專利名稱：新穎的抗癌及抑制細胞過度增生或分化不良的藥物經(jīng)皮吸收劑型的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及以苯基丁酸鹽為活性成份的外用藥配方，特別是關于油質軟膏、乳膏及凝膠等藥學配方，以用于治療身體表淺部的癌癥及細胞過度增生或分化不良。
苯基丁酸(PB；phenylbutyric acid；分子量164.21克/摩爾)的結構為芳香族脂肪酸，為一天然無毒、無色、無味的化合物，可由尿液中純化而得，或可由化學合成而得到高純度的苯基丁酸鈉(NaPB；sodium phenylbutyrate)。苯基丁酸鈉在臨床上可用于治療高氨血癥(hyperammonemia)，當口服此藥物時，苯基丁酸鈉可快速代謝成為苯基乙酸鈉(NaPA；具有尿臭味)。苯基乙酸鹽與谷氨酰胺(Glu)共軛形成苯基乙?；劝滨０罚?jīng)由腎臟排泄；每一摩爾的苯基乙?；劝滨０房蓴y帶2摩爾的氮，因而可治療高氨血癥。口服苯基丁酸鈉最常見的副作用，包括停經(jīng)/月經(jīng)障礙(23％)、食欲降低(4％)、不悅的體味(3％)以及不好的口感(3％)；然而，此藥物的最大劑量為20克/日，為一安全性甚高的藥物。
1980年約翰霍普金斯醫(yī)院以苯基丁酸鈉治療脲循環(huán)疾病(ureacycle disorder)。近年來，基礎及臨床研究更指出苯基丁酸鈉可治療囊性纖維化(cystic fibrosis)、地中海型貧血/鐮狀細胞貧血(thalassemia/sickle cell anemia)、腎及肝衰竭(kidney and liverfailure)、HIV/AIDS以及各種癌癥，例如，乳癌(breast cancer)、黑色素瘤(melanoma)、頭頸鱗狀細胞癌(head and neck squamous cellcarcinoma)、腦腫瘤(brain tumor)、結腸癌(colon cancer)、非小細胞肺癌(non-small lung cancer)或前列腺癌(prostate cancer)。已有臨床治療成功的案例，指出苯基丁酸鈉注入法加上口服維生素A酸(tretinoin)，可有效治療急性前髓細胞性白血病(acutepromylocytic leukemia)。此外，對于自體免疫病一類的類風濕性關節(jié)炎(rheumatoid arthritis)、滑膜細胞(synovial cell)過度增生所引起的關節(jié)破壞，以及放射治療後，照射范圍內(nèi)的皮下成纖維細胞過度增生所引起的皮膚纖維化，已有證據(jù)顯示苯基丁酸鈉可抑制這些細胞的過度生長。因為苯基丁酸鈉已被證實為一強效的分化劑，對于口腔內(nèi)的白或紅斑，以及肌細胞的分化不良所造成的肌肉萎縮，亦有可預期的療效。
美國專利第6,037,376號揭示以苯基乙酸鹽或其衍生物，單獨或合并治療貧血、癌癥、AIDS等的方法。在此專利的實施例20中提及以NaPA為活性成份，賦形劑為硬脂酰醇、白蠟及凡士林而成為油質軟膏(oleaginous ointment)的制備方法。然而，熟悉于制藥業(yè)的人士應可了解，由于是親水性的分子特性，以目前的技術水平，鈉鹽形式的苯基丁酸鹽(NaPB)或苯基乙酸鹽(NaPA)，均無法用于油質軟膏的制備，因此，該專利將苯基乙酸鹽或其衍生物(包括苯基丁酸鹽)制成萬能藥(包括油質軟膏)，并無法據(jù)以實施。此外，目前NaPB在市面上只有口服及針劑劑型，而口服或針劑并無法使皮下藥物濃度達到有效濃度(≥2mM)，且臨床上并無任何不具毒性的抗癌藥膏可用于身體的淺表部，更顯示將PB及PA(苯基乙酸)制作成外用藥的困難及必要。
亦有報告指出，苯基丁酸鹽在臨床上的效果約是苯基乙酸鹽的3-4倍，此外，苯基丁酸鈉無色無臭，且為美國食品藥物管理局(FDA)所核準的藥物。因此，本發(fā)明即針對苯基丁酸鹽及苯基丁酸鈉的特性，設計一種臨床上具有抗癌療效，不具毒性及無臭，且具有優(yōu)良架儲安定性的局部外用藥，包括油質軟膏、乳膏(cream)及凝膠(gel)等的藥學配方，以用于治療身體表淺部的癌癥及細胞過度增生或分化不良，此即為本發(fā)明的目的。
有鑒于此，本發(fā)明提供一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的油質軟膏組合物及其制法，其中油質軟膏組合物包括一有效量的苯基丁酸，以及一種或多種生理上可接受的油質基劑，選自高級脂肪酸、蠟、油脂類、甘油、高級醇及合成脂所組成的族群中。
本發(fā)明的第二種形態(tài)是提供一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的乳膏組合物及其制法，其中乳膏組合物包括一有效量的苯基丁酸或其藥學上可接受的鹽類；一水性溶劑；以及一種或多種生理上可接受的油相成份。
本發(fā)明的第三種形態(tài)是提供一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的凝膠組合物及其制法，其中凝膠組合物包括一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類；一水性溶劑；以及一增稠劑。
