一種促進細胞激活和分化的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種促進細胞激活和分化的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]LED (發(fā)光二極管，Light Emitting D1de)屬于半導(dǎo)體固體發(fā)光器件，當(dāng)半導(dǎo)體P-N結(jié)通以正向電流時，P區(qū)載流子發(fā)生復(fù)合，引起光子發(fā)射直接將電能轉(zhuǎn)化為光能，目前己有紅外、紅、黃、綠、藍、紫等各種發(fā)光二極管。LED具有冷光源、可調(diào)節(jié)波段、全固態(tài)、發(fā)光效率高、能耗低、功率小、單色性好、綠色環(huán)保、壽命長等特點，已被廣泛應(yīng)用于信號指示、裝飾照明、液晶背光、通信等領(lǐng)域。近年來，隨著LED光源技術(shù)巨大進步，LED在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用越發(fā)廣泛，主要用于醫(yī)療特殊燈具照明、疾病診斷、和醫(yī)學(xué)治療，其中在醫(yī)學(xué)治療領(lǐng)域，其臨床上應(yīng)用也越來越廣泛，主要用于理療、保健、美容等方面。
[0003]研究顯示，LED光源輻射能夠激活細胞，促進細胞生長。如，Whelan等利用670nm的LED輻射小鼠成纖維細胞，結(jié)果顯示小鼠成纖維細胞DNA合成速率較正常對照組增加10% _43%，并且隨天數(shù)增加其增長趨勢呈降低規(guī)律。李燕等利用650±17nm波長LED刺激人皮膚成纖維細胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺激600秒后細胞總數(shù)比對照組顯著增多。
[0004]然而，目前測刺激的效果不佳，有待改進。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供不同紅、黃、綠LED燈組合刺激細胞激活和分化的方法。
[0006]細胞激活:是指細胞機能活化，細胞產(chǎn)生細胞促進因子、啟動免疫級聯(lián)、不斷產(chǎn)生系列白細胞介素或干擾素的能力提高的現(xiàn)象。
[0007]本發(fā)明促進細胞激活和分化的方法，它是采用細胞治療轉(zhuǎn)化儀處理，所述細胞治療轉(zhuǎn)化儀包括包括底座、外罩和位于外罩內(nèi)部的LED燈筒，所述外罩一側(cè)有針筒入口，外罩表面設(shè)有液晶顯示屏和儀器啟動鍵，所述LED燈筒內(nèi)部有容納針筒的通道，所述通道的一端開口與針筒入口正對，所述通道側(cè)面有LED光源，所述外罩內(nèi)部有控制板，所述液晶顯示屏、LED光源和儀器啟動鍵與控制板電聯(lián)接，所述外罩與底座固定連接。所述LED燈筒頂部設(shè)有燈座，所述LED光源設(shè)于燈座上，所述燈座平行設(shè)有三排，分別安裝LED紅光源、LED綠光源和LED黃光源，每排等間距設(shè)有10個燈座，所述燈座的排向與通道的軸線平行。所述LED紅光源波長620-625nm，電壓1.9?2.5V ;所述LED綠光源波長510_520nm，電壓3.0?3.2V ;所述LED黃光源波長585-590nm，電壓1.9?2.2V。
[0008]包括如下步驟:
[0009](I)取細胞，置于針筒中，然后將針筒放入通道(7)中；
[0010](2)打開LED光源和儀器啟動鍵(10)，光照10_20min，即可。
[0011]優(yōu)選的，所述外罩與針筒入口相對的另一側(cè)有風(fēng)扇，所述風(fēng)扇與控制板電聯(lián)接。
[0012]優(yōu)選的，所述通道與LED燈筒內(nèi)壁之間有一層玻璃罩。
