1.一種快速檢測乳酸菌精氨酸脫亞胺酶途徑的方法,其特征在于,所述方法是以乳酸菌基因組DNA為模板,分別用引物對A和引物對B進(jìn)行PCR,如果能夠得到分別為200~300bp、450bp~550bp的PCR產(chǎn)物,那么該乳酸菌具有精氨酸脫亞胺酶途徑,否則該乳酸菌不具有精氨酸脫亞胺酶途徑;
其中引物對A由核苷酸序列為SEQ ID NO.1和核苷酸序列為SEQ ID NO.2的核苷酸片段組成,或者是由SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2的序列同時(shí)進(jìn)行反向互補(bǔ)后得到的兩個(gè)核苷酸片段組成;所述引物對B由核苷酸序列為SEQ ID NO.3和核苷酸序列為SEQ ID NO.4的核苷酸片段組成,或者是由SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4的序列同時(shí)進(jìn)行反向互補(bǔ)后得到的兩個(gè)核苷酸片段組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述乳酸菌包括乳酸乳球菌、彎曲乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、植物乳桿菌、乳桿菌、短乳桿菌、魏斯氏菌、德氏乳桿菌、干酪乳桿菌、棒狀乳桿菌、檸檬明串珠菌、假腸膜明串珠菌、腸膜明串珠菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述200~300bp具體是指250bp;所述用450bp~550bp具體是指500bp。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述PCR的反應(yīng)體系為:DNA模板<500ng,上游引物和下游引物各0.2~1μM,10×Ex Taq Buffer 5μL,dNTP 4μL,滅菌蒸餾水補(bǔ)至50μL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述PCR的反應(yīng)條件為:預(yù)變性,94℃,4min;變性,94℃,35s;退火,50℃,35s,延伸,72℃,40s;變性、退火、延伸進(jìn)行30個(gè)循環(huán),繼續(xù)延伸,72℃,10min,最后10℃保持直到取出。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述PCR產(chǎn)物的檢測是使用瓊脂糖凝膠電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。
7.一種組合引物對,其特征在于,所述組合引物對包括引物對A和引物對B;其中引物對A由核苷酸序列為SEQ ID NO.1和核苷酸序列為SEQ ID NO.2的核苷酸片段組成,或者是由SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2的序列同時(shí)進(jìn)行反向互補(bǔ)后得到的兩個(gè)核苷酸片段組成;所述引物對B由核苷酸序列為SEQ ID NO.3和核苷酸序列為SEQ ID NO.4的核苷酸片段組成,或者是由SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4的序列同時(shí)進(jìn)行反向互補(bǔ)后得到的兩個(gè)核苷酸片段組成。
8.權(quán)利要求7所述組合引物對在食品中乳酸菌檢測方面的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,所述食品包括發(fā)酵食品或飲料。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,所述食品是醬油、發(fā)酵香腸、黃酒等。