新地錢素a的人工合成方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種天然藥物化合物的制備方法，尤其涉及新地錢素A的人工合成方法。
[0002]
【背景技術(shù)】
[0003]苔類植物在全球有6000余種，其中我國特有種類約100多種。對(duì)苔類植物活性成分的研宄表明，苔類植物是生物活性天然產(chǎn)物的重要來源。近年來從苔類植物中分離獲得了大量結(jié)構(gòu)新穎并且活性顯著的化合物，其中許多可作為新藥研宄的先導(dǎo)化合物。新地錢素A (Neomarchantin A)是一種新型雙聯(lián)節(jié)類化合物，由山東大學(xué)天然藥物化學(xué)課題組在對(duì)采自四川樂山的粗裂地錢的化學(xué)成分進(jìn)行分析時(shí)首次獲得。研宄發(fā)現(xiàn)，新地錢素A對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株A-549作用突出，對(duì)P-388白血病細(xì)胞株毒也具有中等的細(xì)胞毒作用。但因其天然產(chǎn)物的生長周期相對(duì)較長，含量相對(duì)偏低，分離技術(shù)復(fù)雜，這些因素增加了對(duì)其生物學(xué)和藥理學(xué)活性方面的研宄難度，阻礙了對(duì)該物質(zhì)的進(jìn)一步研宄和應(yīng)用。
[0004]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]解決的技術(shù)問題:針對(duì)現(xiàn)有的天然產(chǎn)物新地錢素A獲取量少，阻礙了對(duì)該物質(zhì)的進(jìn)一步研宄和應(yīng)用方面存在的不足，本發(fā)明提供一種新地錢素A的人工合成方法，該方法能夠持續(xù)、大量地合成新地錢素A，為后續(xù)實(shí)現(xiàn)該藥物的規(guī)?；a(chǎn)提供良好的技術(shù)支持。
[0006]技術(shù)方案:本發(fā)明提供一種新的制備新地錢素A的方法，該方法以4-羥基-3-甲氧基苯甲醛、對(duì)溴苯甲酸甲酯為起始原料，通過化學(xué)反應(yīng)最終制備得到新地錢素A，具體包括以下步驟:
(1)化合物I的合成:
1)將3.9mL N, N-二甲基甲酰胺和4.7mL硫酸二甲酯的混合溶液在50_60°C加熱3_5h，形成DMF-DMS加合物；
2)將5g4-羥基-3-甲氧基苯甲醛用30mL 二氯甲烷溶解，然后加入7.2mL的丙二醇，再加入上述制備得到的DMF-DMS加合物，20-30°C反應(yīng)20_26h，反應(yīng)結(jié)束后，將體系置于冰浴下，向反應(yīng)體系中加入6-8mL三乙胺，用20-25mL乙醚萃取三次，合并有機(jī)層，用含有5%亞硫酸氫鈉和飽和乙酸鈉的溶液洗滌三次，再用飽和氯化鈉和飽和乙酸鈉等比例混合液洗三次，所得有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，旋蒸，重結(jié)晶得到棕色晶體，即為化合物I ;
(2)化合物2的合成:
將化合物I和間溴苯甲醛用吡啶攪拌溶解后，再依次加入碳酸鈣粉末、碳酸鉀粉末，氧化銅粉末，加熱至沸騰后回流，TLC檢測至反應(yīng)完全，減壓蒸餾除去溶劑，然后加二氯甲烷浸取，過濾，濃縮濾液，經(jīng)柱層析分離，得粗產(chǎn)品，最后乙醇重結(jié)晶得白色粉末，即為化合物2，其中化合物I與間溴苯甲醛物質(zhì)的量之比為1: (0.95-1.05)，優(yōu)選為1:1.05，碳酸鈣與碳酸鉀物質(zhì)的量之比為1: (1-5)，回流時(shí)間為15-20h，優(yōu)選18h ；
(3)化合物3的合成:
將3.72g對(duì)溴苯甲酸甲酯、2.5g異香蘭素溶于10mL吡啶中，用機(jī)械攪拌器攪拌后，再依次加入3.58g碳酸鉀粉末、0.68g碳酸鈣粉末、0.65g氧化銅粉末，加熱回流15_20h，TLC檢測至反應(yīng)完全，減壓蒸餾除去溶劑吡啶，然后加30ml 二氯甲烷浸取，過濾，濃縮濾液，經(jīng)柱層析得到粗產(chǎn)品，最后乙醇重結(jié)晶得淡黃色固體，即為化合物3 ;
(4)化合物4的合成:
將3.14g化合物3溶于60mL無水乙醇中，在0-5°C下加入0.17g硼氫化鈉粉末，攪拌10-20min，然后室溫下攪拌反應(yīng)約3h，TLC檢測至反應(yīng)完全，加水至無氣泡產(chǎn)生為止，攪拌30min，旋蒸濃縮，用二氯甲烷萃取，再用飽和乙酸鈉和飽和氯化鈉的等比例混合溶液洗三次，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得白色固體，即為化合物4 ;
(5)化合物5的合成:
將2.53g化合物4、3.16 g三苯基膦氫溴酸鹽依次投入到100 mL圓底燒瓶中，加入50mL乙腈溶解，磁子攪拌，加熱至沸騰回流2h，停止加熱，降至室溫，減壓濃縮，經(jīng)柱層析分離，得白色固體，即為化合物5 ；
(6)化合物6的合成:
將3.6g化合物3、1.7446g化合物5溶于50ml 二氯甲烷中，然后加入1.54g碳酸鉀，用18-冠-6催化，加熱至沸騰回流20-24h，濾液濃縮，剩余物經(jīng)柱層析分離得到油狀固體，即為化合物6;
