本發(fā)明屬于有機(jī)化合物提取制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯制備方法。

背景技術(shù)：

目前銀杏內(nèi)酯的產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域較廣泛，涉及茶、食品、保健品、藥品等各種行業(yè)與產(chǎn)品。但目前國(guó)內(nèi)銀杏內(nèi)酯產(chǎn)品比較嚴(yán)重的問(wèn)題是純度較低，雜質(zhì)較多，有害因子含量高，不僅在應(yīng)用過(guò)程中，產(chǎn)生一系列的副作用與不良反應(yīng)，也嚴(yán)重限制了其應(yīng)用范圍。作為功能性食品配料，安全性是第一要素，盲目的將藥用銀杏葉提取物直接轉(zhuǎn)化為食用，在保留了其功能性之外，還帶來(lái)了許多安全隱患。由于目前行業(yè)內(nèi)諸多企業(yè)科學(xué)技術(shù)不到位，生產(chǎn)出的銀杏葉提取物中不僅含有高致敏性與免疫毒性的銀杏酸，而且通過(guò)添加非銀杏葉“輔料”或以非法工藝提取以追求巨額利潤(rùn)，這些產(chǎn)品在食品范圍內(nèi)的應(yīng)用，很大程度上成為影響廣大人民群眾健康的重大因素。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯制備方法，該方法可有效提高銀杏內(nèi)酯的產(chǎn)品質(zhì)量，減少銀杏酸的含量。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯制備方法，包括以下步驟：

（1）銀杏葉提取物的制備；

（2）銀杏內(nèi)酯溶液的制備：

i. 樹(shù)脂預(yù)處理：大孔樹(shù)脂用95%乙醇浸泡24h，蒸餾水洗滌后備用;

ii. 吸附:將步驟（1）中所得銀杏葉提取物溶于70%乙醇溶液，用步驟i中的大孔樹(shù)脂以2-4BV/h的流速吸附；

iii.洗脫：用無(wú)水乙醇以2-4BV/h的流速洗脫15-17倍柱體積，得到精制的銀杏內(nèi)酯溶液；

（3）銀杏酸的脫除：

a．樹(shù)脂預(yù)處理：離子交換樹(shù)脂通過(guò)乙醇浸泡、水洗、酸洗、堿洗等預(yù)處理；

b．將步驟（2）iii中所制得的銀杏內(nèi)酯溶液以3-5BV/h的流速流過(guò)經(jīng)過(guò)步驟a處理的離子交換樹(shù)脂吸附柱，所得穿透液即得脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯溶液，經(jīng)干燥，得脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯。

進(jìn)一步的，步驟（2）中所述大孔樹(shù)脂為DA201、DM301、AB-8或S-8大孔樹(shù)脂。

進(jìn)一步的，所述步驟（3）中所述離子交換樹(shù)脂為D918陰離子交換樹(shù)脂。

本發(fā)明有益效果：利用本發(fā)明所提供的一種脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯制備方法，乙醇提取、“兩柱”吸附-脫洗等工藝過(guò)程精制的銀杏提取物產(chǎn)品中銀杏酸含量為0.92 mg/kg，遠(yuǎn)小于國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（5PPm），達(dá)到了食品級(jí)的要求，所提取制備的銀杏內(nèi)酯的安全性和品質(zhì)得到有效保障。

附圖說(shuō)明

圖1為實(shí)施例1-8中大孔樹(shù)脂對(duì)銀杏內(nèi)酯的靜態(tài)吸附量A1；

圖2為實(shí)施例1-8中大孔樹(shù)脂對(duì)銀杏內(nèi)酯的靜態(tài)吸附量B1。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步具體說(shuō)明。本發(fā)明中所述實(shí)施例僅用于說(shuō)明解釋本發(fā)明而不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成限制。需說(shuō)明的是，本發(fā)明中未具體闡述的方法步驟等一般屬于本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)手段。

實(shí)施例1:

