有機溶劑極性范圍為約O?I，可以為石油醚、正己烷、環(huán)己烷、異戊烷、正戊燒等有機溶劑。
[0047]實施例4
[0048]實施例3所述的方法，其中
[0049]一定范圍濃度的強堿醇溶液可以是氫氧化鈉、乙醇溶液，其濃度為0.5mol/L。
[0050]一定溫度為50°C。
[0051]—定比例為溶液與藻粉的體積/質(zhì)量的比例，為10:1。
[0052]弱極性有機溶劑極性為石油醚。
[0053]實施例4得到約14.2g脂肪酸樣品。且分析結果脂肪酸組成與微擬球藻脂肪酸組成一致，各脂肪酸組分含量差異較小。
[0054]實施例5
[0055]一定范圍濃度的強堿醇溶液可以是氫氧化鈉、甲醇溶液，其濃度為0.5mol/L。
[0056]—定溫度為60°C。
[0057]一定比例為溶液與藻粉的體積/質(zhì)量的比例，為10:1。
[0058]弱極性有機溶劑極性為正己烷。
[0059]實施例5得到約15.3g脂肪酸樣品。且分析結果脂肪酸組成與微擬球藻脂肪酸組成一致，各脂肪酸組分含量差異較小。
[0060]實施例6
[0061 ] 一定范圍濃度的強堿醇溶液可以是氫氧化鉀、乙醇溶液，其濃度為0.7mol/L。
[0062]一定溫度為70°C。
[0063]—定比例為溶液與藻粉的體積/質(zhì)量的比例，為13:1。
[0064]弱極性有機溶劑極性為環(huán)己烷。
[0065]實施例6得到約15.1g脂肪酸樣品。且分析結果脂肪酸組成與微擬球藻脂肪酸組成一致，各脂肪酸組分含量差異較小。
[0066]實施例7
[0067]—定范圍濃度的強堿醇溶液可以是氫氧化鉀、甲醇溶液，其濃度為0.8mol/L。
[0068]一定溫度為80°C。
[0069]—定比例為溶液與藻粉的體積/質(zhì)量的比例，為15:1。
[0070]弱極性有機溶劑極性為異戊烷。
[0071]實施例7得到約15.7g脂肪酸樣品。且分析結果脂肪酸組成與微擬球藻脂肪酸組成一致，各脂肪酸組分含量差異較小。
[0072]實施例8
[0073]本實施例以微擬球藻凍干粉為實驗材料，用氯仿/甲醇(B-D法)提取油脂再皂化制取脂肪酸的方法包括以下步驟:
[0074]步驟(I)采用B-D法，按1:2:0.8比例配制氯仿/甲醇/水溶液，加入到微擬球藻干藻粉中，45°C水浴回流數(shù)小時，抽濾除去藻體，往抽濾得到的藻體中再加入比例為1: 2:0.8的氯仿/甲醇/水溶液進行水浴回流數(shù)小時，再次抽濾除去藻體，將兩次得到的濾液合并，按體積加入一定量的氯仿和水，使得氯仿/甲醇/水的比例為2:2:1.8，待濾液分層，取氯仿層，旋轉蒸發(fā)除去氯仿溶劑，得到微藻油脂。
[0075]步驟(2)按照實施例1的方法將步驟(I)得到的微藻油脂進行脂肪酸制備，得到12.1g微擬球藻脂肪酸樣品。
[0076]實施例9
[0077]本實施例以微擬球藻凍干粉為實驗材料，用超臨界二氧化碳提取微擬球藻油脂再皂化制取脂肪酸的方法包括以下步驟:
[0078]步驟(I)采用超臨界二氧化碳萃取的方法，將微擬球藻干藻粉裝入萃取釜，超臨界萃取裝置設置一定溫度和壓力，同時在二氧化碳流體中混入一定量的改性劑，對微擬球藻凍干粉進行萃取。
[0079]步驟(2)從收集釜中收集萃取得到的油脂，按照實施例1的方法將步驟(I)得到的微藻油脂進行脂肪酸制備，得到4.Sg微藻脂肪酸樣品。
[0080]實施例8和實施例9為微藻脂肪酸提取的傳統(tǒng)方法，微藻脂肪酸提取率分別達到48.4%和19.2%，而實施例5中微藻脂肪酸提取率為61.2%,比傳統(tǒng)的脂肪酸提取方法高。
[0081]在此說明書中，本發(fā)明已參照其特定的實施例作了描述。但是，很顯然仍可以作出各種修改和變換而不背離本發(fā)明的精神和范圍。因此，說明書和附圖應被認為是說明性的而非限制性的。
【主權項】
