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一種制備納米尖端移液管的裝置及方法與流程

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一種制備納米尖端移液管的裝置及方法與流程

本發(fā)明涉及一種集微納毛細(xì)管拉制、濕法刻蝕和電流檢測(cè)于一體的制備納米尖端移液管的方法及系統(tǒng),屬于納米加工領(lǐng)域。



背景技術(shù):

隨著分析系統(tǒng)微型化、分析樣品微量化在分析化學(xué)中的迅速發(fā)展,納米尖端移液管逐漸進(jìn)入研究人員的視野中,納米尖端移液管的出現(xiàn)使研究人員對(duì)皮升甚至飛升體積液體的操控成為現(xiàn)實(shí)。同時(shí)納米尖端移液管在生物領(lǐng)域也得到了重視,尤其是在顯微操作技術(shù)中。顯微操作技術(shù)現(xiàn)被廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)生物學(xué)研究的多個(gè)重要領(lǐng)域,如細(xì)胞及染色體的顯微分離、細(xì)胞核移植、胚胎顯微操作、顯微注射及顯微受精等方面。在操作過(guò)程中,移液管尖端對(duì)細(xì)胞的損傷不可避免,尤其是體積較小的細(xì)胞,對(duì)移液管尖端的要求更高,損傷嚴(yán)重的細(xì)胞將會(huì)死亡。因此良好的移液管尖端不僅能夠提高操作效率,而且能夠減小對(duì)胚胎和細(xì)胞的損害,從而保證實(shí)驗(yàn)操作的順利進(jìn)行。由此可見(jiàn),納米尖端移液管的使用在生物分析領(lǐng)域具有非常重要的意義,而納米尖端移液管購(gòu)買(mǎi)或制作成本高、制作過(guò)程復(fù)雜、常規(guī)方法制作尖端尺寸較大等一直是亟待解決的問(wèn)題。

制作納米尖端移液管的原料一般是硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管或熔融石英毛細(xì)管,根據(jù)不同的研究目的,毛細(xì)管的規(guī)格有很多,它們的外徑、內(nèi)徑及壁厚有很大差別。常規(guī)制備納米尖端移液管的方法的流程包括拉針、斷針、磨針、拔尖。

首先,將毛細(xì)管置于拉針儀上,按照實(shí)驗(yàn)研究的需求,對(duì)拉針儀的參數(shù)進(jìn)行設(shè)定,按照設(shè)定的參數(shù)將毛細(xì)管拉斷,拉斷的毛細(xì)管將出現(xiàn)尖端。由于制作原料毛細(xì)管的種類(lèi)多樣,一般情況下,會(huì)出現(xiàn)拉制出來(lái)的毛細(xì)管尖端內(nèi)徑封閉或尖端尺寸較長(zhǎng)的問(wèn)題,不能直接進(jìn)行試驗(yàn)。因此,將拉制好的帶尖端的毛細(xì)管固定于煅針儀上,在電熱絲上做一玻璃珠,大小以剛蓋住電熱絲為宜,調(diào)節(jié)旋鈕到所需溫度,將拉好的玻璃管在所需內(nèi)徑處,與玻璃珠輕輕靠攏,此時(shí)輕踩腳控開(kāi)關(guān),使針與玻璃珠穩(wěn)定地接觸,待玻璃針有一個(gè)極小的擺動(dòng)時(shí),立即松開(kāi)腳控開(kāi)關(guān),此時(shí)玻璃珠會(huì)突然冷卻而收縮拉斷玻璃針。隨后將斷好的帶尖端的毛細(xì)管固定在磨針儀上,調(diào)節(jié)角度,先將轉(zhuǎn)速調(diào)到0,將視野調(diào)清,把毛細(xì)管尖端下降至剛好接觸磨石,調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速,在顯微鏡下觀察、磨針。將磨好的帶尖端的毛細(xì)管固定在鍛針儀上,在高倍鏡下將尖端靠近加熱過(guò)的鉑金絲或玻璃球,當(dāng)針尖微融時(shí),迅速拉開(kāi),拔出尖端。

