抗IL-23抗體技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明總體上涉及用于診斷性及治療性用途的抗IL-23p19抗體。更特別是，公開了用于治療各種疾病或病癥的人源化抗IL-23p19抗體及使用方法。亦公開了包含這些化合物的藥物組合物及試劑盒。發(fā)明背景高等真核生物經(jīng)進(jìn)化會(huì)對(duì)病原體起復(fù)雜的應(yīng)答，該應(yīng)答由先天性免疫應(yīng)答起始且隨后為適應(yīng)性免疫應(yīng)答。此兩種機(jī)制一起不僅根除感染生物體的病原體而且亦產(chǎn)生針對(duì)未來暴露的長(zhǎng)期免疫應(yīng)答。缺乏這些反應(yīng)會(huì)使適應(yīng)性免疫應(yīng)答對(duì)感染及/或變化的敏感性增加，導(dǎo)致慢性炎癥及自身免疫性。IL-12為一種由p40及p35蛋白亞單元組成的雜二聚細(xì)胞因子，其長(zhǎng)時(shí)間以來被視為先天性免疫應(yīng)答的標(biāo)志性細(xì)胞因子，對(duì)應(yīng)變性免疫性具有較大影響。然而，關(guān)于此細(xì)胞因子的生物學(xué)作用的研究的數(shù)據(jù)產(chǎn)生令人費(fèi)解的結(jié)果。例如，盡管缺乏p40的小鼠對(duì)膠原蛋白誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎(CIA)及實(shí)驗(yàn)性自身免疫腦脊髓炎(EAE)具有抗性，但缺乏p35的小鼠易感患以上兩種疾病且甚至顯示惡化的疾病。這些難題隨著在1990年代后期發(fā)現(xiàn)在免疫應(yīng)答中具有不同作用的IL-12細(xì)胞因子家族新成員IL-23而開始得以解決。IL-23由與IL-12共有的亞單元(p40)及獨(dú)特p19亞單元構(gòu)成。盡管共有此p40亞單元，但I(xiàn)L-23及IL-12的作用極不相同。IL-12經(jīng)由促進(jìn)Th1細(xì)胞分化、增殖及活化而對(duì)Th1反應(yīng)極為重要。相比之下，IL-23支持新近確定的一組CD4+T輔助細(xì)胞的發(fā)育及維持，所述CD4+T輔助細(xì)胞由于能夠產(chǎn)生IL-17及相關(guān)細(xì)胞因子而稱為Th17細(xì)胞。日益增多的證據(jù)表明IL-23參與慢性自身免疫炎癥，且IL-23活性的調(diào)節(jié)可提供針對(duì)自身免疫疾病的有前途的療法。因此，需要具有有益藥理學(xué)性質(zhì)的針對(duì)IL-23的拮抗劑分子，其可用作治療人類疾病，特別是免疫及自身免疫疾病的治療劑。因此，本發(fā)明的一個(gè)目標(biāo)在于提供抗IL-23拮抗劑分子，特別是對(duì)IL-23具有高結(jié)合親和力的抗IL-23拮抗劑分子。本發(fā)明的另一目標(biāo)在于提供對(duì)IL-23具有高特異性的抗IL-23拮抗劑分子。本發(fā)明的另一目標(biāo)在于提供對(duì)IL-23與其受體的締合具有高阻斷活性的抗IL-23拮抗劑。本發(fā)明的另一目標(biāo)在于提供具有強(qiáng)力細(xì)胞活性的抗IL-23拮抗劑。本發(fā)明的另一目標(biāo)在于提供具有有利生物利用度的抗IL-23拮抗劑。本發(fā)明的另一目標(biāo)在于提供具有有利生物物理學(xué)性質(zhì)的抗IL-23拮抗劑。本發(fā)明的其它目標(biāo)包括上述任何目標(biāo)的組合。發(fā)明概述本發(fā)明解決以上需要且提供與IL-23蛋白的p19亞單元結(jié)合的抗體。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的抗體以高親和力與人類IL-23結(jié)合。在另一方面中，本發(fā)明的抗體抑制小鼠脾細(xì)胞經(jīng)IL-23刺激產(chǎn)生IL-17。在另一方面中，本發(fā)明的抗體不與作為IL-23的密切相關(guān)家族成員的IL-12結(jié)合亦不拮抗IL-12。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供由小鼠融合瘤產(chǎn)生的抗IL-23p19抗體，例如單克隆抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供全長(zhǎng)抗IL-23p19抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供抗IL-23p19人源化抗體，例如人源化單克隆抗IL-23p19抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗IL-23p19抗體。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗體以高親和力與人類IL-23結(jié)合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體亦以高親和力與短尾猴(cynomolgus)IL-23結(jié)合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體抑制DB細(xì)胞中由IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體通過與IL-23的p19亞單元結(jié)合來拮抗IL-23的作用，例如通過對(duì)IL-17及IL-22的細(xì)胞因子的抑制所測(cè)量，所述細(xì)胞因子系由IL-23刺激產(chǎn)生。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有有利的藥物動(dòng)力學(xué)(PK)概況。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有有利生物物理學(xué)性質(zhì)，例如質(zhì)量、穩(wěn)定性或溶解性，例如由呈單體形式抗體的百分比所確定。其它實(shí)施方案涵蓋編碼本發(fā)明的抗體的DNA分子、包含這些DNA分子的表達(dá)載體及宿主細(xì)胞、及制備本發(fā)明的抗體的方法。本發(fā)明另外提供本發(fā)明的抗體特別是針對(duì)免疫及自身免疫疾病的治療性用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含輕鏈CDR1(L-CDR1)序列SEQIDNO:1、4、6、7、8、11、15、18、19、22、27或30；輕鏈CDR2(L-CDR2)序列SEQIDNO:2、5、9、12、16、20、23、25、28或31；輕鏈CDR3(L-CDR3)序列SEQIDNO:3、10、13、14、17、21、24、26、29或32；重鏈CDR1(H-CDR1)序列SEQIDNO:33、36、38、40、43、45、48、51、54、57、60、63、66、67、68、69、77或80；重鏈CDR2(H-CDR2)序列SEQIDNO:34、39、41、46、49、52、55、58、61、64、70、72、73、75、78或81；及重鏈CDR3(H-CDR3)序列SEQIDNO:35、37、42、44、47、50、53、56、59、62、65、71、74、76、79或82。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段包含：輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含以上所列L-CDR1、以上所列L-CDR2及以上所列L-CDR3；及重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含以上所列H-CDR1、以上所列H-CDR2及以上所列H-CDR3。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含分別為SEQIDNO:1、2、3、33、34及35的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:4、5、3、36、34及37的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:1、2、3、38、39及35的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:6、2、3、40、41及42的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:7、2、3、43、41及44的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:8、9、10、45、46及47的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；分別為SEQIDNO:8、9、10、48、49及50的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:11、12、13、51、52及53的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:7、2、14、54、55及56的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:15、16、17、57、58及59的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:18、16、17、60、61及62的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:19；20；21；63、66、67或68；64；及65的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:22、23、24、69、70及71的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:22、25、26、55、72及71的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:8、9、10、45、73及74的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:27、28、29、45、75及76的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:8、9、10、77、78及79的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或分別為SEQIDNO:30、31、32、80、81及82的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段包含：輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含以上所列L-CDR1、L-CDR2及L-CDR3組合；及重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含以上所列H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有氨基酸序列SEQIDNO:84的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:121的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:86的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:123的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:88的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:125的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:90的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:127的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:91的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:128的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:93的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:130的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:95的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:132的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:97的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:134的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:99的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:136的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:101的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:138的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:103的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:140的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:105的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:142的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:107的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:144的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:109的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:146的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:111的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:148的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:113的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:150的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:115的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:152的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:117的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:154的重鏈可變區(qū)；或含有氨基酸序列SEQIDNO:119的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:156的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有選自SEQIDNO:158、160、162及164的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)及含有選自SEQIDNO:166、168、170及172的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段對(duì)IL-23的KD小于40pM或小于20pM或小于10pM或小于1pM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其在由SEQIDNO:181的氨基酸殘基108至126及氨基酸殘基137至151組成的表位處與人類IL-23p19結(jié)合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其與本發(fā)明的抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人類IL-23p19。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其與包含含有氨基酸序列SEQIDNO:174的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:176的重鏈的人源化單克隆抗IL-23p19抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人類IL-23p19。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其與包含含有氨基酸序列SEQIDNO:174的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:178的重鏈的人源化單克隆抗IL-23p19抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人類IL-23p19。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其與包含含有氨基酸序列SEQIDNO:180的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:176的重鏈的人源化單克隆抗IL-23p19抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人類IL-23p19。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其與包含含有氨基酸序列SEQIDNO:180的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:178的重鏈的人源化單克隆抗IL-23p19抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人類IL-23p19。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為單克隆抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為全長(zhǎng)抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原結(jié)合片段為Fab、F(ab')2或單鏈Fv片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原結(jié)合片段包含輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含氨基酸序列SEQIDNO:19(CDR1-L)；氨基酸序列SEQIDNO:20(CDR2-L)；氨基酸序列SEQIDNO:21(CDR3-L)；氨基酸序列SEQIDNO:63、66、67或68(CDR1-H)；氨基酸序列SEQIDNO:64(CDR2-H)；及氨基酸序列SEQIDNO:65(CDR3-H)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含氨基酸序列SEQIDNO:19(CDR1-L)；氨基酸序列SEQIDNO:20(CDR2-L)；氨基酸序列SEQIDNO:21(CDR3-L)；氨基酸序列SEQIDNO:66(CDR1-H)；氨基酸序列SEQIDNO:64(CDR2-H)；及氨基酸序列SEQIDNO:65(CDR3-H)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含：輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含氨基酸序列SEQIDNO:19(CDR1-L)、氨基酸序列SEQIDNO:20(CDR2-L)及氨基酸序列SEQIDNO:21(CDR3-L)；及重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含氨基酸序列SEQIDNO:63、66、67或68(CDR1-H)、氨基酸序列SEQIDNO:64(CDR2-H)及氨基酸序列SEQIDNO:65(CDR3-H)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含：輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含氨基酸序列SEQIDNO:19(CDR1-L)、氨基酸序列SEQIDNO:20(CDR2-L)及氨基酸序列SEQIDNO:21(CDR3-L)；及重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含氨基酸序列SEQIDNO:66(CDR1-H)、氨基酸序列SEQIDNO:64(CDR2-H)及氨基酸序列SEQIDNO:65(CDR3-H)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含：輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含氨基酸序列SEQIDNO:158、160、162或164的任一者；及重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含氨基酸序列SEQIDNO:166、168、170或172的任一者。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有氨基酸序列SEQIDNO:160的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:166的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有氨基酸序列SEQIDNO:160的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:168的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有氨基酸序列SEQIDNO:158的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:166的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其中該抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有氨基酸序列SEQIDNO:158的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:168的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為單克隆抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為全長(zhǎng)抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗IL-23p19抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原結(jié)合片段為Fab、F(ab')2或單鏈Fv片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原結(jié)合片段包含輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種包含與人類IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA或IgE重鏈恒定區(qū)連接的氨基酸序列SEQIDNO:166或168的抗體。一種包含與人類IgG1重鏈恒定區(qū)連接的氨基酸序列SEQIDNO:166或168的抗體。一種包含與人類κ或λ輕鏈恒定區(qū)連接的氨基酸序列SEQIDNO:158或160的抗體。一種包含與人類κ輕鏈恒定區(qū)連接的氨基酸序列SEQIDNO:158或160的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抗體，其包含與人類IgG1重鏈恒定區(qū)連接的氨基酸序列SEQIDNO:166或168、及與人類κ輕鏈恒定區(qū)連接的氨基酸序列SEQIDNO:158或160。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有選自SEQIDNO:158、160、162及164的任一者的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)及含有選自SEQIDNO:166、168、170及172的任一者的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:160的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:166的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:160的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:168的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:158的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:166的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:158的輕鏈可變區(qū)及含有氨基酸序列SEQIDNO:168的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:174或180的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:176或178的重鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:174的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:176的重鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:174的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:178的重鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:180的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:176的重鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種人源化單克隆抗IL-23p19抗體，其包含含有氨基酸序列SEQIDNO:180的輕鏈及含有氨基酸序列SEQIDNO:178的重鏈。