本發(fā)明的第四種形態(tài)是提供一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的持續(xù)釋放的凝膠、乳膏及貼片，包括一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類；一水性溶劑；一表面活性劑；以及一增稠劑。
本發(fā)明的第五種形態(tài)是提供一種治療粘膜表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的口內(nèi)膏組合物，包括一有效量的苯基丁酸；一增粘劑；以及一種或多種生理上可接受的油質基劑，選自高級脂肪酸、蠟、油脂類、甘油、高級醇及合成脂所組成的族群中。
上述身體表淺部的癌癥及細胞過度增生或分化不良，是包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變(premalignant lesions)。
為了讓本發(fā)明的上述和其他目的、特征，及優(yōu)點能更明顯易懂，下文特舉較佳實施例并配合所附圖示，做詳細說明如下

圖1是顯示各種苯基丁酸(鹽)的藥學配方的皮膚滲透試驗。
圖2是顯示各種苯基丁酸(鹽)的藥學配方的安定性試驗(室溫)。
圖3是顯示各種苯基丁酸(鹽)的藥學配方的安定性試驗(30℃+75％RH)。
圖4是顯示各種苯基丁酸(鹽)的藥學配方的安定性試驗(35℃+75％RH)。
圖5是顯示各種苯基丁酸(鹽)的藥學配方的安定性試驗(40℃+75％RH)。
圖6是顯示各種苯基丁酸(鹽)的藥學配方的藥物動力學試驗。
圖7是顯示苯基丁酸鹽持續(xù)釋放的藥學組合物的皮膚滲透試驗。
圖8是顯示苯基丁酸鹽持續(xù)釋放的藥學組合物的藥物動力學試驗。
圖9是顯示苯基丁酸油質軟膏的藥理評估，其中(a)為接種腫瘤細胞第0天的老鼠；(b)為四周後，未涂抹藥物的對照組；以及(c)為涂抹本發(fā)明的苯基丁酸油質軟膏的試驗組，在四周後的結果。
圖10是顯示在上述處理的試驗組及對照組老鼠中，腫瘤體積大小的測量結果。
此處所使用的名詞“油質軟膏(oleaginous ointment)”是指一種半固體的外用藥配方，可涂抹于皮膚或粘膜；其特征為無水、不易吸水(厭水性)、不溶于水以及不易用水洗去。
此處所使用的名詞“乳膏(cream)”是指一種兩相系統(tǒng)的半固體或液體制劑，含有水/油(water-in-oil)乳劑或油/水(oil-in-water)乳劑或水溶性微結晶體的半固體劑量形式；其特征為不透明、軟的半固體或稠厚的液體制劑、大多可用水洗除。
此處所使用的名詞“凝膠(gel)”是指含有凝絮的無機沉淀物或其他微細無機水化顆粒的膠狀團塊，系屬于粘稠的水分散系(aqueous dispersion)。
此處所使用的名詞“持續(xù)釋放(sustained release)”是指每單位時間內(nèi)藥物可持續(xù)穩(wěn)定的釋放；藥物從基劑中緩慢穩(wěn)定地釋放，以達到穩(wěn)定藥物濃度的目的。
此處所使用的名詞“口內(nèi)膏”是指一種可特別用于口腔粘膜的藥學配方，其與一般外用劑型不同的處，在于口內(nèi)膏的粘度，必須能粘著在口腔粘膜且不被唾液酶所分解。
苯基丁酸為一油溶性的化合物，而苯基丁酸鹽(例如，苯基丁酸鈉)則為一親水性的化合物。因此，在賦形成為萬能藥(elixir)時，必須考慮此有效成份的分子特性，將其溶于適當?shù)馁x形劑或基劑中，以制備各種不同劑型的外用藥。根據(jù)本發(fā)明的較佳具體實施例，由于油質軟膏及口內(nèi)膏系使用純的油質基劑，因此是以苯基丁酸作為活性成份；凝膠及持續(xù)釋放的配方則為水性溶劑，因此是以苯基丁酸鹽作為活性成份；至于乳膏，則由于其具有油、水兩相的性質，因此苯基丁酸及苯基丁酸鹽均可作為活性成份。
上述的苯基丁酸包括2-苯基丁酸、3-苯基丁酸或4-苯基丁酸；其藥學上可接受的鹽類包括堿金屬鹽(例如，鈉鹽、鉀鹽)或堿土金屬鹽(例如，鎂鹽、鈣鹽)，由于美國食品藥物管理局所核準的醫(yī)藥級試藥為苯基丁酸鈉，因此，較佳是使用鈉鹽形式的苯基丁酸作為活性成份。在本發(fā)明的藥學配方中，苯基丁酸或苯基丁酸鹽的含量，較佳是在0.1～10％(wt)的劑量范圍內(nèi)，特別地，在油質軟膏的配方中，苯基丁酸或苯基丁酸鹽的含量，可在0.1～40％(wt)的劑量范圍內(nèi)。
本發(fā)明所提供的各種外用藥，可直接涂抹于皮膚或粘膜，因此可有效治療身體表淺部的癌癥及細胞過度增生或分化不良。此處所指的“身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良”，包括發(fā)生在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的任何腫瘤細胞及/或組織，熟悉于腫瘤醫(yī)學的人士應可了解，這些身體表淺部癌癥包括，但并不限于，在皮膚或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。此處所使用的名詞“癌前病變”是指在轉為惡性腫瘤的前，所能觀察到的表征現(xiàn)象，例如，但不限于，口腔癌的征兆口腔白或紅斑；以及結腸癌的征兆息肉等。本發(fā)明所提供的藥學配方，亦可有效地應用在癌前病變，以預防癌癥的發(fā)生。
