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萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種、使用及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法與流程

文檔序號:11125919閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種為香坊腸桿菌(Enterobacter xiangfangensis)MF-Ⅰ,其保藏編號為CGMCC No.12367。

2.如權(quán)利要求1所述的一種萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種,其特征在于,所述菌種在好氧條件下以萘作為碳源,通過共代謝降解氯仿。

3.一種權(quán)利要求1所述的萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的使用方法,其特征在于,所述的使用方法為:將MF-I菌用富集培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng);將滅菌的富集培養(yǎng)基定量備用;將富集培養(yǎng)后的菌株接種至滅菌過的富集培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng),恒溫振蕩2~5天;將菌液在溫度為4℃、轉(zhuǎn)數(shù)為5000的高速離心機(jī)中離心10分鐘,棄上清液,以pH=7.0磷酸鹽緩沖液對沉淀清洗并離心,重復(fù)三次,在吸光度為600nm的紫外分光光度計(jì)下,以磷酸鹽緩沖液調(diào)整菌懸液濃度為OD600=1.0。

4.如權(quán)利要求3所述的一種萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的使用方法,其特征在于,所述的富集培養(yǎng)基由以下組分組成:牛肉膏3g,蛋白胨10g,氯化鈉5g和水1L,富集培養(yǎng)基的pH為7。

5.一種權(quán)利要求1所述的萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法,其特征在于,包括以下步驟:

1)配制培養(yǎng)基于血清瓶中并高壓滅菌;

2)在血清瓶中添加萘和氯仿,調(diào)整萘和氯仿的濃度;

3)在紫外滅菌后的潔凈工作臺上以菌株MF-Ⅰ菌懸液進(jìn)行接種,以紫外分光光度儀進(jìn)行測量以表征生物量,調(diào)整生物量到設(shè)計(jì)值;

4)放入水浴振蕩箱中進(jìn)行以萘作為碳源共代謝降解氯仿的代謝降解反應(yīng)。

6.如權(quán)利要求5所述的一種萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法,其特征在于,步驟1)中所用培養(yǎng)基的化學(xué)組分為:Na2HPO4·12H2O 1g/L,K2HPO4 1g/L,(NH4)2SO40.5g/L,MgSO4·7H2O 0.2g/L,KNO3 0.5g/L,CaCl2 0.001g/L,微量元素1mL/L。

7.如權(quán)利要求6所述的萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法,其特征在于,所述的微量元素的化學(xué)組分為:FeCl2·4H2O 1.5g/L,CoCl2·6H2O 0.19g/L,MnSO4.7H2O 0.1g/L,ZnCl2 0.07g/L,NiCl2·6H2O 0.024g/L,Na2MoO4·2H2O 0.024g/L,MnCl2·4H2O 0.006g/L,CuCl2·2H2O 0.002g/L。

8.如權(quán)利要求7所述的一萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法,其特征在于,步驟2)中萘和氯仿的濃度經(jīng)過調(diào)整后,萘的濃度為20mg/L,氯仿的濃度為20ug/L。

9.如權(quán)利要求8所述的一種萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法,其特征在于,步驟3)中紫外分光光度儀的吸光度為600nm。

10.如權(quán)利要求9所述的一種萘作為碳源共代謝降解氯仿的菌種的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方法,其特征在于,步驟4)中的水浴振蕩箱的溫度為30℃,水浴振蕩箱的轉(zhuǎn)速為150r/min。

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