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:160的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:160的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:166的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:166的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:160的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:160的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:168的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:168的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:158的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:158的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:166的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:166的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:158的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:158的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:168的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:168的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于對(duì)人類IL-23的KD小于或等于1pM。在一個(gè)方面中，在50%人類血清中結(jié)合速率無變化。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其活體外阻斷IL-23與人類IL-23R/Fc結(jié)合。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其不與人類IL-12結(jié)合。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其抑制小鼠脾細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17產(chǎn)生，IC50小于或等于20pM。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其抑制人類DB細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化，IC50小于或等于40pM。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其不具有預(yù)測(cè)的ADCC/CDC活性。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其對(duì)短尾猴IL-23的KD小于或等于1pM。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其不具有與小鼠或大鼠IL-23的交叉反應(yīng)性。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其抑制小鼠耳中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17及IL-22的產(chǎn)生，在1mg/kg下對(duì)兩種細(xì)胞因子的抑制均為80%或80%以上。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于如通過差示掃描熱量測(cè)定法所測(cè)定的熔融溫度為83°C。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于如通過紫外光譜法測(cè)量且通過混濁度監(jiān)測(cè)的溶解度大于或等于100mg/ml。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其以至少90%單體形式或至少92%單體形式或至少95%單體形式存在于緩沖液中。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的特征可進(jìn)一步在于其以至少90%單體形式或至少92%單體形式或至少95%單體形式保持在緩沖液中持續(xù)一個(gè)月或四個(gè)月。在一個(gè)方面中，人源化抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。其它實(shí)施方案涵蓋編碼以上輕鏈可變區(qū)的DNA分子、編碼以上重鏈可變區(qū)的DNA分子、編碼以上輕鏈區(qū)的DNA分子、或編碼以上重鏈區(qū)的DNA分子。其它實(shí)施方案涵蓋含有以上DNA分子的表達(dá)載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，表達(dá)載體包含分別編碼恒定重鏈及/或恒定輕鏈的DNA分子，其分別與編碼可變重鏈及/或可變輕鏈的DNA分子連接。其它實(shí)施方案涵蓋攜帶上述一或多種表達(dá)載體的宿主細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中，宿主為哺乳動(dòng)物細(xì)胞。其它實(shí)施方案涵蓋一種產(chǎn)生上述抗體或其抗原結(jié)合片段的方法，其包括用上述一或多種載體轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞，培養(yǎng)該宿主細(xì)胞，及回收并純化該抗體或其抗原結(jié)合片段。其它實(shí)施方案涵蓋一種產(chǎn)生上述抗體或其抗原結(jié)合片段的方法，其包括獲得包含上述一或多種載體的哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞，及培養(yǎng)該宿主細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法另外包含回收并純化該抗體或其抗原結(jié)合片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種用于醫(yī)藥中的上述抗體或其抗原結(jié)合片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，用途為治療炎性疾病、自身免疫疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、代謝障礙或癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，用途為治療牛皮癬、炎性腸病(克羅恩氏病(Crohn'sdisease)、潰瘍性結(jié)腸炎)、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或強(qiáng)直性脊椎炎。在一個(gè)實(shí)施方案中，用途為治療牛皮癬。在一個(gè)實(shí)施方案中，用途為治療炎性腸病。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種包含上述抗體分子或抗原結(jié)合片段及藥學(xué)上可接受的載劑的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種治療炎性疾病、自身免疫疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、代謝障礙或癌癥的方法，其包括向有需要的個(gè)體，例如患者給予有效量的上述抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段、或包含該抗體或其抗原結(jié)合片段的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段通過非經(jīng)腸給藥途徑給予或經(jīng)靜脈內(nèi)或皮下給予。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或抗原結(jié)合片段經(jīng)皮下給予。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病為牛皮癬、炎性腸病(克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎)、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或強(qiáng)直性脊椎炎。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病為牛皮癬。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病為炎性腸病。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抑制IL-23與哺乳動(dòng)物細(xì)胞上的IL-23受體結(jié)合的方法，其包括向該細(xì)胞給予上述抗體分子或抗原結(jié)合片段，由此抑制由IL-23受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種治療患有IL-23相關(guān)病癥的個(gè)體的方法，其包括向該個(gè)體給予上述抗體或抗原結(jié)合片段，該抗體或抗原結(jié)合片段與人類IL-23結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種檢測(cè)及/或定量測(cè)定生物樣品中的IL-23含量的方法，其通過使該樣品與上述抗體或抗原結(jié)合片段接觸并檢測(cè)該抗體或其片段與IL-23p19的結(jié)合而達(dá)成。此信息可用于診斷IL-23相關(guān)病癥。因此，提供了用于診斷IL-23相關(guān)病癥或確定個(gè)體出現(xiàn)IL-23相關(guān)病癥的風(fēng)險(xiǎn)是否增加的方法，其中該方法包括使來自個(gè)體的生物樣品與上述抗體或抗原結(jié)合片段接觸，并檢測(cè)該抗體或抗原結(jié)合片段與IL-23p19的結(jié)合以測(cè)定IL-23的表達(dá)或濃度。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明另外提供一種抑制IL-23與細(xì)胞上的IL-23受體結(jié)合的方法，其包括向該細(xì)胞或細(xì)胞環(huán)境給予上述抗體或抗原結(jié)合片段，由此抑制由IL-23受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)。附圖簡(jiǎn)述圖1：小鼠可變區(qū)與人源化可變區(qū)的比對(duì)。圖1a：抗IL-23p196B8工程改造的Vk區(qū)。圖1b：抗IL-23p196B8工程改造的VH區(qū)。氨基酸根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)Kabat編號(hào)流程來編號(hào)。普通字體=人類；斜體/加下劃線字體=鼠類；陰影字體=合成；粗體/斜體/加下劃線=CDR。圖2：人類IL-23與IL-23R/Fc結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合分析。發(fā)明詳述IL-23的p19亞單元(在本文中亦稱為“IL-23p19”及“p19亞單元”)為一種具有189個(gè)氨基酸的多肽，其含有具有21個(gè)氨基酸的前導(dǎo)序列(Oppmann等人,Immunity13:715(2000)，SEQIDNO:181)。該分子的生物活性僅在其與IL-12p40亞單元搭配以形成IL-23時(shí)才被檢測(cè)到。IL-23主要由活化樹突狀細(xì)胞(DC)及吞噬細(xì)胞表達(dá)。發(fā)現(xiàn)IL-23的受體由IL-12受體的IL-12Rβ1亞單元與稱為IL-23R的獨(dú)特亞單元搭配構(gòu)成(Parham等人,J.Immunol.168:5699(2002))。檢測(cè)到該受體主要在記憶T細(xì)胞及NK細(xì)胞上表達(dá)。因此，此細(xì)胞因子:受體對(duì)的表達(dá)似乎局限于特定免疫細(xì)胞群體。盡管最初認(rèn)為IL-12與IL-23將共有許多功能，但數(shù)據(jù)顯示并非如此。盡管IL-12在Th1細(xì)胞的產(chǎn)生中具有主要作用，但發(fā)現(xiàn)IL-23關(guān)鍵性地涉及于新近認(rèn)定的稱為Th17的Th細(xì)胞亞群的產(chǎn)生及維持中(Kikly等人Curr.Opin.Immunol.18:670(2006)；Kastelein等人,Ann.Rev.Immunol.25:221(2007))。這些細(xì)胞產(chǎn)生IL-17A、IL-17F、IL-22及其它促炎性細(xì)胞因子，例如IL-6及TNF-α。如下所述，關(guān)于這些Th17細(xì)胞的作用的動(dòng)物模型研究顯示其作為慢性炎癥及自身免疫性中的驅(qū)動(dòng)力的重要性。本發(fā)明提供與IL-23的p19亞單元，特別是人類IL-23p19結(jié)合的抗體。本發(fā)明亦涉及識(shí)別IL-23的p19亞單元的人源化抗體。在具體實(shí)施方案中，這些人源化抗體的序列已基于某些前導(dǎo)小鼠抗體的序列得以鑒定。本發(fā)明的前導(dǎo)小鼠抗體由小鼠融合瘤產(chǎn)生。使用不同技術(shù)對(duì)小鼠進(jìn)行免疫接種。例如，對(duì)人類IL-23p19蛋白或其片段具有特異性的抗體可針對(duì)例如分離的IL-23p19蛋白、分離的IL-23蛋白、分離的雜交IL-23蛋白及/或任何以上蛋白質(zhì)的一部分(包括合成肽)的免疫原性抗原而產(chǎn)生。例如，使用包含小鼠IL-23p40亞單元及人類IL-23p19亞單元的雜交IL-23蛋白質(zhì)對(duì)小鼠進(jìn)行免疫接種?？墒褂帽绢I(lǐng)域中已知的任何適合技術(shù)制備免疫原性抗原及產(chǎn)生單克隆抗體?；谇皩?dǎo)小鼠抗體對(duì)人類IL-23的高親和力對(duì)其進(jìn)行選擇。因此，在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供一種以高親和力與人類IL-23結(jié)合的抗體。所選小鼠抗體經(jīng)人源化以產(chǎn)生人源化抗體。本發(fā)明的人源化抗體以高親和力與人類IL-23結(jié)合。因此，在另一方面中，本發(fā)明提供一種以高親和力與人類IL-23結(jié)合的人源化抗體。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種KD小于40pM的抗IL-23p19抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種KD小于20pM的抗IL-23p19抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種KD小于10pM的抗IL-23p19抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種KD小于1pM的抗IL-23p19抗體。在另一方面中，在人類血清不存在或在50%人類血清存在下，本發(fā)明的抗體以高親和力與IL-23p19結(jié)合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體亦以高親和力與短尾猴IL-23結(jié)合。在另一方面中，本發(fā)明的抗體與IL-23結(jié)合，但不與IL-12結(jié)合。在另一方面中，本發(fā)明的抗體不干擾作為IL-23的密切相關(guān)家族成員的IL-12的生物活性。在另一方面中，本發(fā)明的抗體抑制小鼠脾細(xì)胞經(jīng)IL-23刺激產(chǎn)生IL-17。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體抑制DB細(xì)胞中由IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體通過與IL-23的p19亞單元結(jié)合來拮抗IL-23的作用，該作用通過對(duì)例如IL-17及IL-22的細(xì)胞因子的抑制所測(cè)量(所述細(xì)胞因子由IL-23刺激產(chǎn)生)，且通過這些細(xì)胞因子的含量降低所檢測(cè)，。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有有利的藥物動(dòng)力學(xué)(PK)概況，如由在短尾猴中的活體內(nèi)半衰期所例示。在另一方面中，本發(fā)明的人源化單克隆抗IL-23p19抗體具有有利的生物物理學(xué)性質(zhì)，例如質(zhì)量、穩(wěn)定性或溶解性。在一個(gè)方面中，抗IL-23p19抗體為人源化抗體。在一個(gè)方面中，抗IL-23p19抗體為單克隆抗體。在一個(gè)方面中，抗IL-23p19抗體為全長(zhǎng)抗體。在一個(gè)方面中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體，例如全長(zhǎng)人源化單克隆抗體。本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段識(shí)別特定“IL-23p19抗原表位”或“IL-23p19表位”。如本文所用，這些術(shù)語是指能夠與抗IL-23p19抗體免疫應(yīng)答的分子(例如肽)或分子片段且例如包括由具有以下輕鏈/重鏈序列組合的任何抗體識(shí)別的IL-23p19抗原決定簇：SEQIDNO:84/121、86/123、88/125、90/127、91/128、93/130、95/132、97/134、99/136、101/138、103/140、105/142、107/144、109/146、111/148、113/150、115/152、117/154、119/156、160/166、160/168、158/166或158/168。IL-23p19抗原表位可包括在蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、肽或其類似物中。表位最常見為蛋白質(zhì)、短寡肽、寡肽模擬物(亦即模擬IL-23p19抗原的抗體結(jié)合性質(zhì)的有機(jī)化合物)或其組合。認(rèn)為抗體的肽或多肽表位的最小尺寸為約四至五個(gè)氨基酸。肽或多肽表位含有例如至少七個(gè)氨基酸或例如至少九個(gè)氨基酸或例如約15至約20個(gè)氨基酸。因?yàn)榭贵w可識(shí)別呈三級(jí)形式的抗原肽或多肽，所以構(gòu)成表位的氨基酸不需要是連續(xù)的，且在一些情況下可能甚至不在同一肽鏈上。表位可通過本領(lǐng)域中已知的各種技術(shù)確定，例如X射線結(jié)晶學(xué)、氫/氘交換質(zhì)譜(HXMS)、定點(diǎn)誘變、丙氨酸掃描誘變及肽篩選方法。抗體或免疫球蛋白的一般化結(jié)構(gòu)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。這些分子為通常約150,000道爾頓(dalton)的雜四聚糖蛋白，由兩條相同輕(L)鏈及兩條相同重(H)鏈構(gòu)成且通常稱為全長(zhǎng)抗體。各輕鏈由一個(gè)二硫鍵與重鏈共價(jià)連接以形成雜二聚體，且雜四聚分子經(jīng)由雜二聚體的兩條相同重鏈之間的共價(jià)二硫鍵形成。盡管輕鏈與重鏈由一個(gè)二硫鍵連接在一起，但兩條重鏈之間的二硫鍵數(shù)目隨免疫球蛋白同種型而變化。各重鏈及輕鏈亦具有規(guī)則間隔的鏈內(nèi)二硫橋。各重鏈在氨基端具有可變域(VH)，隨后為三個(gè)或四個(gè)恒定域(CH1、CH2、CH3及CH4)以及介于CH1與CH2之間的鉸鏈區(qū)。各輕鏈具有兩個(gè)域，即氨基端可變域(VL)及羧基端恒定域(CL)。VL域與VH域非共價(jià)締合，而CL域通常經(jīng)由二硫鍵與CH1域共價(jià)連接。據(jù)信特定氨基酸殘基在輕鏈與重鏈可變域之間形成界面(Chothia等人,1985,J.Mol.Biol.186:651-663)。可變域在本文中亦稱為可變區(qū)。可變域內(nèi)的某些域在不同抗體之間頗為不同，亦即為“高變的”。這些高變域含有直接參與各特定抗體對(duì)其特定抗原決定簇的結(jié)合及特異性中的殘基。輕鏈與重鏈可變域兩者的高變性集中在稱為互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)或高變環(huán)(HVL)的三個(gè)區(qū)段中。CDR通過Kabat等人,1991,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版,PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.中的序列比較確定，而HVL(在本文中亦稱為CDR)根據(jù)可變域的三維結(jié)構(gòu)確定結(jié)構(gòu)，如由Chothia及Lesk,1987,J.Mol.Biol.196:901-917所述。此兩種方法會(huì)導(dǎo)致對(duì)CDR的鑒定略有不同。如由Kabat所確定，CDR-L1位于輕鏈可變域中的約殘基24-34處，CDR-L2位于約殘基50-56處，且CDR-L3位于約殘基89-97處；CDR-H1位于重鏈可變域中的約殘基31-35處，CDR-H2位于約殘基50-65處，且CDR-H3位于約殘基95-102處。涵蓋特定CDR的精確殘基數(shù)目將視CDR的序列及尺寸而變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員可鑒于抗體的可變區(qū)氨基酸序列按常規(guī)確定哪些殘基構(gòu)成特定CDR。因此，重鏈及輕鏈的CDR1、CDR2、CDR3限定了給定抗體所特有的獨(dú)特功能性質(zhì)。每一重鏈及輕鏈內(nèi)的三個(gè)CDR為由骨架區(qū)(FR)來間隔，骨架區(qū)含有可變性通常較低的序列。自重鏈及輕鏈可變域的氨基末端至羧基末端，F(xiàn)R及CDR以以下順序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3及FR4。FR的較大β-折疊構(gòu)型使每一鏈內(nèi)的CDR彼此緊鄰且與另一鏈中的CDR緊鄰。所得構(gòu)象有助于抗原結(jié)合位點(diǎn)(參見Kabat等人，1991，NIHPubl.第91-3242號(hào)，第I卷，第647-669頁)，但并非所有CDR殘基皆必須直接參與抗原結(jié)合。FR殘基及Ig恒定域并不直接參與抗原結(jié)合，但有助于抗原結(jié)合和/或介導(dǎo)抗體效應(yīng)子功能。人們認(rèn)為，一些FR殘基以至少三種方式對(duì)抗原結(jié)合產(chǎn)生顯著效應(yīng)：直接與表位非共價(jià)結(jié)合，與一或多個(gè)CDR殘基相互作用，及影響重鏈及輕鏈之間的接口。恒定域并不直接參與抗原結(jié)合，但介導(dǎo)各種Ig效應(yīng)子功能，例如介導(dǎo)抗體參與抗體依賴性細(xì)胞毒性(ADCC)、補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC)及抗體依賴性細(xì)胞吞噬作用(ADCP)?？苫诤愣ㄓ虻陌被嵝蛄袑⒓棺祫?dòng)物免疫球蛋白的輕鏈分配至兩個(gè)顯著不同的種類(κ及λ)中的一類。通過比較，根據(jù)恒定域的序列將哺乳動(dòng)物免疫球蛋白的重鏈分為以下五個(gè)主要類別：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM。將IgG及IgA進(jìn)一步分為亞類(同種型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。對(duì)應(yīng)于不同免疫球蛋白種類的重鏈恒定域分別稱作α、δ、ε、γ及μ。各天然免疫球蛋白種類的亞單元結(jié)構(gòu)及三維構(gòu)型為人所熟知。術(shù)語“抗體”、“抗IL-23p19抗體”、“人源化抗IL-23p19抗體”、“人源化抗IL-23p19表位抗體”及“變體人源化抗IL-23p19表位抗體”具體涵蓋單克隆抗體(包括全長(zhǎng)單克隆抗體)、多克隆抗體、多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)及表達(dá)期望生物學(xué)活性(例如IL-23P19結(jié)合)的抗體片段(例如可變域及抗體的其他部分)。術(shù)語“單克隆抗體”(mAb)是指具有高度特異性，即針對(duì)單一抗原決定簇(即“表位”)具有高度特異性。因此，修飾詞“單克隆”指示針對(duì)相同表位的抗體，且不應(yīng)理解為需要通過任何特定方法來產(chǎn)生該抗體。應(yīng)理解，單克隆抗體可通過本領(lǐng)域已知的任何技術(shù)或方法來制備；包括(例如)雜交瘤方法(Kohler等人，1975，Nature256:495)，或本領(lǐng)域已知的重組DNA方法(例如，參見美國(guó)專利第4,816,567號(hào))，或使用噬菌體抗體文庫通過以下文獻(xiàn)中所述技術(shù)分離以重組方式產(chǎn)生的單克隆抗體的方法：Clackson等人，1991，Nature352：624-628；及Marks等人，1991，J.Mol.Biol.222：581-597。術(shù)語“單體”是指抗體的均質(zhì)形式。例如，對(duì)于全長(zhǎng)抗體，單體是指具有兩條相同重鏈及兩條相同輕鏈的單體抗體。嵌合抗體為由來自一個(gè)物種(例如，非人哺乳動(dòng)物，例如小鼠)的抗體重鏈及輕鏈可變區(qū)及另一物種(例如，人)抗體的重鏈及輕鏈恒定區(qū)組成，且可通過以下方式來獲得：連接來自第一物種(例如，小鼠)的編碼抗體可變區(qū)的DNA序列與來自第二物種(例如人)的編碼抗體恒定區(qū)的DNA序列，并用含有所述經(jīng)連接序列的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主，從而使其可產(chǎn)生嵌合抗體?；蛘?，嵌合抗體中，重鏈和/或輕鏈中的一或多個(gè)區(qū)域或域亦可與來自另一免疫球蛋白種類或同種型的單克隆抗體中的對(duì)應(yīng)序列相同、同源或?yàn)槠渥凅w、或來自共有序列或種系序列。嵌合抗體可包括所述抗體的片段，條件是抗體片段表達(dá)出其親代抗體的期望生物學(xué)活性，例如與相同表位結(jié)合(例如，參見美國(guó)專利第4,816,567號(hào)；及Morrison等人，1984，Proc.Natl.Acad.Sci.USA81：6851-6855)。術(shù)語“抗體片段”、“抗IL-23p19抗體片段”、“抗IL-23p19表位抗體片段”、“人源化抗IL-23p19抗體片段”、“人源化抗IL-23p19表位抗體片段”、“變體人源化抗IL-23p19表位抗體片段”是指全長(zhǎng)抗IL-23P19抗體的一部分，其中保留可變區(qū)或功能能力，例如特異性IL-23P19表位結(jié)合?？贵w片段的實(shí)例包括(但不限于)Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、scFv及scFv-Fc片段、二價(jià)抗體(diabody)、線性抗體、單鏈抗體、微抗體(minibody)、自抗體片段形成的二價(jià)抗體及自抗體片段形成的多特異性抗體?？捎美缒竟系鞍酌富蛭傅鞍酌傅让柑幚砣L(zhǎng)抗體以生成可用抗體片段。使用木瓜蛋白酶消化來產(chǎn)生兩個(gè)相同的稱作“Fab”片段的抗原結(jié)合抗體片段(各自具有單一抗原結(jié)合位點(diǎn))及殘留的“Fc”片段。Fab片段亦含有輕鏈恒定域及重鏈CH1域。胃蛋白酶處理產(chǎn)生F(ab')2片段，其具有兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)且仍能交聯(lián)抗原。Fab'片段與Fab片段的不同之處在于在CH1域的C末端存在額外殘基，包括一或多個(gè)來自抗體鉸鏈區(qū)的半胱氨酸。F(ab')2抗體片段為通過鉸鏈區(qū)中的半胱氨酸殘基連接的Fab'片段對(duì)。亦已知抗體片段的其他化學(xué)偶聯(lián)?！