本發(fā)明涉及豬飼料領(lǐng)域，尤其涉及用于尾菜和秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料的復(fù)合菌劑的制備方法。

背景技術(shù)：

近年來，甘肅蔬菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，已成為全國“西菜東調(diào)”、“北菜南運”的五大商品蔬菜基地之一和西北內(nèi)陸出口蔬菜重點產(chǎn)區(qū)。然而，隨著蔬菜產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，蔬菜在采收、鮮銷和初加工過程中產(chǎn)生的大量尾菜（尾菜即蔬菜廢棄物，主要是娃娃菜、甘藍、花椰菜、芹菜、萵筍等蔬菜的廢棄根、莖、葉）。2016年全省蔬菜種植面積達到800萬畝，尾菜量超過1100萬噸。我國是農(nóng)業(yè)大國，大量的農(nóng)副產(chǎn)品沒有充分利用，造成了極大的浪費和環(huán)境污染，僅農(nóng)作物秸稈每年多達5.7億噸。我國又是養(yǎng)豬大國，而隨著養(yǎng)豬業(yè)快速發(fā)展，飼料資源短缺現(xiàn)象愈發(fā)凸顯，已經(jīng)成為制約養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的瓶頸。

公開號為 CN103518957A和CN105325689A的專利，以尾菜和秸稈為原料，借鑒青貯技術(shù)的原理，生產(chǎn)牛羊等反芻動物青貯飼料，在農(nóng)業(yè)廢棄資源飼料化利用方面進行了有效的探索。本發(fā)明利用尾菜和秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料，不僅拓寬了豬飼料來源，而且拓展了農(nóng)業(yè)廢棄資源飼料化利用途徑，具有廣闊的市場前景和應(yīng)用價值。目前，尚缺乏利用尾菜和農(nóng)作物秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料的成熟技術(shù)，以及專用的商品菌劑。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種工藝簡單、成本低廉的用于尾菜和秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料的復(fù)合菌劑的制備方法。

為解決上述問題，本發(fā)明所述的用于尾菜和秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料的復(fù)合菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按10kg~20kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A；

⑵在所述溶液A中先加入混合菌液，再按每1L所述溶液A添加無機鹽1份，混合均勻后，即得到溶液B；所述混合菌液與所述溶液A的比例為0.2kg~0.4kg：10kg~20kg；

⑶在所述溶液B中加入玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料；所述溶液B與所述玉米粉的比例為1kg~2kg：9kg~12kg；

⑷將所述原料裝入容器中，用透氣膜封口，于28℃~36℃條件下發(fā)酵1~2天，當(dāng)pH值≤4.5、混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下干燥、粉碎、裝袋，即得豬用發(fā)酵飼料復(fù)合菌劑。

所述步驟⑴中牛奶是指經(jīng)過巴氏滅菌后的脫脂牛奶。

所述步驟⑵中無機鹽1份是由檸檬酸二鈉2.0g、磷酸二氫鉀2.0g、磷酸氫二鉀2.0g、硫酸錳0.05g、碳酸鈣20.0g組成。

所述步驟⑵中混合菌液是按下述方法制得：

①分別將菌種產(chǎn)朊假絲酵母（CICC 1314）、白地霉（CICC 1315）、釀酒酵母（CICC1421）按1g菌種用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液A接種于麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基上，37℃條件下培養(yǎng)6~12h，分別得到三種酵母菌的純培養(yǎng)菌種；所述麥芽瓊脂斜面培養(yǎng)基是指將15g瓊脂溶于1L麥芽汁中所得；

②分別將植物乳桿菌（CICC6026）、動物雙歧桿菌（CICC 21717）按1g菌種用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液B接種于MRS斜面固體培養(yǎng)基，37℃條件下培養(yǎng)6~12h，分別得到兩種乳酸菌的純培養(yǎng)菌種；所述MRS斜面固體培養(yǎng)基是指將酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸鈉5.0g、檸檬酸二鈉2.0g、磷酸氫二鉀 2.0g、硫酸錳0.05g、碳酸鈣20.0g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水中所得；

③在密閉容器裝1/2~2/3的所述溶液A，分別按所述溶液A所裝體積的5~10%接種所述三種酵母菌的純培養(yǎng)菌種，用透氣膜封口，在28℃~36℃、轉(zhuǎn)速為180~220r/min的搖床上培養(yǎng)24h~48h，當(dāng)酵母菌達到500億cfu/ml時，分別得到三種酵母菌的擴增菌液；

④分別按所述溶液A體積的5~10%接種所述兩種乳酸菌的純培養(yǎng)菌種，即得兩種接種溶液，在密閉容器中分別裝滿兩種所述接種溶液后并密封，在28℃~36℃，靜置培養(yǎng)24h~48h，當(dāng)乳酸菌達到500億cfu/ml時，分別得到兩種乳酸菌的擴增菌液；

⑤將所述三種酵母菌的擴增菌液和所述兩種乳酸菌的擴增菌液按1：1：1：1：1的重量比均勻混合后，即得混合菌液。

所述步驟⑶中玉米粉細度為80~100目。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：

1、本發(fā)明以玉米、牛奶、紅糖為原料，可規(guī)模化生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料復(fù)合菌劑，生產(chǎn)工藝簡單、原料成本低廉。

