amyloliquefaciens)、沙福芽抱桿菌 (Bacillus safensis)的菌種可以通過商購得到,例如,中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏中心保藏 的枯草芽孢桿菌(ACCC01266)、地衣芽孢桿菌(ACCC01468)、解淀粉芽孢桿菌(ACCC1855)、 北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院的沙福芽孢桿菌(CCTCCAB205598)。
[0018] 根據(jù)本發(fā)明,所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的培養(yǎng)方法沒有特別的限 制為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知,例如,可以在100重量份的培養(yǎng)基(葡萄糖5g,豆柏30g,蛋白 胨2g,蒸饋水1000ml,PH7. 0-7. 2)中接種2-5重量份的枯草芽孢桿菌(BaciIlus subtilis) 的菌株,37°C培養(yǎng),直至枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的活菌數(shù)為2-10 XlO7個/克 的培養(yǎng)基。
[0019] 所述地衣芽孢桿菌(Baclicus Iincheniformis)的培養(yǎng)方法沒有特別的限制為本 領(lǐng)域技術(shù)人員所公知,例如,可以在100重量份的培養(yǎng)基(玉米漿〇.45g,蛋白胨1.50g,豆 餅粉浸汁為1 :15,葡萄糖I. 50g,pH值7. 5)中接種2-5重量份的地衣芽孢桿菌(Baclicus Iincheniformis)的菌株,37°C培養(yǎng),直至地衣芽抱桿菌(Baclicus Iincheniformis)的活 菌數(shù)為2-10X IO7個/克的培養(yǎng)基。
[0020] 所述解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)的培養(yǎng)方法沒有特別的限 制,例如,可以在100重量份培養(yǎng)基(豆餅粉50g,蔗糖20g,硫酸銨5g,檸檬酸三鈉2. 5g,磷 酸二氫鉀0. 3g,硫酸鎂0. 5g,硫酸亞鐵0. 05g,PH7. 0-7. 2)中接種2-5重量份的解淀粉芽 孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)的菌株,37°C培養(yǎng),直至解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)的活菌數(shù)為2-10X IO7個/克的培養(yǎng)基。
[0021] 所述沙福芽孢桿菌(Bacillus safensis)的培養(yǎng)方法沒有特別的限制,例如,可以 在100重量份的培養(yǎng)基(葡萄糖15g,淀粉lg,豆餅粉25g,硫酸錳lg,磷酸二氫鉀I. 5g,硫酸 鎂〇. 5g,酵母膏0. 2g,氯化鐵0. lg,碳酸鈣0. lg,PH7. 0-7. 2)中接種2-5重量份的沙福芽 抱桿菌(Bacillus safensis)的菌株,37°C培養(yǎng),直至沙福芽抱桿菌(Bacillus safensis) 的活菌數(shù)為2-10 X IO7個/克的培養(yǎng)基。
[0022] 本發(fā)明還提供了所述的微生物菌劑在蔬菜育苗中的應(yīng)用。
[0023] 所述蔬菜可以為西瓜、甜瓜、黃瓜、番茄、辣椒、茄子等等,優(yōu)選為西瓜、甜瓜、黃瓜 等蔬菜經(jīng)濟作物上。
[0024] 下面通過具體的實施例對本發(fā)明進(jìn)行更進(jìn)一步的說明。
[0025] 實施例1
[0026] (1)在100重量份的培養(yǎng)基(葡萄糖5g,豆柏30g,蛋白胨2g,蒸餾水1000ml, PH7. 0-7. 2)中接種5重量份的枯草芽孢桿菌(ACCCOl266),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取 樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至枯草芽孢桿菌的活菌數(shù)為2 X IO7個/克的培養(yǎng) 基。
[0027] (2)在100重量份的培養(yǎng)基(玉米漿0.45g,蛋白胨1.50g,豆餅粉浸汁為1 :15,葡 萄糖I. 50g,pH值7. 5)中接種5重量份的地衣芽孢桿菌(ACCC01468),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過 程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)為2 X IO7個 /克的培養(yǎng)基。
[0028] (3)在100重量份的培養(yǎng)基(豆餅粉50g,蔗糖20g,硫酸銨5g,檸檬酸三鈉2. 5g,磷 酸二氫鉀0. 3g,硫酸鎂0. 5g,硫酸亞鐵0. 05g,PH7. 0-7. 2)接種4重量份的解淀粉芽孢桿菌 (ACCC1855),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至解 淀粉芽孢桿菌的活菌數(shù)為2 X IO7個/克的培養(yǎng)基。
[0029] (4)在100重量份的培養(yǎng)基(葡萄糖15g,淀粉lg,豆餅粉25g,硫酸錳lg,磷酸二氫 鉀I. 5g,硫酸鎂0. 5g,酵母膏0. 2g,氯化鐵0. lg,碳酸鈣0. lg,PH7. 0-7. 2)中接種5重量份 的沙福芽孢桿菌(CCTCCAB205598),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計 數(shù)法進(jìn)行觀察,直至沙福芽孢桿菌的活菌數(shù)為2 X IO7個/克的培養(yǎng)基。
