一種從海洋微藻中提取二十碳五烯酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于海洋微藻開發(fā)利用技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種快速有效地從海洋微藻中提取EPA的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]EPA即二十碳五烯酸，是一種多不飽和脂肪酸。同DHA—樣，EPA組成磷脂、膽固醇酯等，是大腦、神經(jīng)系統(tǒng)的重要組成部分。在人體內(nèi)，亞麻酸可以轉(zhuǎn)化成EPA，所以EPA并不是人體必需脂肪酸。EPA對降低低密度脂蛋白膽固醇有很好的作用。EPA存在于魚類、母乳等食物中，EPA有許多功效，可以治療人體自身免疫缺陷，例如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；可以促進(jìn)循環(huán)系統(tǒng)的健康；有助于生長發(fā)育，保持身體里的Ω-3脂肪酸含量處于一個適當(dāng)平衡的位置對正常的生長和發(fā)育是十分必要的；對肺病、腎病、糖尿病、大腸潰瘍和節(jié)段性回腸炎的治療都會起到積極的作用。EPA還具有幫助降低膽固醇和甘油三酯的含量，促進(jìn)體內(nèi)飽和脂肪酸代謝。從而起到降低血液粘稠度，增進(jìn)血液循環(huán)，提高組織供氧而消除疲勞，防止脂肪在血管壁的沉積，預(yù)防動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展、預(yù)防腦血栓、腦溢血、高血壓等心血管疾病。
[0003]但是目前現(xiàn)有技術(shù)中對于EPA的提取率低，亦或有操作復(fù)雜和固定資產(chǎn)投資成本高等問題，均不適于大規(guī)模生產(chǎn)。采用溶劑萃取的方法從海洋微藻中提取EPA，工藝相對簡單，固定資產(chǎn)投資需求小，容易放大規(guī)模生產(chǎn)，所以如何提高EPA的提取率是目前研宄者們研宄的主要問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種從海洋微藻中提取EPA的方法，該方法通過海洋微藻的培養(yǎng)制備和有效提取，從而顯著提高了 EPA的提取率。
[0005]其技術(shù)解決方案包括:
[0006]一種海洋微藻中提取二十碳五烯酸的方法，包括以下步驟:
[0007]a眼點擬微球藻的培養(yǎng)
[0008]取眼點擬微球藻，接種至裝有培養(yǎng)基的三角瓶中，所述眼點擬微球藻和培養(yǎng)基按1.5: 2的比例進(jìn)行接種，然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為28°C，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，培養(yǎng)10天；然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為280C，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，培養(yǎng)9-12天；所述培養(yǎng)基的配方如下:硝酸鈉0.03g/L，磷酸氫二鉀0.01g/L，硼酸10mg/L，氯化錳12mg/L,硫酸銅0.005mg/L，F(xiàn)eC6H5O7 0.2mg/L ；pH 值在 7.5 到 8 之間；
[0009]b溶劑萃取EPA
[0010]眼點擬微球藻培養(yǎng)好后，通過離心收集海藻體，然后冷凍干燥，得到干燥藻體；選取萃取劑萃取干燥藻體，得到萃取液；所述萃取劑是由正己烷與乙醇按照體積比1:2的比例配制而成；然后對萃取液進(jìn)行后處理得到EPA藻油成品。
[0011]步驟a中的培養(yǎng)基采用海水配制，海水在使用前進(jìn)行加溫殺菌處理。
[0012]步驟a中pH值為7.8。
[0013]本發(fā)明的有益技術(shù)效果是:
[0014]本發(fā)明先采用特制的培養(yǎng)基配方，對海洋微藻進(jìn)行培育，通過外因的優(yōu)化提高EPA的表達(dá)量，然后采用溶劑萃取法，選取由正己烷與乙醇按照體積比1:2的比例配制而成的萃取劑，二者綜合作用顯著提高了 EPA的提取率，而且操作步驟簡單，成本低，環(huán)境污染小，有利于大規(guī)模生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0015]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0016]實施例1
[0017]取眼點擬微球藻，接種至裝有特制培養(yǎng)基的三角瓶中，按1: 2的比例進(jìn)行接種，然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為28°C，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，可吸收C02，以防止因碳源不足而影響藻類生長，培養(yǎng)10天。所述特制培養(yǎng)基的配方如下:硝酸鈉0.03g/L，磷酸氫二鉀0.01g/L，硼酸10mg/L，氯化猛12mg/L，硫酸銅0.005mg/L，F(xiàn)eC6H5O7 0.2mL/L ;培養(yǎng)基采用海水配制，調(diào)節(jié)其pH值為7.5。海洋微藻培養(yǎng)完成后，通過離心收集海藻體，然后冷凍干燥，得到干燥藻體；選取萃取劑萃取干燥藻體，得到萃取液。所述萃取劑是由正己烷與乙醇按照體積比1:2的比例配制而成。然后對萃取液進(jìn)行常規(guī)處理得到EPA藻油成品。經(jīng)檢測EPA的提取率為93%。EPA提取率=EPA藻油成品中EPA的量/眼點擬微球藻中EPA的量X 100%。
