本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法。
背景技術(shù)：
氟伐他汀鈉(Fluvastatin sodium)，化學(xué)名為[3R*,5S*-(E)]-(±)-7-[3-(4-氟苯基)-1-異丙基-1H-吲哚-2-基]-3,5-二羥基-6-庚烯酸鈉，是繼洛伐他汀、普伐他汀和辛伐他汀之后開發(fā)的第4個HMG-CoA還原酶抑制。它的吲哚環(huán)仿擬輔酶，甲羥戊酸內(nèi)酯鏈模擬產(chǎn)物甲羥戊酸，可以同時阻斷HMG-CoA底物和產(chǎn)物，起到內(nèi)源性膽固醇合成限速酶的作用，進(jìn)而抑制甲羥戊酸生成膽固醇，并刺激肝臟內(nèi)高親和力的低密度脂蛋白(LDL)受體生成增多，最終使血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平及總膽固醇(TC)水平下降。
氟伐他汀是兩個羥基處于同方向的一對cis異構(gòu)體，其中(3R,5S)-型有藥理活性，而(3S,5R)-型無藥理活性。氟伐他汀英文制劑名為Lescol(來適可)，由瑞士Sandoz公司開發(fā)，并于1993年在瑞士投產(chǎn)，1994年1月首先在英國上市，隨后在美國、加拿大、新西蘭等多國上市，1997年在我國注冊。對原發(fā)性高膽固醇血癥具顯著療效，明顯降低冠心病發(fā)病率和死亡率，廣泛在病人中使用。
本發(fā)明的目的是為了利用現(xiàn)在所擁有的技術(shù)條件，提供一種路線合理，可操作性強，產(chǎn)物易提純，純度高，收率高的合成一種氟伐他汀代謝物的方法，本文所得的目標(biāo)產(chǎn)物，未見文獻(xiàn)報道。在一些實例中，母體化合物會引起相關(guān)的毒性，而也有實例表明，代謝產(chǎn)物才是引起毒性的主因?；蚋淖冇锌赡苁怯捎诋a(chǎn)生了藥物代謝產(chǎn)物這一原因引起的，但也有可能是因組織損傷引起，此外，代謝產(chǎn)物與其它受體之間的相互作用也可能導(dǎo)致基因改變。
本發(fā)明所合成的化合物為氟伐他汀鈉生物代謝提供測試樣品，可以應(yīng)用于臨床藥代動力學(xué)方面的研究，從而更加準(zhǔn)確和方便地了解氟伐他汀鈉在人體內(nèi)的代謝過程。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是提供一種工藝設(shè)計合理，后處理簡單、原料價廉易得的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法。本發(fā)明制備得到的目標(biāo)產(chǎn)物純度可達(dá)99％以上，可用于藥代動力學(xué)研究，為氟伐他汀的代謝機理研究提供測試樣品，具有重要的應(yīng)用價值。
技術(shù)方案：為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：
一種氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(A)將氟伐二醇在室溫條件下，選擇性氧化5位羥基為酮基，提純得到化合物(1)；
(B)取步驟(A)制備得到的化合物(1)溶于有機溶劑中，加入咪唑，用硅醚保護(hù)基保護(hù)3位羥基，處理提純得到化合物(2)；
(C)取步驟(B)得到的化合物(2)溶于甲醇，室溫下用硼氫化鈉還原得到化合物(3)；
(D)取步驟(C)得到的化合物(3)溶于有機溶劑中，加入有機堿，在催化劑存在條件下，與苯甲酰氯室溫下反應(yīng)，處理提純得到化合物(4)；
(E)取步驟(D)得到的化合物(4)溶于四氫呋喃中，加入堿和鈀催化劑，發(fā)生消除反應(yīng)，調(diào)節(jié)pH值到酸性，萃取后結(jié)晶得到化合物(5)；
(F)取步驟(E)得到的化合物(5)溶于四氫呋喃中，加入脫硅醚試劑，提純得到化合物(6)；
(G)取步驟(F)得到的化合物(6)用NaOH水解，提純得到目標(biāo)分子化合物(7)；
