一種合成d-異谷氨酰胺-d-色氨酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種合成D?異谷氨酰胺?D?色氨酸的方法。該方法以H?D?Glu?OR2(化合物I)為原料，采用三苯甲基或其衍生物（Trt’）作為保護基，合成得到中間體Trt’?D?Glu?OR2(化合物 III)。中間體化合物 III與H?D?Trp?OR3(化合物 IV)縮合后得到Trt’?D?Glu(D?Trp?OR3)?OR2(化合物V)?；衔?V經(jīng)酸解、氫解或水解中的一步或兩步后得到粗肽，經(jīng)純化得到D?異谷氨酰胺?D?色氨酸。該方法具有合成路線短、工藝條件要求低、所涉原料試劑成本低、收率高、副產(chǎn)物少等特點，適合大規(guī)模生產(chǎn)D?異谷氨酰胺?D?色氨酸。
【專利說明】
一種合成D-異谷氨酰胺-D-色氨酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥合成領(lǐng)域，具體涉及一種合成D-異谷氨酰胺-D-色氨酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] D-異谷氨酰胺-D-色氨酸，英語名稱為Thymodepressin或簡稱為H-D-iGlu-DTrp-OH (CAS號：186087-26-3)。它是一種人工合成的血調(diào)二肽，具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)式：
[0003] 研究發(fā)現(xiàn)，此二肽具有多種生理活性;這些活性可加以利用以實現(xiàn)相關(guān)醫(yī)療目的。 它可作為免疫抑制劑，在骨髓、組織和器官移植中抑制機體免疫功能和減輕排斥反應(yīng)（〇. V.Semina, et al. Bulletin of Experimental Biology and Medcinine, 2001, 131 (5)，493-5);保護骨髓細胞和免疫系統(tǒng)免受化療和放療的傷害(V. I. Deigin，et al. US573519; V. I. Deigin，et al. US6103699;V. I. Deigin，et al. US6410515)和治 療自身免疫疾病，例如銀肩病和遺傳過敏性皮炎(S.G. Sapuntsova，et al. Bulletin of Experimental Biology and Medcinine，2002，133(5)，488-90)。此二肽不適合制成片 劑或膠囊通過口服形式給藥，主要原因是生物利用度不高。目前此二肽被制成二鈉鹽，通過 靜脈注射或鼻腔粘膜給藥。此類藥物已在俄羅斯銷售。
[0004] D-異谷氨酰胺-D-色氨酸的合成此前已有多篇專利報道，以下部分對此簡單歸納。 W02008064465中描述的合成方法如下： 其中R1和妒為芐基或Cl~C4烷基。
[0005] US5736519描述的方法以Boc-D-Glu-OH和H-D-Trp-OH為原料，經(jīng)過DCC縮合和甲酸 去保護后得到H-D-Glu-D-Trp-OH和H-D-iGlu-D-Trp-〇H的混合物。然后經(jīng)過離子交換色譜 純化后得到目標產(chǎn)物，收率為12.0 %。該方法缺點是選擇性差、副產(chǎn)物多，因此產(chǎn)品的純化 難度大。
[0006] CN102603609中描述的方法如下：
[0007] 其中R1為Fmoc或Cbz，R2為芐基或Cl~C4烷基。當(dāng)采用Fmoc或Cbz作為D-異谷氨酸衍 生物的氨基保護基時，最后的保護基脫除會有各種各樣的問題。
[0008]綜上所述，已有專利報道的方法均為：用適當(dāng)?shù)谋Ｗo基將Glu和Trp保護，然后經(jīng)活 化、偶聯(lián)、脫保護和純化，最后得到D-異谷氨酰胺-D-色氨酸。其中Glu的保護形式可用通式 R1-Glu-OR2來表示;Trp的保護形式可用通式H-Trp(R4)-OR 3來表示。R1保護基選擇Boc、Fmoc 或Cbz;R2選擇芐基、烷基或不保護;R3選擇芐基、烷基或不保護;R4通常選擇不保護;其中烷 基一般選擇苯基或者Cl~C4烷基。
[0009]以Boc作為Rl保護基，其優(yōu)點是去保護比較方便;缺點是與含芳環(huán)類保護基相比酯 溶性較差，因此在合成程中萃取洗滌損失相對較大，合成收率相對較低。此外，Boc保護基脫 保護時產(chǎn)生大量對Trp側(cè)鏈具有加成作用的叔丁基正離子，需加入一定量具有惡臭的乙二 硫醇添加劑以抑制此副反應(yīng)，這不利于大規(guī)模生產(chǎn)且對環(huán)境有影響。以Fmoc或Cbz作為D-異 谷氨酸衍生物的氨基保護基，雖然萃取洗滌過程中產(chǎn)物損失比Boc保護基小、也不存在去保 護時對Trp側(cè)鏈加成的副反應(yīng)，但是這兩個保護基的脫除均不方便。Fmoc的脫除需要在具有 一定堿性的溶液中進行，存在消旋風(fēng)險且脫保護后產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物二苯芴烯。二苯芴烯 在液相合成中除去較為困難且容易聚合。Cbz的脫除需要Pd/C催化劑且在氫氣氛圍下進行， 反應(yīng)過程中使用較為昂貴的催化劑、反應(yīng)后Pd/C處理較為麻煩且對環(huán)境有影響；另外氫化 條件對設(shè)備有一定要求、存在一定的安全隱患。
[0010] 保護基的選擇對此二肽合成非常重要，它決定了起始原料成本、中間體合成收率 和工藝流程。如果在整個合成過程中，每步反應(yīng)均能達到較高收率;且在肽鏈偶聯(lián)完畢后， 所有保護基均能方便快捷地被脫除，副產(chǎn)物少，這將對簡化工藝流程、降低生產(chǎn)成本和實現(xiàn) 大規(guī)模生產(chǎn)D-異谷氨酰胺-D-色氨酸具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明提供一種合成D-異谷氨酰胺-D-色氨酸方法。該方法以H-D-Glu-OR2 (化合 物I)為原料，采用三苯甲基或其衍生物(Trt'）作為保護基，合成得到Trt'-D-Glu-〇R2(化 合物III)?；衔颕II與H-D-Trp-〇R 3(化合物IV)發(fā)生縮合反應(yīng)，得到Trt'-D-Glu(D-Trp-〇R3)-〇R2(化合物V)。（化合物V)根據(jù)保護基R 2或R3的不同，可以經(jīng)過下述之一的方法 處理得到粗肽1)酸解2)氫解3)先經(jīng)酸解，然后水解或氫解4)先經(jīng)水解，然后酸解;粗肽 經(jīng)純化后得到H-D-iGlu-D-Trp-OH。該方法具有合成路線短、工藝條件要求低、所涉原料試 劑成本低、收率高、副產(chǎn)物少和環(huán)境污染小的特點。