2、本發(fā)明所得復(fù)合菌劑，可提高發(fā)酵效率，提升飼料品質(zhì)，減少營養(yǎng)損失，延長發(fā)酵飼料儲存時間。

3、使用本發(fā)明所得復(fù)合菌劑生產(chǎn)的發(fā)酵飼料，呈黃褐色，營養(yǎng)豐富，香味濃郁，酸甜適口，可提高豬的采食量，增重效果明顯。

4、使用本發(fā)明所得復(fù)合菌劑生產(chǎn)的發(fā)酵飼料，富含多種益生菌，能改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，減少腸道疾病發(fā)生，增強豬的抵抗力。

5、使用本發(fā)明所得復(fù)合菌劑，符合國家飼料添加劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使用該菌劑生產(chǎn)的飼料成本低廉，為養(yǎng)殖企業(yè)和養(yǎng)殖戶節(jié)約飼料成本，經(jīng)濟效益、社會效益和環(huán)境效益顯著。

具體實施方式

實施例1 用于尾菜和秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料的復(fù)合菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按10kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A。

其中：牛奶是指經(jīng)過巴氏滅菌后的脫脂牛奶。

⑵在10kg溶液A中先加入0.2kg混合菌液，再按每1L溶液A添加無機鹽1份，混合均勻后，即得到溶液B。

其中：無機鹽1份是由檸檬酸二鈉2.0g、磷酸二氫鉀2.0g、磷酸氫二鉀2.0g、硫酸錳0.05g、碳酸鈣20.0g組成。

混合菌液是按下述方法制得：

①分別將菌種產(chǎn)朊假絲酵母（CICC 1314）、白地霉（CICC 1315）、釀酒酵母（CICC1421）按1g菌種用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液A接種于麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基上，37℃條件下培養(yǎng)6~12h，分別得到三種酵母菌的純培養(yǎng)菌種；麥芽瓊脂斜面培養(yǎng)基是指將15g瓊脂溶于1L麥芽汁中所得；

②分別將植物乳桿菌（CICC6026）、動物雙歧桿菌（CICC 21717）按1g菌種用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液B接種于MRS斜面固體培養(yǎng)基，37℃條件下培養(yǎng)6~12h，分別得到兩種乳酸菌的純培養(yǎng)菌種； MRS斜面固體培養(yǎng)基是指將酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸鈉5.0g、檸檬酸二鈉2.0g、磷酸氫二鉀 2.0g、硫酸錳0.05g、碳酸鈣20.0g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水中所得；

③在密閉容器裝1/2~2/3的所述溶液A，分別按溶液A所裝體積的5~10%接種三種酵母菌的純培養(yǎng)菌種，用透氣膜封口，在28℃~36℃、轉(zhuǎn)速為180~220r/min的搖床上培養(yǎng)24h~48h，當(dāng)酵母菌達到500億cfu/ml時，分別得到三種酵母菌的擴增菌液；

④分別按溶液A體積的5~10%接種兩種乳酸菌的純培養(yǎng)菌種，即得兩種接種溶液，在密閉容器中分別裝滿兩種接種溶液后并密封，在28℃~36℃，靜置培養(yǎng)24h~48h，當(dāng)乳酸菌達到500億cfu/ml時，分別得到兩種乳酸菌的擴增菌液；

⑤將三種酵母菌的擴增菌液和兩種乳酸菌的擴增菌液按1：1：1：1：1的重量比均勻混合后，即得混合菌液。

⑶在1kg溶液B中加入9kg細度為80~100目的玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料。

⑷將原料裝入容器中，用透氣膜封口，于28℃~36℃條件下發(fā)酵1~2天，當(dāng)pH值≤4.5、混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下干燥、粉碎、裝袋，即得豬用發(fā)酵飼料復(fù)合菌劑。

實施例2 用于尾菜和秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料的復(fù)合菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按20kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A。

其中牛奶同實施例1。

⑵在20kg溶液A中先加入0.4kg混合菌液，再按每1L溶液A添加無機鹽1份，混合均勻后，即得到溶液B。

其中：無機鹽1份、混合菌液同實施例1。

⑶在2kg溶液B中加入12kg細度為80~100目的玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料。

⑷將原料裝入容器中，用透氣膜封口，于28℃~36℃條件下發(fā)酵1~2天，當(dāng)pH值≤4.5、混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下干燥、粉碎、裝袋，即得豬用發(fā)酵飼料復(fù)合菌劑。

實施例3 用于尾菜和秸稈生產(chǎn)豬用發(fā)酵飼料的復(fù)合菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按15kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A。

其中牛奶同實施例1。

⑵在15kg溶液A中先加入0.3kg混合菌液，再按每1L溶液A添加無機鹽1份，混合均勻后，即得到溶液B。

其中：無機鹽1份、混合菌液同實施例1。

⑶在1.5kg溶液B中加入10kg細度為80~100目的玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料。

⑷將原料裝入容器中，用透氣膜封口，于28℃~36℃條件下發(fā)酵1~2天，當(dāng)pH值≤4.5、混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下干燥、粉碎、裝袋，即得豬用發(fā)酵飼料復(fù)合菌劑。