作為優(yōu)選方案，以上所述的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，步驟(A)所述的氧化劑為二氧化錳或二氯二氰基苯醌，特別優(yōu)選二氧化錳，反應(yīng)溶劑為四氫呋喃或二氯甲烷；氟伐二醇與氧化劑的摩爾用量比為1:1～5，特別優(yōu)選1：3。氟伐二醇與氧化劑的摩爾用量比的篩選實驗，如下表：
作為優(yōu)選方案，以上所述的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，步驟(B)所述的硅醚保護(hù)基為四甲基硅烷或叔丁基二甲基氯硅烷(TBDSCl)，特別優(yōu)選TBDSCl，反應(yīng)溶劑為二甲基甲酰胺或二氯甲烷；化合物(1)與硅醚保護(hù)基的摩爾用量比為1:1～5，特別優(yōu)選1：2.5；化合物(1)與咪唑的摩爾用量比為1:1～5，特別優(yōu)選1：3。
化合物(1)與咪唑的摩爾用量比的篩選實驗如下：
作為優(yōu)選方案，以上所述的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，步驟(C)中，化合物(2)與還原劑硼氫化鈉的摩爾用量比為1:0.5～3，特別優(yōu)選1：2。
作為優(yōu)選方案，以上所述的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，步驟(D)所述的催化劑為4-二甲氨基吡啶(DMAP)，所用的有機堿為三乙胺，化合物(3)和苯甲酰氯的摩爾用量比為1：1～10，特別優(yōu)選1：6，反應(yīng)時間為6～18小時。
化合物(3)和苯甲酰氯的摩爾用量比的篩選實驗如下表：
作為優(yōu)選方案，以上所述的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，步驟(E)所述的堿為三乙胺或者二異丙基乙胺；所用的鈀催化劑為氯化鈀或者四三苯基膦鈀，鈀催化劑與化合物(4)的摩爾比為1:0.01～0.5，特別優(yōu)選1：0.2，25℃攪拌反應(yīng)10小時。
作為優(yōu)選方案，以上所述的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，步驟(F)所述的脫硅醚試劑為KF、KOH或者四丁基氟化銨，特別優(yōu)選四丁基氟化銨，化合物(5)和四丁基氟化銨的摩爾用量比為1：1～10，特別優(yōu)選1：7，60℃反應(yīng)6～12小時。
化合物(5)和四丁基氟化銨的摩爾用量篩選實驗如下表：
作為優(yōu)選方案，以上所述的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，步驟(G)中化合物(6)和NaOH的摩爾用量比為1：1～5，特別優(yōu)選1：3，38℃反應(yīng)4～8小時。
有益效果：本發(fā)明提供的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法和現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：
本發(fā)明提供的氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，通過大量實驗篩選出最優(yōu)的反應(yīng)條件和最佳的反應(yīng)步驟，路線設(shè)計合理，可操作性強，制備得到的產(chǎn)物純度高達(dá)99.9％以上，得率高，為氟伐他汀的代謝機理研究提供測試樣品，可用于探究該藥物在生物體內(nèi)的代謝過程，在臨床藥代動力學(xué)研究中具有重要研究價值。
附圖說明
附圖1為本發(fā)明提供的氟伐他汀鈉脫水代謝物制備方法的合成路線圖。
具體實施方式
為了更好地理解本發(fā)明，以下結(jié)合路線圖對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)描述。實施例所描述的物料配比及其結(jié)果僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實施例1