在一較佳具體實施例中，口內(nèi)膏組合物可應用于粘膜表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，特別是在口腔、直腸或陰道粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
在本發(fā)明的藥學配方中，可使用的油質基劑的例子包括，但并不限于，高級脂肪酸、蠟、油脂類、甘油、高級醇或合成脂。適合的高級脂肪酸包括，例如，硬脂酸、油酸、肉荳蔻酸或二十二烷酸；適合的油脂類的例子包括礦物油、硅油、凡士林或植物油；適合的高級醇包括，例如，鯨蠟醇、硬脂醇、膽醇、十六醇或二十二醇；以及適合的合成脂包括，例如，單油酸甘油基酯、氫化蓖麻油、肉豆蔻酸異丙基酯或棕櫚酸異丙基酯。蠟為長鏈的碳氫化合物，包括白蠟或石蠟等。熟悉于外用藥制備技藝者應了解，與上述所使用的基劑，在性質上具有相似功能的類似物或衍生物，也是在本發(fā)明的范疇之內(nèi)。
當使用含有水相成份的藥學配方時，例如，本發(fā)明的凝膠、乳膏或持續(xù)釋放配方，其水性溶劑可包括水或C1～C4低級醇(例如，甲醇、乙醇或異丙醇)。這些配方還可視需要，包括一種或多種的添加劑，例如，防腐劑(例如，對-苯甲酸烷基酯(paraben)；例如對-苯甲酸甲基酯或對-苯甲酸丙基酯)；增稠劑(例如，StabilezeQM(商品名)、羧甲基纖維素鈉鹽)；或增進穿透皮膚的作用劑(例如，1，2-二丙醇)。上述含有水性溶劑的藥學配方，在將所有成份混合的後，尚須利用酸液將配方的pH值調(diào)整到pH4～6?？墒褂玫乃嵋翰o特別地限制，包括有機酸或無機酸，例如，磷酸溶液、檸檬酸溶液等，為在此技藝的人士所熟知。
在一較佳具體實施例中，乳膏配方包括一油相成份，較佳地是液體的油相成份，可使用的例子包括，但并不限于，Tefose 63、Superpolystate、Coster 5000、Myritol 318、Coster 5088、GMS SE或其類似物。上述各組份的比例或選擇的成份，并無一定的限制，可視所需要的乳膏性質及效果而個別調(diào)整。
在一較佳具體實施例中，持續(xù)釋放的配方更包括一表面活性劑，以達成持續(xù)釋放的目的?？墒褂玫慕缑婊钚詣├鏟F-127(BASF Inc.)，其添加量可視使用目的而調(diào)整，較佳地是在2～8％(wt)的范圍內(nèi)，但熟悉于此技藝者應了解，表面活性劑愈高，藥物穿透皮膚的能力便愈低。此外，在持續(xù)釋放的配方中，增稠劑的添加量較佳地是在10～15％(wt)的范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的另一較佳具體實施例中，口內(nèi)膏更包括一增粘劑，用于提高藥學配方的粘度?？墒褂玫脑稣硠├缇郾┧徕c，其添加量較佳地是在20～40％(wt)的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的另一種形態(tài)，是提供上述藥學配方的制法，其中，油質軟膏組合物的制法，包括(1)將一種或多種生理上可接受的油質基劑于50℃～100℃加熱融化，以得到一膏狀混合物；(2)將一有效量的苯基丁酸加入該膏狀混合物中；以及(3)將該混合物攪拌至無氣泡并緩慢冷卻至室溫。在不破壞藥物活性成份的前提下，亦可先將苯基丁酸與油質基劑混合，再一起于50℃～100℃加熱融化。上述將膏狀混合物攪拌至無氣泡的方法并無特別的限制，且為熟悉軟膏制備技藝者所熟知，較佳地，是在一真空環(huán)境或惰性氣氛環(huán)境下進行。
本發(fā)明也提供用于治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的乳膏組合物的制法，包括(1)將一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類溶于一水性溶劑中，以形成一水溶液，同時并制備一油相成份；(2)混合該水溶液及油相成份以形成一混合物；以及(3)以一有機酸或無機酸將該混合物的pH調(diào)整至4～6。如上所述，由于具有油、水兩相的性質，乳膏組合物也可使用苯基丁酸作為活性成份，其制法包括(1)將一有效量的苯基丁酸溶于一油相成份中；(2)混合一水性溶劑及該油相成份，以形成一混合物；以及(3)以一有機酸或無機酸將該混合物的pH調(diào)整至4～6 。
本發(fā)明更提供用于治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的凝膠組合物的制法，包括(1)將一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類溶于一水性溶劑中，以形成一水溶液；(2)將一足以使水溶液凝結成膠的增稠劑加入該水溶液中；以及(3)以一有機酸或無機酸將該水溶液的pH調(diào)整至4～6。