[0012] 為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案。
[0013]以H-D-Glu-〇R2(化合物I)為原料，先用R13SiX 1和有機堿處理，然后與連有X2的三 苯甲基及其衍生物(化合物II)反應(yīng)，后處理后得到Trt'-D-Glu-OR2化合物III。后者在縮 合試劑、或加活化試劑的條件下與H-D-Trp-OR 3(化合物IV)發(fā)生縮合反應(yīng)，得到Trt '-D-Glu(D-Trp-〇R3)-〇R2(化合物V)?；衔颲根據(jù)其保護基R2或R 3的不同，可經(jīng)過酸解或氫解 后直接得到粗肽;也可經(jīng)酸解、水解或氫解后得到粗肽;也可經(jīng)水解、酸解后得到粗肽。上述 所得粗肽經(jīng)純化后得到H-D-iGlu-D-Trp-OH。該方法具有合成路線短、工藝條件要求低、所 涉原料試劑成本低、收率高、副產(chǎn)物少和環(huán)境污染小的特點。
[0014] 反應(yīng)路線圖如下：
[0015] 作為優(yōu)選，所述方法中R2可以是氫、甲基、乙基、丙基、異丙、正丁基、異丁基、2-丁 基、叔丁基、2'-苯基異丙基、三苯甲基或、2-氯三苯甲基、三苯甲基、C5~ClO烷基、C3~ClO 環(huán)烷基、苯基或取代苯基、芐基或取代芐基中的一種，但不僅限于此。
[0016] 作為優(yōu)選，所述方法中三個R1基團各自獨立地為Cl~ClO烷基、C3~ClO環(huán)烷基、苯 基或取代苯基、芐基或取代芐基中的一種或幾種的組合，但不僅限于此。在本發(fā)明的實施例 中，更優(yōu)選為三個R1基團都是甲基。
[0017] 作為優(yōu)選，X1為F、Cl、Br、I、CN、SCN和三氟甲磺酸酯基中的一種，但不僅限于此。在 本發(fā)明的實施例中，X1更優(yōu)選為Cl。
[0018] 作為優(yōu)選，所用有機堿為N，N-二異丙基乙胺、三乙胺、N-甲基嗎啡啉和1，8_二氮雜 雙環(huán)(5.4.0)十一-7-烯(DBU)中的一種或多種，但不僅限于此。在本發(fā)明的實施例中，更優(yōu) 選為三乙胺。
[0019] 作為優(yōu)選，Y可以是H，0H，SH，NH2;可以是？、(：1』匕1、0~、30~或三氟甲磺酸酯基； 可以是Cl~ClO烷基、C3~ClO環(huán)烷基、苯基和取代苯基;可以是Cl~ClO烷氧基、C3~ClO環(huán) 烷氧基、苯基和取代苯基氧基;可以是Cl~ClO烷氨基、C3~ClO環(huán)烷氨基、苯基和取代苯基 氨基;所述苯環(huán)上帶有的取代基可以是上述取代基中的一種或多種的組合;這些取代基可 以在同一個苯環(huán)上或者不同苯環(huán)上，但不僅限于此。在本發(fā)明的實施例中，Y優(yōu)選為H。
[0020] 作為優(yōu)選，X2為？、(：1、8^1、^50~和三氟甲磺酸酯基中的一種，但不僅限于此。在 本發(fā)明的實施例中，X2更優(yōu)為C1。
[0021] 作為優(yōu)選，所述合成Trt'-D-Glu-〇R2(化合物III)所用溶劑為二氯甲烷、三氯甲 烷、四氯化碳、氯乙烷、I，2-二氯乙烷、氯丙烷、戊烷和取代戊烷、己烷和取代己烷，環(huán)己烷和 取代環(huán)己烷、正庚烷、甲苯、二甲苯、硝基苯、各種鹵代苯、乙醚、丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、 己醚、甲基叔丁基醚、烷基苯基醚、四氫呋喃、四氫吡喃、1，4_二氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷 基酯、丙酸烷基酯、丁酸烷基酯、苯甲酸烷基酯、硝基甲烷、硝基乙烷、硝基丙烷、乙腈、丙腈、 丁腈、苯乙腈、N，N'_二甲基甲酰胺、N，N'_二甲基乙酰胺、N甲基吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫 醚、乙硫醚、噻吩、二甲亞砜、二甲砜、丙酮、丁酮和戊酮等，反應(yīng)可以在單一溶劑中進行，也 可在由上述幾種溶劑組成的混合溶劑中進行，但不僅限于此。在本發(fā)明的實施例中更優(yōu)選 為三氯甲烷。
[0022]作為優(yōu)選，所述方法中縮合試劑為N，N-二異丙基碳二亞胺(DIC)、N，N-二環(huán)己基碳 二亞胺(DCC)、1-(3_二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCIHCl)、2-(7-偶氮苯并三 氮唑）- N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU) /有機堿、0-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷 酸酯(HBTU) /有機堿、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鑰六氟磷酸鹽(BOP)/有機 堿、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)/有機堿、和0-苯并三氮唑-N，N， Ν'，N'_四甲基脲四氟硼酸酯（TBTU)/有機堿中的一種或多種。所用有機堿為N，N-二異丙基 乙胺、三乙胺或N-甲基嗎啡啉中的一種或多種，但不僅限于此。在本發(fā)明的實施例中更優(yōu)選 為EDCIHC1。
[0023]作為優(yōu)選，所述方法中活化試劑為N-羥基琥珀酰亞胺（HOSu)、1_羥基苯并三唑 (HOBt)、1_羥基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAt)、3_羥基_1，2，3_苯并三嗪-4(3H)_酮(HODhBt)或 N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亞胺(HONb)中的一種或多種，但不僅限于此。在本發(fā)明的 實施例中更優(yōu)選為HOBt。
[0024]作為優(yōu)選，所述方法中R3可以選擇氫、甲基、乙基、丙基、異丙、正丁基、異丁基、2-丁基、叔丁基、2'-苯基異丙基、三苯甲基或、2-氯三苯甲基、三苯甲基、C5~ClO烷基、C3~ ClO環(huán)烷基、苯基或取代苯基、芐基或取代芐基中的一種，但不僅限于此。