（1）利用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)方法提取銀杏葉提取物。

（2）銀杏內(nèi)酯溶液的制備：

i. 樹(shù)脂預(yù)處理：選取DA201用95%乙醇浸泡24h，蒸餾水洗滌后備用;

ii. 吸附:將步驟（1）中所得銀杏葉提取物溶于70%乙醇溶液，用步驟i中的DA201大孔樹(shù)脂柱以3 BV/h的流速吸附，銀杏內(nèi)酯的靜態(tài)吸附量為8.26 mg/g，吸附率為72.52%。

iii.洗脫：用無(wú)水乙醇以3 BV/h的流速洗脫，洗脫量為15倍柱體積，收集洗脫液，得到精制的銀杏內(nèi)酯溶液；

（3）銀杏酸的脫除：

a．樹(shù)脂預(yù)處理：選取D918陰離子交換樹(shù)脂，通過(guò)乙醇浸泡、水洗、酸洗、堿洗等預(yù)處理；

b．將步驟（2）iii中所制得的銀杏內(nèi)酯溶液以4 BV/h的流速流過(guò)經(jīng)過(guò)步驟a處理的D918陰離子交換樹(shù)脂吸附柱，所得穿透液即得脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯溶液，經(jīng)干燥，得脫除銀杏酸的銀杏內(nèi)酯。

（4）利用高效液相色譜法并結(jié)合蒸發(fā)光散射檢測(cè)器對(duì)本發(fā)明所制備的產(chǎn)物中銀杏內(nèi)酯含量進(jìn)行測(cè)定，其中色譜柱：美國(guó)Alltech公司Platinum C18，250mm×4.6mm，5μm；高效液相色譜條件為：以甲醇-水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫：A為甲醇，B為水，0-4min，A從5%升到14%，維持2min，2min內(nèi)從14%升到20%，維持2min，5min內(nèi)從20%升到80%，5min內(nèi)從80%降到50%，3min內(nèi)從50%降到5%，維持2min。進(jìn)樣體積：20μl；漂移管溫度：70.0℃；載氣壓力：40psi；檢測(cè)器增益500，噴霧器模式：冷卻，動(dòng)力級(jí)別70%。檢測(cè)結(jié)果如表1所示。

（5）利用液相色譜分析法對(duì)本發(fā)明所制備的產(chǎn)物中銀杏酸含量進(jìn)行測(cè)定，色譜柱：美國(guó)Alltech公司Platinum C18，250mm×4.6mm，5μm；流動(dòng)相：含有3%磷酸的甲醇；檢測(cè)波長(zhǎng)：310nm；流速：1ml/min；進(jìn)樣體積：20μl。檢測(cè)結(jié)果如表1所示。

由表1可知，通過(guò)乙醇提取、“兩柱”吸附-脫洗等工藝過(guò)程精制的銀杏提取物產(chǎn)品中銀杏酸含量為0.92 mg/kg，遠(yuǎn)小于國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（5 PPm），達(dá)到了食品級(jí)的要求，使得本發(fā)明所提取制備的銀杏內(nèi)酯的安全性和品質(zhì)得到有效保障。

本發(fā)明實(shí)施例2-8，除步驟（2）ii中大孔樹(shù)脂與實(shí)施例1不同外，其他步驟均相同，實(shí)施例2-8中所采用大孔樹(shù)脂依次為DM301、DM130、X-5、S-8、D3520、D101、AB-8，并對(duì)各樹(shù)脂對(duì)銀杏內(nèi)酯的吸附能力進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖1和圖2所示。

在靜態(tài)條件下，用DM301、DM130、X-5、DA201、S-8、D3520、D101、AB-8等8種樹(shù)脂對(duì)銀杏葉粗提物進(jìn)行吸附試驗(yàn)，圖1和圖2反映了8種不同類(lèi)型的大孔吸附樹(shù)脂的靜態(tài)吸附量和吸附率。從結(jié)果可看出，DA201、S-8、DM301、AB-8等4種大孔樹(shù)脂對(duì)銀杏內(nèi)酯的吸附率較高。