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一種海洋放線菌基因組文庫及其構建方法與流程

文檔序號:11145190閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,包括:

步驟A、提取海洋放線菌S.arenicola CNS-205的DNA;

步驟B、采用注射器的針頭隨機剪切提取的DNA;

步驟C、采用末端修復酶修復經隨機剪切后的DNA,然后與載體連接;

步驟D、采用包裝蛋白包裝成噬菌體后侵染宿主細胞,得到海洋放線菌S.arenicola CNS-205的基因組文庫。

2.根據權利要求1所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,所述步驟B具體包括:采用注射器的針頭隨機剪切提取的DNA,直至剪切后的DNA片段集中到25~45kb之間。

3.根據權利要求2所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,剪切后的DNA片段集中到40kb。

4.根據權利要求1所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,所述步驟C中,所述末端修復酶為T 4 DNA聚合酶或T 4多聚核苷酸激酶。

5.根據權利要求1所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,所述步驟C中,所述載體為pWEBTM載體。

6.根據權利要求5所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,所述pWEBTM載體為去磷酸化的pWEBTM載體。

7.根據權利要求1所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,所述步驟D中,所述包裝的條件為28℃水浴120min。

8.根據權利要求1所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,所述步驟D之后還包括:

步驟E、對基因組文庫的質量進行鑒定。

9.根據權利要求8所述的海洋放線菌基因組文庫的構建方法,其特征在于,步驟E中,鑒定內容包括:插入片段的大小、克隆數的多少及覆蓋基因組 DNA 的程度。

10.一種海洋放線菌的基因組文庫,其特征在于,所述基因組文庫采用如權利要求1~9任一所述的方法構建而成。

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