[0025]作為優(yōu)選，所述方法中合成Trt'-D-Glu(D-Trp-〇R3)-〇R2所用溶劑為。
[0026]二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、氯乙烷、1，2-二氯乙烷、氯丙烷、戊烷和取代戊烷、 己烷和取代己烷，環(huán)己烷和取代環(huán)己烷、正庚烷、甲苯、二甲苯、硝基苯、各種鹵代苯、乙醚、 丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、己醚、甲基叔丁基醚、烷基苯基醚、四氫呋喃、四氫吡喃、1，4_二 氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷基酯、丙酸烷基酯、丁酸烷基酯、苯甲酸烷基酯、硝基甲烷、硝基 乙烷、硝基丙烷、乙腈、丙腈、丁腈、苯乙腈、N，N'_二甲基甲酰胺、N，N'_二甲基乙酰胺、N甲基 吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫醚、乙硫醚、噻吩、二甲亞砜、二甲砜、丙酮、丁酮、戊酮、水、甲醇、 乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇等。反應(yīng)可以在單一溶劑中進行，也可在由上述幾種溶劑組成的混 合溶劑中進行，但不僅限于此。在本發(fā)明的實施例中更優(yōu)選為N，N-二甲基甲酰胺。
[0027]作為優(yōu)選，所述方法中縮合反應(yīng)所用的堿為選自N，N_二異丙基乙胺、三乙胺、N-甲 基嗎啡啉、1，8_二氮雜雙環(huán)(5.4.0)十一-7-烯(DBU)、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、 碳酸銫中的一種或多種，但不僅限于此。作為優(yōu)選，所述方法中酸解使用的酸解液酸解液為 以下成分組成的混合溶液:a)選自甲酸、乙酸、三氟乙酸，三氟甲磺酸、氟化氫、氯化氫、溴化 氫或碘化氫一種或多種化合物;b)選自苯甲硫醚、苯甲醚、乙二硫醇、三異丙基硅烷、苯酚、 吲哚中的一種或幾種化合物;和c)選自二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、氯乙烷、1，2_二氯乙 烷、氯丙烷、戊烷和取代戊烷、己烷和取代己烷，環(huán)己烷和取代環(huán)己烷、正庚烷、甲苯、二甲 苯、硝基苯、各種鹵代苯、乙醚、丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、己醚、甲基叔丁基醚、烷基苯基 醚、四氫呋喃、四氫吡喃、1，4_二氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷基酯、丙酸烷基酯、丁酸烷基 酯、苯甲酸烷基酯、硝基甲烷、硝基乙烷、硝基丙烷、乙腈、丙腈、丁腈、苯乙腈、N，N'_二甲基 甲酰胺、N，N'_二甲基乙酰胺、N甲基吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫醚、乙硫醚、噻吩、二甲亞砜、 二甲砜、丙酮、丁酮、戊酮、水、甲酸、乙酸、丙酸和苯甲酸的一種或幾種溶劑組成的混合溶 劑，但不僅限于此。
[0028]作為優(yōu)選，所述方法中氫解為在20~100°C，氫氣壓在2~5大氣壓條件下，在催化劑 的作用下進行;也可在環(huán)己烯、甲酸、甲酸銨或四氫化萘的一種或幾種試劑和催化劑的作用 下進行。所述催化劑為 Pd/C、Pd/BaS〇4、PdCl2、Pd(OH)2、RaneyNi、Pt、Pt/C、Pt〇2、（Ph3P)3· RhCU(Ph3P)3 · RuCl2中的一種或幾種，但不僅限于此。
[0029] 作為優(yōu)選，所述方法中水解使用的水解液為以下成分組成的混合溶液a)選自 恥0!1、1(0!1、1^0!1、〇80!1、1，8-二氮雜雙環(huán)（5.4.0)^-7-烯（DBU)、K 2C〇3、Cs2C03中的一種或 幾種，b)水，和c)選自二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、氯乙烷、1，2_二氯乙烷、氯丙烷、戊烷 和取代戊烷、己烷和取代己烷，環(huán)己烷和取代環(huán)己烷、正庚烷、甲苯、二甲苯、硝基苯、各種鹵 代苯、乙醚、丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、己醚、甲基叔丁基醚、烷基苯基醚、四氫呋喃、四氫 吡喃、1，4_二氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷基酯、丙酸烷基酯、丁酸烷基酯、苯甲酸烷基酯、硝 基甲烷、硝基乙烷、硝基丙烷、乙腈、丙腈、丁腈、苯乙腈、N，N'_二甲基甲酰胺、N，N'_二甲基 乙酰胺、N甲基吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫醚、乙硫醚、噻吩、二甲亞砜、二甲砜、丙酮、丁酮和 戊酮中的一種或幾種，但不僅限于此。
[0030] 作為優(yōu)選，所述方法中純化采用離子色譜，C18或C8高效液相反相色譜，或者由 H20、乙腈、甲酸、磷酸、甲醇、乙醇、異丙醇和丙酮中的一種或幾種溶劑組成的混合溶劑重結(jié) 晶來進行，但不僅限于此。在本發(fā)明的實施例中更優(yōu)選為離子色譜對粗肽進行純化。
[0031] 該方法與之前專利所述方法相比具有以下優(yōu)點：1)工藝條件要求低。本方法中所 有步驟所需條件溫和對設(shè)備無特殊要求;2)收率高。由于三苯甲基及其衍生物與B 〇C、Fm〇C 或Cbz相比酯溶性更好，因此相應(yīng)原料或中間體由Trt'保護與后幾種基團保護相比，各步反 應(yīng)后處理過程中損失相對更小，收率更高;3)生產(chǎn)成本低。本方法中涉及的所有原料和試劑 均已大規(guī)模商品化、簡單易得且價格較低;4)副反應(yīng)少。Trt保護基在脫除后所產(chǎn)生的三苯 基正離子對Trp側(cè)鏈無加成副反應(yīng)且酯溶性較好。由于產(chǎn)物的水溶性較好，因此副產(chǎn)物可以 方便地除去。
【附圖說明】
[0032] 圖IiTrt-Glu-OtBu1H NMRi普圖。
[0033]圖2:D-異谷氨酰胺-D-色氨酸1H NMR譜圖。
[0034]圖3:D-異谷氨酰胺-D-色氨酸HPLC譜圖。
[0035] 圖4:D_異谷氨酰胺-D-色氨酸質(zhì)譜圖。
【具體實施方式】
[0036] 本發(fā)明公開具有一種合成D-異谷氨酰胺-D-色氨酸的方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以 借鑒本
