荸薺皮提取金魚草素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種金魚草素的提取分離方法，特別是涉及 一種荸薺皮中提取分離金魚草素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 金魚草素（Aureusidin)，化學(xué)名為4,6,3'，4'-四羥基橙酮，是最著名的橙酮 類化合物，具有抗氧化、抗菌、抗腫瘤等多種生物活性。金魚草素結(jié)構(gòu)特別，在自然界植物中 分布較少，且在植物體內(nèi)的含量低，難以較大規(guī)模獲得。為了便于研宄其藥理活性，學(xué)者通 常使用合成的方法獲取金魚草素。常州大學(xué)胡昆就報道了金魚草素的全合成方法，該法以 2, 4, 6-三羥基苯乙酮與3, 4-二羥基苯甲醛為原料，經(jīng)五步反應(yīng)合成金魚草素，其缺點是， 合成過程容易帶入構(gòu)型相反的金魚草素異構(gòu)體。與合成金魚草素相比，天然金魚草素避免 了合成過程中帶來的異構(gòu)體，被認(rèn)為更具安全性。人們在實際應(yīng)用中更偏向于使用天然的 金魚草素。
[0003] 天然金魚草素存在于菊科、玄參科、莎草科、地錢科植物之中，主要從莎草科植物 和地錢科地錢屬植物中分離得到，目前市場上的天然金魚草素來自地錢的提取物。公開號 為CN103030615A的中國專利介紹了應(yīng)用超高壓技術(shù)和大孔樹脂富集純化地錢中金魚草素 的方法。該方法具有提取速度快，大孔樹脂吸附選擇性好，吸附容量大，分離效果明顯等特 點。但該發(fā)明使用的超高壓技術(shù)對設(shè)備的要求高，柱層析純化過程所用的硅膠不能重復(fù)利 用，都導(dǎo)致生產(chǎn)的成本過高，且原料地錢，不容易獲得，阻礙了金魚草素生產(chǎn)規(guī)模的擴(kuò)大。
[0004] 荸養(yǎng)（Eleocharistuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸養(yǎng)的地 下球莖，我國大部分地區(qū)都有栽培。其中，廣西荸薺產(chǎn)量占全國70%，賀州荸薺產(chǎn)量占廣西 70%。據(jù)文獻(xiàn)報道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨 床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研宄表明，荸薺的活 性物質(zhì)主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過程中，被丟棄的荸薺皮質(zhì)量約占新鮮荸 薺質(zhì)量的25%，資源非常豐富。我們在研宄中發(fā)現(xiàn)，荸薺皮中含有豐富的金魚草素，但目前 未見從荸薺皮中提取分離該化合物的文獻(xiàn)報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于：提出一種荸薺皮提取金魚草素的方法。
[0006] 本發(fā)明的荸薺皮提取金魚草素的方法，常規(guī)提取法和大孔樹脂及凝膠色譜技術(shù)從 荸薺皮中提取分離金魚草素，具體步驟如下：
[0007] (1)將新鮮的荸薺皮風(fēng)干，粉碎；以重量計，取荸薺皮粉末1份，入提取罐中，每次 加入提取溶劑8-20份，在溫度為50-70°C下提取l-3h，共提取2-3次，過濾，合并濾液，減壓 濃縮至膏狀，獲得提取物。
[0008] (2)以重量計，將提取物1份分散在5-8份水中制成渾濁液，用1-2倍水體積的乙 酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。
[0009] (3)以重量計，將萃取物1份溶于2-3份甲醇中，加入甲醇體積10-15倍的水制成 懸濁液，經(jīng)大孔樹脂吸附后，用25%體積百分比的甲醇水溶液或乙醇水溶液洗脫，薄層色譜 法檢測，收集合并含有金魚草素的洗脫液，減壓濃縮，獲得金魚草素含量粗品。
[0010] (4)以重量計，將粗品1份溶于4-8份甲醇中，加入等體積的水制成懸濁液，用 S印hadex LH-20凝膠柱色譜進(jìn)行分離，用甲醇或70%體積百分比的甲醇水溶液洗脫，薄層 色譜法檢測，收集合并含有金魚草素的洗脫液，減壓濃縮，真空干燥，得到金魚草素含量在 95%以上的產(chǎn)品。
