本發(fā)明屬于制藥領域，提供一種4-N-(2-羥基-3，5-二氯芐基)氨基水楊酸的二氫煙酸酯衍生物及其藥物用途。
背景技術：
腦卒中具有高死亡率、高致殘率、高復發(fā)率等特點，嚴重危害人類健康。由于腦組織結構精細復雜，對缺血缺氧損傷特別敏感且脆弱，迄今臨床上少見療效確切的治療藥物。研究顯示：腦缺血條件下，興奮性氨基酸(如谷氨酸)過度釋放，引起N-甲基-D-天門冬氨酸受體(NMDAR)過度激活，通過NMDAR-PSD-95-nNOS的信號途徑病理性釋放一氧化氮(NO)(Science,1999,284,1845-1848；Nature Medicine 2010,16,1439-1443)。NO本身具有較強的氧化性，釋放過多或清除功能不足時，會直接損傷周圍細胞表面脂質和內部結構。另一方面，腦缺血再灌注過程中生成了大量的氧陰離子自由基(O2-.)，和NO反應生成超氧亞硝酸陰離子自由基(ONOO-.)，后者作為穩(wěn)定的強氧化物，將對細胞造成更為嚴重的損傷(Cell.Mol.Life Sci.,2004,61,657-668)。因此，NMDAR介導的nNOS激活是神經元興奮性毒性發(fā)生的關鍵事件，圍繞這兩個靶分子開發(fā)了許多藥物，但由于NMDAR和nNOS均具有非常重要的生理功能，對它們的直接干預往往導致嚴重的副作用(Curr.Opin.Pharmacol.,2006,6,53-60)。如果不直接干預NMDAR或nNOS，選擇性阻斷NMDAR與PSD-95(Science,2002,298,846-850)或者nNOS與PSD-95的偶聯(lián)(Nature Medicine 2010,16,1439-1443)，可以在不影響NMDAR和nNOS生理功能的前提下抑制腦缺血后NO的病理性釋放，可能獲得沒有明顯副作用的安全有效的抗腦卒治療藥物，而nNOS與PSD-95的偶聯(lián)處在整個信號通路的下游，是更為理想藥物作用靶點(Neuropharmacology,2003,45,738-754)。
nNOS-PSD-95解偶聯(lián)劑芐基苯胺衍生物4-N-(2-羥基-3，5-二氯芐基)氨基水楊酸(ZL006，化合物2)，能夠在不影響NMDAR、nNOS生理功能的前提下，減少NMDAR介導的NO的病理性釋放，對谷氨酸刺激下的神經細胞損傷顯示出明顯的神經保護作用，改善大腦中動脈閉塞(MCAO)再灌注引起的動物神經缺陷癥狀、縮小梗死容積(Nature Medicine 2010,16,1439–1443)。ZL006避免了直接干預NMDAR或/和nNOS可能引起的學習記憶障礙、行為異常等副作用，具有更好的安全性，對于腦缺血損傷相關疾病的治療具有重要意義(Nature.Rev.Neurol.,2011,7,61)。
ZL006為代表的nNOS-PSD-95解偶聯(lián)劑的作用靶點在中樞神經系統(tǒng)，該類藥物需要具有較好的中樞神經系統(tǒng)分布。但由于這類解偶聯(lián)劑具有較高的親水性，不利于藥物中樞神經系統(tǒng)分布。ZL006乙酯(化合物3)雖然能夠增加藥物在中樞神經系統(tǒng)分布，但是在腦組織中產生的ZL006沒有明顯增加(Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 2016,158:494-506)。二氫煙酸酯前藥能夠改善藥物中樞神經系統(tǒng)分布。本發(fā)明人研究發(fā)現，如果只是將ZL006簡單的與二氫煙酸以酰胺鍵連接，獲得的化合物(化合物4)在體內無法釋放出ZL006，而將ZL006簡單的與二氫煙酸以酯鍵連接，獲得的化合物(化合物5)缺乏穩(wěn)定性，在體內迅速釋放出ZL006，無法達到改善藥物中樞神經系統(tǒng)分布的目的。為此，本發(fā)明人通過乙二醇為聯(lián)結基團，將ZL006與二氫煙酸以酯鍵連接，獲得的化合物(1)既能夠在體內具有一定的穩(wěn)定性，又能夠在中樞釋放出ZL006，與ZL006乙酯相比，能夠明顯增加ZL006在腦組織中的濃度，顯示了良好的腦靶向作用。
技術實現要素：
本發(fā)明的目的：本發(fā)明提供一種二氫煙酸酯衍生物及其應用，該衍生物具有良好的腦靶向作用，可用于制備治療腦卒中藥物。
技術方案：一種二氫煙酸酯衍生物，為4-N-(2-羥基-3，5-二氯芐基)氨基水楊酸的二氫煙酸酯衍生物，結構如式1所示：
上述二氫煙酸酯衍生物或其藥學上可接受的鹽在制備治療腦卒中藥物中的應用。
上述二氫煙酸酯衍生物或其藥學上可接受的鹽在制備治療慢性病理性疼痛藥物中的應用。
上述二氫煙酸酯衍生物或其藥學上可接受的鹽在制備治療神經退行性疾病藥物中的應用。
一種治療腦卒中的藥物，有效成分為上述的二氫煙酸酯衍生物。
一種治療慢性病理性疼痛的藥物，有效成分為上述的二氫煙酸酯衍生物。
一種治療神經退行性疾病的藥物，有效成分為上述的二氫煙酸酯衍生物。
本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽還可制成各種制劑，包含但不限于片劑、膠囊、注射液、凍干粉等。