【發(fā)明內(nèi)容】
，適當(dāng)改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本 領(lǐng)域技術(shù)人員來說都是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明內(nèi)。本發(fā)明的方法已經(jīng)通 過較佳實例進行描述，相關(guān)人員明顯不能在不脫離本
【發(fā)明內(nèi)容】
、精神和范圍內(nèi)對本文內(nèi)所 述方法和應(yīng)用進行改動、適當(dāng)變更和組合來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
[0037] 下面結(jié)合實施例，進一步闡述本發(fā)明。
[0038] 實施例1。
[0039] l.l:Trt-Glu-0 t Bu的合成。
[0040] 500 ml三頸瓶中加入H-D-Glu-O t Bu (10.0 g，49.2 mmol)，然后抽真空、充氮 氣反復(fù)三次；在氮氣氛圍下依次加入三氯甲烷（150 ml)、三甲基氯硅烷（25.0 ml，197 mmol)和三乙胺（61.7 ml, 443 mmol);所得混合物在室溫下攪拌15分鐘后，在氮氣氛圍下 加入氯代三苯甲基（13.7 g，49.2 mmol);所得溶液在室溫下攪拌過夜后，加入甲醇（10 ml)并在室溫下攪拌30分鐘。將三頸瓶中的溶液倒入1000 ml分液漏斗中，用10%的磷酸 (200 ml)洗滌三次，飽和食鹽水（200 ml)洗滌一次，分離得到有機相。用無水硫酸鈉干燥 所得有機相30分鐘。過濾除去固體后，所得濾液濃縮蒸干，得到白色固體為Trt-D-Glu-O t Bu (20.47 g，收率89.9%;? NMR (圖 1，CDC13) δ7·378-7·397 (6H，m)，7.180-7.216 (6H, m), 7.103-7.139 (3H, m), 3.396-3.418 (1H, t, / = 4.4 Hz), 2.425-2.485 (1H, m), 2.215-2.292 (1H, m), 1.830-1.860 (2H, t, / = 6.0 Hz), 1.144 (9H, s); HPLC 純度：96.3%)。
[0041 ] 1.2:Trt-D-Glu(D-Trp-0 t Bu)-0 t Bu的合成。
[0042] 500 ml單口燒瓶中加入依次加入DMF (200 ml), Trt-Glu-OiBu (10.36 g, 22.4 mmol,純度96.3%), H-D-Trp-O t Bu (5.83 g, 22.4 mmol)和HOBt (3.03 g, 22.4 mmol)。攪拌至所得溶液澄清后，加入EDCIHC1 (4.29 g, 22.4 mmol)和三乙胺（3.12 ml, 22.4 mmol)。所得溶液在室溫條件下攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液倒入1000 ml水中，大量白色 沉淀析出。所得沉淀用水和乙醚洗滌后真空干燥，得到灰白色固體為Trt-D-GlU(D-Trp-0 t Bu)-0 t Bu(15.7 g，收率86.8%;HPLC純度：85.2%)。
[0043] 1.3:H-D-Glu(D-Trp-OH)-OH粗肽的合成。
[0044] 500 ml單口燒瓶瓶中加入Trt-D-Glu(D-Trp-0 t Bu)-0 t Bu (10.0 g，12.4 mmol,純度85.2%)、乙酸乙酯（150 ml)、乙二硫醇（1.5 ml)和H2O (0.5 ml)。攪拌至完全 溶解后，將HCl氣體慢慢通入到溶液中，大量固體析出。30分鐘后停止攪拌和通氣，將溶液濃 縮，得到黃色油狀物(HPLC純度:72.3%)。
[0045] 1.4:D_異谷氨酰胺-D-色氨酸。
[0046]上述黃色油狀物用Dowex 50WX2陽離子交換樹脂純化，上樣后采用梯度洗脫，收集 并合并餾分。所得餾分冷凍干燥之后，得到白色粉末狀的D-異谷氨酰胺-D-色氨酸(3.43 g， 收率83·0%)</Η 匪R (圖2，CD30D)S7.54卜7.560 (1H, d, / = 7.8 Hz), 7.307-7.327 (1H, d, /=7.8 Hz), 6.987-7.095 (3H, m), 4.698-4.984 (1H, m), 3.775-3.806 (1H, t, / = 6 Hz), 3.351-3.338 (1H, m), 3.120-3.178 (1H, m), 2.397-2.463 (1H, m), 1.198-2.102 (1H, m); HPLC 純度（圖 3):99.4 %;質(zhì)譜（圖 4):ESI m/z, 334·2(Μ++Η, 100)。
[0047] 實施例2。
[0048] 2.1:Trt-Glu-0Me 的合成。
[0049] 500 ml三頸瓶中加入H-D-Glu-OMe (10.0 g，62.1 mmol)，然后抽真空、充氮氣反 復(fù)三次;在氮氣氛圍下依次加入三氯甲烷（200 ml)、三甲基氯硅烷（31.4 ml, 248 mmol) 和三乙胺（77.9 ml，559 mmol);所得混合物在室溫下攪拌15分鐘后，在氮氣氛圍下加入 氯代三苯甲基（17.3 g，62.1 mmol);所得溶液在室溫下攪拌過夜后，加入甲醇（10 ml) 并在室溫下攪拌30分鐘。將三頸瓶中的溶液倒入1000 ml分液漏斗中，用10%的磷酸（200 ml)洗滌三次，飽和食鹽水（200 ml)洗滌一次，分離得到有機相。用無水硫酸鈉干燥所得有 機相30分鐘。過濾除去固體后，所得濾液濃縮蒸干，得到的白色固體為Trt-D-Glu-OMe (22.5 g，收率：85.7%)。咕 NMR (αχη3)δ7·397-7·416 (6H，m)，7.146-7.201 (6H，m)， 7.103-7.121 (3H, m), 3.359-3.389 (1H, t, / = 6.0 Hz), 3.098 (3H, s), 2.441-2.484 (1H, m), 2.307-2.387 (1H, m), 1.973-2.026 (2H, m); HPLC純度：95.4 %。
[0050] 2 · 2: Tr t-D-G Iu (D-Trp-OMe) -OMe 的合成。