癋v”片段含有完整抗原識(shí)別及結(jié)合位點(diǎn)，該位點(diǎn)為由一個(gè)重鏈可變域與一個(gè)輕鏈可變域呈緊密非共價(jià)連接的二聚體組成。在此構(gòu)型中，每一可變域的三個(gè)CDR相互作用，從而在該VH-VL二聚體的表面上界定抗原結(jié)合位點(diǎn)。該六個(gè)CDR共同賦予該抗體抗原結(jié)合特異性?！皢捂淔v”或“scFv”抗體片段為包含抗體VH及VL域的單鏈Fv變體，其中所述域存在于單一多肽鏈中。單鏈Fv能識(shí)別并結(jié)合抗原。scFv多肽亦可任選含有位于VH域與VL域之間的多肽接頭，以促進(jìn)scFv形成用于抗原結(jié)合的期望三維結(jié)構(gòu)(例如，參見Pluckthun，1994，InThePharmacologyofmonoclonalAntibodies，第113卷，Rosenburg及Moore編輯，Springer-Verlag，NewYork，第269-315頁)?！岸r(jià)抗體”是指具有兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)的小抗體片段，所述片段包含在同一多肽鏈中連接的重鏈可變域(VH)與輕鏈可變域(VL)(VH-VL或VL-VH)。二價(jià)抗體更充分描述于例如Holliger等人,(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448中。其他已知的抗體片段包括那些包含一對(duì)串聯(lián)的Fd區(qū)段(VH-CH1-VH-CH1)以形成一對(duì)抗原結(jié)合區(qū)的抗體片段。所述“線性抗體”可為雙特異性或單特異性，如(例如)Zapata等人，1995，ProteinEng.8(10):1057-1062中所述?！叭嗽椿贵w”或“人源化抗體片段”為特定類型的嵌合抗體，其包括免疫球蛋白氨基酸序列變體或其片段，其能結(jié)合預(yù)定抗原，且其包含一或多個(gè)基本上具有人免疫球蛋白氨基酸序列的FR及一或多個(gè)基本上具有非人免疫球蛋白氨基酸序列的CDR。此非人氨基酸序列通常稱作“輸入”序列，通常取自“輸入”抗體域，尤其是可變域。通常，人源化抗體至少包括非人抗體的CDR或HVL，插入人重鏈或輕鏈可變域的FR之間。本發(fā)明闡述特定人源化抗IL-23P19抗體，其含有插入人種系序列重鏈及輕鏈可變域的FR之間的表3及4所示源自鼠類單克隆抗體的CDR或人源化CDR。應(yīng)理解，某些鼠類FR殘基可能對(duì)人源化抗體的功能重要，且因此將修飾某些人種系序列重鏈及輕鏈可變域殘基，以與對(duì)應(yīng)鼠類序列中的那些相同。在另一方面中，人源化抗IL-23P19抗體基本上包含所有至少一個(gè)(通常兩個(gè))可變域(例如含于例如Fab、Fab'、F(ab')2、Fabc及Fv片段中者)，其中所有或基本上所有CDR對(duì)應(yīng)于非人免疫球蛋白的CDR，且在本文中特別是所有CDR為本文下表1至4中所詳述的鼠類序列或人源化序列，且所有或基本上所有FR為人免疫球蛋白共有序列或種系序列的FR。在另一方面中，人源化抗IL-23P19抗體亦包括免疫球蛋白(通常為人免疫球蛋白)Fc區(qū)的至少一部分。通常，抗體含有輕鏈以及至少重鏈可變域二者。若適宜，抗體亦可包括重鏈CH1、鉸鏈、CH2、CH3和/或CH4區(qū)中的一或多者。人源化抗IL-23P19抗體可選自任一種類免疫球蛋白(包括IgM、IgG、IgD、IgA及IgE)及任一同種型(包括IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2)。例如，恒定域可為補(bǔ)體固定的恒定域，其中期望人源化抗體表達(dá)細(xì)胞毒性活性，且同種型通常為IgG1。倘若不期望該細(xì)胞毒性活性，則恒定域可為另一同種型，例如IgG2。替代性人源化抗IL-23P19抗體可包含來自不止一種免疫球蛋白種類或同種型的序列，且本領(lǐng)域技術(shù)人員可熟練選擇特定恒定域來優(yōu)化所期望的效應(yīng)子功能。在具體實(shí)施方案中，本發(fā)明所提供抗體為IgG1抗體，且更具體而言為剔除效應(yīng)子功能的IgG1抗體。人源化抗IL-23P19抗體的FR及CDR或HVL不需要與親代序列精確對(duì)應(yīng)。例如，可通過取代、插入或缺失來改變(例如，誘變處理)輸入CDR或HVL或共有FR或種系FR序列中的一或多個(gè)殘基，從而使得所得氨基酸殘基與任一親代序列中對(duì)應(yīng)位置的原始?xì)埢辉傧嗤?，但抗體仍保留與IL-23P19結(jié)合的功能。該改變通?？刹⒎菑V泛改變且可為保守改變。通常，至少75%人源化抗體殘基可與親代共有FR或種系FR及輸入CDR序列中的那些殘基對(duì)應(yīng)，更通常有至少90%、且最通常有超過95%或超過98%或超過99%的殘基對(duì)應(yīng)。影響重鏈與輕鏈可變區(qū)之間的接口(“VL-VH接口”)的免疫球蛋白殘基為那些影響兩條鏈相對(duì)于彼此接近或定向的殘基。某些可能參與鏈間相互作用的殘基包括VL殘基34、36、38、44、46、87、89、91、96及98以及VH殘基35、37、39、45、47、91、93、95、100及103(采用Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(NationalInstitutesofHealth，Bethesda，Md.，1987)中所述的編號(hào)系統(tǒng))。美國(guó)專利第6,407,213號(hào)亦論述，例如VL殘基43及85以及VH殘基43及60等殘基亦可能參與此相互作用。盡管僅針對(duì)人IgG闡述所述殘基，但其亦適用于其他物種。選擇合理地預(yù)期參與鏈間相互作用的重要抗體殘基用于共有序列中的取代。術(shù)語“共有序列”及“共有抗體”是指在任一特定種類、同種型或亞單元結(jié)構(gòu)的所有免疫球蛋白(例如人免疫球蛋白可變域)中的每一位置包含最常出現(xiàn)的氨基酸殘基的氨基酸序列。共有序列可基于特定物種或多個(gè)物種的免疫球蛋白?！肮灿小毙蛄?、結(jié)構(gòu)或抗體可理解為涵蓋某些實(shí)施方案中所述的共有人序列，且是指在任一特定種類、同種型或亞單元結(jié)構(gòu)的所有人免疫球蛋白中的每一位置包含最常出現(xiàn)的氨基酸殘基的氨基酸序列。因此，共有序列所含有的氨基酸序列在每一位置具有存在于一或多種已知免疫球蛋白中的氨基酸，但其可能并不精確復(fù)制任一單一免疫球蛋白的整個(gè)氨基酸序列?？勺儏^(qū)共有序列并非自任何天然產(chǎn)生的抗體或免疫球蛋白及其變體均可獲得(Kabat等人，1991，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版，PublicHealthService，NationalInstitutesofHealth，Bethesda，Md.)。重鏈及輕鏈共有序列及其變體的FR為人源化抗IL-23P19抗體的制備提供可用序列。例如，參見美國(guó)專利第6,037,454號(hào)及第6,054,297號(hào)。人種系序列天然存在于人種群中。所述種系基因的組合產(chǎn)生抗體多樣性?？贵w輕鏈的種系抗體序列來自保守人種系κ或λv-基因及j-基因。類似地，重鏈序列來自種系v-、d-及j-基因(LeFranc，M-P及LeFranc，G，“TheImmunoglobulinFactsBook”AcademicPress，2001)。如本文所用，“變體”、“抗IL-23p19變體”、“人源化抗IL-23p19變體”或“變體人源化抗IL-23p19”各自是指至少具有來自如表1中所示的任何序列的輕鏈可變鼠類CDR序列、或至少具有如表2中所示的源于鼠類單克隆抗體的重鏈?zhǔn)箢怌DR序列的人源化抗IL-23p19抗體。變體包括在一或兩個(gè)輕鏈或重鏈可變域中具有一或多個(gè)氨基酸變化的變體，其限制條件為氨基酸變化不會(huì)實(shí)質(zhì)上損害抗體與IL-23p19的結(jié)合。本文中產(chǎn)生的例示性人源化抗體包括稱為抗體A、抗體B、抗體C及抗體D的抗體，且所述抗體的各種輕鏈及重鏈分別展示于SEQIDNo:174及180、以及SEQIDNo:176及178中?！胺蛛x的”抗體為已經(jīng)鑒定且已自其天然環(huán)境組分中分離和/或回收的抗體?？贵w天然環(huán)境中的污染物組分為那些可干擾抗體的診斷性或治療性應(yīng)用的物質(zhì)，且可為酶、激素或其他蛋白性或非蛋白性溶質(zhì)。在一個(gè)方面中，可將抗體純化至以抗體重量計(jì)分離度至少大于95%。由于抗體天然環(huán)境中的至少一種組分不會(huì)存在，故分離的抗體包括產(chǎn)生其的重組細(xì)胞內(nèi)的原位抗體。然而，分離的抗體通?？赏ㄟ^至少一個(gè)純化步驟來制備，其中移除了重組細(xì)胞物質(zhì)。術(shù)語“抗體性能”是指有助于抗體識(shí)別抗原或者抗體活體內(nèi)效力的因素?？贵w氨基酸序列的變化可影響例如折疊等抗體特性，且可影響例如以下的物理因素：抗體與抗原結(jié)合的初始速率(ka)、抗體與抗原的解離常數(shù)(kd)、抗體對(duì)抗原的親和常數(shù)(Kd)、抗體構(gòu)象、蛋白穩(wěn)定性及抗體半衰期。本文所用術(shù)語“表位標(biāo)記的”是指抗IL-23P19抗體與“表位標(biāo)簽”融合。“表位標(biāo)簽”為具有足量氨基酸以為抗體產(chǎn)生提供表位的多肽，且其經(jīng)設(shè)計(jì)以使得其不干擾人源化抗IL-23P19抗體的期望活性。表位標(biāo)簽通常具有充分獨(dú)特性以使得針對(duì)該表位標(biāo)簽產(chǎn)生的抗體基本上不會(huì)與其他表位交叉反應(yīng)。適宜的標(biāo)簽多肽一般含有至少6個(gè)氨基酸殘基且通常含有約8至50個(gè)氨基酸殘基或約9至30個(gè)殘基。表位標(biāo)簽及結(jié)合表位的抗體的實(shí)例包括流感HA標(biāo)簽多肽及其抗體12CA5(Field等人，1988Mol.Cell.Biol.8：2159-2165)；c-myc標(biāo)簽及其8F9、3C7、6E10、G4、B7及9E10抗體(Evan等人，1985，Mol.Cell.Biol.5(12):3610-3616)；及單純皰疹病毒糖蛋白D(gD)標(biāo)簽及其抗體(Paborsky等人，1990，ProteinEngineering3(6)：547-553)。在某些實(shí)施方案中，表位標(biāo)簽為“補(bǔ)救受體結(jié)合表位”。本文所用術(shù)語“補(bǔ)救受體結(jié)合表位(salvagereceptorbindingepitope)”是指IgG分子(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)Fc區(qū)中的表位，其負(fù)責(zé)延長(zhǎng)IgG分子的活體內(nèi)血清半衰期。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體可與細(xì)胞毒性劑綴合。細(xì)胞毒性劑為抑制或阻止細(xì)胞機(jī)能和/或引起細(xì)胞破壞的任何物質(zhì)。該術(shù)語意欲包括放射性同位素(例如I131、I125、Y90及Re186)、化學(xué)治療藥物及毒素(例如細(xì)菌、真菌、植物或動(dòng)物源酶活性毒素)及其片段。所述細(xì)胞毒性劑可通過標(biāo)準(zhǔn)操作與本發(fā)明的人源化抗體偶聯(lián)，且其可用于(例如)治療適用抗體療法的患者?！盎瘜W(xué)治療藥物”為可用于治療癌癥的化學(xué)化合物?；瘜W(xué)治療藥物有多種實(shí)例可與本發(fā)明治療性抗體綴合。所述化學(xué)治療藥物的實(shí)例包括烷化劑，例如噻替哌(thiotepa)及環(huán)磷酰胺；磺酸烷基酯，例如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)及哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶，例如苯并多巴(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、meturedopa及uredopa；亞乙基亞胺及甲基密胺，包括六甲密胺(altretamine)、三亞乙基密胺、三亞乙基磷酰胺、三亞乙基硫化磷酰胺及三羥甲基密胺；番荔枝內(nèi)酯(acetogenin)(尤其為布拉他辛(bullatacin)及布拉他辛酮(bullatacinone))；喜樹堿(camptothecin)(包括合成類似物托泊替康(topotecan))；苔蘚抑制素(bryostatin)；callystatin；CC-1065(包括其合成類似物阿多來新(adozelesin)、卡折來新(carzelesin)及比折來新(bizelesin))；cryptophycin(尤其為cryptophycin1及cryptophycin8)；多拉司他汀(dolastatin)；auristatin(包括類似物單甲基-auristatinE及單甲基-auristatinF)；多卡米星(duocarmycin)(包括合成類似物KW-2189及CBI-TMI)；艾榴素(eleutherobin)；pancratistatin；sarcodictyin；spongistatin；氮芥類，例如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、氯磷酰胺(chlorophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、異磷酰胺(ifosfamide)、雙氯乙基甲胺(mechlorethamine)、鹽酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)、美法侖(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥膽甾醇(phenesterine)、潑尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)和烏拉莫司汀(uracilmustard)；硝基脲類，例如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫斯汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，例如烯二炔(enediyne)抗生素(例如刺孢霉素(calicheamicin)，尤其是刺孢霉素γ1I和刺孢霉素參見例如AngewChem.Intl.Ed.Engl.(1994)33:183-186)；dynemicin，包括dynemicinA；二膦酸鹽，例如氯膦酸鹽(clodronate)；埃斯培拉霉素(esperamicin)；新抑癌蛋白生色團(tuán)(neocarzinostatinchromophore)和相關(guān)色蛋白烯二炔抗生素生色團(tuán)(relatedchromoproteinenediyneantibioticchromophore)、aclacinomysin類、放線菌素(actinomycin)、authramycin、偶氮絲氨酸(azaserine)、博來霉素(bleomycin)、放線菌素C(cactinomycin)、carabicin、洋紅霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放線菌素D(dactinomycin)、柔紅霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸(6-diazo-5-oxo-L-norleucine)、多柔比星(AdriamycinTM)(包括嗎啉代-多柔比星(morpholino-doxorubicin)、氰基嗎啉代-多柔比星(cyanomorpholino-doxorubicin)、2-吡咯啉子基-多柔比星(2-pyrrolino-doxorubicin)、去氧多柔比星(deoxydoxorubicin))、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊達(dá)比星(idarubicin)、麻西羅霉素(marcellomycin)、絲裂霉素(mitomycin)類例如絲裂霉素C(mitomycinC)、麥考酚酸(mycophenolicacid)、諾拉霉素(nogalamycin)、橄欖霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(porfiromycin)、嘌羅霉素(puromycin)、三鐵阿霉素(quelamycin)、羅多比星(rodorubicin)、鏈黑霉素(streptonigrin)、鏈佐星(streptozocin)、殺結(jié)核菌素(tubercidin)、烏苯美司(ubenimex)、新制癌菌素(zinostatin)和佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物，例如甲氨喋呤(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)(5-FU)；葉酸類似物，例如二甲葉酸(denopterin)、甲氨喋呤、喋羅呤(pteropterin)和三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類似物，例如氟達(dá)拉濱(fludarabine)、6-巰嘌呤(6-mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)和硫鳥嘌呤(thioguanine)；嘧啶類似物，例如安西他濱(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮雜尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二脫氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、伊諾他濱(enocitabine)和氟尿苷(floxuridine)；雄激素，例如卡普睪酮(calusterone)、丙酸甲雄烷酮(dromostanolonepropionate)、環(huán)硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)和睪內(nèi)酯(testolactone)；抗腎上腺素藥(anti-adrenal)，例如氨魯米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)和曲洛司坦(trilostane)；葉酸補(bǔ)充劑，例如亞葉酸(frolinicacid)；醋葡醛內(nèi)酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinicacid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；伊達(dá)曲殺(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋銨(elliptiniumacetate)；埃坡霉素(epothilone)；依托格魯(etoglucid)；硝酸鎵(galliumnitrate)；羥基脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼達(dá)明(lonidainine)；美登醇(maytansinoid)類，例如美登素(maytansine)和安絲菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；mopidanmol；根瘤菌劑(nitraerine)；噴司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinicacid)；2-乙基肼(2-ethylhydrazide)；丙卡巴肼(procarbazine)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；鍺螺胺(spirogermanium)；細(xì)交鏈孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亞胺醌(triaziquone)；2,2’,2’’-三氯三乙胺(2,2’,2’’-trichlorotriethylamine)；單端孢霉烯(trichothecene)(尤其是T-2毒素、verracurinA、桿孢菌素A(roridinA)和anguidine)；烏拉坦(urethan)；長(zhǎng)春地辛(vindesine)；達(dá)卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴衛(wèi)矛醇(mitolactol)；溴丙哌嗪(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“Ara-C”)；環(huán)磷酰胺；塞替派；紫杉烷(taxoid)，例如紫杉醇(paclitaxel)(Bristol-MyersSquibbOncology，Princeton，N.J.)及多西紫杉醇(doxetaxel)(Rhone-PoulencRorer，Antony，F(xiàn)rance)；苯丁酸氮芥；吉西他濱(gemcitabine)(GemzarTM)；6-硫鳥嘌呤；巰基嘌呤；甲氨喋呤；鉑類似物，例如順鉑(cisplatin)及卡鉑(carboplatin)；長(zhǎng)春堿(vinblastine)；鉑；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；異磷酰胺；米托蒽醌；長(zhǎng)春新堿(vincristine)；長(zhǎng)春瑞濱(vinorelbine)(NavelbineTM)；諾安托(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依達(dá)曲沙(edatrexate)；柔紅霉素(daunomycin)；氨蝶呤(aminopterin)；希羅達(dá)(xeloda)；伊班膦酸鹽(ibandronate)；CPT-11；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑RFS2000；二氟甲基鳥氨酸(DMFO)；類視色素，例如視黃酸；卡培他濱(capecitabine)；及上述藥物中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽、酸或衍生物。此定義中亦包括用于調(diào)節(jié)或抑制激素對(duì)腫瘤的作用的抗激素劑，例如抗雌激素及選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)，包括(例如)他莫昔芬(tamoxifen)(包括NolvadexTM)、雷洛昔芬(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、keoxifene、LY117018、奧那司酮(onapristone)及托瑞米芬(toremifene)(FarestonTM)；抑制芳香酶的芳香酶抑制劑，其調(diào)節(jié)腎上腺中雌激素的產(chǎn)生，例如4(5)-咪唑、胺魯米特、乙酸甲地孕酮(megestrolacetate)(MegaceTM)、依西美坦(exemestane)、福美坦(formestane)、法倔唑(fadrozole)、伏氯唑(vorozole)(RivisorTM)、來曲唑(letrozole)(FemaraTM)及阿那曲唑(anastrozole)(ArimidexTM)；及抗雄激素，例如氟他胺(flutamide)、尼魯米特(nilutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)及戈舍瑞林(goserelin)；及上述藥物中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽、酸或衍生物。所述藥物中的任何一或多者可與本發(fā)明的人源化抗體綴合以提供可用于治療各種病癥的治療藥物。亦可使抗體與前藥綴合?！扒八帯睘樗幬锘钚晕镔|(zhì)的前體或衍生物形式，其與母體藥物相比對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性較小，且能酶促活化或轉(zhuǎn)化為活性更強(qiáng)的形式。例如，參見Wilman，1986,“ProdrugsinCancerChemotherapy”，BiochemicalSocietyTransactions，14，第375-382頁，615thMeetingBelfast；及Stella等人，1985，“Prodrugs：AChemicalApproachtoTargetedDrugDelivery”，DirectedDrugDelivery，Borchardt等人(編輯)，第247-267頁，HumanaPress?？捎玫那八幇?但不限于)含有磷酸根的前藥、含有硫代磷酸根的前藥、含有硫酸根的前藥、含有肽的前藥、經(jīng)D-氨基酸修飾的前藥、糖基化前藥、含有β-內(nèi)酰胺的前藥、含有任選經(jīng)取代的苯氧基乙酰胺的前藥及含有任選經(jīng)取代的苯基乙酰胺的前藥、5-氟胞嘧啶前藥及其他5-氟尿苷前藥，其可轉(zhuǎn)化成具有更高活性的無細(xì)胞毒性藥物?？裳苌鸀榍八幮问降募?xì)胞毒性藥物的實(shí)例包括(但不限于)那些上文所述的化學(xué)治療藥物。出于診斷性以及治療性監(jiān)測(cè)目的，亦可使本發(fā)明的抗體與標(biāo)記(單獨(dú)的標(biāo)記或者標(biāo)記與另外的第二藥物(前藥、化學(xué)治療藥物等))綴合。標(biāo)記與其他第二藥物不同，其是指可檢測(cè)的化合物或組合物藥物，且其可與本發(fā)明的人源化抗體直接或間接綴合。標(biāo)記本身可被可檢測(cè)(例如，放射性同位素標(biāo)記或熒光標(biāo)記)，或在酶標(biāo)記情況下，標(biāo)記可催化底物化合物或組合物發(fā)生可檢測(cè)的化學(xué)變化?？芍苽浣?jīng)標(biāo)記人源化抗IL-23P19抗體并用于各種應(yīng)用中，包括活體外及活體內(nèi)診斷學(xué)?？蓪⒈景l(fā)明的抗體調(diào)配為脂質(zhì)體制劑的一部分以實(shí)現(xiàn)其活體內(nèi)遞送?！爸|(zhì)體”為由各種類型的脂質(zhì)、磷脂和/或表面活性劑組成的小囊泡。脂質(zhì)體可用于向哺乳動(dòng)物遞送化合物或調(diào)配物，例如本文所公開的人源化抗IL-23P19抗體，該抗體任選與一或多種藥物活性藥物和/或標(biāo)記偶聯(lián)或組合。脂質(zhì)體的組分通常以雙層結(jié)構(gòu)排列，此與生物膜的脂質(zhì)排列類似。本發(fā)明某些方面涉及分離的核酸，其編碼本發(fā)明的人源化抗體的一或多個(gè)域。“分離的”核酸分子為自至少一種污染物核酸分子鑒定并分離的核酸分子，其在抗體核酸的天然來源中通常與該污染物核酸分子相結(jié)合。分離的核酸分子與存在于天然細(xì)胞中的核酸分子不同。在本發(fā)明各方面中，重組表達(dá)人源化抗體的一或多個(gè)域。該重組表達(dá)可采用一或多種控制序列，即在特定宿主有機(jī)體中表達(dá)可操作連接的編碼序列所需的聚核苷酸序列。適用于原核細(xì)胞中的控制序列包括(例如)啟動(dòng)子、操縱子及核糖體結(jié)合位點(diǎn)序列。真核控制序列包括(但不限于)啟動(dòng)子、聚腺苷酸化信號(hào)及增強(qiáng)子。所述控制序列可用于在原核及真核宿主細(xì)胞中表達(dá)及產(chǎn)生人源化抗IL-23P19抗體。在使核酸序列與另一核酸序列具有功能性聯(lián)系時(shí)，該核酸序列經(jīng)“可操作連接”。例如，若前序列或分泌前導(dǎo)序列表達(dá)為參與多肽分泌的前蛋白，則該前序列或分泌前導(dǎo)序列與編碼該多肽的核酸可操作連接；若啟動(dòng)子或增強(qiáng)子影響該序列的轉(zhuǎn)錄，則該啟動(dòng)子或增強(qiáng)子與該序列可操作連接；或若核糖體結(jié)合位點(diǎn)的定位可促進(jìn)翻譯，則該核糖體結(jié)合位點(diǎn)與該編碼序列可操作連接。通常，“可操作連接”意指所連接DNA序列為連續(xù)序列，且在分泌前導(dǎo)序列情形下為連續(xù)序列且位于閱讀框內(nèi)。然而，增強(qiáng)子任選是連續(xù)的?？赏ㄟ^在便捷的限制位點(diǎn)處接合來完成連接。若不存在所述位點(diǎn)，則可使用合成寡核苷酸銜接子或接頭。本文所用術(shù)語“細(xì)胞”、“細(xì)胞系”及“細(xì)胞培養(yǎng)物”可互換使用，且所有所述名稱皆包括其子代。