本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及l(fā)nc-psmb8-as1(lncrnapsmb8-as1)基因作為胃癌診療靶點的用途。

背景技術(shù)：

1、胃癌(gastric?cancer，gc)在全世界多種惡性腫瘤的發(fā)病率中占據(jù)第五名的地位，死亡率排在第四名。

2、胃癌病變的發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜且過程很漫長。常為慢性淺表性胃炎發(fā)展到萎縮性胃炎，繼而腸上皮化生導(dǎo)致異型增生，最終導(dǎo)致胃癌的發(fā)生。胃癌的發(fā)病機(jī)制受內(nèi)在因素和外在因素的誘導(dǎo)，內(nèi)在致癌因素主要表現(xiàn)為遺傳家族史原癌基因的表達(dá)。外在致癌因素可直接誘發(fā)或長期破壞胃黏膜屏障，使促癌物質(zhì)更易誘發(fā)干細(xì)胞癌基因表達(dá)或基因突變而產(chǎn)生致癌物，讓新生不成熟的原始細(xì)胞變成各種分化程度不良且生長失控的非正常細(xì)胞。由于胃癌早期癥狀不明顯，不宜察覺，最終發(fā)展為晚期。因此，進(jìn)一步研究gc的發(fā)病分子機(jī)制，找到操作簡易，確診率更高的診斷方法是臨床迫切需求的。

3、長鏈非編碼rna(long?non-coding?rna,lncrna)是長度大于200個核苷酸的非編碼rna。lncrna起初被認(rèn)為是基因組轉(zhuǎn)錄的“噪音”，是rna聚合酶ii轉(zhuǎn)錄的副產(chǎn)物，被認(rèn)為不具有生物學(xué)功能。隨著人們對lncrna的深入研究，發(fā)現(xiàn)lncrna參與了x染色體沉默，基因組印記以及染色質(zhì)修飾，轉(zhuǎn)錄激活，轉(zhuǎn)錄干擾，核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過程。lncrna可編碼蛋白的基因上游啟動子區(qū)轉(zhuǎn)錄，干擾下游基因的表達(dá)；抑制rna聚合酶ii或者介導(dǎo)染色質(zhì)重構(gòu)以及組蛋白修飾，影響下游基因的表達(dá)；與編碼蛋白基因的轉(zhuǎn)錄本形成互補(bǔ)雙鏈，干擾mrna的剪切，形成不同的剪切形式；與編碼蛋白基因的轉(zhuǎn)錄本形成互補(bǔ)雙鏈，在dicer酶的作用下產(chǎn)生內(nèi)源性sirna；與特定蛋白質(zhì)結(jié)合，lncrna轉(zhuǎn)錄本可調(diào)節(jié)相應(yīng)蛋白的活性；作為結(jié)構(gòu)組分與蛋白質(zhì)形成核酸蛋白質(zhì)復(fù)合體；結(jié)合到特定蛋白質(zhì)上，改變該蛋白質(zhì)的細(xì)胞定位；作為小分子rna(如mirna、pirna)的前體分子等。同時研究發(fā)現(xiàn)，長鏈非編碼rna的表達(dá)或功能異常與人類疾病的發(fā)生密切相關(guān)，其中就包括癌癥、退行性神經(jīng)疾病在內(nèi)的多種嚴(yán)重危害人類健康的重大疾病。

4、有研究報道，在胰腺癌與結(jié)腸癌中，較高水平lnc-psmb8-as1的患者愈合較差，lnc-psmb8-as1會通過促進(jìn)癌癥細(xì)胞的增殖、遷移，從而達(dá)到促進(jìn)癌癥進(jìn)展過程。但到目前為止，lnc-psmb8-as1在胃癌發(fā)生中的作用及其發(fā)生機(jī)理關(guān)系還未曾報道。

