專利名稱:一種用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種膠原蛋白肽的制備方法，特別是一種利用淡水魚魚皮酶解制備膠 原蛋白的方法。
技術(shù)背景
我國(guó)淡水魚產(chǎn)量居世界首位，淡水魚加工工業(yè)隨著淡水魚產(chǎn)量的增長(zhǎng)而快速發(fā)展。 目前，淡水魚加工過(guò)程僅局限于對(duì)魚體肌肉的利用，而對(duì)魚皮、魚鱗等通常認(rèn)為的下 腳料加工利用甚少，絕大多數(shù)被拋棄。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年淡水魚加工業(yè)的廢棄物總量
達(dá)到200萬(wàn)噸以上，其中魚皮約占8%，即16萬(wàn)噸。這樣既造成環(huán)境污染，又浪費(fèi)了 資源。為了充分合理的利用資源，出現(xiàn)了利用淡水魚皮制備膠原蛋白的技術(shù)。早期多 采用清水高溫蒸煮法、酸水解法和堿水解法等，但上述方法都會(huì)破壞膠原蛋白、氨基 酸等活性成分，成品利用價(jià)值低。近年來(lái)，酶水解法逐漸取代了各種傳統(tǒng)蛋白水解法。 中國(guó)專利申請(qǐng)(公開(kāi)號(hào)CN)公開(kāi)了利用河豚魚皮制備膠原蛋白及其肽的方法，其工藝 操作步驟包括魚皮原料的處理、非膠原蛋白的去除和酶解。酶水解后得到的魚皮膠原 蛋白及其肽成品純度高、復(fù)溶性好、理化性質(zhì)穩(wěn)定，是化妝品、食品工業(yè)等的高檔原 料。酶水解法尤其適于活性膠原蛋白的制備。而且膠原蛋白來(lái)源于魚類，免除了因瘋 牛病等疾病對(duì)陸生動(dòng)物來(lái)源的膠原蛋白安全性的擔(dān)憂。
但是，無(wú)論是酸(堿)水解法還是酶解法，都存在耗時(shí)長(zhǎng)、脂肪殘存的問(wèn)題。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種酶解反應(yīng)更加迅速且成品無(wú)脂肪殘留的利用淡水魚皮制
備膠原蛋白肽的新方法。
為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是 一種用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步驟 U)原料處理將去除魚肉、魚鰭、魚鱗，清洗干凈的鯉魚魚皮剪成小碎片，-20°C
冷凍備用；
(2) 非膠原蛋白的去除將解凍的碎魚皮放入30倍魚皮體積的3.5%氯化鈉溶液 中，于5'C連續(xù)攪拌24h，用尼龍紗過(guò)濾，棄去濾液；濾渣用IO倍魚皮體積的蒸餾水 清洗，重復(fù)三次，即得到去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮；
(3) 脂肪的去除所述步驟(2)得到的去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮加入0.5 倍魚皮體積的蒸餾水，然后于4'C用1-3倍魚皮體積的石油醚萃取，靜置分層后，棄 去上層石油醚，重復(fù)三次，下層用蒸餾水清洗，揮去殘留的石油醚，得到去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮；
(4) 膠原蛋白的提取所述步驟(3)得到的去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮加 入20倍魚皮體積的0. 1M檸檬酸溶液進(jìn)行溶脹，均質(zhì)3分鐘，即得到魚皮膠原蛋白的
粗提取液，將所述粗提取液連續(xù)攪拌2h，真空抽濾，濾液用20。/。Na2C03調(diào)節(jié)PH至中性， 得到預(yù)處理好的膠原蛋白粗提取液；
