專利名稱：一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌及菌劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于環(huán)境修復(fù)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解菌劑及制備方法。
背景技術(shù)：
隨著人類石油勘探開發(fā)活動的不斷增強，環(huán)境也承受著巨大的石油污染風(fēng)險。大量的石油污染物通過意外事故等途徑進入到環(huán)境中，造成石油污染。石油污染往往發(fā)生在高鹽環(huán)境中，形成石油污染高鹽環(huán)境，例如石油污染鹽潰化土壤、石油污染高鹽廢水和石油污染海水。我國多個大型油田由于其所處的特殊地理位置，土壤都有不同程度地鹽潰化。石油開采過程中的意外泄露極易造成石油污染，形成石油污染鹽潰化土壤。此外，石油勘探開發(fā)過程中產(chǎn)生的采油廢水不僅含有大量的多環(huán)芳烴和石油烴組分還含有大量NaCl和Na2S04等成分。如果不能及時處理將會形成石油污染高鹽廢水。大型油輪的意外泄漏造成的海面溢油同樣能夠形成石油污染高鹽環(huán)境。石油污染鹽潰化土壤、石油污染高鹽廢水和石油污染海水均具有鹽度高、難以生物降解的特點。在低鹽環(huán)境中，石油污染一旦發(fā)生，環(huán)境中的土著石油烴降解菌大量繁殖，在利用石油烴為碳源進行生長代謝的同時逐漸降解石油烴，最終消除石油污染。例如:中國專利(20 0910074535)公開了一種應(yīng)用原生動物纖毛蟲降解石油的方法；中國專利(201010550531)公開了一種采用綠膿桿菌、藤黃微球菌、枯草芽孢桿菌、瓊氏不動桿菌降解井場含油污泥的方法。然而在高鹽環(huán)境中，石油烴降解菌等微生物受到鹽分脅迫，特別是石油烴降解代謝活動受到嚴(yán)重干擾，大大降低了石油烴的微生物降解速度，從而使得高鹽環(huán)境下的石油烴難以生物降解。因此，傳統(tǒng)的非耐鹽石油烴降解菌劑應(yīng)用于石油污染鹽潰化土壤和石油污染海水等高鹽環(huán)境中時，往往降解效率低，應(yīng)用效果差。耐鹽菌可以適應(yīng)較為廣泛的鹽分濃度，在高鹽環(huán)境下仍能保持較高的生理代謝水平。特別是耐鹽降解菌在高鹽環(huán)境下仍可以高效地降解污染物。例如:中國專利(200910229167)公開了一種耐鹽凈污菌劑的制備方法及其用途，歐洲專利(EP0941137B1)公開了一種采用鹽桿菌等嗜鹽菌降解三氯苯酚等鹵代烴的方法。采用耐鹽降解菌降解高鹽環(huán)境下的石油烴等污染物是一種有效的策略。然而，目前國內(nèi)外并沒有采用耐鹽降解菌治理高鹽環(huán)境下石油污染的相關(guān)專利。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，針對目前高鹽環(huán)境下石油污染物難以生物降解的問題，提供一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌。本發(fā)明的的第二個目的是提供一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌劑。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下:一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌，由菌W25和菌W33組成，所述菌W25(Ornithinimicrobium kibberense),命名為克伯村鳥氨酸微菌，其微生物保藏編號為CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名為食烷烴戈登氏菌，其微生物保藏編號為CGMCC N0.6845，所述石油降解復(fù)合菌具有在高鹽環(huán)境中降解石油的能力。高鹽為質(zhì)量濃度為0.1% 8%的鹽，鹽包括NaCl和/或Na2S04。菌W25和菌W33的質(zhì)量比優(yōu)選為I 5:1 5，最好是I 2:1 2。一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌劑，是由菌W25、菌W33和載體組成，所述菌W25 (Ornithinimicrobium kibberense),命名為克伯村鳥氨酸微菌,其微生物保藏編號為CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名為食烷烴戈登氏菌，其微生物保藏編號為CGMCC N0.6845，所述石油降解復(fù)合菌劑具有在高鹽環(huán)境中降解石油的能力。菌W25、菌W33和載體的質(zhì)量比最好是I 5:1 5:1 20。載體可以選自硅藻土、超細碳酸鈣和海藻酸鈉至少一種。載體可以是質(zhì)量比為:0.1 50:0.1 50:0.1 50的硅藻土、超細碳酸鈣和海
藻酸鈉。高鹽為質(zhì)量濃度為0.1% 8%的鹽，鹽包括NaCl和/或Na2S04。本發(fā)明以石油微生物學(xué)為理論依據(jù)，綜合極端微生物學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)和環(huán)境工程學(xué)的相關(guān)理論知識，針對高鹽環(huán)境下的石油降解問題，設(shè)計高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌及其復(fù)合菌劑的配方。實驗證明，本發(fā)明的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌及菌劑對高鹽環(huán)境下的石油污染清除速度快；對石油污染環(huán)境的鹽度適應(yīng)廣泛，最高可用于8%NaCl的高鹽環(huán)境；所選用的菌種分離自高鹽環(huán)境，活性高，適應(yīng)性強?？梢钥焖儆行У刂卫硎臀廴钧}潰化土壤、石油污染海水及石油污染廢水等。
