燕麥發(fā)酵液及其制備方法與作為化妝品原料的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種燕麥發(fā)酵液及其制備方法與作為化妝品 原料的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 燕麥?zhǔn)瞧鹪从谖覈墓爬显耘嘧魑镏?，將成為人類第H大主糧；燕麥具有降血 月旨，輔助降血糖，提高免疫力等功能。燕麥?zhǔn)蔷哂卸喾N用途的谷物，可用于飼料、醫(yī)藥、工業(yè) 原料和化妝品等方面，燕麥營養(yǎng)豐富，其含有的功能成份不但種類多，而且含量也很高。燕 麥在化妝品方面具有保濕，抗氧化，抗衰老，抗敏，止癢等功效。其有效成分包括目-葡聚 糖，蛋白多膚，W及酪類，生物堿，維生素等。例如專利文獻(xiàn)UUSpatentno.US5888521)中 公開的一種促進(jìn)細(xì)胞再生的方法。該專利發(fā)明了一種成份包含有居基姪酸和燕麥提取物， 并且發(fā)現(xiàn)送種成份能促進(jìn)細(xì)胞再生。
[0003] 益生菌公認(rèn)對(duì)人體有益，并且其發(fā)酵液中有大量的氨基酸，作為化妝品添加劑天 然無害。目前很多知名護(hù)膚品都W益生菌發(fā)酵產(chǎn)物作為有效成份添加劑，例如雅詩蘭黛 巧SteeLauder)的AdvancedNi曲tRepair添加了雙歧桿菌發(fā)酵產(chǎn)物，倩碧（Clinique)的 舒緩泛紅防曬粉底液添加了乳酸桿菌發(fā)酵產(chǎn)物，SKII品牌的專利成份Pitera。Pitera是 一種叫做Saccharomycopsis的酵母在發(fā)酵過程中所提煉出來的一種液體，具有優(yōu)異的滋 潤及特殊保濕功能。
[0004] 例如專利文獻(xiàn)2扣Spatentno.US8071115B2)中公開的乳酸菌發(fā)酵稻米提取液作 為護(hù)膚品活性成份的制造方法。專利文獻(xiàn)1中記載了護(hù)膚品中添加乳酸菌發(fā)酵稻米提取液 可W改變發(fā)質(zhì)，提亮膚色，而且可W使化妝品乳液更穩(wěn)定。
[0005] 又如專利文獻(xiàn)3(USpatentno.US5324515)中公開的一種從乳酸桿菌發(fā)酵產(chǎn)物中 獲得化妝品原材料的制備方法。制備方法中包含有乳酸桿菌細(xì)胞裂解液。而且文獻(xiàn)記載了 其發(fā)明的化妝品原材料具有抗氧化的作用，并且能夠修復(fù)皮膚受損的DNA，提高皮膚的免疫 力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種燕麥發(fā)酵液的制備方法。
[0007] 本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟；將尿腸球菌接種到含有燕麥的培養(yǎng)基中，發(fā)酵 培養(yǎng)，得到發(fā)酵產(chǎn)物，即得到燕麥發(fā)酵液。
[0008] 上述方法中，所述含有燕麥的培養(yǎng)基由燕麥、MRS液體培養(yǎng)基和水組成，所述燕麥 在所述含有燕麥的培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為1. 25% -5%;所述MRS液體培養(yǎng)基在所述含 有燕麥的培養(yǎng)基中的體積百分含量為83. 3% ;
[0009] 上述含有燕麥的培養(yǎng)基按照如下方法制備：將7. 5% (質(zhì)量百分含量）的燕麥液 與MRS液體培養(yǎng)基W體積比為1 ;5的比列混合，形成含有燕麥的培養(yǎng)基。
[0010] MRS液體培養(yǎng)基由如下終濃度的物質(zhì)和水組成；20g/L葡萄糖，2g/L硫酸倭，2g/L 巧樣酸二鋼，5g/L醋酸鋼，0.Ig/L走水硫酸鎮(zhèn)，0. 05g/L四水硫酸儘，2g/L磯酸氨二鐘，15g/L酵母粉，lOg/L蛋白腺。
[0011] 所述尿腸球菌W尿腸球菌培養(yǎng)液的形式接種。