(5) 膠原蛋白肽的制備將所述步驟(4)得到的預(yù)處理好的膠原蛋白粗提取液 升溫至10(TC，保持10分鐘，再降低溫度至48t:，調(diào)節(jié)所述粗提取液PH至9，加入 0.03% (酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0.06% (酶/底物，重量百分比)的風(fēng) 味蛋白酶，酶解30分鐘，85t:滅酶5分鐘，得到相對(duì)分子量8000-15000的鯉魚魚皮 膠原蛋白肽，經(jīng)過(guò)減壓濃縮，噴霧千燥，得到白色粉狀、沒(méi)有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋 白肽。
本發(fā)明的有益效果是
1、 由于本發(fā)明酶解工藝采用木瓜酶和風(fēng)味蛋白酶同時(shí)水解魚皮膠原蛋白，酶解時(shí) 間只需30分鐘，就可以將鯉魚皮膠原蛋白水解為膠原蛋白肽。而采用胃蛋白酶、木瓜 蛋白酶酶解膠原蛋白，通常需要10小時(shí)以上，甚至更長(zhǎng)，有可能造成活性膠原蛋白肽 的失活。本發(fā)明極大地縮短了魚皮膠原蛋白水解反應(yīng)的時(shí)間，盡可能地保證了蛋白肽 的活性，提高了利用淡水魚皮制備膠原蛋白肽的生產(chǎn)效率。
2、 利用動(dòng)物源性的原料制備膠原蛋白及其肽都存在脂肪和脂溶性雜質(zhì)殘留的問(wèn) 題，影響了制備的膠原蛋白肽的水溶性和穩(wěn)定性。本發(fā)明利用石油醚萃取法去除脂肪， 大大降低了鯉魚皮膠原蛋白肽成品中的脂肪和脂溶性色素的殘留，提高了成品的質(zhì)量。
3、 本發(fā)明的產(chǎn)率可達(dá)15%，膠原蛋白肽的提出率高達(dá)79%，產(chǎn)品純度達(dá)80-85%。
4、 利用本發(fā)明方法制得的鯉魚皮膠原蛋白肽色澤潔白、沒(méi)有腥味，水溶性好。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例
用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法，包括下列步驟
(一) 原料處理
新鮮鯉魚經(jīng)去頭、去內(nèi)臟后，對(duì)剖成二片式，然后將魚片放入魚肉采取機(jī)進(jìn)行采 肉，實(shí)現(xiàn)魚肉和魚皮的分離。將分離得到的魚皮剪去魚鰭、刮去魚鱗，并將與魚皮粘 連的魚肉也一同刮擦除去。然后將干凈的魚皮剪成小碎塊，-2(TC冷凍備用。
(二) 非膠原蛋白的去除
將解凍的碎魚皮放入30倍魚皮體積的3. 5%氯化鈉溶液中，于5'C連續(xù)攪拌24h， 用尼龍紗過(guò)濾，棄去濾液；濾渣用IO倍魚皮體積的蒸餾水清洗，重復(fù)三次，得到的濾渣即是去除了非膠原蛋白的魚皮。通過(guò)這步處理，可以同時(shí)去除鯉魚皮中大部分水溶 性和鹽溶性雜蛋白，以及部分水溶性色素。
(三) 脂肪的去除
在去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮加入0.5倍魚皮體積的蒸餾水，然后于4"C用l-3
倍魚皮體積的石油醚萃取，靜置分層后，棄去上層石油醚，重復(fù)三次，下層用蒸餾水 清洗，揮去殘留的石油醚，得到去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮，同時(shí)可以除去絕大 部分脂溶性色素。
(四) 膠原蛋白的提取
將去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮加入20倍魚皮體積的0. 1M檸檬酸溶液進(jìn)行溶 脹，均質(zhì)3分鐘，即得到魚皮膠原蛋白的粗提取液，將所述粗提取液連續(xù)攪拌2h，真 空抽濾，去除粗提液中的殘留色素。然后濾液用20。/。Na2C03調(diào)節(jié)ra至中性，得到預(yù)處 理好的膠原蛋白粗提取液。
(五) 膠原蛋白肽的制備 將預(yù)處理好的膠原蛋白粗提取液升溫至IO(TC，保持10分鐘，再降低溫度至48°C，