[0011] 所述步驟（1)中提取溶劑為50-75%體積百分比的甲醇水溶液、乙醇水溶液或者 丙酮水溶液其中的任意一種，提取溶劑體積與荸薺皮粉末質(zhì)量之比為8-20L/g。
[0012] 所述步驟（3)中所用的大孔吸附樹脂為X-5、NKA-II、D101、AB-8H、NKA-9、S-8、 D3520、D4020和H103型樹脂中的任意一種；該步驟的洗脫方式為：先用水洗去雜質(zhì)，再用 25%體積百分比的甲醇水溶液或乙醇水溶液洗去極性大的苷類雜質(zhì)，最后用43-50%體積 百分比的甲醇水溶液或乙醇水溶液。
[0013] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比其有益效果是：設(shè)計科學(xué)合理，與地錢相比，本發(fā)明利用大 量被廢棄的荸薺皮作為原料，原料易得，資源豐富，生產(chǎn)成本低，開辟了從天然植物中提取 分離金魚草素的新途徑，且分離效果好，產(chǎn)品純度高，使荸薺皮變廢為寶，所選用的大孔樹 脂和凝膠均可反復(fù)使用，可進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)，滿足醫(yī)藥工業(yè)需要。
【具體實施方式】
[0014] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0015] 本發(fā)明的荸薺皮提取金魚草素的方法用常規(guī)提取法和大孔樹脂及凝膠色譜技術(shù) 從荸薺皮中提取分離金魚草素，具體步驟如下：
[0016] (1)將新鮮的荸薺皮風(fēng)干，粉碎，備用。稱取一定質(zhì)量（g)的荸薺皮粉末加入提取 罐中，再加入8-20倍體積（mL)的50-75%體積百分比的甲醇水溶液、乙醇水溶液或丙酮水 溶液中的任意一種，在50-70°C下提取l_3h，共提取2-3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏 狀，獲得提取物。
[0017] (2)將提取物（g)分散在5-8倍體積（mL)的水中制成渾濁液，用1-2倍水體積的 乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。
[0018] (3)將萃取物（g)溶于2-3倍體積（mL)的甲醇，再加入甲醇體積10-15倍的水 制成懸濁液，用大孔樹脂吸附，所用大孔吸附樹脂為天津南開大學(xué)所生產(chǎn)的NKA-9、X-5、 AB-8H、S-8、D3520、NKA-II、D101、D4020和H103型樹脂中的任意一種，靜態(tài)吸附后，先用水 洗去雜質(zhì)，再用25 %體積百分比的甲醇水溶液或乙醇水溶液洗去極性大的苷類雜質(zhì)，最后 用43-50 %體積百分比的甲醇水溶液或乙醇水溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有金 魚草素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品。
[0019] (4)將粗品（g)溶于4-8倍體積（mL)的甲醇，加入等甲醇體積的水制成懸濁液，用 Sephadex LH-20凝膠色譜柱進(jìn)行純化，用甲醇或甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并 含有金魚草素的洗脫液，減壓濃縮，真空干燥，得到含量在95%以上的金魚草素產(chǎn)品。
[0020] 實施例1
[0021] 在提取罐中，加入800g新鮮荸薺皮粉末和6. 4L50%體積百分比的丙酮水溶液， 在50°C下提取2h，共提取3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮成膏狀，獲得提取物120g。
[0022] 往提取物中加入900mL水制成渾濁液，加入I. 8L乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液， 減壓濃縮，獲得萃取物10. 5g。
[0023] 將萃取物溶于25mL甲醇，再加入250mL水制成懸濁液，轉(zhuǎn)入IkgDlOl大孔樹脂 層析柱進(jìn)行吸附，靜態(tài)吸附后，先用