實施例本發(fā)明將通過以下的實施例而作更進一步地詳細說明，但這些實施例僅是作為舉例說明，而非用以限定本發(fā)明的范疇。
制備例1油質軟膏Tri-o-01的制備精確秤取470克凡士林(white petrolatum；Riedel-de Ha雗)、25克石蠟(paraffin wax 50/52；富鉑)以及5克的4-苯基丁酸(Merck)，置入1000毫升燒杯中，加熱70℃融解。將膏狀混合物以400轉/分鐘(rpm)的轉速攪拌1小時。放置在室溫中冷卻，待藥含量檢測後，分裝至5克的小管中。
制備例2油質軟膏Tri-o-07的制備精確秤取65克凡士林(Riedel-de Ha雗)、15克鯨蠟醇(Riedel-deHa雗)、260克軟石蠟(soft paraffin；Merck)、155克液態(tài)石蠟(Merck)以及5克的4-苯基丁酸(Merck)，置入1000毫升燒杯中，加熱70℃融解。將膏狀混合物以400rpm的轉速攪拌1小時。放置在室溫中冷卻，待藥含量檢測後，分裝至5克的小管中。
制備例 3乳膏Tri-c-02-3的制備A部份精確秤取70克Tefose 63、20克Superpolystate、10克Coster 5000、15克Myritol 318、15克Coster 5088以及15克GMS SE(以上均購自富鉑公司)，置入500毫升燒杯中，加熱70℃融解。
B部份精確秤取5.739克苯基丁酸鈉(Triple Crown America，Inc.)、0.125克對-苯甲酸甲基酯(Merck)、0.075克對-苯甲酸丙基酯(Merck)以及149.061克去離子水，置入1000毫升燒杯中，加熱70℃融解。
將A部份緩慢加入B部份，持續(xù)攪拌，設定轉速400rpm，攪拌5分鐘。加入2％Stabileze QM(將2克Stabileze QM溶于98克去離子水，加熱70℃攪拌成糊狀，放置室溫冷卻)，攪拌5分鐘。以0.85％磷酸(Merck)調(diào)整至pH5.34，并以600rpm攪拌20分鐘。放置在室溫中冷卻，待藥含量檢測後，分裝至5克的小管中。
制備例4凝膠Tri-g-01-2的制備A部份精確秤取10克Stabileze QM以及232.035克去離子水，置入1000毫升燒杯中，加熱70℃融解。
B部份精確秤取5.739克苯基丁酸鈉(Triple Crown America，Inc.)、0.125克對-苯甲酸甲基酯(Merck)、0.075克對-苯甲酸丙基酯(Merck)、232.035克去離子水以及20克10％NaOH，置入500毫升燒杯中，加熱70℃融解。
將B部份緩慢加入A部份，持續(xù)攪拌，設定轉速400rpm，攪拌20分鐘。放置在室溫中冷卻，待藥含量檢測後，分裝至5克的小管中。
制備例5凝膠Tri-g-05-1的制備A部份精確秤取10克StabilezeQM以及380.561克去離子水，置入1000毫升燒杯中，加熱70℃融解。
B部份精確秤取5.739克苯基丁酸鈉(Triple Crown America，Inc.)、0.125克對-苯甲酸甲基酯(Merck)、0.075克對-苯甲酸丙基酯(Merck)、83.5克1，2-丙二醇(Merck)以及20克10％NaOH，置入500毫升燒杯中，加熱70℃融解。
將B部份緩慢加入A部份，持續(xù)攪拌，設定轉速400rpm，攪拌20分鐘。放置在室溫中冷卻，待藥含量檢測後，分裝至5克的小管中。
實施例1皮膚滲透試驗將制備例1～5的各種配方制品充填于修飾的Franz透明擴散盒(diffusion cell)的上層，使用0.45μm過濾膜，塞入攪拌子并注入預熱至32±0.5℃的6毫升的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)接受相(receptor phase)，小心注入接受相以避免氣泡產(chǎn)生。
皮膚前處理將貯存于冰箱冷凍庫的鋁箔袋包裝的皮膚(購自Ohio Valley Tissue ＆ Skin Center)置于室溫下水中解凍；將解凍的皮膚放入60℃恒溫水中。以鑷子將角質層(stratum corneum)及真皮層(dermis)分開備用。
取出已處理的皮膚，室溫下解凍。組合皮膚滲透裝置，以鐵夾固定。以微量吸管將欲加入的外用劑型分別慢慢加入至皮膚滲透裝置中，并平舖于皮膚表面。將修飾的Franz透明擴散盒放入恒溫攪拌裝置中，以32±0.5℃控溫，在1、2、3、4、6及8小時取樣，取樣時，將PBS萃取液全部倒出，置于閃爍瓶中，重新加入已預熱的PBS萃取液。各樣品經(jīng)0.45μm的過濾膜過濾，以HPLC(Jasco)分析藥物含量(n＝6)，滲透量是以下式計算取樣時間的滲透量(微克)＝(樣品濃度x6.4/0.636)其中，樣品濃度是HPLC的分析結果(微克/毫升)；6.4是皮膚滲透器的體積(立方厘米)；以及0.636是皮膚滲透面積(平方厘米)。結果如表1及圖1所示。
表11％苯基丁酸藥學配方的皮膚滲透試驗
如表1所示，5個配方均非常容易穿過皮膚角質層，于1小時便有很高的藥物滲透量。在8小時，Tri-g-01-2配方為5個配方中藥物累積滲透量最高者。