[0051 ] 250 ml單口燒瓶中加入依次加入DMF (200 ml), Trt-Glu-OMe (9.43 g, 22.3 mmol,純度95.4%), H-D-Trp-OMe (4.87g, 22.3 mmol)、H0Bt (3.01 g, 22.3 mmol)和 DMF (80.0 ml)。所得溶液經(jīng)攪拌澄清后，加入EDCIHC1 (4.27 g, 22.3 mmol)和三乙胺 (3.11 ml，22.3 mmol)。所得溶液在室溫條件下攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液倒入1000 ml水 中，大量白色沉淀析出。所得沉淀用水和乙醚洗滌后真空干燥，得到的白色固體為^七^-Glu(D-Trp-OMe)-OMe (12.9 g，收率：81.2%，HPLC純度：84.8%)。
[0052] 2 · 3: H-D-GI u (D-Trp-OMe) -OMe 的合成。
[0053] 100 ml單口燒瓶中加入Trt-D-Glu(D-Trp-OMe)-OMe (6.37 g, 8.95 mmol,純度 84.8%)，乙酸乙酯（40.0 ml)，H20 (0.15 ml)攪拌至完全溶解后，將HCl氣體慢慢通入到溶 液中，大量固體析出。30分鐘后停止攪拌和通氣，將溶液濃縮后得到黃白色固體。此固體用 石油醚洗滌之后再真空干燥，得到白色固體。（3.39 g，收率:98.1%; HPLC純度:93.6%)。
[0054] 2 · 4: H-D-GI u (D-Trp-OH) -OH 粗肽的合成。
[0055] 100 ml單口燒瓶中加入H-D-Glu(D-Trp-OMe)-OMe (3.00 g, 7.77 mmol,純度 93.6%)和2MNa0H水溶液(20 ml)，室溫攪拌10分鐘后完全溶解。所得溶液在室溫下反應(yīng)2小 時后，反應(yīng)液pH值用20%磷酸水溶液調(diào)到2~3，所得溶液冷凍干燥后得到白色固體（HPLC純 度：88.4%)。
[0056] 2.5: D-異谷氨酰胺-D-色氨酸。
[0057]上述白色固體用Dowex 50WX2陽離子交換樹脂純化，上樣后采用梯度洗脫，收集并 合并餾分。所得餾分冷凍干燥之后，得到白色粉末的D-異谷氨酰胺-D-色氨酸(2.24 g，收 率:86.5 %，HPLC純度：99.5%)。
[0058] 實施例3。
[0059] 3.1:1'忖-0-6111(0-1'印-(116)-(116的合成與2.2相同。
[0060] 3 · 2: Trt-D-Glu(D-Trp-OH)-OH 的合成。
[0061] 100 ml單口燒瓶中加入Trt-D-Glu(D-Trp-OMe)-OMe (6.37 g, 8.95 mmol,純 度:84.8%)，甲醇（40.0 ml)和2M NaOH水溶液（10.0 ml)。室溫攪拌15分鐘后，固體完全溶 解。所得溶液在室溫下反應(yīng)4小時后，反應(yīng)液pH值用5%磷酸水溶液調(diào)到2~3。然后將反應(yīng)溶液 濃縮，加入水(50.0 ml)。用乙酸乙酯（150.0 ml)萃取水相三次，合并乙酸乙酯相后用飽和 氯化鈉洗滌。所得有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮后得到黃色固體(5.01 g，收率： 80.9%，HPLC 純度：83.2%)。
[0062] 3 · 3: H-D-G Iu (D-Trp-OH) -OH 的合成。
[0063] 100 ml單口燒瓶中加入Trt-D-Glu(D-Trp-OH)-OH (5.01 g, 7.24 mmol,純度： 83.2%)和乙酸乙酯（60 ml)、和H2O (0.2 ml)。攪拌至完全溶解后，將HCl氣體慢慢通入到 溶液中，大量固體析出。30分鐘后停止攪拌和通氣，將溶液濃縮，得到黃色油狀物(HPLC純 度：78·3%)。
[0064] 3.4:D_異谷氨酰胺-D-色氨酸。
[0065]上述黃色油狀物用Dowex 50WX2陽離子交換樹脂純化，上樣后采用梯度洗脫，收集 并合并餾分。所得餾分冷凍干燥之后，得到白色粉末的D-異谷氨酰胺-D-色氨酸（1.99 g， 收率:82 · 5%，HPLC 純度：99 · 5%)。
[0066] 實施例4。
[0067] 4.1 :Trt-Glu-〇Bzl的合成。
[0068] 500 ml三頸瓶中加入H-D-Glu-OBzl (10.0 g，42.1 mmol)，然后抽真空、充氮氣 反復(fù)三次；在氮氣氛圍下依次加入三氯甲烷（200 ml)、三甲基氯硅烷（21.3 ml，168 mmol)和三乙胺（52.8 ml, 379 mmol);所得混合物在室溫下攪拌15分鐘后，在氮氣氛圍下 加入氯代三苯甲基（11.7 g，42.1 mmol);所得溶液在室溫下攪拌過夜后，加入甲醇（10 ml)并在室溫下攪拌30分鐘。將三頸瓶中的溶液倒入1000 ml分液漏斗中，用10%的磷酸 (200 ml)洗滌三次，飽和食鹽水（200 ml)洗滌一次，分離得到有機相。用無水硫酸鈉干燥 所得有機相30分鐘。過濾除去固體后，所得濾液濃縮蒸干，得到白色固體的Trt-D-Glu-OBzl (17.8 g，收率：85.4%,? NMR (αχη3)δ7·157-7·334 (7H，m)，7.004-7.157 (13H，m)， 4.468-4.499 (1H, ?, J = 12.4 Hz), 4.252-4.283 (1Η, ?, J = 12.4 Hz), 3.343-3.372 (1Η, t, /=5.6 Hz), 2.297-2.358 (1H, m), 2.181-2.226 (1H, m), 1.891-1.910 (2H, m); HPLC純度：96.9 %。
[0069] 4 · 2: Tr t-G Iu (D-Trp-OBz I) -OBz I 的合成。
[0070] 250 ml單口燒瓶中加入Trt-D-Glu-OBzl (9.30 g, 18.8 mmol,純度：96.9 %)、 H-D-Trp-OBzl (5.53g, 18.8 mmol)、H0Bt (2.54 g, 18.8 mmol)和DMF (80.0 ml);所得 溶液經(jīng)攪拌澄清后，加入EDCIHC1 (3.60 g, 18.8 mmol)和三乙胺（2.62 ml, 18.8 mmol);所得溶液在室溫條件下攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液倒入1000 ml水中，大量白色沉淀析 出。所得沉淀用水和乙醚洗滌后真空干燥，得到白色固體的Trt-D-Glu(D-Trp-OBzI)-OBz 1 (13.6 g,收率:84.0%，HPLC純度：87.8%)。
[0071] 4 · 3: H-G Iu (D-Trp-OBz I) -OBz 1 的合成。