因此，“轉(zhuǎn)化體”及“轉(zhuǎn)化細(xì)胞”包括原代個(gè)體細(xì)胞及其衍生的培養(yǎng)物而不考慮轉(zhuǎn)移次數(shù)。用于治療目的的術(shù)語“哺乳動(dòng)物”是指任何歸類為哺乳動(dòng)物的動(dòng)物，包括人、家畜及農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物，以及動(dòng)物園動(dòng)物、運(yùn)動(dòng)用動(dòng)物或?qū)櫸?，例如狗、馬、貓、牛等。優(yōu)選地，哺乳動(dòng)物為人。本文所用“病癥”為可受益于使用本文所述人源化抗IL-23P19抗體治療的任何病況。該術(shù)語包括慢性及急性病癥或疾病，包括那些使哺乳動(dòng)物易患所述病癥的病理學(xué)病況。本文欲治療的非限制性實(shí)例或病癥包括炎性、血管生成性、自身免疫性及免疫性病癥、呼吸系統(tǒng)病癥、癌癥、血液惡性腫瘤、良性及惡性腫瘤、白血病及淋巴惡性腫瘤。術(shù)語“癌癥”及“癌性”是指或描述哺乳動(dòng)物中特征通常在于細(xì)胞生長(zhǎng)失調(diào)的生理學(xué)病況。癌癥的實(shí)例包括(但不限于)癌瘤、淋巴瘤、母細(xì)胞瘤、肉瘤及白血病。如本文所用，術(shù)語“IL-23相關(guān)病癥”或“IL-23相關(guān)疾病”是指由IL-23活性促成、且IL-23通常異常表達(dá)的病狀。IL-23相關(guān)病癥包括免疫系統(tǒng)疾病及病癥，例如自身免疫病癥及炎癥病癥。所述病況包括(但不限于)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、全身性紅斑狼瘡(SLE)、硬皮癥、Sjogren氏綜合征、多發(fā)性硬化、牛皮癬、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、炎性腸病(例如，潰瘍性結(jié)腸炎及克羅恩氏病)、肺炎癥、哮喘、特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)及強(qiáng)直性脊椎炎。術(shù)語“靜脈內(nèi)輸注”是指在動(dòng)物或人患者靜脈中經(jīng)大于約15分鐘、一般介于約30至90分鐘之間的一段時(shí)間引入藥物。術(shù)語“靜脈內(nèi)推注”或“靜脈內(nèi)推射”是指將藥物給予至動(dòng)物或人的靜脈中，從而使機(jī)體在約15分鐘或更短、一般5分鐘或更短時(shí)間內(nèi)接受藥物。術(shù)語“皮下給予”是指在動(dòng)物或人患者的皮膚下、優(yōu)選在皮膚與基底組織之間的囊內(nèi)通過自藥物貯器相對(duì)緩慢的持續(xù)遞送來引入藥物。將皮膚向上捏離或拉離基底組織可產(chǎn)生囊。術(shù)語“皮下輸注”是指在動(dòng)物或人患者的皮膚下、優(yōu)選在皮膚與基底組織之間的囊內(nèi)經(jīng)一段時(shí)間(包括(但不限于)30分鐘或更短、或90分鐘或更短)通過自藥物貯器相對(duì)緩慢的持續(xù)遞送來引入藥物。任選地，輸注可通過皮下植入藥物遞送泵(植入動(dòng)物或人患者的皮膚下)來實(shí)施，其中該泵經(jīng)預(yù)定時(shí)間段(例如30分鐘、90分鐘或跨越整個(gè)治療方案的時(shí)間段)遞送預(yù)定量的藥物。術(shù)語“皮下推注”是指在動(dòng)物或人患者的皮膚下給予藥物，其中推注藥物遞送短于約15分鐘；在另一方面中，短于5分鐘；且在另一方面中，短于60秒。在另一方面中，在皮膚與基底組織之間的囊內(nèi)給予，其中該囊可通過將皮膚向上捏離或拉離基底組織來產(chǎn)生。所用術(shù)語“治療有效量”是指活性藥物可緩解或改善所治療病癥的一或多種癥狀的量。在另一方面中，治療有效量是指已顯示可有效(例如)減慢疾病進(jìn)展的目標(biāo)血清濃度?？扇Q于欲治療病況以常用方式來測(cè)量功效。本文所用“治療”及“療法”及類似術(shù)語意欲包括針對(duì)疾病或病癥的治療性以及預(yù)防性或抑制性措施，其產(chǎn)生任何臨床上期望或有益的效應(yīng)，包括(但不限于)減輕或緩解疾病或病癥的一或多個(gè)癥狀、使疾病或病癥消退、減慢或停止疾病或病癥的進(jìn)展。因此，例如，術(shù)語治療包括在疾病或病癥的癥狀發(fā)作之前或之后給予藥物，由此預(yù)防或消除疾病或病癥的一或多個(gè)體征。作為另一實(shí)例，該術(shù)語包括在疾病的臨床表達(dá)后給予藥物，從而抵抗該疾病的癥狀。此外，在發(fā)作后及在已出現(xiàn)臨床癥狀后給予藥物包含本文所用“治療”或“療法”，其中不論該治療是否引起疾病改善，給予皆影響疾病或病癥的臨床參數(shù)，例如組織損傷度或轉(zhuǎn)移的量或程度。另外，只要單獨(dú)或與另一治療藥物組合的本發(fā)明組合物與未使用人源化IL-23P19抗體組合物時(shí)相比減輕或改善所治療病癥的至少一個(gè)癥狀，不論是否減輕該病癥的所有癥狀，該結(jié)果即應(yīng)視為可有效治療潛在病癥。所用術(shù)語“包裝說明書”是指通常包括于治療產(chǎn)品商業(yè)包裝內(nèi)的說明書，其含有關(guān)于使用所述治療產(chǎn)品的適應(yīng)癥、用法、給予、禁忌癥和/或警告的信息?？贵w在一個(gè)方面中，本文描述且公開抗IL-23抗體，特別是人源化抗IL-23p19抗體；及包含一或多種抗IL-23抗體，特別是一或多種本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體的組合物及制品。亦描述包括抗IL-23抗體，特別是人源化抗IL-23p19抗體的抗原結(jié)合片段的結(jié)合劑。人源化抗IL-23p19抗體及結(jié)合劑可抑制Th17相關(guān)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，Th17相關(guān)細(xì)胞因子會(huì)促成慢性自身免疫及炎性疾病。因此，人源化抗IL-23p19抗體及結(jié)合劑可用于治療多種疾病或病癥。人源化抗IL-23p19抗體及IL-23p19結(jié)合劑各自包括特異性識(shí)別IL-23p19表位的至少一部分(亦即抗原結(jié)合片段)。在初始表征時(shí)，基于IL-23p19結(jié)合特征選擇小鼠抗體。因此，在一個(gè)方面中，本發(fā)明的抗體對(duì)IL-23，特別是對(duì)人類IL-23的KD小于100pM。在另一方面中，本發(fā)明的抗體的KD小于40pM。在另一方面中，本發(fā)明的抗體的KD小于20pM。在另一方面中，本發(fā)明的抗體的KD小于10pM。在另一方面中，本發(fā)明的單克隆抗體的KD小于1pM。所選小鼠抗體具有下列如表1及表2中所示的輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)。表1：抗IL-23p19小鼠前導(dǎo)物-VK序列表2：抗IL-23p29小鼠前導(dǎo)物-VH序列基于骨架同源性、CDR結(jié)構(gòu)、保守典型殘基、保守界面填充殘基及其它參數(shù)選擇各小鼠前導(dǎo)物的人類骨架序列。各種小鼠抗體的小鼠輕鏈及重鏈CDR分別展示于表3及表4中。表4亦展示經(jīng)由人源化方法源于小鼠抗體6B8的三個(gè)重鏈CDR。表3：輕鏈CDR序列表4：重鏈CDR序列以上在表3及表4中所列的CDR是使用Chothia編號(hào)系統(tǒng)確定的(Al-Lazikani等人,(1997)JMB273,927-948)。相比于嵌合親本Fab顯示較佳或同等結(jié)合的Fab，經(jīng)選擇用于轉(zhuǎn)化成IgG。將6B8轉(zhuǎn)化成IgG1KO形式。IgG1KO(剔除效應(yīng)功能)在Fc區(qū)中具有兩個(gè)突變Leu234Ala及Leu235Ala，其降低效應(yīng)功能，例如FcγR及補(bǔ)體結(jié)合。IgG形式描述在文獻(xiàn)中(參見例如Hezareh等人,(2001)JournalofVirology75:12161-12168)。實(shí)施例1更詳細(xì)描述人源化方法。此人源化的結(jié)果是產(chǎn)生人源化抗體序列。源于小鼠抗體6B8的人源化輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)的代表性編號(hào)提供且展示于表5及表6中。源于小鼠抗體6B8的人源化輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)與小鼠抗體6B8的輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)之間的比對(duì)展示于圖1中。源于小鼠抗體6B8的人源化輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)的所選組合產(chǎn)生抗體A、B、C及D：抗體A：具有IgK-66的6B8-IgG1KO-2(重鏈可變區(qū)6B8CVH-02及輕鏈可變區(qū)6B8CVK-66)；抗體B：具有IgK-66的6B8-IgG1KO-5(重鏈可變區(qū)6B8CVH-05及輕鏈可變區(qū)6B8CVK-66)；抗體C：具有IgK-65的6B8-IgG1KO-2(重鏈可變區(qū)6B8CVH-02及輕鏈可變區(qū)6B8CVK-65)；抗體D：具有IgK-65的6B8-IgG1KO-5(重鏈可變區(qū)6B8CVH-05及輕鏈可變區(qū)6B8CVK-65)?？贵wA、B、C及D具有展示于表7中的重鏈及輕鏈序列。表5：人源化6B8-VK序列表6：人源化6B8-VH序列表7：抗體A、B、C及D的重鏈及輕鏈DNA及氨基酸序列上表7中，抗體A、B、C及D的輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)加下劃線。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少一種性質(zhì)。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少兩種或至少3、4、5、6、7、8、9、10或11種性質(zhì)的任何組合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下所有性質(zhì)。·對(duì)人類IL-23的KD≤1pM(在50%人類血清中結(jié)合速率無變化)·活體外阻斷IL-23與人類IL-23R/Fc結(jié)合·不與人類IL-12結(jié)合·抑制小鼠脾細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17產(chǎn)生，IC50≤20pM·抑制人類DB細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化，IC50≤40pM·無預(yù)測(cè)的ADCC/CDC活性·對(duì)短尾猴IL-23的KD≤1pM·與小鼠或大鼠IL-23無交叉反應(yīng)性·抑制小鼠耳中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17及IL-22產(chǎn)生(在1mg/kg下對(duì)兩種細(xì)胞因子的抑制均≥80%)·穩(wěn)定性83°C(熔融溫度83°C，如通過差示掃描熱量測(cè)定法所測(cè)定)·溶解度≥100mg/ml(如通過紫外光譜法測(cè)量且通過混濁度監(jiān)測(cè))·在三只短尾猴中皮下給予1.0mg/kg顯示，≥10nM的暴露持續(xù)約28天，生物利用度為約70%。在本文中，無預(yù)測(cè)的ADCC/DC活性是指本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體對(duì)Fc受體的親和力降低且因此預(yù)測(cè)不具有ADCC/CDC活性。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少一種性質(zhì)。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少兩種或至少3、4、5、6、7、8、9或10種性質(zhì)的任何組合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下所有性質(zhì)?！?duì)人類IL-23的KD≤1pM(在50%人類血清中結(jié)合速率無變化)·活體外阻斷IL-23與人類IL-23R/Fc結(jié)合·不與人類IL-12結(jié)合·抑制小鼠脾細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17產(chǎn)生，IC50≤20pM·抑制人類DB細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化，IC50≤40pM·無預(yù)測(cè)的ADCC/CDC活性·對(duì)短尾猴IL-23的KD≤1pM·與小鼠或大鼠IL-23無交叉反應(yīng)性·抑制小鼠耳中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17及IL-22產(chǎn)生(在1mg/kg下對(duì)兩種細(xì)胞因子的抑制均≥80%)·穩(wěn)定性83°C(熔融溫度83°C，如通過差示掃描熱量測(cè)定法所測(cè)定)·溶解度≥100mg/ml(如通過紫外光譜法測(cè)量且通過混濁度監(jiān)測(cè))。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有至少一種以下結(jié)合性質(zhì)(性質(zhì)A)。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少兩種或至少三種性質(zhì)的任何組合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下所有性質(zhì)。·對(duì)人類IL-23的KD≤1pM(在50%人類血清中結(jié)合速率無變化)·不與人類IL-12結(jié)合·對(duì)短尾猴IL-23的KD≤1pM·與小鼠或大鼠IL-23無交叉反應(yīng)性。特別是，本發(fā)明的人源化抗體對(duì)人類IL-23的KD≤1pM(在50%人類血清中結(jié)合速率無變化)且不與人類IL-12結(jié)合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有至少一種以下功能性質(zhì)(性質(zhì)B)。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少兩種或至少三種性質(zhì)的任何組合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下所有性質(zhì)?！せ铙w外阻斷IL-23與人類IL-23R/Fc結(jié)合·抑制小鼠脾細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17產(chǎn)生，IC50≤20pM·抑制人類DB細(xì)胞中由人類IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化，IC50≤40pM·抑制小鼠耳中由人類IL-23誘導(dǎo)的IL-17及IL-22產(chǎn)生(在1mg/kg下對(duì)兩種細(xì)胞因子的抑制均≥80%)。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有至少一種以下性質(zhì)(性質(zhì)C)。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少兩種或至少三種性質(zhì)的任何組合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下所有性質(zhì)?！o預(yù)測(cè)的ADCC/CDC活性·穩(wěn)定性83°C(熔融溫度83°C，如通過差示掃描熱量測(cè)定法所測(cè)定)·溶解度≥100mg/ml(如通過紫外光譜法測(cè)量且通過混濁度監(jiān)測(cè))·在三只短尾猴中皮下給予1.0mg/kg顯示，≥10nM的暴露持續(xù)約28天，生物利用度為約70%。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有至少一種以下性質(zhì)(性質(zhì)C)。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下至少兩種性質(zhì)的任何組合。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有以下所有性質(zhì)?！o預(yù)測(cè)的ADCC/CDC活性·穩(wěn)定性83°C(熔融溫度83°C，如通過差示掃描熱量測(cè)定法所測(cè)定)·溶解度≥100mg/ml(如通過紫外光譜法測(cè)量且通過混濁度監(jiān)測(cè))。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗體具有至少一種性質(zhì)A、至少一種性質(zhì)B及至少一種性質(zhì)C。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體具有至少兩種或至少三種性質(zhì)A、B及C的任何組合。在一些方面中，人源化抗體顯示阻斷活性，由此其使IL-23與IL-23受體的結(jié)合減小至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%或至少95%。可使用本領(lǐng)域中已知的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合分析來測(cè)量抗體阻斷IL-23與IL-23受體結(jié)合的能力?；蛘?，可通過評(píng)估IL-23的生物效應(yīng)(例如IL-17及IL-22的產(chǎn)生)以確定由IL-23受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)是否受抑制，以此測(cè)量抗體的阻斷活性。在另一方面中，本發(fā)明提供一種具有有利生物物理學(xué)性質(zhì)的人源化抗IL-23p19抗體。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體以至少90%單體形式或至少92%單體形式或至少95%單體形式存在于緩沖液中。在另一方面中，本發(fā)明的人源化抗IL-23p19抗體在緩沖液中保持至少90%單體形式或至少92%單體形式或至少95%單體形式持續(xù)一個(gè)月或四個(gè)月。在一個(gè)方面中，本發(fā)明的人源化抗體為抗體A、抗體B、抗體C或抗體D。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體包含輕鏈序列SEQIDNO:174及重鏈序列SEQIDNO:176(抗體A)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體包含輕鏈序列SEQIDNO:174及重鏈序列SEQIDNO:178(抗體B)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體包含輕鏈序列SEQIDNO:180及重鏈序列SEQIDNO:176(抗體C)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體包含輕鏈序列SEQIDNO:180及重鏈序列SEQIDNO:178(抗體D)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體由輕鏈序列SEQIDNO:174及重鏈序列SEQIDNO:176組成(抗體A)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體由輕鏈序列SEQIDNO:174及重鏈序列SEQIDNO:178組成(抗體B)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體由輕鏈序列SEQIDNO:180及重鏈序列SEQIDNO:176組成(抗體C)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的人源化抗體由輕鏈序列SEQIDNO:180及重鏈序列SEQIDNO:178組成(抗體D)。在一些實(shí)施方案中，人源化抗IL-23p19抗體(包括其抗原結(jié)合片段，例如重鏈及輕鏈可變區(qū))包含具有源于抗體A(輕鏈序列=SEQIDNO:174；重鏈序列=SEQIDNO:176)、抗體B(輕鏈序列=SEQIDNO:174；重鏈序列=SEQIDNO:178)、抗體C(輕鏈序列=SEQIDNO:180；重鏈序列=SEQIDNO:176)或抗體D(輕鏈序列=SEQIDNO:180；重鏈序列=SEQIDNO:178)的殘基的氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種在由SEQIDNO:181的氨基酸殘基108至126及氨基酸殘基137至151組成的表位處與人類IL-23p19結(jié)合的抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種與本發(fā)明的抗體(例如本文所述的抗體A、抗體B、抗體C或抗體D)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人類IL-23p19的抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段?？墒褂帽绢I(lǐng)域中已知的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合分析來測(cè)量抗體或抗原結(jié)合片段競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合IL-23p19的能力。人源化抗IL-23p19抗體任選在共有或種系骨架區(qū)中包括特定氨基酸取代。相比于通過將CDR或HVL“直接交換(directswap)”至人類種系骨架區(qū)中所形成的人源化抗體所顯示的抗體效能，前述骨架位置中氨基酸殘基的特定取代可改良抗體效能的多個(gè)方面(包括結(jié)合親和力及/或穩(wěn)定性)。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明闡述輕鏈可變區(qū)具有SEQIDNO:84、86、88、90、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117或119所示氨基酸序列的其它單克隆抗體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明闡述重鏈可變區(qū)具有SEQIDNO:121、123、125、127、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154或156所示氨基酸序列的其它單克隆抗體(參見以上表1及表2)。這些小鼠抗體的CDR序列展示于表3及表4中。將這些CDR置于人類共有重鏈及輕鏈可變域的FR中將產(chǎn)生適用的本發(fā)明的人源化抗體。特別是，本發(fā)明提供輕鏈可變區(qū)與重鏈可變區(qū)的組合為SEQIDNO:84/121、86/123、88/125、90/127、91/128、93/130、95/132、97/134、99/136、101/138、103/140、105/142、107/144、109/146、111/148、113/150、115/152、117/154或119/156的單克隆抗體。這些可變區(qū)可與人類恒定區(qū)組合。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明闡述輕鏈可變區(qū)序列具有SEQIDNO:158、160、162或164所示氨基酸序列的其它人源化抗體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明闡述重鏈可變區(qū)序列具有SEQIDNO:166、168、170或172所示氨基酸序列的其它人源化抗體(參見以上表5及表6)。這些抗體的CDR序列展示于表3及表4中。特別是，本發(fā)明提供輕鏈可變區(qū)與重鏈可變區(qū)的組合為SEQIDNO:160/166、160/168、158/166或158/168的單克隆抗體。這些可變區(qū)可與人類恒定區(qū)組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:160的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:160的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:166的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:166的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:160的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:160的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:168的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:168的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:158的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:158的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:166的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:166的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：人源化輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含SEQIDNO:158的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:158的可變域輕鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)；及人源化重鏈可變域，該重鏈可變域包含SEQIDNO:168的CDR，以及氨基酸序列與SEQIDNO:168的可變域重鏈氨基酸序列的骨架區(qū)氨基酸序列至少90%一致、至少93%一致或至少95%一致的骨架區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-23p19抗體為人源化單克隆抗體。在一些具體實(shí)施方案中，本文公開的人源化抗IL-23p19抗體包含至少重鏈或輕鏈可變域，該輕鏈可變域包含如以上表1至表6中所示的鼠類單克隆抗體或人源化抗體的CDR或HVL及人類種系重鏈及輕鏈可變域的FR。這些序列的CDR展示于表3及表4中。因此，在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含輕鏈CDR1(L-CDR1)序列SEQIDNO:1、4、6、7、8、11、15、18、19、22、27或30；輕鏈CDR2(L-CDR2)序列SEQIDNO:2、5、9、12、16、20、23、25、28或31；輕鏈CDR3(L-CDR3)序列SEQIDNO:3、10、13、14、17、21、24、26、29或32；重鏈CDR1(H-CDR1)序列SEQIDNO:33、36、38、40、43、45、48、51、54、57、60、63、66、67、68、69、77或80；重鏈CDR2(H-CDR2)序列SEQIDNO:34、39、41、46、49、52、55、58、61、64、70、72、73、75、78或81；及重鏈CDR3(H-CDR3)序列SEQIDNO:35、37、42、44、47、50、53、56、59、62、65、71、74、76、79或82。