一種藥物活性糖分子合成在抵抗大腸桿菌中的應(yīng)用方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)用高分子領(lǐng)域，具體而言涉及一種藥物活性糖分子合成在抵抗大腸 桿菌中的應(yīng)用方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 大腸桿菌是常見(jiàn)的細(xì)菌，通常會(huì)出現(xiàn)在人體以及動(dòng)物體內(nèi).大多數(shù)的菌株是無(wú)害 的，但是其中一些菌種對(duì)人體有害，如H4型大腸桿菌曾經(jīng)在德國(guó)和法國(guó)造成50人死亡。
[0003] FebF是大腸桿菌F18菌毛的末端，當(dāng)FebF捕捉到腸粘膜中的糖分子后，會(huì)造成腹 瀉或水腫等疾病。FebF被發(fā)現(xiàn)通常會(huì)與磺化乙酰基乳糖胺和磺化乳糖結(jié)合，但具體的配位 體，還沒(méi)有被確認(rèn).為了進(jìn)一步研宄結(jié)合部位糖類(lèi)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，不同的磺化糖分子結(jié)構(gòu)需 要被合成。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] (一）要解決的技術(shù)問(wèn)題
[0005] 為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種藥物活性糖分子合成在抵抗大腸桿菌中的 應(yīng)用方法，其研宄方法簡(jiǎn)單、方便、易操作。
[0006] (二）技術(shù)方案
[0007] -種藥物活性糖分子合成在抵抗大腸桿菌中的應(yīng)用方法，其具體步驟如下：
[0008] A.磺化疊氮丙基乳糖苷的生成：乳糖（1)通過(guò)以下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成6, 7,8;i:Ac20， NaOAc,reflux, 30min, 81 %；ii：3-chloropropan-l-〇l,BF3-Et2O,dryDCM,RT,2h,82% ； iii：1.NaI,dryDMF, 140°C,lh, 2.NaN3,dryDMF,reflux,lh, 80%；iV：1.NaOMe,dryMeOH, RT,lh, 88%；v：dryacetonitrile, 2, 2-dimethoxypropaneVO(OTf)2,RT, 2d, 69%；vi：Dry acetonitrile,benzaldehydedimethylacetal,CSA,30°C,12h,62% ；
[0009] B.P比喃葡萄糖⑵的合成：無(wú)水醋酸鈉（2eq，25. 0g，0. 31mol)和乙酸酐（10. 7eq， 175ml，I. 85mol)混合加熱到回流溫度，然后逐份加入D-乳糖I(leq，50. 0g，0. 15mol)，繼 續(xù)加熱回流反應(yīng)溶液30分鐘，反應(yīng)溶液倒入500ml冰水中攪拌過(guò)夜；析出的固體化合物通 過(guò)過(guò)濾分離，并用水沖洗，減壓干燥后使用600ml的乙醇重結(jié)晶，形成目標(biāo)產(chǎn)物2(80.6g， 81% )；
[0010] 核磁共振的表征如下(500MHz，CDCl3= 7. 31ppm) 6 = 5. 66 (d，1H， H-l，J1>2= 8. 4Hz)，5. 33(dd，1H，J=I. 2Hz，J= 3. 6HzH-4'），4. 46(d，1H，J= 7. 6Hz，H-l'），4. 42(d，1H，H-6'a)，4. 13-4. 04(m，3H，H-5'，H-6A，H-6'B)，3. 88-3. 85(m，2H，H-4'， H-6b)2. 14,2. 10,2. 08,2. 05,2. 04,2. 02,2. 01，I. 95(8s，24H，8CH3)ppm;13C-匪R(125MHz， CDCl3= 77.16) = 170. 48, 170. 44, 170. 26, 170. 18, 169. 74, 169. 68, 169. 14， 168. 98 (8C，8C= 0)，101. 68 (C-1'），91. 67 (C-I)，75. 81，73. 63,72. 76, 71. 09,70. 87， 70. 65,69. 14, 66. 74，（8C)，61. 87 (C-6)，60. 98 (C-6'），20. 95, 20. 93, 20. 87, 20. 75, 20. 73， 20. 71,20. 62,18. 53 (CH3)ppm；
[0011]C.吡喃葡萄糖苷⑶的合成：化合物2 (leq.，10.Og14. 7mmol)與甲苯一起旋 轉(zhuǎn)蒸饋后溶解于DCM;3_ 氣丙醇（2eq.，2. 5mL，29. 4mmol)和BF3.Et20 (2. 5eq，4. 7mL，and 36. 8mm〇l)加入到反應(yīng)溶液中，反應(yīng)在氮?dú)猸h(huán)境下進(jìn)行，室溫下攪拌3小時(shí)，反應(yīng)進(jìn)程由 TLC(t〇luene/EtOAC，l: 1)監(jiān)控；反應(yīng)結(jié)束后，將溶液倒入冰水中攪拌30分鐘；混合溶液 靜置分層后，有機(jī)層分離后用NaHC03和飽和食鹽水清洗，減壓蒸餾；粗產(chǎn)品通過(guò)硅膠柱分 離后得到代有長(zhǎng)鏈的乳糖苷3(8. 2g，82% );
