本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及吡美莫司的純化方法。

背景技術(shù)：

吡美莫司，Pimecrolimus【商品名】Elidel，分子量810.47，分子式C₄₃H₆₈CINO₁₁，為新一代免疫抑制類藥物。主要用做免疫抑制藥物和特應(yīng)性皮炎的治療藥物，作為抗關(guān)節(jié)炎藥物治療胃腸道炎癥藥物即將進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)。吡美莫司是大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物子囊霉素(Ascomycin，F(xiàn)K520)的一種衍生物，由瑞士諾華公司開發(fā)，于2002年在英國首先上市；國內(nèi)目前尚未有廠家生產(chǎn)。

在申請(qǐng)?zhí)枮?00580041024.0發(fā)明專利中，公開了一種從子囊霉素制備吡美莫司的方法，但是該申請(qǐng)文件用柱色法譜純化吡美莫司，其中純度指最終含異構(gòu)體總純度，并未指明能有效降低吡美莫司吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2的含量。

在范丹的《吡美莫司的研究-合成工藝、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定》(2010年碩士學(xué)位論文)一文中描述過經(jīng)柱層析、結(jié)晶提純后得到產(chǎn)物的純度達(dá)到95％以上吡美莫司。但是吡美莫司在該純化方法下得到的吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2含量會(huì)偏大，約為1％～5％左右。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種吡美莫司異構(gòu)體1與吡美莫司異構(gòu)體2含量低的吡美莫司的純化方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種吡美莫司的純化方法，包括以下步驟：

1)將含有異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的吡美莫司與溶劑A混合，加熱溶解，得到吡美莫司溶解液，所述溶劑A為丙酮、乙腈、丁酮、甲醇或乙醇，得到吡美莫司溶解液；

2)過濾步驟1)所得吡美莫司溶解液，收集濾液；

3)向步驟2)得到的濾液中滴加溶劑B，得到混合液，所述溶劑B為正己烷、環(huán)己烷、石油醚或正庚烷；

滴加溶劑B的速度要慢，會(huì)造成局部過飽和導(dǎo)致樣品析出。滴加速度以不會(huì)造成局部過飽和導(dǎo)致樣品析出為宜。

4)將混合液加熱到50至65℃，攪拌3至5分鐘，停止加熱，繼續(xù)攪拌并降溫結(jié)晶，析出白色結(jié)晶物；

因?yàn)檫撩滥井悩?gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2的構(gòu)型不穩(wěn)定，本發(fā)明采用先提高溫度溶解然后緩慢降溫結(jié)晶的方式降低吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2的含量，其主要原理就是通過緩慢降溫方式，使得吡美莫司中間態(tài)構(gòu)型吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2發(fā)生轉(zhuǎn)化翻轉(zhuǎn)到吡美莫司主構(gòu)型。

5)過濾步驟4)中白色結(jié)晶物，去除母液；

6)用溶劑A與溶劑B混合液洗滌步驟5)中的白色結(jié)晶物，烘干，得到的白色粉末，即為相對(duì)于純化前吡美莫司中吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2含量降低的吡美莫司。

優(yōu)選地，所述吡美莫司的純化方法，步驟1)中溶解溫度控制在50至65℃。

優(yōu)選地，所述吡美莫司的純化方法，步驟1)中加熱方式為油浴加熱。

油可以選擇二甲基硅油。

優(yōu)選地，所述吡美莫司的純化方法，步驟1)步驟1)中吡美莫司與溶劑A的重量比為1:6至1:10。

優(yōu)選地，所述吡美莫司的純化方法，步驟1)中溶劑A與步驟3)中溶劑B的體積比為1:3至1:5。

優(yōu)選地，所述吡美莫司的純化方法，步驟4)中降溫速率為4℃/小時(shí)至7℃/小時(shí)。

優(yōu)選地，所述吡美莫司的純化方法，步驟4)中結(jié)晶溫度最后保持為30至32℃。

實(shí)驗(yàn)中，保持此溫度結(jié)晶2小時(shí)左右。

將結(jié)晶溫度最后保持在30℃左右純化效果最好，因?yàn)闇囟冗^高和過低，都會(huì)導(dǎo)致異構(gòu)體1、2含量偏高。

優(yōu)選地，所述吡美莫司的純化方法，步驟6)混合液中溶劑A與溶劑B的體積比為1:3至1:5。

附圖說明

圖1為吡美莫司與吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2互變轉(zhuǎn)化的示意圖。

圖2為純化前吡美莫司HPLC的色譜圖。

圖3為經(jīng)過本發(fā)明純化方法后吡美莫司HPLC的色譜圖。

具體實(shí)施方式

為詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容、構(gòu)造特征、所實(shí)現(xiàn)目的及效果，以下結(jié)合具體實(shí)施方式并配合附圖詳予說明。