在一個(gè)方面中，抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段包含：輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含以上所列L-CDR1、以上所列L-CDR2及以上所列L-CDR3；及重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含以上所列H-CDR1、以上所列H-CDR2及以上所列H-CDR3。在另一方面中，本發(fā)明提供一種抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含：a)分別為SEQIDNO:1、2、3、33、34及35的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或b)分別為SEQIDNO:4、5、3、36、34及37的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或c)分別為SEQIDNO:1、2、3、38、39及35的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或d)分別為SEQIDNO:6、2、3、40、41及42的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或e)分別為SEQIDNO:7、2、3、43、41及44的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或f)分別為SEQIDNO:8、9、10、45、46及47的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或g)分別為SEQIDNO:8、9、10、48、49及50的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或h)分別為SEQIDNO:11、12、13、51、52及53的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或i)分別為SEQIDNO:7、2、14、54、55及56的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或j)分別為SEQIDNO:15、16、17、57、58及59的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或k)分別為SEQIDNO:18、16、17、60、61及62的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或l)分別為SEQIDNO:19；20；21；63、66、67或68；64；及65的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或m)分別為SEQIDNO:22、23、24、69、70及71的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或n)分別為SEQIDNO:22、25、26、55、72及71的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或o)分別為SEQIDNO:8、9、10、45、73及74的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或p)分別為SEQIDNO:27、28、29、45、75及76的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或q)分別為SEQIDNO:8、9、10、77、78及79的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或r)分別為SEQIDNO:30、31、32、80、81及82的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列。在一個(gè)方面中，抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段包含：輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含以上所列L-CDR1、L-CDR2及L-CDR3組合；及重鏈可變區(qū)，該重鏈可變區(qū)包含以上所列H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3組合。在具體實(shí)施方案中，CDR區(qū)在這些例示性免疫球蛋白之間交換(即，例如一種小鼠抗體或源于其的人源化抗體的一或兩個(gè)CDR與來自另一小鼠抗體或源于其的人源化抗體的類似CDR交換)的嵌合抗體預(yù)期可產(chǎn)生適用抗體。在某些實(shí)施方案中，人源化抗IL-23P19抗體為抗體片段。上文已概述各種抗體片段且已研發(fā)出多種技術(shù)來產(chǎn)生所述抗體片段?？山?jīng)由蛋白水解消化完整抗體來獲得片段(例如，參見Morimoto等人，1992，JournalofBiochemicalandBiophysicalMethods24:107-117；及Brennan等人，1985，Science229:81)?；蛘?，可在重組宿主細(xì)胞中直接產(chǎn)生片段。例如，可直接自大腸桿菌(E.coli)回收Fab'-SH片段，并實(shí)施化學(xué)偶聯(lián)以形成F(ab')2片段(例如，參見Carter等人，1992，Bio/Technology10:163-167)。通過另一方法，可直接自重組宿主細(xì)胞培養(yǎng)物中分離F(ab')2片段。本領(lǐng)域技術(shù)人員可了解產(chǎn)生抗體片段的其他技術(shù)。因此，在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供抗體片段，其包含本文所述的CDR，特別是本文所述的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3的一種組合。在另一方面中，本發(fā)明提供抗體片段，其包含本文所述的可變區(qū)，例如本文所述的輕鏈可變區(qū)與重鏈可變區(qū)的一種組合。某些實(shí)施方案包括包含輕鏈序列SEQIDNO:174或180的任一者與重鏈序列SEQIDNO:176或178組合的人源化抗IL-23p19抗體的F(ab')2片段。這些實(shí)施方案可包括包含該F(ab')2的完整抗體。在一些實(shí)施方案中，該抗體或抗體片段包括介導(dǎo)效應(yīng)子功能的恒定區(qū)。恒定區(qū)可提供針對(duì)表達(dá)IL-23的靶細(xì)胞的抗體依賴性細(xì)胞毒性(ADCC)、抗體依賴性細(xì)胞吞噬作用(ADCP)和/或補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC)反應(yīng)。效應(yīng)域可為(例如)Ig分子的Fc區(qū)?？贵w的效應(yīng)域可來自任何適宜的脊椎動(dòng)物物種及同種型。來自不同動(dòng)物物種的同種型介導(dǎo)效應(yīng)子功能的能力不同。例如，人免疫球蛋白介導(dǎo)CDC及ADCC/ADCP的能力一般分別具有以下次序：IgM≈IgG1≈IgG3>IgG2>IgG4及IgG1≈IgG3>IgG2/IgM/IgG4。鼠類免疫球蛋白一般介導(dǎo)CDC及ADCC/ADCP一般分別具有以下次序：鼠類IgM≈IgG3>>IgG2b>IgG2a>>IgG1及IgG2b>IgG2a>IgG1>>IgG3。在另一實(shí)施例中，鼠類IgG2a介導(dǎo)ADCC，而鼠類IgG2a及IgM二者介導(dǎo)CDC?？贵w修飾人源化抗IL-23P19抗體及藥物可包括對(duì)人源化抗IL-23P19抗體或其抗原結(jié)合片段的修飾。例如，可期望在效應(yīng)子功能方面修飾抗體，以增強(qiáng)抗體在治療癌癥中的效力。一種所述修飾為將半胱氨酸殘基引入Fc區(qū)中，由此使得在此區(qū)域中可形成鏈間二硫鍵。由此生成的同二聚抗體可具有經(jīng)改良的內(nèi)在化能力和/或增強(qiáng)的補(bǔ)體介導(dǎo)細(xì)胞殺傷和/或抗體依賴性細(xì)胞毒性(ADCC)。例如，參見Caron等人，1992，J.ExpMed.176:1191-1195；及Shopes，1992，J.Immunol.148：2918-2922。亦可使用異雙功能性交聯(lián)劑來制備具有增強(qiáng)的抗腫瘤活性的同二聚抗體，如Wolff等人，1993，CancerResearch53：2560-2565中所述?；蛘?，抗體可經(jīng)改造以含有雙重Fc區(qū)，從而增強(qiáng)抗體的補(bǔ)體溶胞及ADCC能力。參見Stevenson等人，1989，Anti-CancerDrugDesign3：219-230。已通過修改抗體Fc區(qū)的糖基化模式來生成支持ADCC的能力經(jīng)改良的抗體。這是可能的，因?yàn)榭贵w在CH2域中天冬酰胺殘基N297處的糖基化參與ADCC必需的IgG與Fcγ受體之間的相互作用。已經(jīng)改造宿主細(xì)胞系以表達(dá)糖基化改變(例如增加平分型(bisecting)N-乙酰葡萄糖胺或減少巖藻糖)的抗體。減少巖藻糖比增加平分型N-乙酰葡萄糖胺的存在更大程度地增強(qiáng)ADCC活性。另外，低巖藻糖抗體的ADCC增強(qiáng)與FcγRIIIaV/F多態(tài)性無關(guān)。修飾抗體Fc區(qū)中的氨基酸序列為增強(qiáng)ADCC的糖基化改造的備選方案。已通過廣泛的突變分析來確定Fcγ受體在人IgG1上的結(jié)合位點(diǎn)。此導(dǎo)致生成具有Fc突變的人源化IgG1抗體，所述突變提高對(duì)FcγRIIIa的結(jié)合親和性并增強(qiáng)活體外ADCC。另外，已獲得結(jié)合特性具有多種不同變更的Fc變體，所述特性例如與特異性FcγR受體的結(jié)合增強(qiáng)且與其他FcγR受體的結(jié)合不變或減小。另一方面包括免疫綴合物，其包含與細(xì)胞毒性劑綴合的人源化抗體或其片段，該細(xì)胞毒性劑為例如化學(xué)治療藥物、毒素(例如，細(xì)菌、真菌、植物或動(dòng)物來源的酶活性毒素或其片段)或放射性同位素(即，放射性綴合物)。上文已闡述可用于產(chǎn)生所述免疫綴合物的化學(xué)治療藥物?？捎糜谛纬煽捎妹庖呔Y合物的酶促活性毒素及其片段包括白喉A鏈、白喉毒素的非結(jié)合活性片段、外毒素A鏈(來自銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa))、蓖麻毒素A鏈、相思豆毒蛋白A鏈、蒴蓮根毒素A鏈、α-八疊球菌、油桐(Aleuritesfordii)蛋白、石竹素蛋白、美洲商陸(Phytolacaamericana)蛋白(PAPI、PAPII及PAP-S)、苦瓜(Momordicacharantia)抑制劑、瀉果素(curcin)、巴豆毒蛋白、肥皂草(Sapaonariaofficinalis)抑制劑、白樹毒素、mitogellin、局限曲菌素、酚霉素、依諾霉素(enomycin)、單端孢霉烯等。多種放射性核素可用于產(chǎn)生放射性綴合物的人源化抗IL-23P19抗體。實(shí)例包括212Bi、131I、131In、90Y及186Re。人源化抗IL-23P19抗體與細(xì)胞毒性劑或化學(xué)治療劑的綴合物可通過已知方法使用多種雙功能蛋白偶聯(lián)劑制得，所述偶聯(lián)劑例如3-(2-吡啶基二巰基)丙酸N-琥珀酰亞胺酯(SPDP)、亞胺基硫雜環(huán)戊烷(IT)、亞胺酸酯的雙功能衍生物(例如己二酸二甲酯HCL)、活性酯(例如辛二酸二琥珀酰亞胺酯)、醛(例如戊二醛)、雙疊氮基化合物(例如雙(對(duì)-疊氮基苯甲酰基)己二胺)、雙重氮衍生物(例如雙(對(duì)重氮苯甲?；?-乙二胺)、二異氰酸酯(例如甲苯2,6-二異氰酸酯)及雙活性氟化合物(例如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如，蓖麻毒素免疫毒素可如Vitetta等人，1987，Science238:1098中所述來制備。經(jīng)碳-14標(biāo)記的1-異硫氰酰芐基-3-甲基二亞乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)為放射性核苷酸與抗體綴合的示例性螯合劑。綴合物亦可使用可裂解接頭來形成。亦可將本文所公開人源化抗IL-23P19抗體調(diào)配為免疫脂質(zhì)體。含有抗體的脂質(zhì)體通過本領(lǐng)域已知的方法來制備，例如以下文獻(xiàn)中所闡述：Epstein等人，1985，Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:3688；Hwang等人，1980，Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4030；及美國(guó)專利第4,485,045號(hào)及第4,544,545號(hào)。循環(huán)時(shí)間延長(zhǎng)的脂質(zhì)體公開于(例如)美國(guó)專利第5,013,556號(hào)中。尤其有用的脂質(zhì)體可使用包含磷脂酰膽堿、膽固醇及PEG衍生的磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)的脂質(zhì)組合物通過反相蒸發(fā)法來生成。經(jīng)由具有指定孔徑的濾膜擠出脂質(zhì)體以獲得具有期望直徑的脂質(zhì)體?？山?jīng)由二硫化物互換反應(yīng)使本文所公開抗體的Fab'片段與脂質(zhì)體組合，如Martin等人，1982，J.Biol.Chem.257:286-288中所述?；瘜W(xué)治療藥物(例如多柔比星)任選含于脂質(zhì)體內(nèi)。例如，參見Gabizon等人，1989，J.NationalCancerInst.81(19):1484。本文闡述并公開的抗體亦可通過使抗體與活化前藥的酶綴合來用于ADEPT(抗體導(dǎo)向的酶前藥療法)操作，該酶將前藥(例如，肽基化學(xué)治療藥物)轉(zhuǎn)化為活性抗癌藥物。例如，參見WO81/01145、WO88/07378及美國(guó)專利第4,975,278號(hào)?？捎糜贏DEPT的免疫綴合物中的酶組分為能作用于前藥而將其轉(zhuǎn)化為活性更強(qiáng)的細(xì)胞毒性形式的酶?？捎糜贏DEPT的具體酶包括(但不限于)：堿性磷酸酶，其用于將含磷酸酯前藥轉(zhuǎn)化為游離藥物；芳基硫酸酯酶，其用于將含硫酸酯前藥轉(zhuǎn)化為游離藥物；胞嘧啶脫胺酶，其用于將非毒性5-氟胞嘧啶轉(zhuǎn)化為抗癌藥物5-氟尿嘧啶；蛋白酶，例如沙雷菌(Serratia)蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、羧肽酶及組織蛋白酶(例如組織蛋白酶B及L)，其用于將含肽前藥轉(zhuǎn)化為游離藥物；D-丙氨酰羧肽酶，其用于轉(zhuǎn)化含有D-氨基酸取代基的前藥；碳水化合物裂解酶，例如β-半乳糖苷酶及神經(jīng)氨酸酶，其用于將糖基化前藥轉(zhuǎn)化為游離藥物；β-內(nèi)酰胺酶，其用于將經(jīng)β-內(nèi)酰胺衍生的藥物轉(zhuǎn)化為游離藥物；及青霉素酰胺酶，例如青霉素V酰胺酶或青霉素G酰胺酶，其用于分別將胺氮上經(jīng)苯氧基乙?；虮交阴；苌乃幬镛D(zhuǎn)化為游離藥物。或者，可使用具有酶活性的抗體(“抗體酶”)來將前藥轉(zhuǎn)化為游離活性藥物(例如，參見Massey，1987，Nature328：457-458)。可通過已知方法來制備抗體-抗體酶綴合物以供將抗體酶遞送至腫瘤細(xì)胞群，例如，通過使酶與上述人源化抗IL-23P19抗體/異雙功能性交聯(lián)試劑共價(jià)結(jié)合來制備。或者，可使用重組DNA技術(shù)構(gòu)造融合蛋白，其包含本文所公開抗體的至少抗原結(jié)合區(qū)及與之相連的上述酶的至少功能活性部分(例如，參見Neuberger等人，1984，Nature312:604-608)。在某些實(shí)施方案中，可期望使用人源化抗IL-23P19抗體片段而非完整抗體以(例如)促進(jìn)組織滲透。可期望修飾抗體片段以延長(zhǎng)其血清半衰期。此可通過(例如)將補(bǔ)救受體結(jié)合表位納入抗體片段中來達(dá)成。在一種方法中，可改變(例如使之突變)抗體片段中的適宜區(qū)域，或可通過(例如)DNA或肽合成將表位納入肽標(biāo)簽中，隨后使該標(biāo)簽在末端或在中部與抗體片段融合。例如，參見WO96/32478。在其他實(shí)施方案中，亦包括人源化抗IL-23P19抗體的共價(jià)修飾。共價(jià)修飾包括對(duì)以下基團(tuán)的修飾：半胱氨?；鶜埢⒔M氨?；鶜埢?、賴氨?；鞍被┒藲埢⒕滨；鶜埢?、酪氨酰基殘基、羧基側(cè)基團(tuán)(天冬氨?；蚬劝滨；?、谷氨酰氨?；疤於０滨；鶜埢蚪z氨?；蛱K氨?；鶜埢?。另一共價(jià)修飾類型涉及使糖苷與抗體化學(xué)或酶促偶聯(lián)。若適用，所述修飾可通過化學(xué)合成或通過抗體的酶促或化學(xué)裂解來制備?？赏ㄟ^使抗體的靶向氨基酸殘基與能與所選側(cè)鏈或氨基-或羧基-末端殘基反應(yīng)的有機(jī)衍生劑反應(yīng)來將抗體的其他共價(jià)修飾類型引入分子中?？贵w上存在的任何碳水化合物部分的移除可以以化學(xué)或酶促方式來完成?；瘜W(xué)去糖基化闡述于以下文獻(xiàn)中：Hakimuddin等人，1987，Arch.Biochem.Biophys.259:52及Edge等人，1981，Anal.Biochem.，118:131?？贵w上碳水化合物部分的酶促裂解可通過使用多種內(nèi)切糖苷酶及外切糖苷酶來達(dá)成，如Thotakura等人，1987，Meth.Enzymol138:350中所述?？捎玫墓矁r(jià)修飾的另一類型包含使抗體與多種非蛋白性聚合物(例如聚乙二醇、聚丙二醇或聚氧化烯)中的一者以以下文獻(xiàn)中的一或多者所述的方式連接：美國(guó)專利第4,640,835號(hào)、美國(guó)專利第4,496,689號(hào)、美國(guó)專利第4,301,144號(hào)、美國(guó)專利第4,670,417號(hào)、美國(guó)專利第4,791,192號(hào)及美國(guó)專利第4,179,337號(hào)。人源化及氨基酸序列變體抗IL-23P19抗體的氨基酸序列變體可通過將適宜核苷酸變化引入抗IL-23P19抗體DNA中或通過肽合成來制備。所述變體包括(例如)本文實(shí)施例中抗IL-23P19抗體氨基酸序列內(nèi)殘基的缺失和/或插入和/或取代。實(shí)施缺失、插入及取代的任一組合以獲得最終構(gòu)建體，條件是最終構(gòu)建體具有期望特征。氨基酸變化亦可改變?nèi)嗽椿蜃凅w抗IL-23P19抗體的翻譯后過程，例如改變糖基化位點(diǎn)的數(shù)目或位置?？捎糜阼b定抗IL-23P19抗體中優(yōu)選誘變位置的某些殘基或區(qū)域的方法稱作“丙氨酸掃描誘變”，如Cunningham及Wells(Science，244:1081-1085(1989))中所述。此處，鑒定了殘基或目標(biāo)殘基群(例如帶電荷殘基，例如arg、asp、his、lys及glu)且其經(jīng)中性或帶負(fù)電荷氨基酸(通常為丙氨酸)取代以影響氨基酸與IL-23P19抗原的相互作用。然后通過在取代位點(diǎn)或針對(duì)取代位點(diǎn)引入另外或其他變體來改良那些顯示對(duì)取代具有功能敏感性的氨基酸位置。因此，在預(yù)先確定引入氨基酸序列變異的位點(diǎn)時(shí)，突變本身的性質(zhì)無需預(yù)先確定。例如，為分析給定位點(diǎn)處突變的性能，在目標(biāo)密碼子或區(qū)域處實(shí)施丙氨酸掃描誘變或隨機(jī)誘變并針對(duì)期望活性篩選所表達(dá)的抗IL-23P19抗體變體。氨基酸序列插入包括氨基-和/或羧基末端融合(長(zhǎng)度介于一個(gè)殘基至含有上百或更多殘基的多肽的范圍內(nèi))以及單一或多個(gè)氨基酸殘基的序列內(nèi)插入。末端插入的實(shí)例包括與表位標(biāo)簽融合的抗IL-23P19抗體?？笽L-23P19抗體分子的其他插入性變體包括酶或可提高抗體血清半衰期的多肽與抗IL-23P19抗體N-或C-末端的融合。另一類型的變體系氨基酸取代變體。所述變體在抗IL-23P19抗體分子中移除至少一個(gè)氨基酸殘基并在該位置處插入不同殘基。用于取代誘變的最受關(guān)注的位點(diǎn)包括超變區(qū)，但亦涵蓋FR改變。保守取代展示于表5的“優(yōu)選取代”標(biāo)題下。若所述取代引起生物活性改變，則可引入更重要的改變(命名為“示例性取代”，或如下文參照氨基酸種類所進(jìn)一步闡述)，并篩選產(chǎn)物。表8：在蛋白化學(xué)中，一般公認(rèn)抗體的生物學(xué)特性可通過選擇維持以下特性的效應(yīng)顯著不同的取代來達(dá)成：(a)取代區(qū)域中多肽骨架的結(jié)構(gòu)，例如呈折疊或螺旋構(gòu)象，(b)分子在靶位點(diǎn)處的電荷或疏水性，或(c)側(cè)鏈體積。根據(jù)常見側(cè)鏈特性將天然殘基分為以下各類：(1)疏水性：正亮氨酸、met、ala、val、leu、ile；(2)中性親水性：cys、ser、thr；(3)酸性：asp、glu；(4)堿性：asn、gin、his、lys、arg；(5)影響鏈取向的殘基：gly、pro；及(6)芳香族：trp、tyr、phe。非保守性取代使得需要將所述種類之一的成員交換為另一種類。亦可取代(一般用絲氨酸取代)維持人源化或變體抗IL-23P19抗體的適當(dāng)構(gòu)象時(shí)未涉及的任何半胱氨酸殘基，從而提高分子的氧化穩(wěn)定性，預(yù)防異常交聯(lián)，或提供與細(xì)胞毒性或細(xì)胞抑制化合物的已確認(rèn)的經(jīng)合點(diǎn)。相反，可將半胱氨酸鍵添加至抗體以提高其穩(wěn)定性(尤其在抗體為例如Fv片段等抗體片段時(shí))。一類取代型變體涉及取代親代抗體(例如人源化或人抗體)中的一或多個(gè)超變區(qū)殘基。通常，所選用于進(jìn)一步研發(fā)的所得變體可相對(duì)于產(chǎn)生所述變體的親代抗體具有改良的生物特性。產(chǎn)生所述取代型變體的便捷方法為使用噬菌體展示實(shí)施的親和性成熟。簡(jiǎn)言之，使若干超變區(qū)位點(diǎn)(例如6至7個(gè)位點(diǎn))突變以在每一位點(diǎn)產(chǎn)生所有可能的氨基酸取代。由此產(chǎn)生的抗體變體以單價(jià)方式以與每一顆粒內(nèi)所封裝的M13基因III產(chǎn)物的融合形式自絲狀噬菌體顆粒展示出來。然后針對(duì)生物學(xué)活性(例如結(jié)合親和性)來篩選噬菌體展示的變體。為確定修飾的候選超變區(qū)位點(diǎn)，可實(shí)施丙氨酸掃描誘變以確定顯著促進(jìn)抗原結(jié)合的超變區(qū)殘基?；蛘呋蛄硗?，有利的是分析抗原-抗體復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)以確定抗體與人IL-23P19之間的接觸點(diǎn)。所述接觸殘基及附近殘基為本文所述技術(shù)的候選取代殘基。產(chǎn)生所述變體后，立即如本文所述對(duì)變體組進(jìn)行篩選，且可選擇在一或多個(gè)相關(guān)分析中具有優(yōu)良特性的抗體以供進(jìn)一步研發(fā)?？贵w的另一類氨基酸變體改變抗體的原始糖基化模式?！案淖儭币庵溉笔б换蚨鄠€(gè)存在于抗體中的碳水化合物部分和/或添加一或多個(gè)抗體中不存在的糖基化位點(diǎn)。在一些實(shí)施方案中，可期望修飾本發(fā)明的抗體以添加糖基化位點(diǎn)?？贵w的糖基化通常為N-連接或O-連接。N-連接是指碳水化合物部分連接至天冬酰氨酸殘基側(cè)鏈。三肽序列天冬酰氨酸-X-絲氨酸及天冬酰氨酸-X-蘇氨酸(其中X為除脯氨酸外的任何氨基酸)為碳水化合物部分經(jīng)酶連接至天冬酰氨酸側(cè)鏈的識(shí)別序列。因此，多肽中存在所述三肽序列中的任一者均可產(chǎn)生潛在糖基化位點(diǎn)。O-連接糖基化是指糖N-乙酰半乳糖胺、半乳糖或木糖之一連接至羥基氨基酸，最常見為絲氨酸或蘇氨酸，但亦可使用5-羥脯氨酸或5-羥賴氨酸。因此，為糖基化特定蛋白(例如抗體)，改造該蛋白的氨基酸序列以含有上述三肽序列中的一或多者(對(duì)于N-連接糖基化位點(diǎn))。亦可通過一或多個(gè)絲氨酸或蘇氨酸殘基添加或取代于原始抗體序列中來改變(對(duì)于O-連接糖基化位點(diǎn))。編碼抗IL-23P19抗體氨基酸序列變體的核酸分子為由本領(lǐng)域已知的多種方法制備。所述方法包括(但不限于)自天然來源分離(在天然氨基酸序列變體情況下)或通過抗IL-23P19抗體的預(yù)先制備的變體或非變體形式實(shí)施寡核苷酸介導(dǎo)(或定點(diǎn))誘變、PCR誘變及盒式誘變制備。聚核苷酸、載體、宿主細(xì)胞及重組方法其他實(shí)施方案涵蓋包含編碼人源化抗IL-23P19抗體的序列的分離的聚核苷酸、包含該聚核苷酸的載體及宿主細(xì)胞，以及產(chǎn)生人源化抗體的重組技術(shù)。分離的聚核苷酸可編碼抗IL-23P19抗體的任何期望形式，包括例如全長(zhǎng)單克隆抗體、Fab、Fab'、F(ab')2及Fv片段、二價(jià)抗體(diabodies)、線性抗體、單鏈抗體分子及自抗體片段形成的多特異性抗體。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段的輕鏈可變區(qū)的序列，該輕鏈可變區(qū)具有以下任何氨基酸序列：SEQIDNO:84、86、88、90、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117或119。編碼這些氨基酸序列的例示性聚核苷酸序列為SEQIDNO:83、85、87、89、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116及118。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段的重鏈可變區(qū)的序列，該重鏈可變區(qū)具有氨基酸序列SEQIDNO:121、123、125、127、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154或156。編碼這些氨基酸序列的例示性聚核苷酸序列為SEQIDNO:120、122、124、126、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153或155。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段的輕鏈可變區(qū)的序列，該輕鏈可變區(qū)具有以下任何氨基酸序列：SEQIDNO:158、160、162或164。編碼這些氨基酸序列的例示性聚核苷酸序列為SEQIDNO:157、159、161或163。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼抗體或抗體片段的重鏈可變區(qū)的序列，該重鏈可變區(qū)具有氨基酸序列SEQIDNO:166、168、170或172。編碼這些氨基酸序列的例示性聚核苷酸序列為SEQIDNO:165、167、169或171。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼抗體輕鏈的序列，該輕鏈具有以下任何氨基酸序列：SEQIDNO:174或180。編碼這些氨基酸序列的例示性聚核苷酸序列為SEQIDNO:173或179。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼抗體重鏈的序列，該重鏈具有氨基酸序列SEQIDNO:176或178。編碼這些氨基酸序列的例示性聚核苷酸序列為SEQIDNO:175或177。在一個(gè)方面中，分離的聚核苷酸序列編碼抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段分別包含以下氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)：SEQIDNO:174及SEQIDNO:176；SEQIDNO:174及SEQIDNO:178；SEQIDNO:180及SEQIDNO:176；SEQIDNO:180及SEQIDNO:178。編碼這些氨基酸序列的例示性聚核苷酸序列分別為SEQIDNO:173及175；SEQIDNO:173及177；SEQIDNO:179及175；SEQIDNO:179及177。包含編碼人源化抗IL-23P19抗體或其片段或鏈的序列的聚核苷酸可與一或多種本領(lǐng)域已知的調(diào)節(jié)或控制序列融合，且可含于本領(lǐng)域已知的適宜的表達(dá)載體或宿主細(xì)胞中。