如圖1所示，一種氟伐他汀鈉脫水代謝物的制備方法，其包括以下步驟：
步驟(A)：中間產(chǎn)物(1)的制備
20g氟伐二醇溶于400mL THF中，加入11.1g二氧化錳，室溫攪拌12小時后，反應(yīng)完全，抽濾除去二氧化錳，固體用THF洗滌，濾液濃縮，用色譜柱提純得到化合物(1)，產(chǎn)率85.33％。
步驟(B)：中間產(chǎn)物(2)的制備
取12g化合物(1)溶于120mL二氯甲烷，加入5.3g咪唑和9.7g叔丁基二甲基氯硅烷，室溫反應(yīng)18小時，TLC顯示反應(yīng)完全，反應(yīng)液依次用水、0.5N鹽酸和氯化鈉水溶液洗滌后，無水硫酸鈉干燥，濃縮干用硅膠色譜柱提純得到油狀物化合物(2)13.6g，產(chǎn)率91％。MS:602[M+Na+]。
步驟(C)：中間產(chǎn)物(3)的制備
取13.6g化合物(2)溶于136mL二氯甲烷，冰浴下分批加入1.8g硼氫化鈉，反應(yīng)液于25℃攪拌1小時，點板反應(yīng)完全，加水淬滅反應(yīng)，水相繼續(xù)用二氯甲烷萃取兩次，硫酸鈉干燥后濃縮得到化合物(3)13g，產(chǎn)率95.26％。MS:581[M+Na+]。
步驟(D)：中間產(chǎn)物(4)的制備
取13g化合物(3)溶于130mL二氯甲烷，加入9g三乙胺和18.8g苯甲酰氯，所得反應(yīng)液于25℃攪拌12小時，100mL水淬滅反應(yīng)，飽和氯化鈉洗滌后，有機相用硫酸鈉干燥、濃縮得到淡黃色油狀物，用色譜柱提純得到化合物(4)13g，產(chǎn)率85.32％。MS:708[M+Na+]。
步驟(E)：中間產(chǎn)物(5)的制備
4.38g四三苯基膦鈀和1g三乙胺溶于130mL THF中，13g化合物(4)的130mL THF溶液緩慢滴加到上述溶液中，25℃攪拌10小時，薄層色譜顯示反應(yīng)完全，把THF濃縮干，然后加入100mL水，水相用乙酸乙酯萃取，有機相干燥后濃縮得到12g黑色油狀物，硅膠柱提純得到10g化合物(5)，產(chǎn)率93.5％。MS:586[M+Na+]。
步驟(F)：中間產(chǎn)物(6)的制備
取9g化合物(5)溶于68mL THF，加入112mL的TBAF溶液，加熱到60℃反應(yīng)12小時，薄層色譜顯示反應(yīng)完全，反應(yīng)液冷卻后加入100mL水，旋蒸除去THF，水相用二氯甲烷萃取，粗產(chǎn)物用色譜柱提純得到6g化合物(6)，產(chǎn)率83.6％。
MS:472[M+Na+]；1H NMR:(400MHz,DMSO-d6):δ1.38(s,9H),1.60(dd,6H),2.3(dd,2H),4.35(m,1H),4.9(m,1H),5.1(dd,1H),5.65(dd,1H),6.2-6.5(m,2H),6.75(d,2H),7.0-7.7(Ar-H,8H).
步驟(G)：目標(biāo)化合物(7)的制備
取2.5g化合物(6)溶于25mL THF，加入1.1g氫氧化鈉，加熱到38℃反應(yīng)5小時，薄層色譜顯示反應(yīng)完全，反應(yīng)液冷卻后加入15mL水，旋蒸除去THF，水相用乙酸乙酯洗兩次，蒸干得到2g化合物(7)，產(chǎn)率86.6％，HPLC：99.91％。
化合物(7)MS:392[M-H-]；1H NMR:(400MHz,CD3OD):δ1.65(d,6H),2.35(d,2H),4.47(m,1H),4.85-4.94(m,1H),5.62-5.68(dd,1H),6.25-6.37(m,2H),6.65(d,1H),7.02(t,1H),7.1-7.2(m,3H),7.4(m,3H),7.6(d,1H).
本發(fā)明的上述實例是經(jīng)過大量試驗優(yōu)化后的實例，任何在本路線基礎(chǔ)上對條件進(jìn)行優(yōu)化都視為本發(fā)明所保護(hù)的范圍。