實施例2安定性試驗根據(jù)衛(wèi)生署所規(guī)定的藥品虐待試驗方法，分別使用3個加速溫度(30℃、35℃及40℃)及75％相對濕度(RH)的條件，進行6個月的藥品安定性試驗。其中，藥含量的萃取方式如下(1)油質軟膏配方精確稱取0.5克樣品于50毫升樣品瓶，定量加入25毫升乙腈，置入60℃水溫的超音波振蕩30分鐘。樣品放至室溫，取2毫升樣品溶液，以0.02M KH2PO4稀釋到20毫升。取上述樣品溶液5毫升，以移動相稀釋到20毫升。過濾(0.45μm)，取濾液進行HPLC分析。
(2)乳膏、凝膠配方精確稱取0.5克樣品于50毫升樣品瓶，定量加入25毫升乙腈，置入超音波振蕩30分鐘。樣品放至室溫，取2毫升樣品溶液，以0.02M KH2PO4稀釋到20毫升。取上述樣品溶液5毫升，以移動相稀釋到20毫升。過濾(0.45μm)，取濾液進行HPLC分析。
結果如表2及圖2～5所示。
表21％苯基丁酸藥學配方的安定性試驗
如表2所示，除Tri-o-07配方加速安定性藥含量有衰退的現(xiàn)象，Tri-g-01-2配方的外觀較為混濁，其余配方的外觀及安定性極佳。
實施例3存放期的推算根據(jù)加溫安定性試驗結果，以ARRHENIUS方程式LN(K*1000)＝A+B*(1000/T)回推產(chǎn)品室溫存放期，得到以下表3的結果(K速率常數(shù)，A截距，B斜率，T絕對溫度(簁))表31％苯基丁酸藥學配方的存放期推算表
實施例4藥物動力學試驗根據(jù)Young，Mu Jen，et al，＂Mathematical Modeling of Matrix YypeTransdermal Therapeutic System＂，(1994)21st CRS Annual Meeting onControlled Delivery of Drug and Bioactive Materials，Nice France所說明的藥物皮膚濃度推導模式，可計算出體內(nèi)藥物于不同時間點的濃度變化情形。此動力學是根據(jù)以下的假設而推算(1)藥物于皮膚中的滲透系由Fick’s擴散定律決定；(2)藥物滲透量不隨時間變化；(3)藥物于皮膚角質層中擴散速率一定；(4)藥物一進入真皮層後即被血液帶走；以及(5)時間為零時皮膚中不含藥物。結果如表4及圖6所示。
表4藥物動力學計算結果
制備例6持續(xù)釋放配方的制備根據(jù)以下表4的組成份制備持續(xù)釋放的配方。將配方放入40℃+75％安定箱中(1星期)，以觀察其外觀；并在室溫下放置3個月，以觀察其安定性，結果如表5所示。
表5持續(xù)釋放配方(單位wt％)
*以PF-127作為持續(xù)釋放基底，羧甲基纖維素鈉鹽作為增稠劑。
實施例5持續(xù)釋放配方的皮膚滲透試驗將持續(xù)釋放配方Tri-s-04及Tri-s-05，根據(jù)實施例1的方法，進行皮膚滲透試驗(皮膚編號0415000103)，并以凝膠配方Tri-g-05-1作為對照組。分別在0.33、0.66、1、2、3、4、6、8及24小時取樣，并計算其滲透累積量。結果如表6及圖7所示。
表6持續(xù)釋放配方的皮膚滲透試驗
實施例6藥物動力學試驗同實施例4所述的藥物皮膚濃度推導模式，計算體內(nèi)藥物于不同時間點的濃度變化情形。結果如表7及圖8所示。
表7藥物動力學計算結果
制備例7口內(nèi)膏配方的制備精確秤取345克凡士林、150克聚丙烯酸鈉(作為增粘劑)以及5克的4-苯基丁酸(Merck)，置入1000毫升燒杯中，加熱70℃融解。將膏狀混合物以400轉/分鐘(rpm)的轉速攪拌1小時。
將此配方(Tri-oral-04)放入40℃+75％安定箱中(1星期)，以觀察其外觀；并在室溫下放置3個月，以觀察其安定性。結果呈現(xiàn)白色半固體、具有顆粒感、不會產(chǎn)生油水分離的現(xiàn)象，可適用于口內(nèi)膏的應用。
實施例7抗癌活性的試驗將老鼠1MEA.7R.1細胞株(5×105細胞溶于1毫升PBS中)，以皮下注射的方式，接種至20只雌性BALB/c老鼠的脅腹。使腫瘤生長至大約0.5公分的范圍。選擇12只具有相同大小腫瘤的老鼠進行以下的試驗，并將其區(qū)分為兩組(1)對照組(6只)，未涂抹藥物；以及(2)試驗組(6只)，涂抹適量的Tri-o-01(含1％苯基丁酸)至患部，每日2次，持續(xù)4周。每周以卡尺測量表皮上可觸摸到的腫瘤大小，并根據(jù)以下的公式而計算腫瘤體積腫瘤體積＝ab2/2其中，a及b分別是腫瘤的大直徑及小直徑(單位公分)。結果如圖9及圖10所示。
由皮膚滲透試驗的結果可知，本發(fā)明的配方均非常容易穿過皮膚角質層，于1小時便有很高的藥物滲透量(參考圖1及圖7)。由安定性試驗結果可知，除Tri-o-07配方加速安定性藥含量有衰退的現(xiàn)象，Tri-g-01-2配方的外觀較為混濁，其余配方均保持良好的外觀以及極佳的安定性(圖2～5)，其中，Tri-c-02-3的乳膏配方，其存放期更可達83.9月。油質軟膏因目前苯基丁酸無制藥級的原料，故可能影響本發(fā)明的安定性及存放期。參考圖7，由單位時間內(nèi)藥物持續(xù)的釋放量可知，Tri-s-05具有極優(yōu)異的持續(xù)釋放效果；且由藥物動力學的結果可知，Tri-s-05可達到較高的藥物皮膚濃度(參考圖8)。