[0072] 100 ml單 口燒瓶中加入Trt-Glu(D-Trp-〇Bzl )-〇Bzl (6 · Og，6 · 97mmol，純度： 87.8%)、乙酸乙酯（40.0 ml)，，H20 (0.15 ml)，攪拌至完全溶解后，將HCl氣體慢慢通入到 溶液中，大量固體析出。30分鐘后停止攪拌和通氣，將溶液濃縮后得到黃白色固體。此固體 用石油醚洗滌之后再真空干燥，得到白色固體(4.05g，收率:94.0%，HPLC純度:83.1%)。
[0073] 4 · 4: H-G Iu (D-Trp-OH) -OH 的合成。
[0074] 100 ml單口燒瓶中加入H-D-Glu(D-Trp-OBzl)-OBzl (2.03 g, 3.28 mmol,純 度:83.1%)和2M NaOH水溶液(30 ml)，室溫攪拌10分鐘后完全溶解。所得溶液在室溫下反應(yīng) 2小時后，反應(yīng)液pH值用20%磷酸水溶液調(diào)到2~3，所得溶液冷凍干燥后得到白色固體（HPLC 純度：78.4%)。
[0075] 4.5: D-異谷氨酰胺-D-色氨酸。
[0076]上述白色固體用Dowex 50WX2陽離子交換樹脂純化，上樣后采用梯度洗脫，收集并 合并餾分。所得餾分冷凍干燥之后，得到白色粉末的D-異谷氨酰胺-D-色氨酸(0.791 g，收 率：72 · 3%，HPLC 純度：99 · 4%)。
[0077] 實施例5。
[0078] 5 · I: H-D-GIu(D-Trp-OBz I) -OBz 1 的合成與4 · 3相同。
[0079] 5 · 2: H-D-GI u (D-Trp-OH) -OH 粗肽的合成。
[0080] 50 ml單口燒瓶中加入H-D-Glu(D-Trp-OBzl)-OBzl (2.025 g, 3.40 mmol,純 度:83.1%)和甲醇(25.0 ml )，室溫攪拌5分鐘后直至完全溶解;然后向此澄清溶液中加入 200mg Pd/C，反應(yīng)混合物在2個大氣壓的氫氣氛下攪拌過夜;接著將反應(yīng)體系過濾，濾液濃 縮后得到白色固體(HPLC純度:61.5%)。
[0081] 5 · 3: D-異谷氨酰胺-D-色氨酸。
[0082]上述白色固體用Dowex 50WX2陽離子交換樹脂純化，上樣后采用梯度洗脫，收集并 合并餾分。所得餾分冷凍干燥之后，得到白色粉末的D-異谷氨酰胺-D-色氨酸(0.835 g，收 率:73 · 7%，HPLC 純度:99 · 4%)。
[0083] 實施例6。
[0084] 6 · I: Trt-D-GIu(D-Trp-OBz I) -OBz 1 的合成與4 · 2相同。
[0085] 6 · 2: H-D-GI u (D-Trp-OH) -OH 粗肽的合成。
[0086] 100 ml單口燒瓶中加入Trt-Glu(D-Trp-OBzl)-OBzl (6.0g, 6.97mmol,純度： 87.8%)、甲醇（60.0 ml)，攪拌至完全溶解后，向此澄清溶液中加入600mg Pd/C，反應(yīng)混合 物在2個大氣壓的氫氣氛下攪拌過夜；接著將反應(yīng)體系過濾，濾液濃縮后得到白色固體 (HPLC 純度：26.2%)。
[0087] 6.3: D-異谷氨酰胺-D-色氨酸。
[0088]上述白色固體用Dowex 50WX2陽離子交換樹脂純化，上樣后采用梯度洗脫，收集并 合并餾分。所得餾分冷凍干燥之后，得到白色粉末的D-異谷氨酰胺-D-色氨酸（1.92 g，收 率:82.6%; HPLC純度：99.5%)。
[0089] 實施例7。
[0090] 7.1:Trt-D-Glu-OH 的合成。
[0091] 500 ml三頸瓶中加入H-D-Glu-OH (10.0 g，68.0 mmol)，然后抽真空、充氮氣反 復(fù)三次;在氮氣氛圍下依次加入三氯甲烷（200 ml)、三甲基氯硅烷（34.5 ml, 272 mmol) 和三乙胺（85.3 ml，612 mmol);所得混合物在室溫下攪拌5分鐘后，在氮氣氛圍下加入氯 代三苯甲基（37.9 g，136 mmol);所得溶液在室溫下攪拌過夜后，加入甲醇（20 ml)并在 室溫下攪拌30分鐘。將三頸瓶中的溶液倒入1000 ml分液漏斗中，用10%的磷酸（200 ml)洗 滌三次，飽和食鹽水（200 ml)洗滌一次，分離得到有機相。用無水硫酸鈉干燥所得有機相 30分鐘。過濾除去固體后，所得濾液濃縮蒸干，得到的白色固體為Trt-D-Glu-OH (22.9 g， 收率：82.6%，1!1匪1?(〇)(：13)37.456-7.475 (6!1，111)，7.250-7.339 (9!1，111)，3.627-3.633(lH，t，/=5.8Hz)，2.541-2.556(lH，m)，2.474-2.497(lH，m)，2.031-2.100 (2H, m); HPLC純度：95.5%)。
[0092] 7 · 2: Trt-D-Glu(D-Trp-OH)-OH 的合成。
[0093] 250 ml單口燒瓶中加入Trt-D-Glu-OH (10.5 g, 25.7 mmol,純度：95.5%)、!1-0-Trp-OH (5.25 g, 25.7 mmol)、H0Bt (3.47 g, 25.7 mmol)和 DMF (80.0 ml);所得溶液 經(jīng)攪拌澄清后，加入EDCIHC1 (4.93 g, 25.7 mmol)和三乙胺（3.58 ml, 25.7 mmol);所 得溶液在室溫條件下攪拌過夜后，將反應(yīng)溶液倒入1000 ml水中，大量白色沉淀析出。所得 沉淀用水和乙醚洗滌后真空干燥，得到白色固體為Trt-D-Glu(D-Trp-OH)-OH和Trt-D-Glu-D-Trp-OH的混合物（14.Ig,收率:82.6%,其比例為2.32/1; HPLC純度:86.7%)。
[0094] 7 · 3: H-D-GI u (D-Trp-OH) -OH 粗肽的合成。
[0095] 100 ml單口燒瓶中加入Trt-D-Glu(D-Trp-OH)-OH和Trt-D-Glu-D-Trp-OH的混合 物（7.05g，10.6 mmol, HPLC純度：86.7%)，然后加入乙酸乙酯（50 ml)，H20 (0.15 ml)。 攪拌至完全溶解后，將HCl氣體慢慢通入到溶液中，大量固體析出。30分鐘后停止攪拌和通 氣，將溶液濃縮，得到黃色油狀物，其中包含H-D-Glu(D-Trp-OH)-OH和H-D-Glu-D-Trp-OH的 混合物(HPLC純度:75.3%;兩者比例為2.32/1)。
[0096] 7.4:D_異谷氨酰胺-D-色氨酸。
[0097]上述白色固體用Dowex 50WX2陽離子交換樹脂純化，上樣后采用梯度洗脫，收集并 合并餾分。所得餾分冷凍干燥之后，得到白色粉末的D-異谷氨酰胺-D-色氨酸（1.85 g，收 率：52 · 4%，HPLC純度：99 · 2%)。