制作出來(lái)的尖端外徑在納米級(jí)別的毛細(xì)管就被稱(chēng)為納米尖端移液管,這樣制作的缺點(diǎn)在于:毛細(xì)管的尖端尺寸較大,無(wú)法得到較小或很小的尺寸;步驟相對(duì)復(fù)雜。在此基礎(chǔ)上有研究人員為了得到較小尺寸的尖端,將拉制好的毛細(xì)管尖端,采用離子束轟擊刻蝕的方法,能夠得到較小尺寸通透性的尖端,但是該種方法成本較高,大部分實(shí)驗(yàn)室無(wú)法制作。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)提供一種集微納毛細(xì)管拉制、濕法刻蝕和電流檢測(cè)于一體的制備納米尖端移液管的方法及系統(tǒng),通過(guò)該系統(tǒng),能夠成功檢測(cè)到氫氟酸將石英毛細(xì)管尖端由封閉刻蝕通的電流信號(hào)變化,在不同的電流值下終止氫氟酸刻蝕,從而可控制備納米尖端移液管。

為了實(shí)現(xiàn)以上發(fā)明目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下。

一種集微納毛細(xì)管拉制、濕法刻蝕和電流檢測(cè)于一體的制備納米尖端移液管的系統(tǒng),其特征在于,包括獨(dú)立的:毛細(xì)管通透性驗(yàn)證裝置(圖1)、毛細(xì)管拉制系統(tǒng)(圖2)、毛細(xì)管刻蝕及電流回路檢測(cè)系統(tǒng)(圖3)。

毛細(xì)管通透性驗(yàn)證裝置(圖1)包括高壓氣瓶(1)、小鋼瓶(2)、待拉制毛細(xì)管(3)、離心管(4);在該裝置中小鋼瓶(2)中為空,離心管(4)中裝有超純水,將待拉制毛細(xì)管(3)一端在小鋼瓶(2)中,另一端伸入到在離心管(4)的超純水中,高壓氣瓶(1)與鋼瓶(2)連通,可向小鋼瓶(2)中通入氮?dú)?,觀察待拉制毛細(xì)管(3)在離心管(4)中有明顯氣泡冒出,證明該待拉制毛細(xì)管(3)良好,可用于后面的拉制;

毛細(xì)管拉制系統(tǒng)(圖2)包括高壓氣瓶(1)、小鋼瓶(2)、待拉制毛細(xì)管(3)、小離心管(5)、毛細(xì)管拉制器(6);小離心管(5)中放有一半體積的鹽酸(HCl)溶液,將小離心管(5)放入小鋼瓶(2)中,待拉制毛細(xì)管(3)一端浸在小鋼瓶(2)中的小離心管(5)的鹽酸溶液中,另一端固定在毛細(xì)管拉制器(6)上,高壓氣瓶(1)與小離心管(5)連通,用高壓氣瓶(1)向小鋼瓶(2)的小離心管(5)中通入氮?dú)?,通一段時(shí)間的氮?dú)?,?dāng)待拉制毛細(xì)管(3)中充滿(mǎn)鹽酸溶液后,為避免在拉制過(guò)程中鹽酸揮發(fā)及在內(nèi)徑中形成氣柱,在連續(xù)通氮?dú)獾臈l件下,將待拉制毛細(xì)管(3)拉斷,得到帶尖端毛細(xì)管,用于后續(xù)的濕法刻蝕;