1.一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于:包括以下步驟: 步驟一:皂化:將強堿醇溶液與微藻凍干藻粉進行皂化反應形成皂化液濁液； 步驟二:除雜:將皂化液濁液冷卻至室溫后去除其中的藻體，得到皂化液溶液，將皂化液溶液經(jīng)弱極性有機溶劑萃取，去除溶液中的不皂化物； 步驟三:提取:將步驟二中所得皂化液溶液用無機酸液調(diào)PH至2-3，再用弱極性有機溶劑分3次充分萃取脂肪酸，合并有機溶劑相，得到含有脂肪酸產(chǎn)物的溶劑相，除去溶劑后獲得脂肪酸產(chǎn)品。2.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟一中的強堿醇溶液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、乙醇、甲醇。3.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟一中的強堿醇溶液的溶度為0.5?lmol/L。4.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟一中的強堿醇溶液在溫度為50?80°C下與微藻凍干藻粉進行皂化反應3小時，小時，并且脂肪酸不易發(fā)生氧化。5.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟一中的強堿醇溶液與微藻凍干藻粉按照體積或者質(zhì)量比例10:1?20:1進行皂化。6.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟一中的皂化液濁液中同時存在藻體、脂肪酸鹽、不皂化物、甘油物質(zhì)。7.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟一中的微藻包括微擬球藻、小球藻、裂殖壺菌、三角褐指藻、鹽生杜氏藻、新月菱形藻、隱甲藻、等鞭金藻、富油新綠藻、斜生柵藻海洋微藻。8.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟二中的弱極性有機溶劑極性范圍為約O?I，且不溶于皂化液溶液，不皂化物在這種有機溶劑中的分配系數(shù)大于在皂化液溶液中的分配系數(shù)，且脂肪酸鹽微溶或不溶于該有機溶劑，同時這種溶劑可以回收利用。9.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟三中的弱極性有機溶劑極性范圍為約O?I，且不溶于步驟三所述的調(diào)酸后的溶液，脂肪酸在這種有機溶劑中的分配系數(shù)大于在皂化液溶液中的分配系數(shù)，且沸點低于脂肪酸的沸點，同時這種溶劑可以回收利用。10.根據(jù)權利要求1所述的一種微藻干藻粉直接皂化高效提取脂肪酸的方法，其特征在于，所述步驟三中的脂肪酸產(chǎn)品，利用GC法結合脂肪酸混合標樣的GC圖譜進行脂肪酸組成分析，證明所得脂肪酸產(chǎn)品即為微藻油脂肪酸產(chǎn)品。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種微藻干藻粉直接皂化提取脂肪酸的方法，包括直接皂化法提取微藻脂肪酸的步驟。采用直接皂化獲得的脂肪酸可占微藻油脂含量15％以上，與兩步提取脂肪酸中脂肪酸占微藻油脂含量的12％相比，脂肪酸提取率有所提高，且直接皂化法操作工藝簡單，容易控制，溶劑回收率高，環(huán)境污染小，成本低，可促進微藻PUFAs的綜合利用，促進微藻產(chǎn)業(yè)發(fā)展。
【IPC分類】C11B1/00, C11B1/10
【公開號】CN105505553
【申請?zhí)枴緾N201510833765
【發(fā)明人】楊海麟, 王玉仙, 張玲, 夏小樂, 辛瑜, 王武
【申請人】江南大學
【公開日】2016年4月20日
【申請日】2015年11月26日