(7)化合物7的合成:
將2.0448g化合物6溶解于40mL乙酸乙酯中，加入0.2Ig Pd/C和4.5mL三乙胺，通入氫氣，常溫?cái)嚢?0-24h，TLC檢測至反應(yīng)完全，過濾，減壓濃縮，剩余物經(jīng)柱層析分離，得淡黃色油狀物即為化合物7 ;
(8)化合物8的合成:
依次將1.7834g化合物7、0.18g四氫鋰鋁加入到25mL無水四氫呋喃中，在0_5°C下攪拌l_2h，反應(yīng)結(jié)束后，慢慢滴加水10ml，減壓濃縮，用30ml 二氯甲烷萃取，有機(jī)相再用飽和氯化鈉溶液洗三次，再用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得無色油狀物，即為化合物8 ;
(9)化合物9的合成:
將1.3804g化合物8溶于60mL乙醇中，然后加2.5ml濃鹽酸和25mL的水，室溫?cái)嚢?4h，反應(yīng)完畢后，滴加6ml飽和碳酸氫鈉溶液至無氣泡，減壓濃縮，加乙酸乙酯溶解，用碳酸氫鈉和氯化鈉飽和混合溶液洗三次，合并有機(jī)相，用無水硫酸鈉干澡，減壓濃縮，經(jīng)柱層析分離，得無色油狀物，即為化合物9 ;
(10)化合物10的合成:
將0.986g化合物9、0.74g三苯基膦氫溴酸鹽投入到30mL乙腈中，攪拌加熱至沸騰回流2h，TLC檢測至反應(yīng)完全，降至室溫，減壓濃縮，經(jīng)柱層析分離，得白色固體，即為化合物10 ；
(11)化合物11的合成:
將0.86g甲醇鈉加入到200mL 二氯甲烷中，將1.58g化合物10用300 mL二氯甲烷溶解后緩滴加至上述的甲醇鈉的二氯甲烷溶液中，反應(yīng)12 h，TLC檢測至反應(yīng)完全，減壓濃縮，經(jīng)柱層析分離，得白色粉末，即為化合物11;
(12)化合物12的合成:
將0.768g化合物11溶解于20mL乙酸乙酯中，加入0.07g Pd/C，通入氫氣，室溫?cái)嚢?4h，TLC檢測至反應(yīng)完畢后過濾，濾液減壓濃縮，剩余物經(jīng)柱層析分離得白色粉末，即為化合物12 ；
(13)化合物13的合成:
將0.7430g化合物12溶解到30mL 二氯甲烷中，然后在-40°C下滴入1.5mL三溴化硼的20ml 二氯甲烷溶液，在-10°C時(shí)反應(yīng)12h，TLC檢測至反應(yīng)完畢，在0_5°C下滴加水1ml水，用二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相，用無水硫酸鈉干燥，蒸干得白色粉末，即為化合物13，所述化合物13即為新地錢素A。
[0007]所述步驟(2)中的TLC檢測至反應(yīng)完全的具體步驟為:用電吹風(fēng)機(jī)將反應(yīng)體系的溶劑蒸發(fā)，再用二氯甲烷溶解，用化合物1、間溴苯甲醛的二氯甲烷溶液點(diǎn)板，用二氯甲烷作流動(dòng)相進(jìn)行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應(yīng)體系中的無化合物I的斑點(diǎn)，即反應(yīng)完全。
[0008]所述步驟(3)中的TLC檢測至反應(yīng)完全的具體步驟為:用電吹風(fēng)機(jī)將反應(yīng)體系的溶劑蒸發(fā)，再用二氯甲烷溶解，用對(duì)溴苯甲酸甲酯、異香蘭素的二氯甲烷溶液點(diǎn)板，用二氯甲烷作流動(dòng)相進(jìn)行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應(yīng)體系中的無異香蘭素斑點(diǎn)，即反應(yīng)完全。
[0009]所述步驟(4)中的TLC檢測至反應(yīng)完全的具體步驟為:用化合物3的二氯甲烷溶液以及反應(yīng)體系點(diǎn)板，用二氯甲烷作流動(dòng)相進(jìn)行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應(yīng)體系中的無化合物3的斑點(diǎn)，即反應(yīng)完全。
[0010]所述步驟(7)中的TLC檢測至反應(yīng)完全的具體步驟為:用化合物6的乙酸乙酯溶液以及反應(yīng)體系點(diǎn)板，用乙酸乙酯和二氯甲烷混合液作流動(dòng)相進(jìn)行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應(yīng)體系中的無化合物6的斑點(diǎn)，即反應(yīng)完全；其中乙酸乙酯與二氯甲烷體積比為 1: (0.5-2)，優(yōu)選 1:1。
[0011]所述步驟(10)中的TLC檢測至反應(yīng)完全的具體步驟為:用化合物9的二氯甲烷溶液以及反應(yīng)體系點(diǎn)板，用乙酸乙酯作流動(dòng)相進(jìn)行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應(yīng)體系中的無化合物9的斑點(diǎn)，即反應(yīng)完全。
[0012]所述步驟(11)中的TLC檢測至反應(yīng)完全的具體步驟為:用化合物10的二氯甲烷溶液以及反應(yīng)體系