一種高效提取枸杞葉多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及從枸杞葉中提取多糖的方法，尤其是一種高效提取枸杞葉多糖的方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 多糖作為一種具有抗病毒、抗癌、降血糖、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、幫助身體組織結(jié)構(gòu)的再 生和修復(fù)等多種保健作用的天然產(chǎn)物，在現(xiàn)代的保健食品研發(fā)中占有重要的地位。在現(xiàn) 有的多糖提取工藝中，較為常見的有水提醇沉法、酸提法、堿提法、超臨界流體萃取法、酶解 法、物理輔助提法等。
[0003] 但是，在這些主流的提取方法中，許多都存在明顯的缺點(diǎn)，如：水提法提取多糖時， 多糖的獲得率往往低于5%，而且提取耗時較長，提取物中含有的雜質(zhì)較多，這就限制了此 法在實際應(yīng)用中特別是在規(guī)模化生產(chǎn)中的應(yīng)用。同樣的，酸提法會引起糖苷鍵的斷裂，堿提 法會引起提取物的風(fēng)味和色澤改變，超臨界流體萃取法雖然能提高多糖的得率和效率，但 由于其設(shè)備較為復(fù)雜、運(yùn)行成本高、提取范圍有限等缺點(diǎn)，仍然不能大規(guī)模使用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種高效提取枸杞葉多糖的方法，能夠有效的提高多糖的得 率，從而節(jié)約了原料，降低了生產(chǎn)成本。
[0005] 一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特別之處在于，包括如下步驟：
[0006] (1)原料及處理：將枸杞葉烘干，然后粉碎并過40-80目篩；
[0007] (2)向得到的粉末中加入石油醚，震蕩20-30min，抽濾，在40-60°C的減壓干燥箱 中干燥l-3h從而得到去除脂肪的枸杞葉粉末；
[0008] (3)在得到的枸杞葉粉末中加入蒸餾水，控制料液比為lg/30_50ml，提取，抽濾后 濾渣再按照上述方法提取兩次，合并三次所得的提取液；
[0009] (4)將合并后的提取液減壓蒸餾以濃縮到原來體積的1/10,然后加入濃縮液 0. 5-2倍體積的savage溶液，充分震蕩15-20min后出現(xiàn)分層，然后在離心機(jī)中離心去除中 間的蛋白層，收集并合并上下層得到多糖溶液；
[0010] (5)在得到的多糖溶液中加入無水乙醇，使乙醇濃度大于80%，靜置2-3h使其充 分沉淀，再經(jīng)過抽濾后得到的濾餅為粗多糖；用體積比為1:1:1的無水乙醇、乙醚、丙酮混 合液清洗粗多糖2-3次，從而去除粗多糖中的色素和雜質(zhì)；
[0011] (6)然后將得到的除去色素和雜質(zhì)后的粗多糖溶于水，并進(jìn)行超濾純化，所用的超 濾膜截留的分子量為8-10KDa，收集大于該分子量的多糖溶液，加入無水乙醇，使乙醇濃度 大于80 %，靜置2-3h使其充分沉淀并抽濾，將所得的濾餅在冷凍干燥機(jī)中干燥，即得枸杞 葉多糖粉末。
[0012] 步驟（3)中提取時所用的方法為高溫高壓法，其溫度和壓力分別為 0. 15MPa-0. 25MPa、100°C_121°C。
[0013]步驟（3)中提取時間為30min-60min。
[0014]步驟（6)中所用的超濾膜截留分子量為lOKDa。
[0015] 步驟（1)中過60目篩。
[0016] 步驟（6)中將所得的濾餅在冷凍干燥機(jī)中干燥，控制溫度_50°C，干燥18_24h。
[0017] 步驟（1)中烘干是指將枸杞葉在40_60°C烘干6_8h。
[0018] 步驟（2)中石油醚的用量為使石油醚液面沒過枸杞葉粉末2-3cm。
[0019]步驟（4)中在離心機(jī)中1000-2000r/min離心10_15min。
[0020] 本發(fā)明提供了一種高效提取枸杞葉多糖的方法，該方法是在水提法的基礎(chǔ)上，加 上高溫高壓的條件，使得多糖從枸杞葉細(xì)胞中的溶出速率和溶出率都增加，得率是其他方 法的2倍以上，從而達(dá)到節(jié)省原材料和時間的目的。并且，在多糖的提取前后分別進(jìn)行了乙 醚去脂和savage法去蛋白的工作，而在醇沉過程中，以及在不同極性混合液（乙醇、丙酮和 乙醚）同時提取過程中，許多物質(zhì)如多酚、黃酮、色素等都隨著乙醇被除去，最后通過超濾 除去分子量小于l〇KDa的成分，所得的多糖純度較高。除此之外，由于此法所用的設(shè)備較為 簡單，只是用到了粉碎機(jī)、高溫高壓設(shè)備、超濾設(shè)備和真空干燥設(shè)備，因此其運(yùn)行成本較低， 更適合工業(yè)化生產(chǎn)。綜上所述，本發(fā)明提供的一種高效提取枸杞葉多糖的方法與其他多糖 提取方法相比具有耗時短、多糖得率高、多糖純度高、節(jié)約原材料和運(yùn)行成本低等優(yōu)點(diǎn)，更 有利于現(xiàn)代的工業(yè)化生產(chǎn)和連續(xù)性生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0021] 附圖1為實施例1至15的多糖得率圖。
【具體實施方式】
[0022] 本發(fā)明的目的在于在現(xiàn)有的多糖提取工藝的基礎(chǔ)上，加上了高溫高壓的方法，具 體步驟如下：