【主權(quán)項】
1. 一種合成D-異谷氨酰胺-D-色氨酸的方法，其特征在于，包括以下步驟： a) 以H-D-Glu-〇R2(化合物I)為原料，用RSSiX1和有機堿處理后與Trt'X 2(化合物II) 反應(yīng)，得到中間體Trt'-D-Glu-〇R2(化合物III); b) 在縮合條件下（縮合試劑、活化試劑和堿），化合物III與H-D-Trp-OR3(化合物IV)縮 合，得到帶保護基的二肽Trt '-D-Glu(D-Trp-OR3)-OR2 (化合物V); c) 通過下述之一的方法處理化合物V后得到粗肽：1)酸解，2)氫解，3)先經(jīng)酸解，然后水 解或氫解，4)先經(jīng)水解，然后酸解； d) 步驟c)獲得的粗妝經(jīng)純化后得到H-D-iGlu-D-Trp-〇H; 其中，R2為氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、2-丁基、叔丁基、2'-苯基異丙 基、2-氯三苯甲基、三苯甲基、C5~C10烷基、C3~C10環(huán)烷基、苯基或取代苯基、芐基或取代 芐基;三個R1基團各自獨立地為C1~C10烷基、C3~C10環(huán)烷基、苯基或取代苯基、芐基或取 代芐基;X 1為？、(：1、8^1、^30~或三氟甲磺酸酯基;1^為三苯基甲基或苯環(huán)上帶有取代 基的三苯基甲基;X 2為卩、(：1』廣1、^50~或三氟甲磺酸酯基;妒為氫、甲基、乙基、丙基、異丙 基、正丁基、異丁基、2-丁基、叔丁基、2'-苯基異丙基、2-氯三苯甲基、三苯甲基、C5~C10烷 基、C3~C10環(huán)烷基、苯基或取代苯基、芐基或取代芐基。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，步驟a)所用有機堿選自N，N-二異丙基乙胺、 三乙胺、N-甲基嗎啡啉和1，8_二氮雜雙環(huán)(5.4.0)^-7-烯(DBU)中的一種或多種。3. 根據(jù)權(quán)利要求1至2任意一項所述方法，其特征在于，所述苯環(huán)上帶有取代基的三苯 甲基，其取代基可以是H，0H，SH，NH 2;可以是？、(：1、8廣1、0~30~和三氟甲磺酸酯基;可以是(：1 ~C10烷基、C3~C10環(huán)烷基、苯基和取代苯基;可以是C1~C10烷氧基、C3~C10環(huán)烷氧基、苯 基和取代苯基氧基;可以是C1~C10烷氨基、C3~C10環(huán)烷氨基、苯基和取代苯基氨基;所述 苯環(huán)上帶有的取代基可以是上述取代基中的一種或多種的組合;這些取代基可以在同一個 苯環(huán)上或者不同苯環(huán)上。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任意一項所述方法，其特征在于，合成中間體Trt ' -D-Glu-OR2 (化 合物III)的反應(yīng)中使用的溶劑可以在單一溶劑中進行，也可在由多種溶劑組成的混合溶 劑中進行。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，合成中間體Trt'-D-Glu-OR2(化合物III)的 反應(yīng)中使用的溶劑為:二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、氯乙烷、1，2_二氯乙烷、氯丙烷、戊烷 和取代戊烷、己烷和取代己烷，環(huán)己烷和取代環(huán)己烷、正庚烷、甲苯、二甲苯、硝基苯、各種鹵 代苯、乙醚、丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、己醚、甲基叔丁基醚、烷基苯基醚、四氫呋喃、四氫 吡喃、1，4_二氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷基酯、丙酸烷基酯、丁酸烷基酯、苯甲酸烷基酯、硝 基甲烷、硝基乙烷、硝基丙烷、乙腈、丙腈、丁腈、苯乙腈、N，N'_二甲基甲酰胺、N，N'_二甲基 乙酰胺、N甲基吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫醚、乙硫醚、噻吩、二甲亞砜、二甲砜、丙酮、丁酮和 戊酮;反應(yīng)可以在單一溶劑中進行，也可在由上述多種溶劑組成的混合溶劑中進行。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5任意一項所述方法，其特征在于，所述方法中縮合試劑為N，N-二 異丙基碳二亞胺(DIC)、N，N-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞 胺鹽酸鹽(EDCI.HCl)、2-(7-偶氮苯并三氮唑）-N，N，N'，N'_四甲基脲六氟磷酸酯(HATU) / 有機堿、0-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU) /有機堿、苯并三氮唑-1-基氧基三(二 甲基氨基）磷鑰六氟磷酸鹽(Β0Ρ) /有機堿、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷 (PyBOP) /有機堿和0-苯并三氮唑-N，N，N'，N'_四甲基脲四氟硼酸酯(TBTU)/有機堿中的一 種或多種;縮合試劑中的有機堿為N，N-二異丙基乙胺、三乙胺或N-甲基嗎啡啉中的一種或 多種。7. 根據(jù)權(quán)利要求1至6任意一項所述方法，其特征在于，所述活化試劑為N-羥基琥珀酰 亞胺(HOSu)、1-羥基苯并三唑(HOBt)、1-羥基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAt)、3-羥基-1，2，3-苯 并三嗪-4(3H)_酮(HODhBt)或N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亞胺(!10他）中的一種或多 種。8. 根據(jù)權(quán)利要求1至7任意一項所述方法，其特征在于，縮合反應(yīng)在溶劑中進行，所用溶 劑可以是單一溶劑，也可以是多種溶劑組成的混合溶劑。