編碼重鏈或輕鏈可變域的每一聚核苷酸分子皆可獨(dú)立地與編碼恒定域(例如人恒定域)的聚核苷酸序列融合，從而使得能產(chǎn)生完整抗體?；蛘撸墒咕酆塑账峄蚱洳糠秩诤显谝黄?，從而提供產(chǎn)生單鏈抗體的模板。對(duì)于重組產(chǎn)生，將編碼抗體的聚核苷酸插入可復(fù)制載體中以供克隆(擴(kuò)增DNA)或表達(dá)?？墒褂枚喾N適合表達(dá)重組抗體的載體。載體組分一般包括(但不限于)以下中的一或多者：信號(hào)序列、復(fù)制起點(diǎn)、一或多個(gè)標(biāo)記基因、增強(qiáng)子組件、啟動(dòng)子及轉(zhuǎn)錄終止序列。人源化抗IL-23P19抗體亦可以融合多肽形式產(chǎn)生，其中抗體與異源多肽融合，例如信號(hào)序列或在成熟蛋白或多肽的氨基末端具有特異性裂解位點(diǎn)的其他多肽。所選異源性信號(hào)序列通常為宿主細(xì)胞可識(shí)別及加工(即，通過信號(hào)肽酶裂解)的序列。對(duì)于不能識(shí)別并加工人源化抗IL-23P19抗體信號(hào)序列的原核宿主細(xì)胞而言，信號(hào)序列可由原核信號(hào)序列取代。信號(hào)序列可為(例如)堿性磷酸酶、青霉素酶、脂蛋白、耐熱腸毒素II前導(dǎo)序列等。對(duì)于酵母分泌，可用(例如)以下信號(hào)來取代天然信號(hào)序列：得自酵母轉(zhuǎn)化酶α-因子的前導(dǎo)序列(包括酵母菌屬(Saccharomyces)及克魯維酵母屬(Kluyveromyces)α-因子前導(dǎo)序列)、酸性磷酸酶、白色念珠菌(C.albicans)葡糖淀粉酶或WO90/13646中所述的信號(hào)。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，可使用哺乳動(dòng)物信號(hào)序列以及病毒分泌前導(dǎo)序列(例如單純皰疹病毒gD信號(hào))。該前體區(qū)的DNA在閱讀框中與編碼人源化抗IL-23P19抗體的DNA接合。表達(dá)及克隆載體含有使載體能在一或多個(gè)所選宿主細(xì)胞中復(fù)制的核酸序列。通常，在克隆載體中，此序列為使載體能獨(dú)立于宿主染色體DNA而復(fù)制者，且其包括復(fù)制起點(diǎn)或自主復(fù)制序列。用于多種細(xì)菌、酵母及病毒的所述序列為本領(lǐng)域所熟知。來自質(zhì)粒pBR322的復(fù)制起點(diǎn)適用于大多數(shù)革蘭氏(Gram)陰性細(xì)菌，2-υ質(zhì)粒起點(diǎn)適用于酵母，且多種病毒起點(diǎn)(SV40、多瘤、腺病毒、VSV及BPV)可用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中克隆載體。通常，哺乳動(dòng)物表達(dá)載體不需要復(fù)制起點(diǎn)組分(通常可僅使用SV40起點(diǎn)，這是因?yàn)槠浜性缙趩?dòng)子)。表達(dá)及克隆載體可含有編碼可選擇標(biāo)記物的基因以有助于對(duì)表達(dá)的鑒定。典型可選擇標(biāo)記基因編碼如下蛋白：賦予對(duì)抗生素或其他毒素(例如，氨芐西林(ampicillin)、新霉素、甲氨蝶呤或四環(huán)素)的抗性；或者，為營(yíng)養(yǎng)缺陷的補(bǔ)體；或在其他備選方案中供應(yīng)復(fù)合培養(yǎng)基中不存在的特定營(yíng)養(yǎng)素，例如編碼桿菌(Bacilli)的D-丙氨酸消旋酶的基因。選擇方案的一個(gè)實(shí)施例利用藥物來阻止宿主細(xì)胞的生長(zhǎng)。那些經(jīng)異源基因成功轉(zhuǎn)化的細(xì)胞產(chǎn)生賦予抗藥性的蛋白，且因此可在該選擇方案中存活。該顯性選擇的實(shí)施例使用藥物新霉素、霉酚酸及潮霉素。哺乳動(dòng)物細(xì)胞的常用可選擇標(biāo)記物為那些使得能鑒定可吸收編碼人源化抗IL-23P19抗體的核酸的細(xì)胞的標(biāo)記物，例如DHFR(二氫葉酸還原酶)、胸苷激酶、金屬硫蛋白-I及-II(例如靈長(zhǎng)類動(dòng)物金屬硫蛋白基因)、腺苷脫胺酶、鳥氨酸脫羧酶等。首先通過在含有甲氨蝶呤(Mtx)(DHFR的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)所有轉(zhuǎn)化體來鑒定經(jīng)DHFR選擇基因轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。在采用野生型DHFR時(shí)，適宜的宿主細(xì)胞為DHFR活性缺陷的中國(guó)倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞系(例如DG44)。或者，經(jīng)編碼抗IL-23P19抗體、野生型DHFR蛋白及另一可選擇標(biāo)記物(例如氨基葡萄糖苷3'-磷酸轉(zhuǎn)移酶(APH))的DNA序列轉(zhuǎn)化或共轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞(尤其是含有內(nèi)源性DHFR的野生型宿主)可通過在含有針對(duì)所述可選擇標(biāo)記物的選擇劑(例如氨基糖苷抗生素，例如卡那霉素(kanamycin)、新霉素或G418)的培養(yǎng)基中使細(xì)胞生長(zhǎng)來進(jìn)行選擇。例如，參見美國(guó)專利第4,965,199號(hào)。倘若使用酵母細(xì)胞作為宿主細(xì)胞來實(shí)施重組產(chǎn)生，則可使用存在于酵母質(zhì)粒YRp7中的TRP1基因(Stinchcomb等人，1979，Nature282：39)作為可選擇標(biāo)記物。TRP1基因?yàn)槿鄙僭谏彼嶂猩L(zhǎng)的能力的酵母突變體菌株(例如，ATCC第44076號(hào)或PEP4-1)提供選擇標(biāo)記物(Jones，1977，Genetics85:12)。則酵母宿主細(xì)胞基因組中trp1損傷的存在可提供有效環(huán)境以通過在不存在色氨酸時(shí)生長(zhǎng)來檢測(cè)轉(zhuǎn)化。類似地，Leu2p缺陷型酵母菌株(例如ATCC20,622或38,626)通過具有LEU2基因的已知質(zhì)粒來補(bǔ)足。另外，可使用得自1.6μm環(huán)形質(zhì)粒pKD1的載體來轉(zhuǎn)化克魯維酵母?；蛘撸褕?bào)導(dǎo)用于大規(guī)模產(chǎn)生重組牛凝乳酶的表達(dá)系統(tǒng)可用于乳酸克魯維酵母(K.lactis.)(VandenBerg，1990，Bio/Technology8:135)。亦已公開通過克魯維酵母屬的工業(yè)菌株分泌成熟重組人血清白蛋白的穩(wěn)定多拷貝表達(dá)載體(Fleer等人，1991，Bio/Technology9:968-975)。表達(dá)及克隆載體通常含有宿主有機(jī)體可識(shí)別且與編碼抗IL-23P19抗體或其多肽鏈的核酸分子可操作連接的啟動(dòng)子。適用于原核宿主的啟動(dòng)子包括phoA啟動(dòng)子、β-內(nèi)酰胺酶及乳糖啟動(dòng)子系統(tǒng)、堿性磷酸酶、色氨酸(trp)啟動(dòng)子系統(tǒng)及雜合啟動(dòng)子(例如tac啟動(dòng)子)。其他已知的細(xì)菌啟動(dòng)子亦適宜。用于細(xì)菌系統(tǒng)的啟動(dòng)子亦可含有與編碼人源化抗IL-23P19抗體的DNA可操作連接的Shine-Dalgamo(S.D.)序列。已知多種真核啟動(dòng)子序列。事實(shí)上，所有真核基因皆具有富AT區(qū)，其位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游約25至30個(gè)堿基處。在許多基因的轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游70至80個(gè)堿基處發(fā)現(xiàn)的另一序列為CNCAAT區(qū)，其中N可為任一核苷酸。在大多數(shù)真核基因的3'端處為AATAAA序列，其可能向編碼序列的3'端添加聚A尾的信號(hào)。所有所述序列皆以適宜方式插入真核表達(dá)載體中。適用于酵母宿主的啟動(dòng)序列的實(shí)例包括以下酶的啟動(dòng)子：3-磷酸甘油酸酯激酶或其他糖酵解酶，例如烯醇化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、己糖激酶、丙酮酸脫羧酶、磷酸果糖激酶、葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶、3-磷酸甘油酸變位酶、丙酮酸激酶、磷酸丙糖異構(gòu)酶、磷酸葡萄糖異構(gòu)酶及葡糖激酶。誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的另一優(yōu)點(diǎn)為通過生長(zhǎng)條件來控制轉(zhuǎn)錄。所述啟動(dòng)子包括以下酶的酵母啟動(dòng)子區(qū)：醇脫氫酶2、異細(xì)胞色素C、酸性磷酸酶、與氮代謝相關(guān)的衍生物酶、金屬硫蛋白、甘油醛-3-磷酸脫氫酶及負(fù)責(zé)麥芽糖及半乳糖利用的酶。用于酵母表達(dá)的適宜載體及啟動(dòng)子進(jìn)一步闡述于EP73,657中。酵母增強(qiáng)子亦可有利地與酵母啟動(dòng)子一起使用。在哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞中自載體轉(zhuǎn)錄人源化抗IL-23P19抗體受(例如)自以下獲得的啟動(dòng)子控制：病毒基因組，例如多瘤、雞痘病毒、腺病毒(例如腺病毒2)、牛乳頭瘤病毒、禽肉瘤病毒、細(xì)胞巨化病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、肝炎B病毒及猿猴病毒40(SV40)；異源性哺乳動(dòng)物啟動(dòng)子，例如肌動(dòng)蛋白啟動(dòng)子或免疫球蛋白啟動(dòng)子；熱休克啟動(dòng)子，條件是所述啟動(dòng)子與宿主細(xì)胞系統(tǒng)兼容。SV40病毒的早期及晚期啟動(dòng)子為便捷地以SV40限制性片段形式獲得，其亦含有SV40病毒復(fù)制起點(diǎn)。人細(xì)胞巨化病毒的立即早期啟動(dòng)子為便捷地以HindIIIE限制性片段形式獲得。使用牛乳頭瘤病毒作為載體在哺乳動(dòng)物宿主中表達(dá)DNA的系統(tǒng)公開于美國(guó)專利第4,419,446號(hào)中。此系統(tǒng)的修改形式闡述于美國(guó)專利第4,601,978號(hào)中。亦可參見Reyes等人，1982，Nature297:598-601，其公開在來自單純皰疹病毒的胸苷激酶啟動(dòng)子控制下在小鼠細(xì)胞中表達(dá)人p-干擾素cDNA。或者，可使用勞斯肉瘤病毒(roussarcomavirus)長(zhǎng)末端重復(fù)序列作為啟動(dòng)子?？捎糜谥亟M表達(dá)載體的另一可用組件為增強(qiáng)子序列，其用于提高高等真核生物中編碼人源化抗IL-23P19抗體的DNA的轉(zhuǎn)錄。現(xiàn)已知多種增強(qiáng)子序列來自哺乳動(dòng)物基因(例如珠蛋白、彈性蛋白酶、白蛋白、α-胎蛋白及胰島素)。然而，通常使用來自真核細(xì)胞病毒的增強(qiáng)子。實(shí)例包括位于復(fù)制起點(diǎn)遲側(cè)(lateside)上的SV40增強(qiáng)子(bp100-270)、細(xì)胞巨化病毒早期啟動(dòng)子增強(qiáng)子、位于復(fù)制起點(diǎn)遲側(cè)上的多瘤增強(qiáng)子及腺病毒增強(qiáng)子。關(guān)于活化真核啟動(dòng)子的增強(qiáng)組件的描述亦可參見Yaniv，1982，Nature297:17-18?？蓪⒃鰪?qiáng)子剪接至載體中人源化抗IL-23P19抗體編碼序列的5'或3'位置處，但優(yōu)選位于啟動(dòng)子的5'位點(diǎn)。用于真核宿主細(xì)胞(酵母、真菌、昆蟲、植物、動(dòng)物、人細(xì)胞或來自其他多細(xì)胞有機(jī)體的有核細(xì)胞)中的表達(dá)載體亦可含有終止轉(zhuǎn)錄及穩(wěn)定mRNA所需的序列。所述序列一般可自真核生物或病毒DNA或cDNA的5'及偶而其3'非翻譯區(qū)獲得。所述區(qū)域含有在編碼抗IL-23P19抗體的mRNA的非翻譯部分中轉(zhuǎn)錄為聚腺苷酸化片段的核苷酸區(qū)段。一種可用的轉(zhuǎn)錄終止組分為牛生長(zhǎng)激素聚腺苷酸化區(qū)。參見WO94/11026及其中所公開的表達(dá)載體。在一些實(shí)施方案中，人源化抗IL-23P19抗體可使用CHEF系統(tǒng)來表達(dá)。(例如，參見美國(guó)專利第5,888,809號(hào)，其公開內(nèi)容為以引用方式并入本文中。)在本文載體中克隆或表達(dá)DNA的適宜的宿主細(xì)胞為上述原核細(xì)胞、酵母細(xì)胞或高等真核細(xì)胞。適用于此目的的原核生物包括真細(xì)菌，例如革蘭氏陰性或革蘭氏陽性有機(jī)體，例如：腸桿菌科(Enterobacteriaceae)，例如埃希氏菌屬(Escherichia)(例如大腸桿菌)、腸桿菌屬(Enterobacter)、歐文氏菌屬(Erwinia)、克雷伯氏菌屬(Klebsiella)、變形桿菌屬(Proteus)、沙門氏菌屬(Salmonella)(例如鼠傷寒沙門氏菌(Salmonellatyphimurium))、沙雷菌屬(例如黏質(zhì)沙雷氏菌(Serratiamarcescans))及志賀氏菌屬(Shigella)，以及桿菌屬(例如枯草芽孢桿菌(B.subtilis)及地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)(例如于1989年4月12日出版的DD266,710中所公開的地衣芽孢桿菌41P))、假單胞菌屬(Pseudomonas)(例如銅綠假單胞菌)及鏈霉菌屬(Streptomyces)。優(yōu)選的大腸桿菌克隆宿主為大腸桿菌294(ATCC31,446)，但其他菌株(例如大腸桿菌B、大腸桿菌X1776(ATCC31,537)及大腸桿菌W3110(ATCC27,325))亦適合。所述實(shí)施例為例示性而非限制性。除原核生物外，例如絲狀真菌或酵母等真核微生物亦為人源化抗IL-23P19抗體編碼載體的適宜的克隆或表達(dá)宿主。釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)或常見的面包酵母(baker'syeast)為最常用的低等真核宿主微生物。然而，一般可使用多種其他屬、種及菌株且可用于本文中，例如裂殖酵母菌(Schizosaccharomycespombe)；克魯維酵母屬宿主，例如乳酸克魯維酵母、脆壁克魯維酵母(K.fragilis)(ATCC12,424)、保加利亞克魯維酵母(K.bulgaricus)(ATCC16,045)、威克克魯維酵母(K.wickeramii)(ATCC24,178)、瓦爾特克魯維酵母(K.waltii)(ATCC56,500)、果蠅克魯維酵母(K.drosophilarum)(ATCC36,906)、耐熱克魯維酵母(K.thermotolerans)及馬科斯克魯維酵母(K.marxianus)；耶氏酵母屬(yarrowia)(EP402,226)；巴斯德畢赤酵母菌(Pichiapastoris)(EP183,070)；念珠菌屬(Candida)；里氏木霉菌(Trichodermareesia)(EP244,234)；粗糙鏈孢霉菌(Neurosporacrassa)；許旺酵母屬(Schwanniomyces)，例如西方許旺酵母(Schwanniomycesoccidentalis)；及絲狀真菌，例如鏈孢霉屬(Neurospora)、青霉屬(Penicillium)、彎頸霉屬(Tolypocladium)及曲霉菌屬(Aspergillus)宿主(例如構(gòu)巢曲霉(A.nidulans)及黑曲霉(A.niger))。表達(dá)糖基化人源化抗IL-23P19抗體的適宜宿主細(xì)胞得自多細(xì)胞有機(jī)體。無脊椎動(dòng)物細(xì)胞的實(shí)例包括植物及昆蟲細(xì)胞，包括(例如)多種桿狀病毒株及變體及來自例如以下宿主的相應(yīng)許可的昆蟲宿主細(xì)胞：草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)(毛蟲)、埃及伊蚊(Aedesaegypti)(蚊子)、白紋伊蚊(Aedesalbopictus)(蚊子)、黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)(果蠅)及家蠶(Bombyxmori)(蠶)。多種轉(zhuǎn)染用病毒株可自公開途徑獲得，例如苜蓿銀紋夜蛾(Autographacalifornica)NPV的L-1變體及家蠶NPV的Bm-5株，且所述病毒尤其可用于轉(zhuǎn)染草地貪夜蛾細(xì)胞。亦可采用棉花、玉米、馬鈴薯、大豆、矮牽?；?、西紅柿及煙草的植物細(xì)胞培養(yǎng)物作為宿主。在另一方面中，人源化抗IL-23P19的表達(dá)為在脊椎動(dòng)物細(xì)胞中實(shí)施。脊椎動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)(組織培養(yǎng))中的繁殖已成為常規(guī)操作且技術(shù)隨處可得?？捎貌溉閯?dòng)物宿主細(xì)胞系的實(shí)例為經(jīng)SV40轉(zhuǎn)化的猴腎CV1為(COS-7，ATCCCRL1651)、人胚腎系(293系或經(jīng)亞克隆以供在懸浮培養(yǎng)中生長(zhǎng)的293細(xì)胞，Graham等人，1977，J.GenVirol.36：59)、幼倉鼠腎細(xì)胞(BHK，ATCCCCL10)、中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞/-DHFR1(CHO，Urlaub等人，1980，Proc.Natl.Acad.Sci.USA77：4216；例如DG44)、小鼠睪丸支持細(xì)胞(TM4，Mather，1980，Biol.Reprod.23:243-251)、猴腎細(xì)胞(CV1ATCCCCL70)、非洲綠猴腎細(xì)胞(VERO-76，ATCCCRL-1587)、人宮頸癌細(xì)胞(HELA，ATCCCCL2)、犬腎細(xì)胞(MDCK，ATCCCCL34)、水牛鼠肝細(xì)胞(BRL3A，ATCCCRL1442)、人肺細(xì)胞(W138，ATCCCCL75)、人肝細(xì)胞(HepG2，HB8065)、小鼠乳房腫瘤(MMT060562，ATCCCCL51)、TR1細(xì)胞(Mather等人，1982，AnnalsN.Y.Acad.Sci.383：44-68)、MRC5細(xì)胞、FS4細(xì)胞及人肝細(xì)胞瘤系(HepG2)。用上述用于產(chǎn)生人源化抗IL-23P19抗體的表達(dá)或克隆載體來轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，并在常用營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所述營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基經(jīng)修改以適于誘導(dǎo)啟動(dòng)子、選擇轉(zhuǎn)化體或擴(kuò)增編碼期望序列的基因。可在多種培養(yǎng)基中培養(yǎng)用于產(chǎn)生本文所述人源化抗IL-23P19抗體的宿主細(xì)胞。市售培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)宿主細(xì)胞，例如Ham'sF10(Sigma-Aldrich公司，St.Louis，Mo.)、最小必需培養(yǎng)基((MEM)，Sigma-Aldrich公司)、RPMI-1640(Sigma-Aldrich公司)及達(dá)爾伯克氏改良的伊格爾氏培養(yǎng)基(Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium)((DMEM)，Sigma-Aldrich公司)。另外，可使用以下文獻(xiàn)中的一或多者闡述的任一培養(yǎng)基來作為宿主細(xì)胞的培養(yǎng)基：Ham等人，1979，Meth.Enz.58：44；Barnes等人，1980，Anal.Biochem.102：255；美國(guó)專利第4,767,704號(hào)、美國(guó)專利第4,657,866號(hào)、美國(guó)專利第4,927,762號(hào)、美國(guó)專利第4,560,655號(hào)、美國(guó)專利第5,122,469號(hào)、WO90/103430及WO87/00195。所述培養(yǎng)基中的任一者可根據(jù)需要補(bǔ)加有激素和/或其他生長(zhǎng)因子(例如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白或表皮生長(zhǎng)因子)、鹽(例如氯化鈉、鈣鹽、鎂鹽及磷酸鹽)、緩沖液(例如HEPES)、核苷酸(例如腺苷及胸苷)、抗生素(例如慶大霉素)、痕量元素(定義為通常以微摩爾范圍的最終濃度存在的無機(jī)化合物)及葡萄糖或等效能源。亦可以包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適當(dāng)濃度的其他補(bǔ)加物。例如溫度、pH等培養(yǎng)條件為那些先前用于所選表達(dá)用宿主細(xì)胞的條件，且對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。在使用重組技術(shù)時(shí)，抗體可在細(xì)胞內(nèi)、在壁膜間隙中產(chǎn)生，或直接分泌至培養(yǎng)基中。若在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生抗體，則作為第一步驟可使細(xì)胞破裂以釋放蛋白?？赏ㄟ^離心或超濾移除微粒碎片，即宿主細(xì)胞或溶解片段。Carter等人，1992，Bio/Technology10:163-167闡述分離分泌至大腸桿菌壁膜間隙中的抗體的操作。簡(jiǎn)言之，在乙酸鈉(pH3.5)、EDTA及苯甲磺酰氟(PMSF)存在下經(jīng)約30分鐘使細(xì)胞糊劑解凍?？赏ㄟ^離心移除細(xì)胞碎片。倘若抗體分泌至培養(yǎng)基中，則通常首先使用市售蛋白濃縮濾器(例如Amicon或MilliporePellicon超濾單元)濃縮來自所述表達(dá)系統(tǒng)的上清液。在任一前述步驟中可包括例如PMSF等蛋白酶抑制劑以抑制蛋白水解，且可包括抗生素以防止外來污染物生長(zhǎng)?？墒褂枚喾N方法自宿主細(xì)胞分離抗體?？墒褂?例如)羥基磷灰石色譜、凝膠電泳、透析及親和色譜來純化自細(xì)胞制備的抗體組合物，其中親和色譜為常用純化技術(shù)。蛋白A作為親和配體的適合性取決于存在于抗體中的任一免疫球蛋白Fc域的物種及同種型。蛋白A可用于純化基于人γ1、γ2或γ4重鏈的抗體(例如，參見Lindmark等人，1983J.Immunol.Meth.62:1-13)。推薦蛋白G用于所有小鼠同種型及人γ3(例如，參見Guss等人，1986EMBOJ.5:1567-1575)。親和配體所附接的基質(zhì)最經(jīng)常為瓊脂糖，但亦可使用其他基質(zhì)。機(jī)械上穩(wěn)定的基質(zhì)(例如可控多孔玻璃或聚(苯乙烯二乙烯基)苯)使得可達(dá)成較使用瓊脂糖更快的流速及更短的處理時(shí)間。倘若抗體包含CH3域，則BakerbondABXTM樹脂(J.T.Baker，Phillipsburg，N.J.)可用于純化。取決于欲回收的抗體，亦可使用其他蛋白純化技術(shù)，例如離子交換柱分級(jí)分離、乙醇沉淀、反相HPLC、硅膠色譜、肝素SEPHAROSETM色譜、陰離子或陽離子交換樹脂(例如聚天冬氨酸柱)色譜、色譜聚焦、SDS-PAGE及硫酸銨沉淀。在任何初步純化步驟后，可使用pH介于約2.5至4.5之間的洗脫緩沖液對(duì)包含目標(biāo)抗體及污染物的混合物實(shí)施低pH疏水相互作用色譜，其通常在低鹽濃度(例如，約0-0.25M鹽)下實(shí)施。亦包括在如本文定義的低、中及高嚴(yán)格度條件下與由編碼本發(fā)明的抗體或抗體片段的分離的聚核苷酸序列表示的核苷酸序列的全部或一部分(例如編碼可變區(qū)的部分)發(fā)生雜交的核酸。雜交核酸的雜交部分通常長(zhǎng)至少15個(gè)(例如，20個(gè)、25個(gè)、30個(gè)或50個(gè))核苷酸。雜交核酸的雜交部分與編碼抗IL-23P19多肽(例如，重鏈或輕鏈可變區(qū))或其補(bǔ)體的核酸的一部分或全部的序列至少80%(例如至少90%、至少95%或至少98%)一致。本文所述類型的雜交核酸可用作(例如)克隆探針、引物(例如PCR引物)或診斷探針。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼氨基酸序列為SEQIDNO:84、86、88、90、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117或119的任一者的抗體或抗體片段的序列；及與聚核苷酸序列SEQIDNO:83、85、87、89、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116或118至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的序列。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼氨基酸序列為SEQIDNO:158、160、162或164的任一者的抗體或抗體片段的序列；及與聚核苷酸序列SEQIDNO:157、159、161或163至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的序列。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼氨基酸序列為SEQIDNO:121、123、125、127、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154或156的任一者的抗體或抗體片段的序列；及與聚核苷酸序列SEQIDNO:120、122、124、126、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153或155至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的序列。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼氨基酸序列為SEQIDNO:166、168、170或172的任一者的抗體或抗體片段的序列；及與聚核苷酸序列SEQIDNO:165、167、169或171至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的序列。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼輕鏈可變區(qū)氨基酸序列與氨基酸序列SEQIDNO:84、86、88、90、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117或119的任一者至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的抗體或抗體片段的序列。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼輕鏈可變區(qū)氨基酸序列與氨基酸序列SEQIDNO:158、160、162或164的任一者至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的抗體或抗體片段的序列。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼重鏈可變區(qū)氨基酸序列與氨基酸序列SEQIDNO:121、123、125、127、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154或156的任一者至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的抗體或抗體片段的序列。