毛細(xì)管刻蝕及電流回路檢測(cè)系統(tǒng)(圖3)包括高壓輸液泵(7)、二通(8)、Peek管(9)、四通(10)、第一Pt電極(11)、第二Pt電極(12)、離心管(13)、毛細(xì)管(14)、數(shù)字源表(15)、數(shù)字源表輸出端線(xiàn)(16)、數(shù)字源表輸入端線(xiàn)(17)、帶尖端毛細(xì)管(A);高壓輸液泵(7)的流動(dòng)相為KCl溶液,高壓輸液泵(7)依次經(jīng)由二通(8)、Peek管與四通(10)的一個(gè)端口連接,二通(8)與四通(10)之間連有一根Peek管(9)因Peek管(9)是絕緣的,主要用于隔斷二通(8)前段部分的金屬管對(duì)檢測(cè)電流的干擾;毛細(xì)管(14)安裝到四通(10)的另一個(gè)端口,此端口位置與Peek管相對(duì),毛細(xì)管(14)主要用于在給定的流速下,使泵內(nèi)的壓力平衡穩(wěn)定;第一Pt電極(11)固定在四通(10)的第三個(gè)端口內(nèi),可與流動(dòng)相中的KCl溶液相接觸;四通(10)的第四個(gè)端口通過(guò)帶尖端毛細(xì)管(A)與離心管(13)連接,離心管(13)中是含有HF和KCl的溶液,HF可以刻蝕毛細(xì)管尖端,KCl可以起導(dǎo)電作用;離心管(13)同時(shí)還經(jīng)由第二Pt電極(12)與數(shù)字源表輸出端線(xiàn)(16)連接,數(shù)字源表輸出端線(xiàn)(16)與數(shù)字源表(15)連接;第一Pt電極(11)通過(guò)數(shù)字源表輸入端線(xiàn)(17)與數(shù)字源表(15)連接;

拉制完的內(nèi)徑充滿(mǎn)鹽酸溶液的帶尖端的毛細(xì)管(A),由于其被拉制完成后尖端內(nèi)徑多是封閉的,故將帶尖端的毛細(xì)管(A)無(wú)尖端的部分固定在與第一Pt電極(11)相對(duì)的四通(10)的第四個(gè)端口內(nèi),帶尖端的毛細(xì)管(A)無(wú)尖端部分的端面與流動(dòng)相中的KCl溶液相接觸,帶尖端的毛細(xì)管(A)的尖端浸入離心管(13)的HF、KCl的溶液中,第二Pt電極(12)同樣浸在離心管(13)的HF、KCl的溶液中;將數(shù)字源表輸入端線(xiàn)(17)與第一Pt電極(11)相連,數(shù)字源表輸出端線(xiàn)(16)與第二Pt電極(12)相連,通過(guò)數(shù)字源表(15)在第一Pt電極(11)、第二Pt電極(12)之間施加一個(gè)電壓;由于開(kāi)始時(shí)帶尖端的毛細(xì)管(A)的尖端內(nèi)徑封閉,所以沒(méi)有電流被檢測(cè)到(因?yàn)橥饨鐚?duì)數(shù)字源表(15)有一定干擾,所以斷路時(shí)穩(wěn)定后電流并非完全為0,而是有一個(gè)小波動(dòng),但這并不是通路時(shí)的電流,也并不影響檢測(cè),可以理解為電流背景,檢測(cè)過(guò)程中盡量不要碰觸數(shù)字源表(15)的輸入輸出線(xiàn)),一旦帶尖端的毛細(xì)管(A)封閉的尖端被離心管(13)的HF溶液刻蝕變通,第一Pt電極(11)、四通(10)內(nèi)的流動(dòng)相、帶尖端的毛細(xì)管(A)、離心管(13)的HF、KCl的溶液及第二Pt電極(12)就構(gòu)成一個(gè)通路,靈敏的數(shù)字源表(15)將檢測(cè)到電流由無(wú)到有、有小變大的過(guò)程。

想要得到不同尺寸的尖端,可以在不同的電流下將帶尖端的毛細(xì)管(A)的尖端從離心管(13)中取出,用堿溶液終止HF溶液對(duì)毛細(xì)管(A)的尖端刻蝕。

采用上述系統(tǒng)進(jìn)行微納毛細(xì)管制備納米尖端移液管的方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)配置KCl溶液,濃度在0.001-0.3mol/L之間,過(guò)濾兩遍;配置鹽酸(HCl)溶液,濃度小于1mol/L,使用前需過(guò)濾;配置NaOH溶液,濃度小于1mol/L;配置刻蝕液(KCl溶液+HF溶液的混合液),配置完成的刻蝕液中KCl溶液濃度在0.001-0.3mol/L之間,含HF的量為0.1%-15%;準(zhǔn)備兩根鉑電極(11、12)

(2)將高壓輸液泵(7)的流動(dòng)相換成KCl溶液;