圖1為吡美莫司與吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2互變轉(zhuǎn)化的示意圖。

吡美莫司屬于大環(huán)內(nèi)酯類化合物，空間結(jié)構(gòu)上受結(jié)構(gòu)化學(xué)中分子立體構(gòu)型的性質(zhì)影響，空間排布優(yōu)選以反式異構(gòu)體為主要的原型化合物結(jié)構(gòu)存在，由于在生產(chǎn)過程中溶劑極化等因素，尤其用到醇類等質(zhì)子性溶劑，六元環(huán)結(jié)構(gòu)在有質(zhì)子性溶劑及水分子溶液氫鍵效應(yīng)作用下部分開環(huán)然后閉環(huán)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生互變異構(gòu)的順式異構(gòu)體，生產(chǎn)工藝中控制結(jié)晶條件可以有效的控制互變異構(gòu)體往空間結(jié)構(gòu)能量較低的反式異構(gòu)體形式原型化合物存在。

實(shí)施例1

本實(shí)施例的具體工藝方法如下：

1)將含有異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的吡美莫司與溶劑A丙酮混合，油浴加熱到50℃溶解，得到吡美莫司溶解液，吡美莫司與溶劑A丙酮的重量比為1:10；

2)過濾步驟1)所得吡美莫司溶解液，收集濾液；

3)向步驟2)得到的濾液中滴加溶劑B正己烷，得到混合液；步驟1)中溶劑A丙酮與步驟3)中溶劑B正己烷的體積比為1:3。

4)將混合液加熱到50℃，攪拌5分鐘，停止加熱，繼續(xù)攪拌，以降溫速率為7℃/小時(shí)降溫，溫度降到30℃并保持此溫度結(jié)晶，保持此溫度結(jié)晶2小時(shí)，析出白色結(jié)晶物；

5)過濾步驟4)中白色結(jié)晶物，去除母液；

6)溶劑A丙酮、與溶劑B正己烷、混合液洗滌步驟5)中的白色結(jié)晶物，溶劑A丙酮、與溶劑B正己烷、的體積比為1:3；烘干，得到的白色粉末，即為相對(duì)于純化前吡美莫司中吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2含量降低的吡美莫司。

實(shí)施例2

本實(shí)施例的具體工藝方法如下：

1)將含有異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的吡美莫司與溶劑A乙腈混合，油浴加熱到50至65℃溶解，得到吡美莫司溶解液，吡美莫司與溶劑A乙腈的重量比為1:6；

2)過濾步驟1)所得吡美莫司溶解液，收集濾液；

3)向步驟2)得到的濾液中滴加溶劑B環(huán)己烷，得到混合液；步驟1)中溶劑A乙腈與步驟3)中溶劑B環(huán)己烷的體積比為1:5。

4)將混合液加熱到65℃，攪拌3分鐘，停止加熱，繼續(xù)攪拌，以降溫速率為4℃/小時(shí)降溫，溫度降到32℃并保持此溫度結(jié)晶，保持此溫度結(jié)晶2小時(shí)，析出白色結(jié)晶物；

5)過濾步驟4)中白色結(jié)晶物，去除母液；

6)溶劑A乙腈與溶劑B環(huán)己烷混合液洗滌步驟5)中的白色結(jié)晶物，溶劑A乙腈與溶劑B環(huán)己烷的體積比為1:5；烘干，得到的白色粉末，即為相對(duì)于純化前吡美莫司中吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2含量降低的吡美莫司。

實(shí)施例3

本實(shí)施例的具體工藝方法如下：

1)將含有異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的吡美莫司與溶劑A丁酮混合，油浴加熱到55℃溶解，得到吡美莫司溶解液，吡美莫司與溶劑A丁酮的重量比為1:9；