[0012] 上述尿腸球菌培養(yǎng)液為將尿腸球菌接種到種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到尿腸球菌培養(yǎng) 液。
[0013] 上述種子培養(yǎng)基為MRS液體培養(yǎng)基；
[0014] 所述培養(yǎng)條件為37°C，lOOr/min，振蕩培養(yǎng)20小時(shí)。
[0015] 上述方法中，所述含有燕麥的培養(yǎng)基中的燕麥的質(zhì)量百分含量為1. 25%;
[0016] 所述接種為將1. 5Xl〇9c化/ml尿腸球菌培養(yǎng)液接種到含有燕麥的培養(yǎng)基中，使 發(fā)酵初始體系中的所述尿腸球菌的密度ODe。。為0. 5。
[0017]上述發(fā)酵初始體系為所述尿腸球菌培養(yǎng)液接入所述含有燕麥的培養(yǎng)基中時(shí)的發(fā) 酵容器中的全部物質(zhì)；
[0018] 上述方法中，所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為30-4(TC，所述發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間為24h-50h; 所述發(fā)酵培養(yǎng)的最佳或具體溫度為37C，所述發(fā)酵培養(yǎng)的最佳或具體時(shí)間為30小時(shí)；
[0019] 所述發(fā)酵培養(yǎng)中發(fā)酵體系的抑值為6. 2-7. 0,所述發(fā)酵培養(yǎng)中發(fā)酵體系的抑值具 體為6. 8 ;
[0020] 所述發(fā)酵產(chǎn)物的葡萄糖的濃度不超過lOg/L;
[0021] 所述發(fā)酵培養(yǎng)的方式為攬拌發(fā)酵培養(yǎng)，且在發(fā)酵培養(yǎng)過程中補(bǔ)加葡萄糖，且使發(fā) 酵體系中葡萄糖的終濃度不超過lOg/l，具體為0. 5-lOg/L。。
[0022] 上述方法中，所述方法還包括如下步驟；在得到發(fā)酵產(chǎn)物后，收集上清液；再將所 述上清液過濾除菌。
[0023] 所述收集上清液為離必，所述離必為1400化pm離必0. 5小時(shí)；
[0024] 所述過濾采用濾膜，所述濾膜的孔徑為0. 22U m。
[0025] 上述方法中，所述燕麥具有如下特性；水溶性膳食纖維含量為4. 3%，蛋白含量為 15. 2% ；
[0026] 所述尿腸球菌為GIMCC編號(hào)；GIML388的尿腸球菌。
[0027]由上述方法制備的燕麥發(fā)酵液。
[0028] 上述的燕麥發(fā)酵液在制備具有如下A或B特征產(chǎn)品中的應(yīng)用也是本發(fā)明保護(hù)的范 圍；
[0029]A、抗衰老、美白和/或抗氧化；
[0030]B、促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞內(nèi)黑色素的合成、抑制細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性和/或消 除自由基。
[0031] 上述應(yīng)用中，所述廣品為化妝品或試劑盒。
[0032] 上述應(yīng)用中，所述抗衰老通過促進(jìn)細(xì)胞增殖體現(xiàn)；所述細(xì)胞具體采用小鼠成纖維 細(xì)胞Ba化/c3T3;
[0033] 所述美白通過抑制細(xì)胞內(nèi)黑色素的合成和/或抑制細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性體現(xiàn)；所 述細(xì)胞為黑素瘤B16 -FlO細(xì)胞；
[0034] 所述抗氧化通過消除自由基體現(xiàn)。
[0035] 上述的燕麥發(fā)酵液在作為化妝品原料或制備化妝品中的應(yīng)用。
[0036] 上述的燕麥發(fā)酵液如下1)-4)至少一種中的應(yīng)用：
[0037] 1)促進(jìn)細(xì)胞增殖；所述細(xì)胞為小鼠成纖維細(xì)胞度a化/c3T3細(xì)胞）