(3)利用毛細(xì)管通透性驗(yàn)證裝置(圖1)驗(yàn)證待拉制毛細(xì)管(3)的通透性良好后進(jìn)行下一步;

(4)利用毛細(xì)管拉制系統(tǒng)(圖2)將待拉制毛細(xì)管(3)拉斷得到帶尖端的毛細(xì)管,備用;

(5)調(diào)節(jié)數(shù)字源表(15)穩(wěn)定后關(guān)閉備用,組裝毛細(xì)管刻蝕及電流回路檢測(cè)系統(tǒng)(圖3),在將帶尖端的毛細(xì)管(A)的尖端放入離心管(13)溶液前,打開(kāi)數(shù)字源表(15);

(6)將帶尖端的毛細(xì)管(A)的尖端放入離心管(13)的溶液中,觀察數(shù)字源表(15)的電流示數(shù)變化;

(7)發(fā)現(xiàn)數(shù)字源表(15)的電流有明顯變化;檢測(cè)的電流由無(wú)到有,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在電流為某一數(shù)值時(shí)將帶尖端的毛細(xì)管(A)的尖端從離心管(13)中取出,放入配置的NaOH溶液中一段時(shí)間,再放入超純水中保護(hù);

(8)將高壓輸液泵(7)的流動(dòng)相換成超純水,用水沖洗高壓輸液泵(7)和制備的毛細(xì)管;

(9)用氮?dú)鈱⒅苽涞拿?xì)管吹干,放于真空干燥箱中,在真空或惰性氣體氣氛中保存,待用。

本發(fā)明將濕法刻蝕與電流檢測(cè)相結(jié)合,可實(shí)現(xiàn):利用各種規(guī)格的玻璃毛細(xì)管和熔融石英毛細(xì)管來(lái)制備通透的納米級(jí)別尖端的移液管。本發(fā)明可制備:錐尖外徑小于1μm的通透性納米移液管尖端,能夠精確移取皮升級(jí)甚至飛升體積的液體。本方法將濕法刻蝕與電流檢測(cè)相結(jié)合,與傳統(tǒng)的制作方法和現(xiàn)有的其它方法相比,簡(jiǎn)便、靈敏、可控性強(qiáng),提高了取液精度,由于制備的尖端尺寸較小,因此大大減小了對(duì)操作對(duì)象的損傷。本法所制備的納米尖端移液管具有廣泛用途,如:可用于精確移液、顯微操作,電化學(xué)檢測(cè)電極的制備、膜片鉗、質(zhì)譜進(jìn)樣等方面。

本發(fā)明由于采用以上技術(shù)方案,其具有以下優(yōu)點(diǎn):

(1)制備方法與系統(tǒng)簡(jiǎn)便。減少了制備步驟,避免使用較多的儀器,操作人員容易掌握。

(2)數(shù)字源表的靈敏性高。能夠檢測(cè)到10pA(10-11)級(jí)的電流,故決定了該制備方法具有較強(qiáng)的靈敏性,數(shù)字源表的靈敏度直接決定了該實(shí)驗(yàn)的成敗。

(3)可控性強(qiáng)。通過(guò)調(diào)節(jié)刻蝕液中HF的濃度,來(lái)調(diào)節(jié)刻蝕毛細(xì)管速度,再通過(guò)檢測(cè)電流的變化,電流由無(wú)到有,證明了毛細(xì)管由封閉到通的變化;電流由小變大,證明了毛細(xì)管內(nèi)徑開(kāi)口由小變大的過(guò)程。其它條件不變的條件下,在不同的電流下終止刻蝕,得到的毛細(xì)管尖端尺寸不同,達(dá)到可控制備的目的。

(4)成本較低。與干法(離子束)刻蝕毛細(xì)管尖端來(lái)得到較小的通透性納米尖端的方法相比,該方法大大減小了制作成本。

(5)在生物中,制備的納米尖端移液管對(duì)操作對(duì)象的損傷小,提高了操作對(duì)象的存活率,可推進(jìn)醫(yī)學(xué)的進(jìn)步;