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述方法，其特征在于，所用溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、 氯乙烷、1，2-二氯乙烷、氯丙烷、戊烷和取代戊烷、己烷和取代己烷，環(huán)己烷和取代環(huán)己烷、 正庚烷、甲苯、二甲苯、硝基苯、各種鹵代苯、乙醚、丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、己醚、甲基叔 丁基醚、烷基苯基醚、四氫呋喃、四氫吡喃、1，4_二氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷基酯、丙酸烷 基酯、丁酸烷基酯、苯甲酸烷基酯、硝基甲烷、硝基乙烷、硝基丙烷、乙腈、丙腈、丁腈、苯乙 腈、N，N'_二甲基甲酰胺、N，N'_二甲基乙酰胺、N甲基吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫醚、乙硫醚、 噻吩、二甲亞砜、二甲砜、丙酮、丁酮、戊酮、水、甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇和丁醇;反應(yīng)可以在 單一溶劑中進行，也可在由上述多種溶劑組成的混合溶劑中進行。10. 根據(jù)權(quán)利要求1至9任意一項所述方法，其特征在于，縮合反應(yīng)所用的堿為選自N，N-二異丙基乙胺、三乙胺、N-甲基嗎啡啉、1，8-二氮雜雙環(huán)(5.4.0)^-7-烯(DBU)、碳酸鈉、 碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、碳酸銫中的一種或多種。11. 根據(jù)權(quán)利要求1至10任意一項所述方法，其特征在于，所述方法中酸解使用的酸解 液為以下成分組成的混合溶液:a)選自甲酸、乙酸、三氟乙酸，三氟甲磺酸或鹵化氫中的一 種或多種化合物;b)選自苯甲硫醚、苯甲醚、乙二硫醇、三異丙基硅烷、苯酚、吲哚中的一種 或幾種化合物;和c)選自一種或極性溶劑組成的混合溶劑。12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述方法，其特征在于，所述鹵化氫為氟化氫、氯化氫、溴化氫、或 碘化氫;所述溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、氯乙烷、1，2_二氯乙烷、氯丙烷、戊烷和 取代戊烷、己烷和取代己烷，環(huán)己烷和取代環(huán)己烷、正庚烷、甲苯、二甲苯、硝基苯、各種鹵代 苯、乙醚、丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、己醚、甲基叔丁基醚、烷基苯基醚、四氫呋喃、四氫吡 喃、1，4_二氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷基酯、丙酸烷基酯、丁酸烷基酯、苯甲酸烷基酯、硝基 甲烷、硝基乙烷、硝基丙烷、乙腈、丙腈、丁腈、苯乙腈、N，N'_二甲基甲酰胺、N，N'_二甲基乙 酰胺、N甲基吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫醚、乙硫醚、噻吩、二甲亞砜、二甲砜、丙酮、丁酮、戊 酮、水、甲酸、乙酸、丙酸和苯甲酸。13. 根據(jù)權(quán)利要求1至12任意一項所述方法，其特征在于，所述方法中氫解在20~100°C， 氫氣壓為2~5大氣壓，催化劑的作用下進行;也可在環(huán)己烯、甲酸、甲酸銨或四氫化萘的一種 或幾種試劑和催化劑的作用下進行。14. 根據(jù)權(quán)利要求13所述方法，其特征在于，所述催化劑為Pd/C、Pd/BaS〇4、PdCl2、Pd (0H)2、Raney Ni、Pt、Pt/C、Pt02、（Ph3P)3 · RhCl、（Ph3P)3 · RuCh中的一種或幾種。15. 根據(jù)權(quán)利要求1至14任意一項所述方法，其特征在于，所述方法中水解使用的水解 液為以下成分組成的混合溶液:a)選自NaOH、KOH、LiOH、CsOH、1，8-二氮雜雙環(huán)（5.4.0)十 一-7-烯(DBU)、K2C03、Cs2C03中的一種或幾種，b)水，和c)選自極性溶劑中的一種或幾種組 成的混合溶劑。16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述方法，所述溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、氯乙烷、1， 2-二氯乙烷、氯丙烷、戊烷和取代戊烷、己烷和取代己烷，環(huán)己烷和取代環(huán)己烷、正庚烷、甲 苯、二甲苯、硝基苯、各種鹵代苯、乙醚、丙醚、異丙醚、丁醚、異戊醚、己醚、甲基叔丁基醚、烷 基苯基醚、四氫呋喃、四氫吡喃、1，4_二氧六環(huán)、甲酸烷基酯、乙酸烷基酯、丙酸烷基酯、丁酸 烷基酯、苯甲酸烷基酯、硝基甲燒、硝基乙燒、硝基丙烷、乙臆、丙臆、丁臆、苯乙臆、N，N ' - _. 甲基甲酰胺、N，N'_二甲基乙酰胺、N甲基吡咯烷酮、苯甲酰胺、甲硫醚、乙硫醚、噻吩、二甲亞 砜、二甲砜、丙酮、丁酮和戊酮。17. 根據(jù)權(quán)利要求1至16任意一項所述方法，其特征在于，所述方法中純化采用離子色 譜，C18或C8高效液相反相色譜，或者由H 20、乙腈、甲酸、磷酸、甲醇、乙醇、異丙醇和丙酮中 的一種或幾種溶劑組成的混合溶劑重結(jié)晶來進行。18. -種多肽中間體，其化學(xué)式為Trt'-D-Glu-OR2(化合物III)，其中，R 2為氫、甲基、乙 基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、2-丁基、叔丁基、2'-苯基異丙基、2-氯三苯甲基、三苯甲 基、C5~C10烷基、C3~C10環(huán)烷基、苯基或取代苯基、芐基或取代芐基;Trt'為三苯基甲基或 苯環(huán)上帶有取代基的三苯基甲基。19. 根據(jù)權(quán)利要求18所述的中間體，其特征在于，所述苯環(huán)上帶有的取代基可以是H， 0!1，3!1，順2;可以是？、(：1、8匕1、^30~和三氟甲磺酸酯基 ;可以是(：1~(：10烷基工3~(：10環(huán) 烷基、苯基和取代苯基;可以是C1~C10烷氧基、C3~C10環(huán)烷氧基、苯基和取代苯基氧基;可 以是C1~C10烷氨基、C3~C10環(huán)烷氨基、苯基和取代苯基氨基;所述苯環(huán)上帶有的取代基可 以是上述取代基中的一種或幾種的組合；這些取代基可以在同一個苯環(huán)上或者不同苯環(huán) 上。
【文檔編號】C07D209/20GK106008307SQ201610283054
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月3日
【發(fā)明人】李湘, 徐琪, 魏忠勇
【申請人】中肽生化有限公司