[0023] 1、原料及處理：將枸杞葉于鼓風(fēng)干燥機(jī)中60°C烘干（約6h)，用中藥粉碎機(jī)將烘干 后的枸杞葉粉碎并過60目篩，向粉末中加入適量的石油醚（石油醚液面沒過粉末lcm)并 用磁力攪拌器攪拌30min，抽濾并干燥后得到去除脂肪的枸杞葉粉末。2、在除去脂肪的枸 杞葉粉末中加入蒸餾水（料液比為lg/30_50ml)，在高溫高壓（100-121°C，0. 15-0. 25MPa) 的環(huán)境中提取30-60min，抽濾后濾渣再按照上述方法提取兩次，合并三次所得的提取液。 3、將合并的提取液用減壓蒸餾裝置濃縮到原來體積的1/10,加入濃縮液2倍體積的savage 溶液（氯仿：正丁醇=4:1)，充分震蕩20min后出現(xiàn)分層，然后在離心機(jī)中1500r/min離 心lOmin，去除中間的蛋白層，合并上下層。4、在去除蛋白質(zhì)后的多糖溶液中加入無水乙醇， 使乙醇體積分?jǐn)?shù)大于80%，靜止2h充分沉淀，抽濾后得到的濾餅為粗多糖。5、配制無水乙 醇：丙酮：乙醚=1:1:1(體積比）的混合溶液，將此溶液倒入盛有粗多糖的容器中，液面 沒過多糖粉末，充分震搖l〇min后再浸泡lOmin，抽濾，再用混合溶液清洗2次；然后將多糖 溶于水，并進(jìn)行超濾，所用的超濾膜為l〇KDa，收集分子量大于lOKDa的多糖溶液，再次用乙 醇沉淀并抽濾，所得的濾餅在冷凍干燥機(jī)中干燥即得到純度較高的枸杞葉多糖粉末。
[0024] 下表為不同提取條件下的多糖得率。
[0025]
【主權(quán)項】
1. 一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 原料及處理：將枸杞葉烘干，然后粉碎并過40-80目篩； (2) 向得到的粉末中加入石油醚，震蕩20-30min，抽濾，在40-60°C的減壓干燥箱中干 燥l_3h從而得到去除脂肪的枸杞葉粉末； (3) 在得到的枸杞葉粉末中加入蒸餾水，控制料液比為lg/30-50ml，提取，抽濾后濾渣 再按照上述方法提取兩次，合并三次所得的提取液； (4) 將合并后的提取液減壓蒸餾以濃縮到原來體積的1/10,然后加入濃縮液0.5-2倍 體積的savage溶液，充分震蕩15_20min后出現(xiàn)分層，然后在離心機(jī)中離心去除中間的蛋白 層，收集并合并上下層得到多糖溶液； (5) 在得到的多糖溶液中加入無水乙醇，使乙醇濃度大于80%，靜置2-3h使其充分沉 淀，再經(jīng)過抽濾后得到的濾餅為粗多糖；用體積比為1:1:1的無水乙醇、乙醚、丙酮混合液 清洗粗多糖2-3次，從而去除粗多糖中的色素和雜質(zhì)； (6) 然后將得到的除去色素和雜質(zhì)后的粗多糖溶于水，并進(jìn)行超濾純化，所用的超濾膜 截留的分子量為8-10KDa，收集大于該分子量的多糖溶液，加入無水乙醇，使乙醇濃度大于 80 %，靜置2-3h使其充分沉淀并抽濾，將所得的濾餅在冷凍干燥機(jī)中干燥，即得枸杞葉多 糖粉末。
2. 如權(quán)利要求1所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（3)中提 取時所用的方法為高溫高壓法，其溫度和壓力分別為〇. 15MPa-0. 25MPa、100°C _121°C。
3. 如權(quán)利要求2所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（3)中提 取時間為30min_60min。
4. 如權(quán)利要求1所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（6)中所 用的超濾膜截留分子量為lOKDa。
5. 如權(quán)利要求1所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（1)中過 60目篩。
6. 如權(quán)利要求1所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（6)中將 所得的濾餅在冷凍干燥機(jī)中干燥，控制溫度_50°C，干燥18-24h。
7. 如權(quán)利要求1所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（1)中烘 干是指將枸杞葉在40-60°C烘干6-8h。
8. 如權(quán)利要求1所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（2)中石 油醚的用量為使石油醚液面沒過枸杞葉粉末2-3cm。
9. 如權(quán)利要求1所述的一種高效提取枸杞葉多糖的方法，其特征在于：步驟（4)中在 離心機(jī)中 1000-2000r/min 離心 10_15min。
【專利摘要】本發(fā)明涉及從枸杞葉中提取多糖的方法，尤其是一種高效提取枸杞葉多糖的方法。其特點(diǎn)是，包括如下步驟：(1)原料及處理：將枸杞葉烘干，然后粉碎并過40-80目篩；(2)向得到的粉末中加入石油醚，震蕩20-30min，抽濾，在40-60℃的減壓干燥箱中干燥1-3h從而得到去除脂肪的枸杞葉粉末；(3)在得到的枸杞葉粉末中加入蒸餾水，控制料液比為1g/30-50ml，提取，抽濾后濾渣再按照上述方法提取兩次，合并三次所得的提取液。本發(fā)明提供了一種高效提取枸杞葉多糖的方法，在水提法的基礎(chǔ)上，加上高溫高壓的條件，使得多糖從枸杞葉細(xì)胞中的溶出速率和溶出率都增加，得率是其他方法的2倍以上，節(jié)省原材料和時間。
【IPC分類】C08B37-00
【公開號】CN104592410
【申請?zhí)枴緾N201510017422
【發(fā)明人】王立英, 范俊峰, 徐士梅, 金明, 王儲
【申請人】寧夏森淼種業(yè)生物工程有限公司, 寧夏林業(yè)研究所股份有限公司
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2015年1月14日