[0012] 核磁共振和質(zhì)譜數(shù)據(jù)如下！1H-NMR(500MHz，CDC13 = 7. 31ppm)6 = 5. 33(dd， 1H，J=I. 2Hz，J= 4. 4Hz，H-4'），5. 14(dd=t，1H，H-3)，5. 10(dd，1H，H-2'）， 4.94(dd，lH，J= 3.6Hz，J= 10.4Hz，H-3'），4.87(dd，lH，，J= 8.0Hz，J= 9.6Hz， H-2)，4. 50-4. 45 (m，3H，H-l'，H-6a，H-l)，4. 14-4. 04(m，3H，H-5'，H-6a，H-6'b)， 3. 96-3. 91 (m，1H，-0CH2a_)，3. 88-3. 84 (m，1H，H-6b)，3. 80-3. 75(dd=t，1H，H-4)， 3. 69-3. 55 (m，4H，H-5, -〇CH2b，-CH2N3)，2. 14,2. 11，2. 05,2. 04,2. 03,2. 29,I. 95(7s， 21H，-⑶CH3)ppm;13C-匪R(125MHz，CDCl3= 77. 16ppm) :S= 170. 50,170. 47,170. 27， 170. 18,169. 86,169. 83,169. 19(C= 0)，101. 21 (Cl)，100. 93 (Cl，），76. 4, 72. 84, 72. 80， 71. 79,71. 13,70. 83,69. 25 (7C) ,66. 74 (-OCH2CH2CH2Cl) ,66. 50,62. 11,60. 95 (3C), 41. 43 (2C，-OCH2CH2CH2Cl)，32. 29 (-OCH2CH2CH2Cl)，20. 99, 20. 93,20. 94, 20. 82, 20. 77， 20. 76,20. 74 (CH3)ppm.MALDI-TOFMS：CalcdforC29H41C1018713. 08 [M] ；736. 08 [M+Na]+. Found:737. 06 [M+Na] + ±27ppm;
[0013] D.P比喃葡萄糖苷⑷的合成：化和物3(leq，4. 0g，5. 6mmol)和NaI(2eq，I. 7g， 11. 3mm〇l)溶解于干燥的DMF中，加熱到50°C攪拌I小時(shí)；然后加入NaN3后反應(yīng)溶液升 溫到140°C回流1小時(shí)，反應(yīng)溶液倒入冰水中；加入EtOAc后靜置分層，分離有機(jī)相，并使 用EtOAc重復(fù)萃取兩次，兩次的萃取相合并后用飽和食鹽水清洗并減壓蒸餾得到化和物 4(3. 2g,80% )；
[0014] 核磁共振數(shù)據(jù)如下"H-NMRbOOMHz，CDCl3= 7. 31ppm)S= 5. 39(dd，lH，J= 1.2Hz，J= 3.6HzH-4'），5.23(dd=t，lH，H-3)，5.15(dd，lH，H-2'），5.00(dd，lH，J =3.6Hz，J= 10.4Hz，H-3'），4.93(dd，lH，H-2)，4.55-4.50(dd，lH，H-6'a)，4.52(d， 1H，H-l'），4. 51 (d，1H，H-l)，4. 18-4. 09(m，3H，H-5'，H-6a，H-6'b)，3. 97-3. 89(m，2H， H-6b，-0CH2a-)，3.83(dd=t，lH，J= 9.6Hz，H-4)，3.66-3.59(m，2H，H-5, 0CH2b-)， 3. 41-3. 36 (m，2H，-CH2N3)，2. 19,2. 16,2. 10, 2. 09, 2. 08,2. 01，2. 00 (7s，21H，-CH3)， I. 90-1. 82(m，2H，-CH2CH2CH2N3)ppm;13C-NMR(125MHz，CDCl3= 77. 16ppm) :S= 170.40, 170. 39, 170. 19,170. 10,169. 80,169. 68,i69. 12(C= 0)，101. 22(C1)，100. 71 (Cl，）， 76. 38 (C-4)，72. 89 (C-3)，72.81 (C-5)，71.79 (C-2)，71. 12 (C-5,），70.83 (C-3,）， 69. 24(02'），66. 74(04'），66. 59 (-0CH2CH2CH2N3)，62. 06 (06'），60. 93 (C-6)， 48. 08 (-OCH2CH2CH2N3)，29. 11 (-OCH2CH2CH2N3)，20. 98-20. 64 (7CH3)ppm.MALDI-TOFMS:Calcd forC29H41N3018719.24[M] ;742.24[M+Na]+.Found:742. 21 [M+Na] + ±40ppm.NMRdatawere inagreementwiththepreviouslyreportedones[26]；
[0015]E.吡喃葡萄糖苷（5)的合成：化和物4(leq，I. 0g，I. 38mmol)溶解于干燥的甲醇 (10ml，10ml/gsugar);加入甲氧基鈉（1M，100y1)后反應(yīng)溶液在室溫下放置一晚，反應(yīng)進(jìn) 程通過(guò)TLC(DCM/Me0H，3 : 1)進(jìn)行監(jiān)控