[0018]實施例2
[0019]取眼點擬微球藻，接種至裝有特制培養(yǎng)基的三角瓶中，按1: 2的比例進(jìn)行接種，然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為28°C，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，可吸收C02，以防止因碳源不足而影響藻類生長，培養(yǎng)10天。所述特制培養(yǎng)基的配方如下:硝酸鈉0.03g/L，磷酸氫二鉀0.01g/L，硼酸10mg/L，氯化猛12mg/L，硫酸銅0.005mg/L，F(xiàn)eC6H5O7 0.2mL/L ;培養(yǎng)基采用海水配制，調(diào)節(jié)其pH值為7.8。海洋微藻培養(yǎng)完成后，通過離心收集海藻體，然后冷凍干燥，得到干燥藻體；選取萃取劑萃取干燥藻體，得到萃取液。所述萃取劑是由正己烷與乙醇按照體積比1:2的比例配制而成。然后對萃取液進(jìn)行常規(guī)處理得到EPA藻油成品。經(jīng)檢測EPA的提取率為95%。EPA提取率=EPA藻油成品中EPA的量/眼點擬微球藻中EPA的量X 100%。
[0020]實施例3:
[0021]取眼點擬微球藻，接種至裝有特制培養(yǎng)基的三角瓶中，按1: 2的比例進(jìn)行接種，然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為28°C，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，可吸收C02，以防止因碳源不足而影響藻類生長，培養(yǎng)10天。所述特制培養(yǎng)基的配方如下:硝酸鈉0.03g/L，磷酸氫二鉀0.01g/L，硼酸10mg/L，氯化猛12mg/L，硫酸銅0.005mg/L，F(xiàn)eC6H5O7 0.2mL/L ;培養(yǎng)基采用淡水配制，調(diào)節(jié)其pH值為7.8。海洋微藻培養(yǎng)完成后，通過離心收集海藻體，然后冷凍干燥，得到干燥藻體；選取萃取劑萃取干燥藻體，得到萃取液。所述萃取劑是由正己烷與乙醇按照體積比1:2的比例配制而成。然后對萃取液進(jìn)行常規(guī)處理得到EPA藻油成品。經(jīng)檢測EPA的提取率為93.5%。EPA提取率=EPA藻油成品中EPA的量/眼點擬微球藻中EPA的量X 100%。
【主權(quán)項】
1.一種從海洋微藻中提取二十碳五烯酸的方法，其特征在于包括以下步驟: a眼點擬微球藻的培養(yǎng) 取眼點擬微球藻，接種至裝有培養(yǎng)基的三角瓶中，所述眼點擬微球藻和培養(yǎng)基按1.5: 2的比例進(jìn)行接種，然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為28°C，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，培養(yǎng)10天；然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為280C，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，培養(yǎng)9-12天；所述培養(yǎng)基的配方如下:硝酸鈉0.03g/L，磷酸氫二鉀0.01g/L，硼酸10mg/L，氯化錳12mg/L,硫酸銅0.005mg/L，F(xiàn)eC6H5O7 0.2mg/L ；pH 值在 7.5 到 8 之間；b溶劑萃取EPA 眼點擬微球藻培養(yǎng)好后，通過離心收集海藻體，然后冷凍干燥，得到干燥藻體；選取萃取劑萃取干燥藻體，得到萃取液；所述萃取劑是由正己烷與乙醇按照體積比1:2的比例配制而成；然后對萃取液進(jìn)行后處理得到EPA藻油成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從海洋微藻中提取二十碳五烯酸的方法，其特征在于:步驟a中的培養(yǎng)基采用海水配制，海水在使用前進(jìn)行加溫殺菌處理。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從海洋微藻中提取二十碳五烯酸的方法，其特征在于:步驟a中pH值為7.8。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種海洋微藻中提取二十碳五烯酸的方法，屬于海洋微藻開發(fā)利用技術(shù)領(lǐng)域。該提取方法包括：取眼點擬微球藻，接種至裝有培養(yǎng)基的三角瓶中，所述眼點擬微球藻和培養(yǎng)基按1.5∶2的比例進(jìn)行接種，然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，溫度為28℃，光暗周期為12h/12h，振搖時保持三角瓶開口，培養(yǎng)10天；然后置于光照培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)，眼點擬微球藻培養(yǎng)好后，通過離心收集海藻體，然后冷凍干燥，得到干燥藻體；選取萃取劑萃取干燥藻體，得到萃取液，對萃取液進(jìn)行后處理得到EPA藻油成品。本發(fā)明方法獲得的EPA的提取率為95％。
【IPC分類】C12R1-89, C12P7-64
【公開號】CN104878050
【申請?zhí)枴緾N201510247112
【發(fā)明人】鄒寧, 張承才, 郭素霞, 韓睿明, 張兆雷, 李悅明, 徐建春
【申請人】鄒寧
【公開日】2015年9月2日
【申請日】2015年5月14日