[0013]優(yōu)選的，所述針筒入口處安裝有滾動軸承，所述滾動軸承的外環(huán)與針筒入口的內(nèi)壁配合，滾動軸承的內(nèi)環(huán)伸出滾動軸承的兩端，所述底座上有電機，所述電機通過皮帶與內(nèi)環(huán)的一端連接，內(nèi)環(huán)另一端設(shè)有螺孔，有螺紋孔的一端位于外罩外側(cè)；所述外罩上表面設(shè)有開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵和關(guān)閉旋轉(zhuǎn)控制鍵，所述電機、開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵和關(guān)閉旋轉(zhuǎn)控制鍵與控制板電聯(lián)接；步驟(2)中，打開開LED光源和儀器啟動鍵的同時，打開開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵，其中旋轉(zhuǎn)的速率為30轉(zhuǎn)/分鐘。
[0014]進一步的，所述外罩上表面設(shè)有增加時間控制鍵和減少時間控制鍵，所述增加時間控制鍵和減少時間控制鍵與控制板電聯(lián)接。
[0015]進一步的，所述外罩和LED燈筒的材質(zhì)為醫(yī)用無鉛不銹鋼。
[0016]進一步的，所述外罩的外表面和內(nèi)表面及LED燈筒的外表面均噴涂有烤漆。
[0017]優(yōu)選地，步驟(I)中，針筒放入通道(7)中后，LED光源與針筒的垂直距離為3_8cm0
[0018]優(yōu)選地，步驟⑴中，所述細胞為血小板、干細胞或巨核細胞。
[0019]本發(fā)明還提供了前述方法在提高血小板的血管內(nèi)皮生長因子、血小板衍生因子血管生成素-1和/或白細胞介素I受體拮抗劑表達水平中的用途。
[0020]本發(fā)明方法采用紅、綠、黃3種特定波段LED光源組合輻射結(jié)合旋轉(zhuǎn)處理，高效率誘導(dǎo)細胞激活，促進細胞生長和分化，其適用于人或動物富含血小板血漿(PRP)中的血小板、干細胞、上皮細胞等再生轉(zhuǎn)化，臨床應(yīng)用前景良好。
[0021]顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0022]以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0023]圖1是本發(fā)明中外罩的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0024]圖2是本發(fā)明中LED燈筒的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0025]圖中:1-外罩、2-LED燈筒、3_針筒入口、4_液晶顯示屏、5_風(fēng)扇、6_燈座、7_通道、8-減少時間控制鍵、9-增加時間控制鍵、10-儀器啟動鍵、11-開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵、12-關(guān)閉旋轉(zhuǎn)控制鍵。
[0026]圖3生長因子ELISA表達檢測結(jié)果；
[0027]圖4 ELISA實驗顯色前后各生長因子狀態(tài)。
【具體實施方式】
[0028]實施例1本發(fā)明促進細胞激活和分化方法
[0029]本發(fā)明促進細胞激活和分化的儀器一一細胞治療轉(zhuǎn)化儀的結(jié)構(gòu)如圖1、2所示，包括底座、外罩I和位于外罩內(nèi)部的LED燈筒2，外罩I 一側(cè)有針筒入口 3，外罩表面設(shè)有液晶顯示屏4和儀器啟動鍵10，LED燈筒2內(nèi)部有容納針筒的通道7，通道7的一端開口與針筒入口 3正對，通道7側(cè)面有LED光源，外罩I內(nèi)部有控制板，液晶顯示屏4、LED光源和儀器啟動鍵10與控制板電聯(lián)接，外罩I與底座固定連接；優(yōu)選的，外罩I與針筒入口 3相對的另一側(cè)有風(fēng)扇5，風(fēng)扇5與控制板電聯(lián)接，優(yōu)選的，通道7與LED燈筒2內(nèi)壁之間有一層玻璃罩。