[0038] 2)抑制細(xì)胞內(nèi)黑色素的合成；所述細(xì)胞為黑素瘤B16 -FlO細(xì)胞；
[0039] 3)抑制細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性；所述細(xì)胞為黑素瘤B16 -FlO細(xì)胞；
[0040] 4)消除自由基。
[0041] 本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明選取市售可食用性燕麥片作為生物轉(zhuǎn)化對(duì)象，保證燕 麥原料的質(zhì)量安全性；采用益生菌尿腸球菌作為發(fā)酵菌種，對(duì)燕麥進(jìn)行發(fā)酵生物轉(zhuǎn)化制得 燕麥發(fā)酵液，能兼具益生菌和植物活性物的營養(yǎng)。因此，本發(fā)明的生物轉(zhuǎn)化液安全性高，且 具有優(yōu)異的抗衰老，抗氧化，W及美白作用，可W用于化妝品中。
[0042] 可W配合本發(fā)明的燕麥發(fā)酵液的化妝品種類沒有特別的限定。
【附圖說明】
[0043]圖1為燕麥發(fā)酵液對(duì)細(xì)胞內(nèi)相對(duì)黑素含量的影響
[0044] 圖2為燕麥發(fā)酵液對(duì)細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶相對(duì)生物活性的影響
[0045]圖3為燕麥發(fā)酵液的化Olox當(dāng)量的抗氧化能力
【具體實(shí)施方式】
[0046] 下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0047] 下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0048] 下述實(shí)施例中燕麥轉(zhuǎn)化液為燕麥發(fā)酵液。
[0049] 實(shí)施例1、燕麥發(fā)酵液的制備
[0050] -、含有燕麥的培養(yǎng)基的配置
[0051] 選取市售可食用性燕麥片作為生物轉(zhuǎn)化對(duì)象，其水溶性膳食纖維含量為4. 3%，蛋 白含量為15. 2%。
[0052] 配制7. 25% (質(zhì)量百分含量）燕麥液，將燕麥片溶解在水里，12rC滅菌20min。
[0053]MRS液體培養(yǎng)基由如下終濃度的物質(zhì)和水組成；20g/L葡萄糖，2g/L硫酸倭，2g/L 巧樣酸二鋼，5g/L醋酸鋼，0.Ig/L走水硫酸鎮(zhèn)，0. 05g/L四水硫酸儘，2g/L磯酸氨二鐘，15g/ L酵母粉，lOg/L蛋白腺，pH調(diào)節(jié)到7. 0,12rC滅菌20min〇
[0054] 含有燕麥的培養(yǎng)基由燕麥、MRS液體培養(yǎng)基和水組成，其中燕麥在含有燕麥的培養(yǎng) 基中的質(zhì)量百分含量為1.25% ;MRS液體培養(yǎng)基在所述含有燕麥的培養(yǎng)基中的體積百分含 量為83. 3%。
[0055] 上述含有燕麥的培養(yǎng)基按照如下方法制備：將7. 5% (質(zhì)量百分含量）的燕麥液 與MRS液體培養(yǎng)基W體積比為1 ;5的比列混合，形成含有燕麥的培養(yǎng)基。
[0056] 二、尿腸球菌培養(yǎng)液的制備
[0057] 菌種；尿腸球菌（廣東省微生物研究所微生物菌種保藏中必，GIMCC編號(hào)： GIML 388)。
[005引平板培養(yǎng)基；MRS瓊脂培養(yǎng)基，含2. 0 %瓊脂，pH為6. 5。
[0059] 搖瓶種子培養(yǎng)基為MRS液體培養(yǎng)基，抑為6. 2~6. 5。
[0060] 用接種環(huán)畫斜線接種尿腸球菌于平板培養(yǎng)基上，37C培養(yǎng)18小時(shí)至尿腸球菌菌 落出現(xiàn)。從平板上取3個(gè)菌落接種于搖瓶種子培養(yǎng)基（250mlH角瓶裝MRS液體培養(yǎng)基 150ml)中，，37°C，100r/min，振蕩培養(yǎng)20小時(shí)，得到尿腸球菌培養(yǎng)液（約為1.5Xl〇9cfu/