有益效果：本發(fā)明所述的4-N-(2-羥基-3，5-二氯芐基)氨基水楊酸的二氫煙酸酯衍生物，具有良好的腦靶向作用?？捎糜谥苽渲委熌X卒中、神經病理性疼痛、炎性病理性疼痛的藥物。同時，由于該類藥物獨特的作用機制，還可用于制備治療癲癇、情感障礙性疾病以及各種神經退行性疾病的藥物。
附圖說明
圖1：尾靜脈注射ZL006衍生物的腦組織中ZL006濃度比較圖。式1化合物的腦組織中ZL006濃度明顯高于其他ZL006衍生物。
圖1小鼠尾靜脈給藥化合物1、化合物2(ZL006)、化合物3(ZL006乙酯)、化合物4、化合物5后15分鐘、30分鐘、60分鐘，腦組織中ZL006的濃度。
具體實施方式
以下實施例詳細描述了尾靜脈注射本發(fā)明的目標化合物和其他ZL006衍生物的腦組織中ZL006濃度比較，可使本專業(yè)技術人員可全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
實施例1 4-N-(2-羥基-3，5-二氯芐基)氨基水楊酸的二氫煙酸酯衍生物(化合物1)的合成
目標化合物的合成路線如下：
1)4-[N-(3,5-二氯-2-羥基芐)-N-叔丁氧羰基]氨基-2-羥基苯甲酸(Boc-ZL006)的合成
在50mL茄形瓶中加入5-(3,5-二氯-2-羥基芐)氨基-2-羥基苯甲酸(1.0g,3.0mmol)，4-二甲氨基吡啶(0.37g,3.0mmol)，二碳酸二叔丁酯(0.65g,3.0mmol)以及二氯甲烷(3.0mL)，室溫攪拌6h。反應結束后，加水(20mL)，乙酸乙酯(20mL)萃取3次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到白色的5-[N-(3,5-二氯-2-羥基芐基)-N-叔丁氧羰基]氨基-2-羥基苯甲酸(1.2g，產率91％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.83(s,1H),7.77(d,J＝8.43Hz,1H),7.69(s,1H),6.93(s,1H),6.84(d,J＝7.69Hz,1H),5.72(s,1H),5.68(s,1H),4.85(s,2H),1.26(s,9H).
MS(ESI):m/z 427.1[M–H]-.
2)4-[N-(3,5-二氯-2-羥基芐)-N-叔丁氧羰基]氨基-2-羥基苯甲酸2-(N-甲基二氫煙酸酯基)乙酯(Boc-ZL006二氫煙酸酯)的合成
在100mL茄形瓶中，加入化合物Boc-ZL006 1.07g(2.5mmol),碳酸鉀1.66g(12mmol)，碘化鉀1.66g(10.0mmol)，N,N-二甲基甲酰胺50mL，55℃攪拌30min后，加入N-甲基二氫煙酸2-溴乙醇2.9g(16.0mmol)，55℃回流8h。反應結束后，過濾，濾液加三氟醋酸(1.7g,15mmol)，室溫下攪拌1h。加水用500mL乙酸乙酯多次萃取，收集乙酸乙酯，分別用飽和碳酸氫鈉溶液洗2次，水洗1次，飽和氯化鈉溶液1次。加入無水硫酸鈉，過濾，旋干，經硅膠柱層析分離，得到黃色狀物0.30g，產率24.3％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)7.80(s,1H),7.74(d,J＝8.43Hz,1H),7.67(s,1H),7.43(d,1H),6.91(s,1H),6.47(m,1H),6.84(d,J＝7.68Hz,1H),5.75(s,1H),5.67(s,1H),4.86(s,2H),4.95-4.85(m,1H),3.29(s,2H).
實施例2腦組織中ZL006的濃度測定
1.樣品溶液的配制
稱取ZL006二氫煙酸酯(化合物1)樣品20mg，溶于極少量DMSO中(少于總體積1％)，加入吐溫80(少于總體積5％)，于熱水浴中后加入生理鹽水定容至20mL，配制成濃度為1mg·mL-1溶液。
2.試驗方法
取ICR小鼠18只，體重20g左右，隨機分成3組，每組6只，尾靜脈給藥ZL006二氫煙酸酯(化合物1)，劑量為20mg·kg-1。小鼠禁食不禁水12h，實驗期間自由飲水。給藥后分別于15min、30min、1h處死小鼠。解剖取出腦組織，用生理鹽水漂洗組織表面的血漬，用濾紙將組織表面的水分吸干，稱重。加入重量比提及1:3的生理鹽水(即1g腦組織加入3mL生理鹽水)，電動勻漿器將組織制備成勻漿液。超聲10min，排除氣泡。于1.5mL的離心管中精密吸取100μL腦組織勻漿液，隨后加入精密吸取的10μL內標溶液以及300μL甲醇作為沉淀劑，于渦旋振蕩器上混勻渦1min，于離心機中12000r·min-1，離心10min，精密吸取上清液150μL加入50μL超純水，取10μL溶液進樣，采用Agilent 1200SL/6410B高效液相色譜/質譜儀檢測，記錄其色譜圖像。應用色譜工作站得到ZL006和內標的峰面積比值，代入隨行標準曲線中，求得ZL006的腦組織濃度。
同法測定小鼠尾靜脈給藥ZL006(化合物2)、ZL006乙酯(化合物3)、化合物4、化合物5腦組織中ZL006的濃度。測定結果見圖1。小鼠尾靜脈注射本發(fā)明的目標化合物1后腦組織中ZL006的濃度明顯高于其他ZL006衍生物。