以苯基丁酸處理的試驗組，其腫瘤生長的速度減緩，而對照組則明顯地增加壞死的區(qū)域(圖9)。經(jīng)過4周，對照組的腫瘤大小是試驗組的6倍(圖10)。此外，4周後，試驗組不再涂抹Tri-o-01，則2周內(nèi)腫瘤長至與對照組相同的大小(數(shù)據(jù)未顯示)。所有對照組及試驗組均存活超過12周。結果顯示在老鼠模式中，局部涂抹本發(fā)明制備的含苯基丁酸的藥物，可產(chǎn)生明顯的腫瘤生長遲延效果。
雖然本發(fā)明已以較佳實施例揭露如上，然其并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉此技藝者，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，當可作各種的更動與潤飾，因此本發(fā)明的保護范圍，當視後附的權利要求的范圍為準。
權利要求
1.一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的油質軟膏組合物，包括(a)一有效量的苯基丁酸；以及(b)一種或多種生理上可接受的油質基劑，選自高級脂肪酸、蠟、油脂類、甘油、高級醇及合成脂所組成的族群中。
2.如權利要求1所述的油質軟膏組合物，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
3.如權利要求2所述的油質軟膏組合物，其中苯基丁酸的含量是在0.1～40％(wt)的范圍。
4.如權利要求1所述的油質軟膏組合物，其中該高級脂肪酸包括硬脂酸、油酸、肉荳蔻酸或二十二烷酸。
5.如權利要求1所述的油質軟膏組合物，其中該油脂類包括礦物油、硅油或凡士林。
6.如權利要求1所述的油質軟膏組合物，其中該高級醇包括鯨蠟醇、硬脂醇、膽醇、十六醇或二十二醇。
7.如權利要求1所述的油質軟膏組合物，其中身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
8.一種用于治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的油質軟膏組合物的制法，包括下列步驟(1)將一種或多種生理上可接受的油質基劑于50℃～100℃加熱融化，以得到一膏狀混合物；(2)將一有效量的苯基丁酸加入該膏狀混合物中；以及(3)將該混合物攪拌至無氣泡并緩慢冷卻至室溫。
9.如權利要求8所述的制法，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
10.如權利要求9所述的制法，其中苯基丁酸的含量是在0.1～10％(wt)的范圍。
11.如權利要求8所述的制法，其中油質基劑選自高級脂肪酸、蠟、油脂類、甘油、高級醇及合成脂所組成的族群中。
12.如權利要求11所述的制法，其中該高級脂肪酸包括硬脂酸、油酸、肉荳蔻酸或二十二烷酸。
13.如權利要求11所述的制法，其中該油脂類包括礦物油、硅油或凡士林。
14.如權利要求11所述的制法，其中該高級醇包括鯨蠟醇、硬脂醇、膽醇、十六醇或二十二醇。
15.如權利要求8所述的制法，其中身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
16.一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的乳膏組合物，包括(a)一有效量的苯基丁酸或其藥學上可接受的鹽類；(b)一水性溶劑；以及(c)一種或多種生理上可接受的油相成份。
17.如權利要求16所述的乳膏組合物，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
18.如權利要求17所述的乳膏組合物，其中藥學上可接受的鹽類包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽。
19.如權利要求18所述的乳膏組合物，其中藥學上可接受的鹽類是鈉鹽。
20.如權利要求17所述的乳膏組合物，其中苯基丁酸或其藥學上可接受的鹽類是在0.1～10％(wt)的范圍。
21.如權利要求16所述的乳膏組合物，其中油相成份是液體的油相成份。
22.如權利要求16所述的乳膏組合物，其中水性溶劑是水。
23.如權利要求16所述的乳膏組合物，其中該乳膏組合物的pH是在4～6的范圍內(nèi)。
24.如權利要求16所述的乳膏組合物，更包括一種或多種的添加劑，選自防腐劑、增稠劑及增進穿透皮膚的作用劑所組成的族群中。
25.如權利要求24所述的乳膏組合物，其中該防腐劑包括對苯甲酸烷基酯。
26.如權利要求24所述的乳膏組合物，其中該增進穿透皮膚的作用劑是1.2-丙二醇。
27.如權利要求16所述的乳膏組合物，其中身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