具體實施例方式本發(fā)明使用的菌株由發(fā)明人從石油污染鹽潰化土壤中分離篩選得到，具有石油烴高效降解特征和耐鹽特征。菌株W25,分類命名:克伯村鳥氨酸微菌(Ornithinimicrobium kibberense)于2012年11月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址:北京市朝陽區(qū)大屯路，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編:100101，保藏編號為CGMCCN0.6844，并已存活。菌株W33,分類命名:食燒烴戈登氏菌(Gordonia alkanivorans)于2012年11月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址:北京市朝陽區(qū)大屯路，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編:100101，保藏編號為CGMCCN0.6845，并已存活。菌株W25 (Ornithinimicrobium kibberense)具有以下微生物學(xué)特性:1.形態(tài)學(xué)特性在顯微鏡 下觀察，為短桿狀，直徑為0.5 0.8 μ m ;在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上形成橘紅色菌落。2.培養(yǎng)學(xué)特性在35°C下，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中培養(yǎng)時，本發(fā)明的石油降解菌W25(Ornithinimicrobium kibberense)菌株具有以下特性。表面較光滑，干燥，邊緣整齊規(guī)則，個體微小呈圓形，菌體呈橘紅色。
3.生理特性好氧條件下可利用石油烴生長的革蘭氏陽性細菌，接觸酶陽性、甲基紅試驗陽性、水解淀粉、液化明膠、不產(chǎn)生吲哚、生長pH值為6 10，生長溫度25 40°C。
權(quán)利要求
1.一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌，其特征是由菌W25和菌W33組成，所述菌W25 (Ornithinimicrobium kibberense),命名為克伯村鳥氨酸微菌,其微生物保藏編號為CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名為食烷烴戈登氏菌，其微生物保藏編號為CGMCC N0.6845，所述石油降解復(fù)合菌具有在高鹽環(huán)境中降解石油的能力。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解菌，其特征是所述高鹽為質(zhì)量濃度為0.1% 8%的鹽，所述鹽包括NaCl和/或Na2S04。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌，其特征是所述菌W25和菌W33的質(zhì)量比為I 5:1 5。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌，其特征是所述菌W25和菌W33的質(zhì)量比為I 2:1 2。
5.一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌劑，其特征是由菌W25、菌W33和載體組成，所述菌W25 (Ornithinimicrobium kibberense),命名為克伯村鳥氨酸微菌,其微生物保藏編號為CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名為食烷烴戈登氏菌，其微生物保藏編號為CGMCC N0.6845，所述石油降解復(fù)合菌劑具有在高鹽環(huán)境中降解石油的能力。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌劑，其特征是所述菌W25、菌W33和載體的質(zhì)量比為I 5:1 5:1 20。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌劑，其特征是所述載體為硅藻土、超細碳酸鈣和海藻酸鈉至少一種。
8.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌劑，其特征是所述載體為質(zhì)量比為:0.1 50:0.1 50:0.1 50的硅藻土、超細碳酸鈣和海藻酸鈉。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌劑，其特征是所述高鹽為質(zhì)量濃度為0.1% 8%的鹽，所述鹽包括NaCl和/或Na2S04。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種應(yīng)用于高鹽環(huán)境下的石油降解復(fù)合菌及菌劑，復(fù)合菌由菌W25和菌W33組成，菌W25(Ornithinimicrobium kibberense)，命名為克伯村鳥氨酸微菌，其微生物保藏編號為CGMCC No.6844，菌W33(Gordonia alkanivorans)，命名為食烷烴戈登氏菌，其微生物保藏編號為CGMCC No.6845，所述石油降解復(fù)合菌具有在高鹽環(huán)境中降解石油的能力。實驗證明，本發(fā)明的復(fù)合菌及菌劑對高鹽環(huán)境下的石油污染清除速度快；對石油污染環(huán)境的鹽度適應(yīng)廣泛，最高可用于8%NaCl的高鹽環(huán)境；可以快速有效地治理石油污染鹽漬化土壤、石油污染海水及石油污染廢水等。
文檔編號B09C1/10GK103232960SQ201310144009
公開日2013年8月7日 申請日期2013年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月23日
發(fā)明者王新新, 吳亮, 楊勇, 安偉, 牛志剛, 丁東華 申請人:中國海洋石油總公司, 中海油能源發(fā)展股份有限公司, 中海石油環(huán)保服務(wù)(天津)有限公司