2)過濾步驟1)所得吡美莫司溶解液，收集濾液；

3)向步驟2)得到的濾液中滴加溶劑B石油醚，得到混合液；步驟1)中溶劑A丁酮與步驟3)中溶劑B石油醚的體積比為1:3.5。

4)將混合液加熱到55℃，攪拌4分鐘，停止加熱，繼續(xù)攪拌，以降溫速率為6℃/小時(shí)降溫，溫度降到30.5℃并保持此溫度結(jié)晶，保持此溫度結(jié)晶2小時(shí)，析出白色結(jié)晶物；

5)過濾步驟4)中白色結(jié)晶物，去除母液；

6)溶劑A丁酮與溶劑B石油醚混合液洗滌步驟5)中的白色結(jié)晶物，溶劑A丁酮與溶劑B石油醚的體積比為1:3.5；烘干，得到的白色粉末，即為相對(duì)于純化前吡美莫司中吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2含量降低的吡美莫司。

實(shí)施例4

本實(shí)施例的具體工藝方法如下：

1)將含有異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的吡美莫司與溶劑A甲醇混合，油浴加熱到60℃溶解，得到吡美莫司溶解液，吡美莫司與溶劑A甲醇的重量比為1:7；

2)過濾步驟1)所得吡美莫司溶解液，收集濾液；

3)向步驟2)得到的濾液中滴加溶劑B正庚烷，得到混合液；步驟1)中溶劑A甲醇與步驟3)中溶劑B正庚烷的體積比為1:4.5。

4)將混合液加熱到60℃，攪拌3.5分鐘，停止加熱，繼續(xù)攪拌，以降溫速率為5℃/小時(shí)降溫，溫度降到31.5℃并保持此溫度結(jié)晶，保持此溫度結(jié)晶2小時(shí)，析出白色結(jié)晶物；

5)過濾步驟4)中白色結(jié)晶物，去除母液；

6)溶劑A甲醇與溶劑B正庚烷混合液洗滌步驟5)中的白色結(jié)晶物，溶劑A甲醇與溶劑B正庚烷的體積比為1:4.5；烘干，得到的白色粉末，即為相對(duì)于純化前吡美莫司中吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2含量降低的吡美莫司。

實(shí)施例5

本實(shí)施例的具體工藝方法如下：

1)將含有異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的吡美莫司與溶劑A乙醇混合，油浴加熱到50至65℃溶解，得到吡美莫司溶解液，吡美莫司與溶劑A乙醇的重量比為1:8；

2)過濾步驟1)所得吡美莫司溶解液，收集濾液；

3)向步驟2)得到的濾液中滴加溶劑B正己烷，得到混合液；步驟1)中溶劑A乙醇與步驟3)中溶劑B正己烷的體積比為1:4。

4)將混合液加熱到55℃，攪拌4分鐘，停止加熱，繼續(xù)攪拌，以降溫速率為5.5℃/小時(shí)降溫，溫度降到31℃并保持此溫度結(jié)晶，保持此溫度結(jié)晶2小時(shí)，析出白色結(jié)晶物；

5)過濾步驟4)中白色結(jié)晶物，去除母液；

6)溶劑A乙醇與溶劑B正己烷混合液洗滌步驟5)中的白色結(jié)晶物，溶劑A乙醇與溶劑B正己烷的體積比為1:4；烘干，得到的白色粉末，即為相對(duì)于純化前吡美莫司中吡美莫司異構(gòu)體1、吡美莫司異構(gòu)體2含量降低的吡美莫司。

純度檢測(cè)方法：高效液相色譜測(cè)定，色譜柱Kromasil ODS C18，5μm，250mm*4.6mm；流動(dòng)相體積比為V(乙腈)：V(乙酸)：V(水)＝700:1:300，流動(dòng)相流速1.0mL/min；檢測(cè)波長210nm；色譜柱柱溫60℃；外標(biāo)法定量。

圖2為純化前吡美莫司HPLC的色譜圖，其中吡美莫司異構(gòu)體1含量為1.4％、吡美莫司異構(gòu)體2含量為2.1％，吡美莫司純度為96.5％。

圖3為經(jīng)過本發(fā)明實(shí)施例5純化后的吡美莫司HPLC的色譜圖，純化后吡美莫司純度為99.4％。

以上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書及附圖內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。