28.一種用于治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的乳膏組合物的制法，包括下列步驟(1)將一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類溶于一水性溶劑中，以形成一水溶液，同時并制備一油相成份；(2)混合該水溶液及油相成份以形成一混合物；以及(3)以一有機酸或無機酸將該混合物的pH調(diào)整至4～6。
29.如權利要求28所述的制法，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
30.如權利要求29所述的制法，其中藥學上可接受的鹽類包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽。
31.如權利要求30所述的制法，其中藥學上可接受的鹽類是鈉鹽。
32.一種用于治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的乳膏組合物的制法，包括下列步驟(1)將一有效量的苯基丁酸溶于一油相成份中；(2)混合一水性溶劑及該油相成份，以形成一混合物；以及(3)以一有機酸或無機酸將該混合物的pH調(diào)整至4～6。
33.如權利要求32所述的制法，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
34.如權利要求28或32所述的制法，其中苯基丁酸或其藥學上可接受的鹽類是在0.1～10％(wt)的范圍。
35.如權利要求28或32所述的制法，更包括加入一種或多種的添加劑，選自防腐劑、增稠劑及增進穿透皮膚的作用劑所組成的族群中。
36.如權利要求35所述的制法，其中該防腐劑包括對-苯甲酸烷基酯。
37.如權利要求35所述的制法，其中該增進穿透皮膚的作用劑是1，2-丙二醇。
38.如權利要求28或32所述的制法，其中身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
39.一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的凝膠組合物，包括(a)一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類；(b)一水性溶劑；以及(c)一增稠劑。
40.如權利要求39所述的凝膠組合物，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
41.如權利要求40所述的凝膠組合物，其中藥學上可接受的鹽類包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽。
42.如權利要求41所述的凝膠組合物，其中藥學上可接受的鹽類是鈉鹽。
43.如權利要求39所述的凝膠組合物，其中苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類是在0.1～1 0％(wt)的范圍。
44.如權利要求39所述的凝膠組合物，其中水性溶劑是水。
45.如權利要求39所述的凝膠組合物，其中該凝膠組合物的pH是在4～6的范圍內(nèi)。
46.如權利要求39所述的凝膠組合物，更包括一種或多種的添加劑，系選擇自防腐劑及增進穿透皮膚的作用劑所組成的族群中。
47.如權利要求46所述的凝膠組合物，其中該防腐劑包括對-苯甲酸烷基酯。
48.如權利要求46所述的凝膠組合物，其中該增進穿透皮膚的作用劑是1，2-丙二醇。
49.如權利要求39所述的凝膠組合物，其中身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
50.一種用于治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的凝膠組合物的制法，包括下列步驟(1)將一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類溶于一水性溶劑中，以形成一水溶液；(2)將一足以使水溶液凝結成膠的增稠劑加入該水溶液中；以及(3)以一有機酸或無機酸將該水溶液的pH調(diào)整至4～6。
51.如權利要求50所述的制法，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
52.如權利要求51所述的制法，其中藥學上可接受的鹽類包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽。
53.如權利要求52所述的制法，其中藥學上可接受的鹽類是鈉鹽。
54.如權利要求50所述的制法，其中苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類是在0.1～10％(wt)的范圍。
55.如權利要求50所述的制法，更包括加入一種或多種的添加劑，選自防腐劑及增進穿透皮膚的作用劑所組成的族群中。
56.如權利要求55所述的制法，其中該防腐劑包括對-苯甲酸烷基酯。
57.如權利要求55所述的制法，其中該增進穿透皮膚的作用劑是1，2-丙二醇。
58.如權利要求50所述的制法，其中身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