(6)外該方法還可靈敏地檢測(cè)已制備的納米尖端移液管的通透性;

(7)本方法所制尖端具有多種用途,比如:可用于化學(xué)中的精準(zhǔn)取樣,尤其對(duì)比較珍貴且用量很少的液體樣品;可用于顯微操作中的取樣/進(jìn)樣針;可用于電化學(xué)檢測(cè)微電極的制備;可用于膜片鉗中,檢測(cè)細(xì)胞的離子通道;也可作為質(zhì)譜進(jìn)樣針使用等。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明中驗(yàn)證毛細(xì)管通透性裝置的示意圖;

圖2是本發(fā)明中毛細(xì)管拉制系統(tǒng)的示意圖;

圖3是本發(fā)明中毛細(xì)管刻蝕及電流回路檢測(cè)系統(tǒng)的示意圖;

圖4是本發(fā)明具體實(shí)施方式中,用內(nèi)徑為100μm、外徑360μm的毛細(xì)管制備出的尖端開(kāi)口橫切面及側(cè)面掃描電鏡圖;

圖5是本發(fā)明具體實(shí)施方式中,用內(nèi)徑為75μm、外徑360μm的毛細(xì)管制備出的尖端開(kāi)口橫切面及側(cè)面掃描電鏡圖;

圖6是本發(fā)明具體實(shí)施方式中,用內(nèi)徑為25μm、外徑360μm的毛細(xì)管制備出的尖端開(kāi)口橫切面及側(cè)面掃描電鏡圖;

圖7是本發(fā)明具體實(shí)施方式中,用內(nèi)徑為5μm、外徑360μm的毛細(xì)管制備出的尖端開(kāi)口橫切面及側(cè)面掃描電鏡圖;

圖8、9、10是本發(fā)明具體實(shí)施方式中,用內(nèi)徑為0.9μm、外徑360μm的毛細(xì)管制備出的不同尺寸的尖端開(kāi)口橫切面及側(cè)面掃描電鏡圖;

圖11是本發(fā)明具體實(shí)施方式中用內(nèi)徑為0.9μm、外徑360μm的毛細(xì)管制備的尖端,在熒光倒置顯微鏡100倍油鏡下接近并扎取動(dòng)物細(xì)胞的顯微圖;

1高壓氣瓶,2小鋼瓶,3待拉制毛細(xì)管,4、13離心管,5小離心管,6毛細(xì)管拉制器,7高壓輸液泵,8二通,9Peek管,10四通,11第一Pt電極、12第二Pt電極,14毛細(xì)管,15數(shù)字源表,16數(shù)字源表輸出端線(xiàn),17數(shù)字源表輸入端線(xiàn),A帶尖端毛細(xì)管。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖,對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例,都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1

本發(fā)明實(shí)施例提供一種集微納毛細(xì)管拉制、濕法刻蝕和電流檢測(cè)于一體的制備納米尖端移液管的方法及系統(tǒng),現(xiàn)以外徑360μm,內(nèi)徑0.9μm的微納毛細(xì)管來(lái)制備納米尖端移液管為例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述,具體實(shí)施步驟如下:

S1.配置0.1mol/L的KCl溶液,過(guò)濾兩遍;配置0.2mol/L的HCl溶液,使用前過(guò)濾;配置0.1mol/L的NaOH溶液;配置HF濃度為2%-5%的刻蝕液(稀KCl溶液+原HF溶液的混合液);準(zhǔn)備兩根鉑電極(11、12);

S2.將高壓輸液泵(7)的流動(dòng)相換成0.1mol/L的KCl溶液;

S3.利用毛細(xì)管通透性驗(yàn)證裝置(圖1)驗(yàn)證外徑為360μm,內(nèi)徑為0.9μm的微納毛細(xì)管(3)的通透性,設(shè)定高壓氣瓶(1)分閥壓力約為1000psi,當(dāng)離心管(4)中有明顯氣泡冒出時(shí),證明毛細(xì)管良好;