[0030]針筒入口 3處安裝有滾動軸承，滾動軸承的外環(huán)與針筒入口 3的內(nèi)壁配合，滾動軸承的內(nèi)環(huán)伸出滾動軸承的兩端，底座上有電機，電機通過皮帶與內(nèi)環(huán)的一端連接，內(nèi)環(huán)另一端設(shè)有螺孔，本實施方式中螺孔設(shè)有三個，螺孔中有螺絲，有螺紋孔的一端位于外罩I外側(cè)；外罩I上表面設(shè)有開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵11和關(guān)閉旋轉(zhuǎn)控制鍵12，所述電機、開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵11和關(guān)閉旋轉(zhuǎn)控制鍵12與控制板電聯(lián)接，
[0031]進一步的，外罩I上表面設(shè)有增加時間控制鍵9和減少時間控制鍵8，所述增加時間控制鍵9和減少時間控制鍵8與控制板電聯(lián)接；優(yōu)選的LED燈筒2頂部設(shè)有燈座6，LED光源設(shè)于燈座6上，所述燈座6平行設(shè)有三排，分別安裝LED紅光源、LED綠光源和LED黃光源，每排等間距設(shè)有10個燈座6，燈座的排向與通道7的軸線平行，優(yōu)選的，LED紅光源波長620-625nm，電壓1.9?2.5V ；LED綠光源波長510_520nm，電壓3.0?3.2V ；LED黃光源波長585-590nm，電壓1.9?2.2V。外罩I和LED燈筒2的材質(zhì)為醫(yī)用無鉛不銹鋼；外罩I的外表面和內(nèi)表面及LED燈筒2的外表面均噴涂烤漆，外罩I長17cm，寬14cm，高9.5cm。
[0032]將細胞懸液裝入針筒，針筒通過針筒入口 3進入通道7，旋緊螺孔中的螺絲，將針筒與滾動軸承的內(nèi)環(huán)固定在一起，開啟儀器啟動鍵10，按下開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵11，LED紅光源、LED綠光源和LED黃光源組合對細胞進行刺激；內(nèi)置的電機通過皮帶帶動滾動軸承的內(nèi)環(huán)轉(zhuǎn)動，進而帶動針筒旋轉(zhuǎn)，既可使得LED光照更均勻、充分，也可防止如血小板、PRP之類血細胞的聚集現(xiàn)象，保證細胞生長活性。通過減少時間控制鍵8或增加時間控制鍵9可減少或增加照射時間，風(fēng)扇5可散熱，當(dāng)溫度達到25度，風(fēng)扇會自動啟動，保證細胞于LED燈照射下溫穩(wěn)定低于37度；通過液晶顯示屏4可顯示時間和溫度，通道7與LED燈筒2內(nèi)壁之間的玻璃罩隔絕LED燈與所檢測樣品并可平衡LED燈的照射強度，通過控制板自動溫度、光照時間，以及控制電機和風(fēng)扇5的啟動和關(guān)閉。
[0033]促進細胞激活和分化的步驟如下:
[0034](I)取細胞，置于針筒中，然后將針筒放入通道(7)中；
[0035](2)打開LED光源和儀器啟動鍵(10)，光照10_20min，即可。
[0036]其中，步驟(I)中，針筒放入通道(7)中后，LED光源與針筒的垂直距離為3-8cm。
[0037]其中，步驟(2)中，打開開LED光源和儀器啟動鍵的同時，打開開啟旋轉(zhuǎn)控制鍵，其中旋轉(zhuǎn)的速率為30轉(zhuǎn)/分鐘。
[0038]以下用實驗例的方式來說明本發(fā)明有益效果:
[0039]實驗例I采用本發(fā)明方法處理富含血小板血漿
[0040]一、儀器
[0041]本發(fā)明實施例1記載的細胞治療轉(zhuǎn)化儀。
[0042]二、處理方法
[0043]原料:采集健康人靜脈外周血1ml于醫(yī)用抗凝管內(nèi)，立即顛倒混合5?10次，利用改進的2次離心法離心，第I次離心室溫200g