59.一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的持續(xù)釋放的藥學組合物，包括(a)一有效量的苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類；(b)一水性溶劑；(c)一表面活性劑；以及(d)一增稠劑。
60.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
61.如權利要求60所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中藥學上可接受的鹽類包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽。
62.如權利要求61所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中藥學上可接受的鹽類是鈉鹽。
63.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中苯基丁酸的藥學上可接受的鹽類是在0.1～10％(wt)的范圍。
64.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中水性溶劑是水。
65.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中該藥學組合物的pH是在4～6的范圍內(nèi)。
66.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中增稠劑是羧甲基纖維素鈉鹽。
67.如權利要求66所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中增稠劑的添加量是在10～15％(wt)的范圍內(nèi)。
68.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中表面活性劑是PF-127。
69.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中表面活性劑的添加量是在2～8％(wt)的范圍內(nèi)。
70.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，更包括一種或多種的添加劑，選自防腐劑及增進穿透皮膚的作用劑所組成的族群中。
71.如權利要求70所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中該防腐劑包括對-苯甲酸烷基酯。
72.如權利要求59所述的持續(xù)釋放的藥學組合物，其中身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在皮膚、皮下、肌肉、關節(jié)或粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變。
73.一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的口內(nèi)膏組合物，包括(a)一有效量的苯基丁酸；(b)一增粘劑；以及(c)一種或多種生理上可接受的油質基劑，選自高級脂肪酸、蠟、油脂類、甘油、高級醇及合成脂所組成的族群中。
74.如權利要求73所述的口內(nèi)膏組合物，其中苯基丁酸選自2-苯基丁酸、3-苯基丁酸及4-苯基丁酸所組成的族群中。
75.如權利要求74所述的口內(nèi)膏組合物，其中苯基丁酸的含量是在0.1～10％(wt)的范圍。
76.如權利要求73所述的口內(nèi)膏組合物，其中該高級脂肪酸包括硬脂酸、油酸、肉荳蔻酸或二十二烷酸。
77.如權利要求73所述的口內(nèi)膏組合物，其中該油脂類包括礦物油、硅油或凡士林。
78.如權利要求73所述的口內(nèi)膏組合物，其中該高級醇包括鯨蠟醇、硬脂醇、膽醇、十六醇或二十二醇。
79.如權利要求73所述的口內(nèi)膏組合物，其中增粘劑包括聚丙烯酸鈉。
80.如權利要求73所述的口內(nèi)膏組合物，其中增粘劑的添加量是在20～40％(wt)的范圍內(nèi)。
81.如權利要求73所述的口內(nèi)膏組合物，其中粘膜表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良，包括在口腔、直腸或陰道粘膜上的轉移癌、復發(fā)癌、原位癌或癌前病變以及口腔內(nèi)的白斑或紅斑。
全文摘要
本發(fā)明揭示一種治療身體表淺部癌癥及細胞過度增生或分化不良的局部外用藥,包括油質軟膏、乳膏及凝膠等藥學配方,并以其體外皮膚滲透試驗、藥物血中濃度模擬、安定性試驗及存放期為特征。
文檔編號A61P35/00GK1343489SQ0012868
公開日2002年4月10日 申請日期2000年9月20日 優(yōu)先權日2000年9月20日
發(fā)明者鐘邑林, 顏榮郎, 王藹君, 姚麗芬 申請人:鐘邑林, 顏榮郎