[0030] (5)將步驟(1)至(4)中分別得到的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、地衣芽 抱桿菌(Baclicus Iincheniformis)、角軍淀粉芽抱桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)、 沙福芽孢桿菌(Bacillus safensis)按照比例進(jìn)行混合,使得到的微生物菌劑中, 枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的活菌數(shù)為總活菌數(shù)的35 %、地衣芽孢桿菌 (Baclicus Iincheniformis)的活菌數(shù)為總活菌數(shù)的35%、解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)的活菌數(shù)為總活菌數(shù)的15%、沙福芽孢桿菌(Bacillus safensis)的 活菌數(shù)為總活菌數(shù)的15%,得到微生物菌劑Al。
[0031] 實施例2
[0032] (1)在100重量份的培養(yǎng)基(葡萄糖5g,豆柏30g,蛋白胨2g,蒸餾水1000ml, PH7. 0-7. 2)中接種4重量份的枯草芽孢桿菌(ACCCO1266),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取 樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至枯草芽孢桿菌的活菌數(shù)為8 X IO7個/克的培養(yǎng) 基。
[0033] (2)在100重量份的培養(yǎng)基(玉米漿0.45g,蛋白胨1.50g,豆餅粉浸汁為1 :15,葡 萄糖I. 50g,pH值7. 5)中接種6重量份的地衣芽孢桿菌(ACCC01468),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過 程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)為8 X IO7個 /克的培養(yǎng)基。
[0034] (3)在100重量份的培養(yǎng)基(豆餅粉50g,蔗糖20g,硫酸銨5g,檸檬酸三鈉2. 5g,磷 酸二氫鉀0. 3g,硫酸鎂0. 5g,硫酸亞鐵0. 05g,PH7. 0-7. 2)中接種3重量份的解淀粉芽孢桿 菌(ACCC1855),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至 解淀粉芽孢桿菌的活菌數(shù)為8 X IO7個/克的培養(yǎng)基。
[0035] (4)在100重量份的培養(yǎng)基(葡萄糖15g,淀粉lg,豆餅粉25g,硫酸錳lg,磷酸二氫 鉀I. 5g,硫酸鎂0. 5g,酵母膏0. 2g,氯化鐵0. lg,碳酸鈣0. lg,PH7. 0-7. 2)中接種4重量份 的沙福芽孢桿菌(CCTCCAB205598),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計 數(shù)法進(jìn)行觀察,直至沙福芽孢桿菌的活菌數(shù)為8 X IO7個/克的培養(yǎng)基。
[0036] (5)將步驟(1)至(4)中分別得到的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、地衣芽 抱桿菌(Baclicus Iincheniformis)、角軍淀粉芽抱桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)、 沙福芽孢桿菌(Bacillus safensis)按照比例進(jìn)行混合,使得到的微生物菌劑中, 枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的活菌數(shù)為總活菌數(shù)的25 %、地衣芽孢桿菌 (Baclicus Iincheniformis)的活菌數(shù)為總活菌數(shù)的25%、解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)的活菌數(shù)為總活菌數(shù)的25%、沙福芽孢桿菌(Bacillus safensis)的 活菌數(shù)為總活菌數(shù)的25%,得到微生物菌劑A2。
[0037] 實施例3
[0038] (1)在100重量份的培養(yǎng)基(葡萄糖5g,豆柏30g,蛋白胨2g,蒸餾水1000ml, PH7. 0-7. 2)中接種3重量份的枯草芽孢桿菌(ACCCOl266),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取 樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至枯草芽孢桿菌的活菌數(shù)為5 X IO7個/克的培養(yǎng) 基。
[0039] (2)在100重量份的培養(yǎng)基(玉米漿0.45g,蛋白胨1.50g,豆餅粉浸汁為1 :15,葡 萄糖I. 50g,pH值7. 5)中接種8重量份的地衣芽孢桿菌(ACCC01468),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過 程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至地衣芽孢桿菌的活菌數(shù)為5 X IO7個 /克的培養(yǎng)基。
[0040] (3)在100重量份的培養(yǎng)基(豆餅粉50g,蔗糖20g,硫酸銨5g,檸檬酸三鈉2. 5g,磷 酸二氫鉀0. 3g,硫酸鎂0. 5g,硫酸亞鐵0. 05g,PH7. 0-7. 2)中接種2重量份的解淀粉芽孢桿 菌(ACCC1855),37°C培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中進(jìn)行取樣并通過顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行觀察,直至 解淀粉芽孢