20〕、、熒光光纖〔21〕、柱型透鏡〔22〕組成，光纖、平鏡、透鏡由螺釘固定。
專利摘要本設(shè)計由流動注射分析儀通過可控電磁場控制反應(yīng)圈,與熒光光纖流通池相連,光源發(fā)出的激發(fā)光通過光纖固定架上的光纖傳感器與熒光分光光度計相連接,將熒光分光光度計的讀數(shù)轉(zhuǎn)換成數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的響應(yīng)值。本設(shè)計取樣、混合、反應(yīng)均可自動化,反應(yīng)可在流路中進行(可運行,可倍流),準確控制反應(yīng)時間。使用本設(shè)計及與之匹配的試劑藥盒,可對多種蛋白(抗原、抗體、藥物等)進行標記,實現(xiàn)自動、原位、在線分析。
文檔編號G01N35/08GK2490584SQ00244650
公開日2002年5月8日 申請日期2000年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月13日
發(fā)明者何俊, 但德忠, 李毓琦 申請人:岳英