5、因此本發(fā)明將檢測長鏈非編碼lnc-psmb8-as1在胃癌組織中的表達(dá)情況，旨在用于制備診斷性試劑盒，并在此基礎(chǔ)上研究lnc-psmb8-as1表達(dá)下調(diào)對胃癌細(xì)胞增殖與遷移情況的影響，這對于提高胃癌的診斷率及改善胃癌的生存狀況提供有利的理論依據(jù)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的之一提供一種lnc-psmb8-as1基因在制備用于治療胃癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的另一目的是提供一種lnc-psmb8-as1基因在制備用于胃癌分子診斷的試劑盒中的應(yīng)用。

2、為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、(1)lnc-psmb8-as1基因(ncbi?gene?id：100507463)在制備用于胃癌診斷性試劑盒中的應(yīng)用。

4、(2)lnc-psmb8-as1基因在制備用于抑制胃癌的藥物中的應(yīng)用。所述藥物以lnc-psmb8-as1基因為靶點設(shè)計而成。

5、(3)lnc-psmb8-as1基因的抑制劑，為lnc-psmb8-as1-sirna，其序列為：5’-cagugcauguaaacagacutt-3’。

6、(4)lnc-psmb8-as1基因的抑制劑在制備用于抑制胃癌的藥物中的應(yīng)用。

7、有益效果：本發(fā)明通過大量的實驗數(shù)據(jù)證明，lnc-psmb8-as1在胃癌的發(fā)生過程中起著重要的促進(jìn)作用：應(yīng)用特異性sirna序列高效抑制lnc-psmb8-as1基因在人胃癌細(xì)胞株的表達(dá)，經(jīng)過mtt、細(xì)胞劃痕實驗和實時熒光定量pcr方法，證實降低lnc-psmb8-as1基因的表達(dá)可以抑制胃癌細(xì)胞增殖遷移能力。可見，lnc-psmb8-as1基因在制備用于治療胃癌藥物、用于胃癌分子診斷試劑盒中具有廣泛應(yīng)用。

技術(shù)特征：

1.lncr-psmb8-as1基因在制備用于胃癌的診斷性試劑盒中的應(yīng)用。

2.lnc-psmb8-as1基因在制備用于治療胃癌的藥物中的應(yīng)用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物以lnc-psmb8-as1基因為靶點設(shè)計而成。

4.lnc-psmb8-as1基因的抑制劑，其特征在于，所述抑制劑為lnc-psmb8-as1-sirna，其序列為：5’-cagugcauguaaacagacutt-3’。

5.lnc-psmb8-as1基因的抑制劑在制備用于治療胃癌的藥物中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于：干擾lnc-psmb8-as1表達(dá)的基因包括敲除或沉默lnc-psmb8-as1編碼基因，所述載體為病毒載體或非病毒基因沉默載體。

7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于：所述病毒載體為腺病毒載體、腺相關(guān)病毒載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體或皰疹病毒載體。

8.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于：所述非病毒基因沉默載體為crispr/cas9系統(tǒng)基因敲除載體、rnai系統(tǒng)基因沉默載體或在此基礎(chǔ)上改造的載體。

技術(shù)總結(jié)
Lnc?PSMB8?AS1基因在制備治療胃癌藥物及診斷試劑盒中的應(yīng)用屬于生物醫(yī)療領(lǐng)域。本發(fā)明通過對TCGA數(shù)據(jù)庫中的胃癌患者組織及正常胃組織中Lnc?PMSB8?AS1基因表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)胃癌組織中Lnc?PMSB8?AS1表達(dá)量明顯高于正常組織。其次利用實時熒光定量PCR技術(shù)在lncRNA水平驗證，結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染Lnc?PMSB8?AS1?siRNA后，MGC?803細(xì)胞相關(guān)遷移增殖基因MMP7、MMP14、cyclinB1、cyclinE1的mRNA水平表達(dá)明顯降低。同時結(jié)合表型實驗結(jié)果，提示Lnc?PMSB8?AS1在制備胃癌診斷性試劑盒和靶向治療藥物有很好的應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：陳衛(wèi)東,郭凡,葉文凌,劉春羽
受保護(hù)的技術(shù)使用者：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19