S4.利用毛細(xì)管拉制系統(tǒng)(圖2)將外徑為360μm,內(nèi)徑為0.9μm的微納毛細(xì)管(3)拉斷備用,設(shè)定高壓氣瓶(1)分閥壓力也約為1000psi,設(shè)定毛細(xì)管拉制器(6)的參數(shù)為HEAT:360FIL:2VEL:50DEL:120PUL:100,設(shè)定高壓輸液泵(7)的流速為0.1mL/s,;

S5.調(diào)節(jié)數(shù)字源表(15)穩(wěn)定后(因?yàn)槭芡饨绛h(huán)境干擾,10pA位置的的值在上下波動(dòng),不影響檢測(cè),可以理解為電流背景),關(guān)閉備用,組裝毛細(xì)管刻蝕及電流回路檢測(cè)系統(tǒng)(圖3),在將毛細(xì)管(A)的尖端放入離心管(13)的刻蝕溶液中前,打開(kāi)數(shù)字源表(15);

S6.將毛細(xì)管(A)的尖端放入離心管(13)的溶液中,觀察數(shù)字源表(15)的電流示數(shù)變化;

S7.發(fā)現(xiàn)數(shù)字源表(15)的電流有明顯變化,檢測(cè)的電流由無(wú)到有;根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,在電流為某一數(shù)值時(shí)將毛細(xì)管(A)的尖端從離心管(13)中取出,放入配置的0.1mol/L的NaOH溶液中2-5min,再放入超純水中保護(hù);

S8.將高壓輸液泵(7)的流動(dòng)相換成超純水,用大量的水沖洗高壓輸液泵(7)和制備的毛細(xì)管(A);

S9.用氮?dú)鈱⒅苽涞拿?xì)管(A)吹干,放于超精間的真空干燥箱中,在真空或惰性氣體氣氛中保存,避免制備的毛細(xì)管尖端被灰塵或其它微小物質(zhì)堵塞,備用。

按照實(shí)施例的方法,還可用外徑360μm,內(nèi)徑分別為5μm、25μm、75μm、100μm或其它規(guī)格的的微納毛細(xì)管來(lái)制備納米尖端移液管。根據(jù)毛細(xì)管的規(guī)格不同,需要適當(dāng)調(diào)節(jié)所使用溶液的濃度及操作儀器的參數(shù);其它步驟基本不變。

按照實(shí)施例的方法制備得到的尖端用于動(dòng)物細(xì)胞的活體取樣

S1.取已分散好的動(dòng)物細(xì)胞懸浮液,滴加少量到蓋玻片上;

S2.將蓋玻片放于熒光倒置顯微鏡的載物臺(tái)上,及時(shí)用移液槍補(bǔ)充液體到蓋玻片上,保持蓋玻片細(xì)胞的活性;

S3.將制備的毛細(xì)管尖端夾于三維調(diào)節(jié)架的夾具上,毛細(xì)管尖端朝向蓋玻片,另一端接通電滲泵;

S4.顯微鏡下操作尖端接近并刺入動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行取樣。(參見(jiàn)圖11)

需要說(shuō)明的是,上述方法和系統(tǒng)內(nèi)的各單元之間的相互配合、執(zhí)行過(guò)程等內(nèi)容,由于與本發(fā)明方法實(shí)施例基于同一構(gòu)思,具體內(nèi)容可參見(jiàn)本發(fā)明方法實(shí)施例中的敘述,此處不再贅述。

本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以理解上述實(shí)施例的方法具有簡(jiǎn)便、靈敏、可控性強(qiáng)、成本低等優(yōu)點(diǎn),并且容易被操作者所掌握。

以上對(duì)本發(fā)明實(shí)施例所提供的一種集微納毛細(xì)管拉制、濕法刻蝕和電流檢測(cè)于一體的制備納米尖端移液管的方法及系統(tǒng),進(jìn)行了詳細(xì)介紹,本文中應(yīng)用了具體個(gè)例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式及所得產(chǎn)品進(jìn)行了闡述,以上實(shí)施例的說(shuō)明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想;同時(shí),對(duì)于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員,依據(jù)本發(fā)明的思想,在具體實(shí)施方式及應(yīng)用范圍上均會(huì)有改變之處,綜上所述,本說(shuō)明書(shū)內(nèi)容不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。

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