一些實(shí)施方案包括分離的聚核苷酸，其包含編碼重鏈可變區(qū)氨基酸序列與氨基酸序列SEQIDNO:166、168、170或172的任一者至少80%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%一致的抗體或抗體片段的序列。本文所用術(shù)語“一致”或“一致性百分比”在兩個(gè)或更多個(gè)核酸或多肽序列的上下文中是指兩個(gè)或更多個(gè)序列或子序列在進(jìn)行對(duì)比及對(duì)齊(以獲得最大對(duì)應(yīng)性)時(shí)相同或有指定百分比的核苷酸或氨基酸殘基相同。為測(cè)定一致性百分比，將序列對(duì)齊以達(dá)成最佳對(duì)比目的(例如，可在第一氨基酸或核酸序列中引入空位以與第二氨基酸或核酸序列達(dá)成最佳對(duì)齊)。然后對(duì)比對(duì)應(yīng)氨基酸位置或核苷酸位置處的氨基酸殘基或核苷酸。若第一序列中的位置與第二序列中的對(duì)應(yīng)位置由相同氨基酸殘基或核苷酸占據(jù)，則所述分子在該位置處一致。兩個(gè)序列之間的一致性百分比為所述序列所共有的一致性位置數(shù)目的函數(shù)(即，一致性%=一致性位置數(shù)/總位置數(shù)(例如，重疊位置數(shù))x100)。在一些實(shí)施方案中，所對(duì)比兩個(gè)序列在合適時(shí)(例如，不包括延伸出所對(duì)比序列外的額外序列)于序列內(nèi)引入空位后長(zhǎng)度相同。例如，在對(duì)比可變區(qū)序列時(shí)，不考慮前導(dǎo)序列和/或恒定域序列。在兩個(gè)序列之間的序列對(duì)比中，“對(duì)應(yīng)”CDR是指兩個(gè)序列中相同位置處的CDR(例如，每一序列的CDR-H1)。兩個(gè)序列之間一致性百分比或相似性百分比的測(cè)定可使用數(shù)學(xué)算法來完成。用于對(duì)比兩個(gè)序列的數(shù)學(xué)算法的優(yōu)選非限制性實(shí)例為Karlin及Altschul的算法(1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:2264-2268)，其根據(jù)Karlin及Altschul，1993，Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:5873-5877加以修改。此一算法已納入Altschul等人的NBLAST及XBLAST程序中(1990，J.Mol.Biol.215:403-410)。BLAST核苷酸搜索可用NBLAST程序(分?jǐn)?shù)=100，字長(zhǎng)=12)來實(shí)施，從而獲得與編碼目標(biāo)蛋白的核酸同源的核苷酸序列。BLAST蛋白搜索可用XBLAST程序(分?jǐn)?shù)=50，字長(zhǎng)=3)來實(shí)施，從而獲得與目標(biāo)蛋白同源的氨基酸序列。出于對(duì)比目的，為獲得加空位對(duì)齊，可如Altschul等人，1997，NucleicAcidsRes.25:3389-3402中所述來利用GappedBLAST?；蛘撸墒褂肞SI-Blast來實(shí)施迭代搜索，其檢測(cè)分子之間的遠(yuǎn)距離聯(lián)系(同一文獻(xiàn))。在利用BLAST、GappedBLAST及PSI-Blast程序時(shí)，可使用各程序(例如，XBLAST及NBLAST)的預(yù)設(shè)參數(shù)。用于對(duì)比序列的另一優(yōu)選非限制性實(shí)例為Myers及Miller的算法(CABIOS(1989))。此一算法已納入ALIGN程序(2.0版)中，其為GCG序列對(duì)齊軟件包的一部分。在利用對(duì)齊程序來對(duì)比氨基酸序列時(shí)，可使用PAM120加權(quán)殘差表、等于12的空位長(zhǎng)度罰分及等于4的空位罰分。用于序列分析的其他算法為本領(lǐng)域已知且包括ADVANCE及ADAM，如Torellis及Robotti，1994，Comput.Appl.Biosci.10:3-5中所述；及FASTA，如Pearson及Lipman，1988，Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:2444-8中所述。在FASTA內(nèi)，ktup為設(shè)定靈敏度及搜索速度的控制選項(xiàng)。若ktup=2，則通過檢查對(duì)齊殘基對(duì)來發(fā)現(xiàn)所對(duì)比兩個(gè)序列中的相似區(qū)域；若ktup=1，則檢查單一對(duì)齊氨基酸。對(duì)于蛋白序列，可將ktup設(shè)定為2或1，或?qū)τ贒NA序列設(shè)定為1至6。若未指定ktup，則對(duì)于蛋白默認(rèn)值為2且對(duì)于DNA默認(rèn)值為6?；蛘?，蛋白序列對(duì)齊可使用CLUSTALW算法來實(shí)施，如Higgins等人，1996，MethodsEnzymol.266:383-402所述。非治療性用途本文所述抗體可用作親和純化劑。在此方法中，使用本領(lǐng)域熟知方法將抗體固定在例如蛋白A樹脂等固相上。使固定抗體與含有欲純化IL-23P19蛋白(或其片段)的樣品接觸，且隨后用適宜溶劑洗滌載體，從而可移除樣品中除與固定抗體結(jié)合的IL-23P19蛋白以外的基本上所有物質(zhì)。最后，用另一適宜溶劑洗滌載體，從而可自抗體釋放IL-23P19蛋白?？笽L-23p19抗體，例如人源化抗IL-23p19抗體亦適用于診斷分析中以檢測(cè)及/或定量測(cè)定IL-23蛋白，例如檢測(cè)特定細(xì)胞、組織或血清中的IL-23表達(dá)?？笽L-23p19抗體可診斷性用于例如監(jiān)測(cè)疾病的顯現(xiàn)或進(jìn)展作為臨床測(cè)試程序的一部分以例如確定給定治療及/或預(yù)防方案的功效。檢測(cè)可通過偶合抗IL-23p19抗體加以促進(jìn)。可檢測(cè)物質(zhì)的實(shí)例包括各種酶、輔基、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、生物發(fā)光物質(zhì)、放射性物質(zhì)、使用各種正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)的正電子發(fā)射金屬、及非放射性順磁性金屬離子。關(guān)于可與本發(fā)明的適用作診斷劑的抗體結(jié)合的金屬離子，參見例如美國(guó)專利第4,741,900號(hào)?？笽L-23p19抗體可用于診斷IL-23相關(guān)病癥(例如特征在于IL-23的表達(dá)異常的病癥)或確定個(gè)體出現(xiàn)IL-23相關(guān)病癥的風(fēng)險(xiǎn)是否增加的方法中。這些方法包括使來自個(gè)體的生物樣品與IL-23p19抗體接觸并檢測(cè)抗體與IL-23p19的結(jié)合?！吧飿悠贰笔侵缸詡€(gè)體、細(xì)胞系、組織培養(yǎng)物或潛在表達(dá)IL-23的其它細(xì)胞來源獲得的任何生物樣品。用于自哺乳動(dòng)物獲得組織活檢及體液的方法在本領(lǐng)域中為熟知的。在一些實(shí)施方案中，該方法可另外包括比較患者樣品中的IL-23含量與對(duì)照樣品(例如不患有IL-23相關(guān)病癥的個(gè)體)中的IL-23含量，以確定患者是否患有IL-23相關(guān)病癥或處于顯現(xiàn)IL-23相關(guān)病癥的風(fēng)險(xiǎn)中。在一些實(shí)施方案中，例如出于診斷性目的，可有利地用可檢測(cè)部分標(biāo)記抗體?？墒褂枚喾N可檢測(cè)標(biāo)記，包括放射性同位素、熒光標(biāo)記、酶底物標(biāo)記等?？墒褂枚喾N已知技術(shù)使標(biāo)記與抗體間接綴合。例如，可使抗體與生物素綴合，且可使上文所述三大類標(biāo)記中的任一種與抗生物素蛋白綴合，或反之亦然。生物素選擇性地與抗生物素蛋白結(jié)合，且該標(biāo)記由此可以以該間接方式與抗體綴合。或者，為達(dá)成標(biāo)記與抗體之間接綴合，可使抗體與較小半抗原(例如地高辛(digoxin))綴合且使一種不同類型的上述標(biāo)記與抗半抗原抗體(例如，抗地高辛抗體)綴合。由此，可達(dá)成標(biāo)記與抗體之間接綴合。示例性放射性同位素標(biāo)記包括35S、14C、125I、3H及131I。使用(例如)以下文獻(xiàn)中所述的技術(shù)可用放射性同位素標(biāo)記抗體：CurrentProtocolsinImmunology，第1及2卷，1991，Coligen等人編輯，Wiley-Interscience，NewYork，N.Y.，Pubs。可通過(例如)閃爍計(jì)數(shù)來測(cè)量放射性。示例性熒光標(biāo)記包括得自以下的標(biāo)記：稀土螯合物(銪螯合物)或熒光素及其衍生物、羅丹明(rhodamine)及其衍生物、丹磺酰(dansyl)、麗絲胺(Lissamine)、藻紅蛋白及得克薩斯紅(TexasRed)?？山?jīng)由已知技術(shù)使熒光標(biāo)記與抗體綴合，例如CurrentProtocolsinImmunology(上述文獻(xiàn))中所公開的那些。可使用熒光計(jì)來定量測(cè)量熒光。本領(lǐng)域已知多種經(jīng)充分表征的酶-底物標(biāo)記(例如，綜述參見美國(guó)專利第4,275,149號(hào))。酶一般催化發(fā)色底物發(fā)生可使用各種技術(shù)測(cè)量的化學(xué)改變。例如，改變可為可以以分光光度計(jì)法測(cè)量的底物顏色變化?；蛘撸缚筛淖兊孜锏臒晒饣蚧瘜W(xué)發(fā)光。量化熒光變化的技術(shù)如上文所述。化學(xué)發(fā)光底物可通過化學(xué)反應(yīng)經(jīng)電子激發(fā)，隨后可發(fā)射可使用(例如)化學(xué)發(fā)光計(jì)測(cè)量的光線或向熒光受體提供能量。酶標(biāo)記的實(shí)例包括螢光素酶(例如螢火蟲螢光素酶及細(xì)菌螢光素酶，美國(guó)專利第4,737,456號(hào))、螢光素、2,3-二氫酞嗪二酮、蘋果酸脫氫酶、脲酶、過氧化物酶(例如辣根過氧化物酶(HRPO))、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、葡糖淀粉酶、溶菌酶、糖氧化酶(例如葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶)、雜環(huán)氧化酶(例如尿酸酶及黃嘌呤氧化酶)、乳過氧化物酶、微過氧化物酶等。綴合酶與抗體的技術(shù)闡述于(例如)以下文獻(xiàn)中：O'Sullivan等人，1981，MethodsforthePreparationofEnzyme-AntibodyConjugatesforuseinEnzymeImmunoassay，MethodsinEnzym.(J.Langone及H.VanVunakis編輯)，Academicpress，N.Y.，73：147-166。酶-底物組合的實(shí)例包括(例如)：辣根過氧化物酶(HRPO)與作為底物的過氧化氫酶，其中過氧化氫酶氧化染料前體(例如鄰苯二胺(OPD)或3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽(TMB))；堿性磷酸酶(AP)與作為發(fā)色底物的磷酸對(duì)硝基苯酯；及β-D-半乳糖苷酶(β-D-Gal)與發(fā)色底物(例如對(duì)硝基苯基-β-D-半乳糖苷酶或熒光底物4-甲基傘形酮-β-D-半乳糖苷酶)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可了解多種其他酶-底物組合。所述組合的一般綜述參見美國(guó)專利第4,275,149號(hào)及美國(guó)專利第4,318,980號(hào)。在另一實(shí)施方案中，使用未標(biāo)記人源化抗IL-23P19抗體且用結(jié)合該人源化抗IL-23P19抗體的經(jīng)標(biāo)記抗體來檢測(cè)。本文所述抗體可用于任一已知分析方法中，例如競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合分析、直接及間接夾心(sandwich)分析及免疫沉淀分析。例如，參見Zola，MonoclonalAntibodies：AManualofTechniques，第147-158頁(CRCPress公司，1987)。抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段可用于抑制IL-23與IL-23受體的結(jié)合。這些方法包括向細(xì)胞(例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)或細(xì)胞環(huán)境給予抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，由此抑制由IL-23受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)。這些方法可在活體外或在活體內(nèi)進(jìn)行。“細(xì)胞環(huán)境”是指組織、培養(yǎng)基或包圍細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)。向細(xì)胞的細(xì)胞環(huán)境給予抗IL-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段，以使得該抗體或片段能夠與在細(xì)胞外部及環(huán)繞細(xì)胞的IL-23分子結(jié)合，從而阻止IL-23與其受體結(jié)合。診斷試劑盒抗IL-23P19抗體可用于診斷試劑盒中，即預(yù)定量試劑與實(shí)施診斷分析的說明書的經(jīng)包裝組合。倘若用酶標(biāo)記抗體，則試劑盒可包括酶所需底物及輔因子(例如提供可檢測(cè)發(fā)色團(tuán)或熒光團(tuán)的底物前體)。另外，可包括其他添加劑，例如穩(wěn)定劑、緩沖劑(例如封阻緩沖劑或溶胞緩沖劑)等。各種試劑的相對(duì)量可大幅變化以使所述試劑在溶液中的濃度可顯著優(yōu)化分析的靈敏度。試劑可以干粉形式(通常經(jīng)凍干)提供，其包括在溶解后可使試劑溶液具有適宜濃度的賦形劑。治療性用途在另一實(shí)施方案中，本文所公開人源化抗IL-23P19抗體可用于治療如本文所述各種與IL-23P19的表達(dá)有關(guān)的病癥。用于治療IL-23相關(guān)病癥的方法包括向有需要的個(gè)體給予治療有效量的人源化抗IL-23p19抗體。人源化抗IL-23P19抗體或藥物通過任何適宜方式來給予，包括腸胃外、皮下、腹膜內(nèi)、肺內(nèi)及鼻內(nèi)，且若需要局部免疫抑制治療，則實(shí)施病灶內(nèi)給予(包括灌注或以其他方式使移植物在移植前與抗體接觸)。人源化抗IL-23P19抗體或藥物可以(例如)輸注或推注形式來給予。腸胃外輸注包括肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下給予。另外，人源化抗IL-23P19抗體通過脈沖輸注適當(dāng)給予，尤其是以抗體的遞減劑量來給予。在一方面中，通過注射來實(shí)施給藥，最優(yōu)選通過靜脈內(nèi)或皮下注射來給藥，這部分地取決于給予是短期給予還是長(zhǎng)期給予。在預(yù)防或治療疾病時(shí)，抗體的適宜劑量可取決于多種因素，例如如上文所定義欲治療疾病的類型、疾病的嚴(yán)重程度及病程、給予抗體的目的是預(yù)防性還是治療性、先前治療、患者臨床史及對(duì)抗體的反應(yīng)，以及主治醫(yī)師的決定?？贵w一次性給予或經(jīng)一系列治療以適當(dāng)方式給予患者。取決于疾病類型及嚴(yán)重程度，不論(例如)通過一或多次分開給予還是通過連續(xù)輸注來給予，向患者給予的抗體初始候選劑量為約1μg/kg至20mg/kg(例如0.1-15mg/kg)。取決于上文所提及的因素，典型日劑量可介于約1μg/kg至100mg/kg或更高范圍內(nèi)。對(duì)于經(jīng)數(shù)天或更長(zhǎng)時(shí)間重復(fù)給予，取決于病況，持續(xù)治療直至疾病癥狀出現(xiàn)所期望的抑制。然而，可使用其他劑量方案。此療法的進(jìn)展可通過常用技術(shù)及分析容易地監(jiān)測(cè)。示例性劑量方案公開于WO94/04188中。本文所用術(shù)語“抑制”在與“改善”及“減輕”相同的背景中意指減少疾病的一或多個(gè)特征?？梢耘c良好醫(yī)療實(shí)踐一致的方式對(duì)抗體組合物進(jìn)行調(diào)配、配量及給予。在此上下文中需考慮的因素包括所治療的特定病癥、所治療的特定哺乳動(dòng)物、個(gè)體患者的臨床病況、病因、藥物的遞送位點(diǎn)、給予方法、給予時(shí)間安排及從業(yè)醫(yī)師所知的其他因素。欲給予抗體的“治療有效量”可取決于所述因素，且為預(yù)防、改善或治療與IL-23表達(dá)有關(guān)的病癥所需的最小量?？贵w不必(但任選)與一或多種當(dāng)前用于預(yù)防或治療所述病癥的藥物一起調(diào)配。所述其他藥物的有效量取決于人源化抗IL-23P19抗體存在于調(diào)配物中的量、病癥或治療的類型及上述其他因素。所述其他藥物通常以與上文所用相同的劑量及給予途徑來使用或?yàn)樯衔乃脛┝康募s1%至99%。IL-23相關(guān)病癥抗IL-23p19抗體或藥劑適用于治療或預(yù)防特征在于例如因免疫細(xì)胞(例如淋巴細(xì)胞或樹突狀細(xì)胞)活化不當(dāng)所致的IL-23表達(dá)異常的免疫病癥。此IL-23異常表達(dá)可歸因于例如IL-23蛋白含量增加?？笽L-23p19抗體或其抗原結(jié)合片段亦可用于治療或預(yù)防呼吸系統(tǒng)病癥、代謝障礙(例如糖尿病)及某些癌癥。根據(jù)本文所述的方法治療或預(yù)防免疫病癥、呼吸系統(tǒng)病癥、代謝障礙或癌癥，是通過向需要此治療或預(yù)防的個(gè)體給予有效量的抗IL-23p19抗體或藥劑，由此抗體使與疾病狀態(tài)相關(guān)的IL-23的活性降低來達(dá)成的。特征為免疫細(xì)胞的不當(dāng)活化且可通過本文所述方法來治療或預(yù)防的免疫疾病可根據(jù)(例如)該病癥的基礎(chǔ)超敏反應(yīng)的類型來分類。所述反應(yīng)通?？煞譃樗念悾哼^敏性反應(yīng)、細(xì)胞毒性(細(xì)胞溶解性)反應(yīng)、免疫復(fù)合物反應(yīng)或細(xì)胞介導(dǎo)的免疫(CMI)反應(yīng)(亦稱作遲發(fā)型超敏(DTH)反應(yīng))。(例如，參見FundamentalImmunology(WilliamE.Paul編輯，RavenPress，N.Y.，第3版，1993))。免疫疾病包括炎性疾病及自身免疫疾病。所述免疫疾病的具體實(shí)例包括以下疾?。侯愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性脫髓鞘疾病(例如，多發(fā)性硬化、過敏性腦脊髓炎)、內(nèi)分泌性眼病、葡萄膜視網(wǎng)膜炎、全身性紅斑狼瘡、重癥肌無力、格雷夫斯氏病(Grave'sdisease)、腎小球腎炎、自身免疫性血液病、炎性腸病(例如，克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)、過敏反應(yīng)、過敏性反應(yīng)、Sjogren氏綜合征、I型糖尿病、原發(fā)性膽汁性肝硬化、韋格納氏肉芽腫病(Wegener'sgranulomatosis)、纖維肌痛、多發(fā)性肌炎、皮肌炎、炎癥肌炎、多發(fā)性內(nèi)分泌不足、施密特氏綜合征(Schmidt'ssyndrome)、自身免疫性葡萄膜炎、艾迪生氏病、腎上腺炎、甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、自身免疫性甲狀腺病、惡性貧血、胃萎縮、慢性肝炎、類狼瘡性肝炎、動(dòng)脈粥樣硬化、亞急性皮膚紅斑狼瘡、甲狀旁腺功能減退、德雷斯勒氏綜合征(Dressler'ssyndrome)、自身免疫性血小板減少癥、特發(fā)性血小板減少性紫癜、溶血性貧血、尋常天皰瘡、天皰瘡、皰疹樣皮炎、斑禿、類天皰瘡、硬皮癥、進(jìn)行性全身性硬化癥、CREST綜合征(鈣質(zhì)沉著癥、雷諾現(xiàn)象(Raynaud'sphenomenon)、食管活動(dòng)不良、指端硬化及毛細(xì)管擴(kuò)張)、雄性及雌性自身免疫性不育、強(qiáng)直性脊柱炎、潰瘍性結(jié)腸炎、混合性結(jié)締組織病、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、全身性壞死性血管炎、特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性鼻炎、古德帕斯丘氏綜合征(Goodpasture'ssyndrome)、恰加斯氏病(Chagas'disease)、肉樣瘤病、風(fēng)濕熱、哮喘、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、抗磷脂綜合征、農(nóng)民肺(farmer'slung)、多形紅斑、心臟切開術(shù)后綜合征、柯興綜合征(Cushing'ssyndrome)、自身免疫性慢性活動(dòng)性肝炎、養(yǎng)鳥人肺、中毒性表皮壞死溶解癥、阿爾波特氏綜合征(Alport'ssyndrome)、肺泡炎、過敏性肺泡炎、纖維化肺泡炎、間質(zhì)性肺病、結(jié)節(jié)性紅斑、壞疽性膿皮病、輸血反應(yīng)、高安動(dòng)脈炎(Takayasu'sarteritis)、風(fēng)濕性多肌痛、顳動(dòng)脈炎、血吸蟲病、巨細(xì)胞動(dòng)脈炎、蛔蟲病、曲霉菌病、阿司匹林三聯(lián)癥(Sampter'ssyndrome)、濕疹、淋巴瘤樣肉芽腫病、貝切特氏病(Behcet'sdisease)、卡普蘭綜合征(Caplan'ssyndrome)、川崎病(Kawasaki'sdisease)、登革熱(dengue)、腦脊髓炎、心內(nèi)膜炎、心內(nèi)膜心肌纖維化癥、眼內(nèi)炎、持久性隆起性紅斑、牛皮癬、牛皮癬關(guān)節(jié)炎、胎兒成紅細(xì)胞增多癥、嗜酸細(xì)胞性筋膜炎、輸血后紫癜綜合征(Shulman'ssyndrome)、費(fèi)爾蒂綜合征(Felty'ssyndrome)、絲蟲病、睫狀體炎、慢性睫狀體炎、異色睫狀體炎、?？怂菇逘铙w炎(Fuch'scyclitis)、IgA腎病、亨-舍二氏紫癜(Henoch-Schonleinpurpura)、移植物抗宿主病、移植排斥、心肌病、肌無力綜合征(Eaton-Lambertsyndrome)、復(fù)發(fā)性多軟骨炎、冷球蛋白血癥、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥(Waldenstrom'smacroglobulemia)、埃文斯綜合征(Evan'ssyndrome)、急性呼吸窘迫綜合征、肺炎癥、骨質(zhì)疏松、遲發(fā)型超敏反應(yīng)及自身免疫性性腺衰竭。在一些實(shí)施方案中，免疫病癥為T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫病癥，且因此如本文所述的抗IL-23p19抗體及藥劑亦適用于治療或預(yù)防T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫病癥。在一個(gè)方面中，抗IL-23p19抗體或藥劑適用于治療或預(yù)防IL-23異常表達(dá)的呼吸系統(tǒng)病癥。根據(jù)本文所述的方法治療或預(yù)防呼吸系統(tǒng)病癥，是通過向需要此治療或預(yù)防的個(gè)體給予有效量的抗IL-23p19抗體或藥劑，由此抗體使與疾病狀態(tài)相關(guān)的IL-23活性降低來達(dá)成的。這些病癥包括(但不限于)：呼吸系統(tǒng)病、各種起因的阻塞性肺病、各種起因的肺氣腫、限制性肺病、間質(zhì)性肺病(interstitialpulmonarydisease/interstitiallungdisease)、囊腫性纖維化、各種起因的支氣管炎、支氣管擴(kuò)張癥、ARDS(成人呼吸窘迫綜合征)及所有形式的肺水腫；選自COPD(慢性阻塞性肺病)的阻塞性肺病、哮喘、支氣管哮喘、兒科哮喘、重度哮喘、急性哮喘發(fā)作及慢性支氣管炎；起源于COPD(慢性阻塞性肺病)或α1-蛋白酶抑制劑缺乏的肺氣腫；選自過敏性肺泡炎的限制性肺病、由工作相關(guān)的有害物質(zhì)引發(fā)的限制性肺病(例如石棉肺(asbestosis)或矽肺病(silicosis))、及由肺腫瘤(例如癌性淋巴管癥(lymphangiosiscarcinomatosa)、支氣管肺泡癌及淋巴瘤)引起的限制；由感染，例如病毒、細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物、蠕蟲或其它病原體感染引起的肺炎；由各種因素，例如吸氣及左心功能不全引起的肺炎；輻射誘發(fā)的肺炎或纖維化、膠原癥(例如紅斑狼瘡、全身性硬皮病或類肉瘤病)、肉芽腫(例如伯克氏病(Boeck'sdisease)、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎或特發(fā)性肺纖維化(IPF))；黏液阻塞癥(mucoviscidosis)、由細(xì)菌或病毒感染引起的支氣管炎、過敏性支氣管炎及中毒性支氣管炎；支氣管擴(kuò)張癥；肺水腫，例如在吸入有毒物質(zhì)及外來物質(zhì)之后的中毒性肺水腫；鼻炎、關(guān)節(jié)炎及相關(guān)關(guān)節(jié)病、牛皮癬、骨髓性白血病、多發(fā)性硬化、阿茲海默氏病(Alzheimer'sdisease)、腎小球腎炎及慢性異位性皮膚炎。在另一方面中，如本文所述的抗IL-23p19抗體及藥劑亦適用于治療IL-23異常表達(dá)的癌癥?？赏ㄟ^本文所述的方法治療的IL-23表達(dá)性癌癥包括(例如)白血病，例如急性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓細(xì)胞性白血病(例如，成髓細(xì)胞性白血病、前髓細(xì)胞性白血病、骨髓單核細(xì)胞性白血病、單核細(xì)胞性白血病或紅白血病)、慢性白血病、慢性髓細(xì)胞性(粒細(xì)胞性)白血病或慢性淋巴細(xì)胞性白血病；真性紅細(xì)胞增多癥；淋巴瘤(例如，霍奇金氏病或非霍奇金氏病)；多發(fā)性骨髓瘤、瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血癥；重鏈病；實(shí)體腫瘤，例如肉瘤及癌瘤(例如，纖維肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、成骨性肉瘤、骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因氏腫瘤(Ewing'stumor)、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、肝癌、膽管癌、絨毛膜癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎性癌、維爾姆斯氏腫瘤(Wilms'tumor)、宮頸癌、子宮癌、睪丸瘤、肺癌、小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細(xì)胞瘤、聽神經(jīng)瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦膜瘤(menangioma)、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、鼻咽癌或食管癌)。藥物組合物及其給藥可將包含IL-23p19結(jié)合劑(例如抗IL-23p19抗體)的組合物給予患有免疫病癥、呼吸系統(tǒng)病癥或癌癥或處于患有免疫病癥、呼吸系統(tǒng)病癥或癌癥的風(fēng)險(xiǎn)中的個(gè)體。本發(fā)明另外提供IL-23P19結(jié)合劑(例如，抗IL-23P19抗體)在制備用于預(yù)防或治療表達(dá)IL-23P19的癌癥或免疫病癥的藥物中的用途。本文所用術(shù)語“個(gè)體”意指可給予IL-23P19結(jié)合劑的任何哺乳動(dòng)物患者，包括(例如)人及非人哺乳動(dòng)物，例如靈長(zhǎng)類動(dòng)物、嚙齒類動(dòng)物及狗。明確意欲使用本文所述方法治療的個(gè)體包括人。在免疫病癥或表達(dá)IL-23P19的癌癥的預(yù)防或治療中，抗體或藥物可單獨(dú)或與其他組份組合給予?？膳c抗體或藥劑組合給予的這些組份包括甲胺喋呤(MTX)及免疫調(diào)節(jié)劑，例如抗體或小分子。用于這些藥物組合物中的抗體的實(shí)例為包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQIDNO:84、86、88、90、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117或119的任一者的人源化抗體或抗體片段的抗體。用于這些藥物組合物中的抗體的實(shí)例亦為包含重鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQIDNO:121、123、125、127、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154或156的任一者的人源化抗體或抗體片段的抗體。用于這些藥物組合物中的抗體的其它實(shí)例亦為包含輕鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQIDNO:158、160、162或164的任一者的人源化抗體或抗體片段的抗體。用于這些藥物組合物中的優(yōu)選抗體亦為包含重鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQIDNO:166、168、170或172的任一者的人源化抗體或抗體片段的抗體。用于這些藥物組合物中的抗體的其它實(shí)例亦為包含輕鏈可變區(qū)及重鏈可變區(qū)為SEQIDNO:160及166、SEQIDNO:160及168、SEQIDNO:158及166或SEQIDNO:158及168的任一者的人源化抗體或抗體片段的抗體。用于這些藥物組合物中的抗體的其它實(shí)例亦為包含輕鏈區(qū)氨基酸序列為SEQIDNO:174或180的任一者的人源化抗體的抗體。用于這些藥物組合物中的優(yōu)選抗體亦為包含重鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQIDNO:176或178的任一者的人源化抗體的抗體。用于這些藥物組合物中的抗體的其它實(shí)例亦為包含抗體A、抗體B、抗體C或抗體D的抗體。已知且可使用多種遞送系統(tǒng)來給予IL-23P19結(jié)合劑。引入方法包括(但不限于)真皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)、硬膜外及經(jīng)口途徑。IL-23P19結(jié)合劑可通過(例如)輸注、推注或注射來給予，且可與例如化學(xué)治療藥物等其他生物活性劑一起給予。給予可為全身性或局部給予。在優(yōu)選實(shí)施方案中，通過皮下注射來給予?？稍?例如)預(yù)填充注射器中制備用于所述注射的調(diào)配物，其可每隔一周給予一次。在具體實(shí)施方案中，IL-23P19結(jié)合劑組合物為通過注射、借助導(dǎo)管、借助栓劑或借助植入體來給予，該植入體為有孔、無孔或凝膠狀材料，其包括例如硅橡膠膜等膜或纖維。通常，在給予組合物時(shí)，使用抗IL-23P19抗體或藥物不能吸附的材料。在其他實(shí)施方案中，抗IL-23P19抗體或藥物以控釋系統(tǒng)來遞送。在一實(shí)施方案中，可使用泵(例如，參見Langer，1990，Science249:1527-1533；Sefton，1989，CRCCrit.Ref.Biomed.Eng.14:201；Buchwald等人，1980，Surgery88:507；Saudek等人，1989，N.Engl.J.Med.321:574)。在另一實(shí)施方案中，可使用聚合材料。(例如，參見MedicalApplicationsofControlledRelease(Langer及Wise編輯，CRCPress，BocaRaton，F(xiàn)la.，1974)；ControlledDrugBioavailability，DrugProductDesignandPerformance(Smolen及Ball編輯，Wiley，NewYork，1984)；Ranger及Peppas，1983，Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23:61。亦參見Levy等人，1985，Science228:190；During等人，1989，Ann.Neurol.25:351；Howard等人，1989，J.Neurosurg.71:105。)其他控釋系統(tǒng)論述于(例如)Langer(上述文獻(xiàn))中。IL-23P19結(jié)合劑(例如，抗IL-23P19抗體)可以包含治療有效量的結(jié)合劑及一或多種藥學(xué)上相容的成分的藥物組合物形式來給予。在典型實(shí)施方案中，根據(jù)常規(guī)操作將藥物組合物調(diào)配為適用于靜脈內(nèi)或皮下給予人的藥物組合物。通常，注射給予用組合物為存在于無菌等滲水性緩沖液中的溶液。若需要，藥物亦可包括增溶劑及局部麻醉劑(例如利諾卡因(lignocaine))以減輕注射位點(diǎn)的疼痛。通常，各成分單獨(dú)或混合在一起以單位劑型來供應(yīng)，例如，作為凍干干粉或無水濃縮物存在于例如安瓿或藥囊等標(biāo)明活性劑的量的密封容器中。倘若藥物為通過輸注來給予，則可將其分配至含有無菌藥物級(jí)水或鹽水的輸注瓶中。倘若藥物通過注射來給予，則可提供含有注射用無菌水或鹽水的安瓿以使得可在給予之前混合各成分。此外，可以以藥物試劑盒形式來提供藥物組合物，所述試劑盒包含(a)含有呈凍干形式的IL-23P19結(jié)合劑(例如，抗IL-23P19抗體)的容器及(b)含有藥學(xué)上可接受的注射用稀釋劑(例如，無菌水)的第二容器。藥學(xué)上可接受的稀釋劑可用于重組或稀釋凍干抗IL-23P19抗體或藥物。任選地，該容器可附帶有監(jiān)管藥物或生物產(chǎn)品的制備、使用或銷售的政府機(jī)構(gòu)所規(guī)定形式的公告，該公告顯示政府機(jī)構(gòu)已批準(zhǔn)用于人給予的制備、使用或銷售。IL-23P19結(jié)合劑(例如，抗IL-23P19抗體)在治療或預(yù)防免疫病癥或表達(dá)IL-23P19的癌癥中的有效量可通過標(biāo)準(zhǔn)臨床技術(shù)來確定。另外，可任選采用活體外分析來幫助確定最佳劑量范圍。調(diào)配中所用確切劑量亦可取決于給予途徑及免疫病癥或癌癥的階段，且應(yīng)根據(jù)從業(yè)醫(yī)師的判斷及各患者的情況來決定?？筛鶕?jù)得自活體外或動(dòng)物模型測(cè)試系統(tǒng)的劑量反應(yīng)曲線來推斷有效劑量。通常，抗IL-23P19抗體或IL-23P19結(jié)合劑給予患有免疫病癥或表達(dá)IL-23P19的癌癥的患者的劑量通常為約0.1mg/kg至約100mg/kg個(gè)體體重。給予個(gè)體的劑量為約0.1mg/kg至約50mg/kg個(gè)體體重、約1mg/kg至約30mg/kg、約1mg/kg至約20mg/kg、約1mg/kg至約15mg/kg、或約1mg/kg至約10mg/kg。示例性劑量包括(但不限于)1ng/kg至100mg/kg。在一些實(shí)施方案中，劑量為約0.5mg/kg、約1mg/kg、約2mg/kg、約3mg/kg、約4mg/kg、約5mg/kg、約6mg/kg、約7mg/kg、約8mg/kg、約9mg/kg、約10mg/kg、約11mg/kg、約12mg/kg、約13mg/kg、約14mg/kg、約15mg/kg或約16mg/kg。該劑量可以例如以下的頻率來給予：每日、每周一次(一周一次)、每周兩次、每周三次、每周四次、每周五次、每周六次、每?jī)芍芤淮位蛎吭乱淮?、每?jī)蓚€(gè)月一次或每三個(gè)月一次。在具體實(shí)施方案中，劑量為約0.5mg/kg/周、約1mg/kg/周、約2mg/kg/周、約3mg/kg/周、約4mg/kg/周、約5mg/kg/周、約6mg/kg/周、約7mg/kg/周、約8mg/kg/周、約9mg/kg/周、約10mg/kg/周、約11mg/kg/周、約12mg/kg/周、約13mg/kg/周、約14mg/kg/周、約15mg/kg/周或約16mg/kg/周。在一些實(shí)施方案中，劑量介于約1mg/kg/周至約15mg/kg/周的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，包含IL-23P19結(jié)合劑的藥物組合物還可包含與該結(jié)合劑綴合或未綴合的治療藥物?？笽L-23P19抗體或IL-23P19結(jié)合劑可與一或多種用于治療或預(yù)防免疫病癥或癌癥的治療藥物組合共同給予。該組合療法給予可對(duì)疾病參數(shù)(例如，癥狀嚴(yán)重度、癥狀數(shù)或復(fù)發(fā)頻率)產(chǎn)生累加或協(xié)同效應(yīng)。對(duì)于組合給予的治療方案，在一具體實(shí)施方案中，將抗IL-23P19抗體或IL-23P19結(jié)合劑與治療藥物同時(shí)給予。在另一具體實(shí)施方案中，在給予抗IL-23P19抗體或IL-23P19結(jié)合劑之前或之后給予治療藥物，即在給予抗IL-23P19抗體或IL-23P19結(jié)合劑之前或之后至少一小時(shí)且最長(zhǎng)數(shù)月、例如至少一小時(shí)、5小時(shí)、12小時(shí)、1天、1周、1個(gè)月或3個(gè)月給予治療藥物。制品在另一方面中，包括含有可用于治療上述病癥的材料的制品。該制品包含容器及標(biāo)記。適宜容器包括(例如)瓶子、小瓶、注射器及試管。容器可自例如玻璃或塑料等多種材料形成。容器容納可有效治療病況的組合物且可具有無菌出入口。例如，容器可為靜脈內(nèi)溶液袋或具有皮下注射針可刺入塞子的小瓶。組合物中的活性藥物為人源化抗IL-23P19抗體。容器上或與容器相連的標(biāo)記指示，該組合物為用于治療所選病況。制品還可包含第二容器，該第二容器包含藥學(xué)上可接受的緩沖液，例如磷酸鹽緩沖鹽水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)及右旋糖溶液。其還可包括根據(jù)商業(yè)及用戶角度考慮所期望的其他材料，包括其他緩沖液、稀釋劑、濾器、針、注射器及寫有使用說明的包裝說明書。本發(fā)明進(jìn)一步在下列實(shí)施例中加以描述，所述實(shí)施例不意欲限制本發(fā)明范疇。實(shí)施例實(shí)施例1：產(chǎn)生人源化抗IL-23p19抗體將小鼠前導(dǎo)抗體6B8轉(zhuǎn)化成由6B8的小鼠可變域及人類恒定IgG1KO域組成的嵌合抗體。小鼠抗體6B8展示于上文表1及表2中。IgG1KO(KO即knockout，剔除)具有兩個(gè)置換突變(Leu234Ala及Leu235Ala)，所述突變通過降低效應(yīng)功能，例如FcγR及補(bǔ)體結(jié)合而消除ADCC及CDC活性。小鼠抗體的可變域與嵌合抗體的可變域相同。產(chǎn)生嵌合抗體以確認(rèn)抗體的功能且確保獲得正確序列。接著經(jīng)由設(shè)計(jì)及篩選方法使抗體的可變區(qū)人源化。以任何給定位置中可為人類或小鼠殘基的方式制備人類及小鼠殘基變化的文庫。對(duì)于在人類種系與小鼠抗體之間不同的那些氨基酸，制備此類文庫。僅選擇保留親本小鼠抗體的功能的純系?？贵w6B8的代表性人源化可變區(qū)展示于表5及表6中。以此方式，抗體A、抗體B、抗體C及抗體D為由小鼠抗體6B8選殖至人類IgG1-KO(KO=剔除)/κ骨架中所獲得的人源化抗體?？贵wA、B、C及D展示于表7中。實(shí)施例2：抗體與重組IL-23蛋白的結(jié)合A)下文展示小鼠抗IL-23p19抗體與重組人類IL-23結(jié)合的動(dòng)力學(xué)及親和力(表9)。在單柱純化之后，使用自融合瘤產(chǎn)生的物質(zhì)，利用FortebioOctet(Fortebio,MenloPark,CA)來測(cè)量動(dòng)力學(xué)及結(jié)合親和力。因?yàn)镺ctet不為基于流體學(xué)的技術(shù)，所以此方法不提供對(duì)解離速率的精確測(cè)定。在一些情況下，僅可獲得親和力的估計(jì)值。表9抗體ka(1/Ms)kd(1/s)KD(pM)18C43.84E+052.14E-065.5718E53.29E+052.61E-067.9318D33.19E+052.16E-066.7820E84.21E+052.69E-0463822E23.46E+053.53E-04102424A52.02E+054.57E-0622.615C114.11E+051.07E-052643F51.72E+055.96E-0634.627G81.57E+054.26E-0627.231H92.99E+053.45E-0611.52D1<1e-6<19D12<1e-6<16B8<1e-6<173H105.29E+045.24E-0699.274H33.06E+042.09E-0668.335H826F74.76E+051.34E-0528.134G39.18E+053.10E-0532.834D93.44E+031.87E-06544B)測(cè)量源于小鼠抗體6B8的人源化抗體的親和力。使用ProteONXPR36(Biorad,Hercules,CA)測(cè)量、且整體擬合成1:1結(jié)合模型的動(dòng)力學(xué)結(jié)合數(shù)據(jù)顯示，與共價(jià)聯(lián)接p19與p40亞單元的重組IL-23(其含有21個(gè)氨基酸的接頭或不含有該接頭)的相互作用具有高親和力，親和力的范圍為1pM-100pM之間(表10)。亦測(cè)試抗體6H12(公開于WO2007/027714中)、抗體QF20(公開于WO2007/024846中)及抗體C1273(公開于WO2007/005955中)。表10C)用ProteONXPR36測(cè)量抗IL-23p19抗體與短尾猴IL-23結(jié)合的親和力及動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)，且整體擬合成1:1結(jié)合模型(表11)。亦測(cè)試抗體6H12(公開于WO2007/027714中)、抗體QF20(公開于WO2007/024846中)及抗體C1273(公開于WO2007/005955中)。表11抗體KD(pM)ka(1/Ms)kd(1/s)抗體A<12.95E+06<1e-6抗體B<12.99E+06<1e-6抗體C2.93.23E+069.36E-06抗體D15.92.07E+063.29E-05C-1273>5,000n/an/a6H121579.91E+051.56E-04QF201.23.90E+064.78E-06D)相對(duì)于人類IL-12的分子選擇性抗IL-23p19抗體亦在100nM的濃度下注射于人類IL-12表面。使用FortebioOctet測(cè)得的這些抗體的結(jié)合信號(hào)為零，這表明這些抗體選擇性結(jié)合人類IL-23。亦在50%人類血清存在下分析抗IL-23p19抗體與IL-23的結(jié)合且觀測(cè)到血清對(duì)結(jié)合速率無顯著影響，從而證明結(jié)合具有高特異性。實(shí)施例3：人類IL-23與人類IL-23R/Fc結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合分析在生物傳感器表面上捕捉人類IL-23R-Fc，并注射10nM人類IL-23。傳感器圖譜指示IL-23與IL-23受體之間的特異性結(jié)合(圖2，上部)。抗體接著與10nM人類IL-23共同注射以評(píng)估抗體與IL-23結(jié)合是否可抑制IL-23與IL-23受體之間的相互作用。在此實(shí)施例中，若抗體與人類IL-23結(jié)合且能夠抑制相互作用，則將觀測(cè)到結(jié)合降低或無結(jié)合(圖2，下部)。在所示實(shí)施例中，等摩爾濃度的抗體A與10nM重組人類IL-23共同注射。實(shí)施例4：功能性細(xì)胞分析，抑制小鼠脾細(xì)胞經(jīng)IL-23刺激產(chǎn)生IL-17一種針對(duì)抗IL-23p19抗體的功能性細(xì)胞分析，測(cè)量其抑制自小鼠脾分離的單核細(xì)胞經(jīng)IL-23刺激的產(chǎn)生IL-17的能力。人類重組IL-23蛋白能夠刺激IL-17自小鼠脾細(xì)胞釋放。此外，活化人類單核細(xì)胞性THP-1細(xì)胞的上清液中發(fā)現(xiàn)的天然來源的人類IL-23可用于刺激小鼠單核細(xì)胞產(chǎn)生IL-17。人類重組IL-23或來自活化THP-1細(xì)胞的天然人類IL-23與經(jīng)滴定的抗IL-23p19抗體一起預(yù)培育。接著將IL-23/抗體組合加入至新鮮分離的鼠類脾細(xì)胞中。僅將重組IL-23用作陽性對(duì)照。在培養(yǎng)兩天之后，收集細(xì)胞上清液且通過ELISA(R&DSystems,Minneapolis,MN)分析IL-17。下文展示抗IL-23p19抗體的代表性IC50值。所測(cè)試抗體為由融合瘤產(chǎn)生的小鼠抗體(第1-19列，參見表1及表2)、嵌合抗體(第20-23列)、及抗體A至D。亦測(cè)試抗體6H12(公開于WO2007/027714中)、抗體QF20(公開于WO2007/024846中)及抗體C1273(公開于WO2007/005955中)。表12抗體IC50值(pM)，重組人類IL-23IC50值(pM)，天然人類IL-2318C4471100，41318E5未測(cè)出9，9，1318D3234未測(cè)出20E8未測(cè)出438，56122E261，130117，3524A522，3785，3115C1112623243F5250，8000800027G8235500031H996020002D1未測(cè)出2336，1911，15979D1259281，1386B8138，273H101411未測(cè)出74H31352未測(cè)出36H8未測(cè)出未測(cè)出26F7272，834G333627，2534D9510456嵌合18E5318，36，10，9嵌合22E21009，178嵌合24A540495，102嵌合6B826，37，575，2，6，3抗體A5，5，5，151，1抗體B13，30，54，429，8抗體C53，71，162，8916，32抗體D236，225，614，458133，1256H121600，806，1300957，4400，1013，439QF20未測(cè)出7，12C1273未測(cè)出93，44實(shí)施例5：在人類活化T細(xì)胞分析中針對(duì)IL-12的功能特異性測(cè)試在人類活化T細(xì)胞分析中測(cè)試抗IL-23p19抗體對(duì)IL-12的功能性抑制。人類重組IL-12(1ng/ml)與5μg/ml抗IL-23p19抗體一起預(yù)培育。接著將所述IL-12/抗體組合添加至來自PHA的人類T細(xì)胞母細(xì)胞中。僅將重組IL-12用作陽性對(duì)照?？笽L-12p70抗體(BenderMedSystems,Vienna,Austria)用作對(duì)照的抑制性抗體。在培養(yǎng)兩天之后，收集細(xì)胞上清液且通過ELISA(R&DSystems)分析IFN-γ。一式三份測(cè)試樣品且測(cè)定IFN-γ的平均值(pg/ml)。結(jié)果(連同標(biāo)準(zhǔn)偏差)展示于下表中。表13抗體細(xì)胞因子刺激平均pg/mlIFN-γ+/-標(biāo)準(zhǔn)偏差無抗體無87+/-7無抗體1ng/mlIL-12532+/-51嵌合18E51ng/mlIL-12511+/-3嵌合6B81ng/mlIL-12523+/-60抗體A1ng/mlIL-12497+/-30抗體B1ng/mlIL-12537+/-2抗體C1ng/mlIL-12495+/-25抗體D1ng/mlIL-12539+/-38抗IL-12p70抗體1ng/mlIL-12119+/-12實(shí)施例6：抑制人類細(xì)胞系DB中由IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化人類細(xì)胞系DB(ATCC,Manassas,VA)通過內(nèi)源性IL-23R復(fù)合物(IL-23R及IL-12Rβ1)對(duì)IL-23刺激產(chǎn)生應(yīng)答，且以IL-23劑量依賴性方式使STAT3磷酸化。開發(fā)出一種用于測(cè)試抗IL-23p19抗體抑制IL-23誘導(dǎo)的STAT3磷酸化的分析。DB細(xì)胞以1×10e6個(gè)細(xì)胞/孔接種于96孔板中。欲測(cè)試的抗體經(jīng)連續(xù)稀釋且在室溫與重組人類IL-23(10ng/ml)一起預(yù)培育1小時(shí)。接著在37°C下，將抗體/IL-23混合物添加至細(xì)胞中，持續(xù)30分鐘。通過在4°C下離心10分鐘收集細(xì)胞且接著于冰冷緩沖液(CellSignalingTechnology,Beverly,MA)中將細(xì)胞溶解。對(duì)一部分溶解產(chǎn)物進(jìn)行磷酸STAT3ELISA(Invitrogen)。根據(jù)相比于無抗體對(duì)照孔的STAT3磷酸化抑制百分比計(jì)算抗體IC50值。代表性IC50值展示于下表中。表14抗體IC50(pM)抗體A25，15，38，23，13，18抗體B73，84抗體C132，80抗體D158QF2026，26，27C-1273163，438實(shí)施例7：小鼠耳中由IL-23誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞因子的活體內(nèi)模型使用小鼠中的活體內(nèi)模型。連續(xù)4天將重組人類IL-23注射至小鼠耳的皮膚中，從而導(dǎo)致表皮變厚且IL-17及IL-22蛋白上調(diào)。在此模型中評(píng)估抗IL-23p19抗體。在初次將IL-23注射至皮膚中之前1小時(shí)，經(jīng)單次腹膜內(nèi)注射給予1mg/kg或5mg/kg的抗體。再持續(xù)3天每日一次注射重組人類IL-23(其含有接頭)且收集組織進(jìn)行細(xì)胞因子評(píng)估。顯示抗體對(duì)細(xì)胞因子產(chǎn)生的抑制作用。三個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果展示于下表中(實(shí)驗(yàn)1：第1-7行，實(shí)驗(yàn)2：第8-10行，實(shí)驗(yàn)3：第1-14行)。表15實(shí)施例8：短尾猴中的藥物動(dòng)力學(xué)研究通過靜脈內(nèi)輸注十分鐘來向三只短尾猴給予人源化抗IL-23p19抗體，劑量為1.0mg/kg。歷經(jīng)6周時(shí)程收集血清樣品，且使用特定ELISA測(cè)量游離抗體濃度。抗體的血清濃度-時(shí)間曲線及相應(yīng)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)概述于下表16中。表16抗體CL(ml/d/kg)Vol(ml/kg)AUC(nM·h/ml)T1/2(天)MRT(天)抗體A5.2883226212.117.2抗體B6.0872703010.114.8抗體C4.7913464214.119.6抗體D3.4674763312.619.8實(shí)施例9：NSO細(xì)胞中的表達(dá)及生物物理學(xué)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)染NS0細(xì)胞及產(chǎn)生穩(wěn)定細(xì)胞池(pool)：使NS0細(xì)胞在1%FBS存在下生長(zhǎng)，隨后進(jìn)行轉(zhuǎn)染。收集40×10e6個(gè)細(xì)胞，且與20μg線性化DNA(重鏈及輕鏈表達(dá)載體)一起再懸浮于含有2%FBS的0.8ml培養(yǎng)基中，接著在冰上培育細(xì)胞約15分鐘，隨后在750V/25μF(Bio-RadGenePulserXcell)下對(duì)細(xì)胞電穿孔。在37°C及5%CO2下用2%FBS回收細(xì)胞約48小時(shí)，接著以2×10e5個(gè)細(xì)胞/ml接種于含有G418及霉酚酸的96孔板中，持續(xù)14-21天直至形成群落。通過ELISA自96孔板篩選帶有群落的上清液。ELISA板用含1μg/ml山羊抗-κ(SouthernBiotech,Birmingham,AL)的PBS涂布，且培育經(jīng)稀釋的上清液，接著用山羊抗-人類IgGFc-HRP(來自JacksonImmunoResearchLaboratories,WestGrove,PA)檢測(cè)。匯合陽性群落以擴(kuò)大規(guī)模。根據(jù)制造商方案使用蛋白A尖頭(proteinAtips)，通過ForteBio測(cè)定抗體產(chǎn)生的效價(jià)?？贵wA及抗體D的效價(jià)介于250-350mg/L之間，自蛋白質(zhì)純化的回收率超過80%，且在IEX純化之后含超過94%的單體。將蛋白質(zhì)再懸浮于含有20mM檸檬酸鈉及115mMNaCl的最終緩沖液(pH6.0)中且在4°C下保持穩(wěn)定至少4個(gè)月，且在該緩沖液中的溶解度高達(dá)100mg/ml。表17表18AUC：在0.5-1mg/ml的濃度下，根據(jù)沉降速度法的測(cè)量進(jìn)行分析超速離心；SEC：尺寸排阻色譜；%M：?jiǎn)误w百分比。實(shí)施例10：表位定位(mapping)使用氫/氘交換質(zhì)譜(HXMS)來定位抗體A與人類IL-23p19結(jié)合的表位。此方法測(cè)定IL-23p19的酰胺骨架氫與D2O交換的易發(fā)性。實(shí)驗(yàn)用單獨(dú)的IL-23以及添加有抗體A的IL-23進(jìn)行。由此鑒定IL-23p19序列中顯示因抗體A的結(jié)合而顯著地免于交換的區(qū)域。方法的分辨率取決于用胃蛋白酶或蛋白酶XVIII消化所產(chǎn)生的肽。通過采用標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確質(zhì)量及HPLCMS/MS技術(shù)用未交換樣品進(jìn)行其它對(duì)照實(shí)驗(yàn)來鑒定這些源于IL-23p19的肽。使用重組人類IL-23。對(duì)于蛋白質(zhì)+抗體樣品，50μlIL-23(0.8mg/ml)與10μl抗體A(12.7mg/ml)一起在室溫培育15分鐘。抗體A/IL-23的最終摩爾比為1.2:1。為進(jìn)行交換，將5μlIL-23蛋白加入50μl氘化緩沖液(含50mMPBS的D2O)中且在室溫培育100秒。添加50μl2M脲/0.5MTCEP且在室溫培育60秒。添加5μl胃蛋白酶或蛋白酶XVIII(4mg/ml，溶于0.1%甲酸中)，并將樣品即刻冷卻至4°C。在5分鐘之后，在下列條件下將50μl樣品注射于ShimadzuHPLC系統(tǒng)(SCL10A控制器及兩個(gè)LC10AD泵)上：流動(dòng)相A=99/1/0.1(水/乙腈/甲酸)。流動(dòng)相B=95/5/0.1(乙腈/水/甲酸)。流速=100μl/min。柱=PhenomenexJupiterC5，5μ，50×1.0mm。流動(dòng)相管線、柱、注射器環(huán)處于冰浴中。梯度=時(shí)間0(3%B)，時(shí)間2.2(3%B)，時(shí)間10.1(90%B)，時(shí)間12.0(90%B)，時(shí)間12.1(3%B)。如下進(jìn)行質(zhì)譜分析：質(zhì)譜儀=ThermoOrbitrapVelos(0900865)。方法：A.斷裂化(以鑒定肽)：12分鐘采集時(shí)間(3分鐘起動(dòng)延遲)，在30,000分辨率下全掃描FTMS，七次離子阱數(shù)據(jù)依賴性掃描(CID)。B.MS操作：12分鐘采集時(shí)間(3分鐘起動(dòng)延遲)，在60,000分辨率下全掃描FTMS。使用斷裂化數(shù)據(jù)及程序ProteomeDiscoverer(Thermoscientific,Waltham,MA)鑒定胃蛋白酶及蛋白酶XVIII肽。所鑒定的肽使用Xcalibur軟件(Thermoscientific)進(jìn)行目視比較(單獨(dú)的蛋白質(zhì)與存在抗體的蛋白質(zhì))。對(duì)于單獨(dú)的IL-23與有抗體A的IL-23而言，在IL-23p19區(qū)的外部無顯著交換變化。對(duì)于蛋白質(zhì)的p19部分，使用程序PepMap(Thermoscientific)分析數(shù)據(jù)。此程序計(jì)算所交換肽的平均質(zhì)量。檢查PepMap結(jié)果且藉助于MicrosoftExcel計(jì)算不產(chǎn)生所驗(yàn)證結(jié)果的那些肽。IL-23序列中顯示因抗體A的結(jié)合而顯著地免于交換的區(qū)域，鑒定為SEQIDNO:181的氨基酸殘基108至126及SEQIDNO:181的氨基酸殘基137至151。