調(diào)節(jié)所述粗提取液PH至9，加入O. 03%(酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0. 06% (酶/底物，重量百分比)的風(fēng)味蛋白酶，酶解30分鐘，85'C滅酶5分鐘，得到相對(duì) 分子量8000-15000的鯉魚魚皮膠原蛋白肽，經(jīng)過(guò)減壓濃縮，噴霧干燥，得到白色粉狀、 沒(méi)有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋白肽。
(六) 對(duì)成品進(jìn)行檢驗(yàn)、計(jì)量和包裝
通過(guò)上述工藝步驟，1Kg新鮮鯉魚魚皮，可以得到純度為80-85%的鯉魚魚皮膠原 蛋白肽140-150g。
權(quán)利要求
1、一種用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步驟(1)原料處理將去除魚肉、魚鰭、魚鱗，清洗干凈的鯉魚魚皮剪成小碎片，-20℃冷凍備用；(2)非膠原蛋白的去除將解凍的碎魚皮放入30倍魚皮體積的3.5％氯化鈉溶液中，于5℃連續(xù)攪拌24h，用尼龍紗過(guò)濾，棄去濾液；濾渣用10倍魚皮的體積蒸餾水清洗，重復(fù)三次，即得到去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮；(3)脂肪的去除所述步驟(2)得到的去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮加入0.5倍魚皮體積的蒸餾水，然后于4℃用1-3倍魚皮體積的石油醚萃取，靜置分層后，棄去上層石油醚，重復(fù)三次，下層用蒸餾水清洗，揮去殘留的石油醚，得到去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮；(4)膠原蛋白的提取所述步驟(3)得到的去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮加入20倍魚皮體積的0.1M檸檬酸溶液進(jìn)行溶脹，均質(zhì)3分鐘，即得到魚皮膠原蛋白的粗提取液，將所述粗提取液連續(xù)攪拌2h，真空抽濾，濾液用20％Na2CO3調(diào)節(jié)PH至中性，得到預(yù)處理好的膠原蛋白粗提取液；(5)膠原蛋白肽的制備將所述步驟(4)得到的預(yù)處理好的膠原蛋白粗提取液升溫至100℃，保持10分鐘，再降低溫度至48℃，調(diào)節(jié)所述粗提取液PH至9，加入0.03％(酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0.06％(酶/底物，重量百分比)的風(fēng)味蛋白酶，酶解30分鐘，85℃滅酶5分鐘，得到相對(duì)分子量8000-15000的鯉魚魚皮膠原蛋白肽，經(jīng)過(guò)減壓濃縮，噴霧干燥，得到白色粉狀、沒(méi)有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋白肽。
專利摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種利用鯉魚魚皮酶解制備膠原蛋白的方法，包括原料處理，氯化鈉去除非膠原蛋白，石油醚萃取去除脂肪，檸檬酸提取膠原蛋白和木瓜酶、風(fēng)味酶共同酶解，減壓濃縮，噴霧干燥即得到相對(duì)分子量8000-15000、色澤潔白、沒(méi)有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋白肽。本發(fā)明酶解工藝采用木瓜酶和風(fēng)味蛋白酶同時(shí)水解魚皮膠原蛋白，酶解時(shí)間大為縮短，只需30分鐘。利用石油醚萃取法去除脂肪，大大降低了鯉魚皮膠原蛋白肽成品中的脂肪和脂溶性色素的殘留，提高了成品的質(zhì)量。本發(fā)明的產(chǎn)率和膠原蛋白肽的提出率高，產(chǎn)品純度好。
文檔編號(hào)C12P21/06GKCN101481723SQ200910114887
公開(kāi)日2009年7月15日 申請(qǐng)日期2009年1月23日
發(fā)明者江 朱, 熊新安 申請(qǐng)人:熊新安;朱 江導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan