專利名稱：一種肌苷的分離方法
專利說明 本發(fā)明涉及一種肌苷的分離方法，特別是一種從肌苷濃度低、雜質(zhì)離子含量高的微生物發(fā)酵液中分離肌苷的方法。
目前國內(nèi)外多采用離子交換柱上柱分離，炭柱濃縮后真空濃縮的方法從枯草桿菌發(fā)酵液中分離肌苷。由于發(fā)達(dá)國家的發(fā)酵技術(shù)較為先進(jìn)，發(fā)酵液中的肌苷含量可高達(dá)30‰左右，使用上述工藝一般有較高的肌苷得率。而國內(nèi)的發(fā)酵液含肌苷量一般為7～9‰，通常發(fā)酵液上離子交換柱時(shí)上柱量約僅為樹脂體積的2～2.5倍，耗酸堿量大，肌苷上柱率低，離交柱的洗脫殘余損失大，由于洗脫頻繁，跑、冒、漏等外損失較大。一般國內(nèi)廠家的肌苷得率約為65%左右，經(jīng)濟(jì)效益較低。
本發(fā)明的目的在于提出一種低濃度高含雜量的肌苷發(fā)酵液的分離方法，使離交過程中樹脂上柱量大，肌苷得率高，提取的肌苷濃度高、減小耗酸堿量。
克服傳統(tǒng)工藝方法的缺點(diǎn)的關(guān)鍵在于提高離交柱的上柱率的同時(shí)提高發(fā)酵液對(duì)離交柱的上柱量。在發(fā)酵液中含有較多的雜質(zhì)離子，這些雜質(zhì)離子在上離交柱的過程中被離交柱所吸附，占據(jù)了吸附位置，影響了吸附肌苷。本發(fā)明的核心思想是在上離交柱前先除去雜質(zhì)離子。本發(fā)明包括對(duì)枯草桿菌發(fā)酵液進(jìn)行陽離子柱上柱分離，經(jīng)炭柱濃縮后真空濃縮的處理步驟，對(duì)所述的發(fā)酵液進(jìn)行上述處理之前，先將發(fā)酵液的PH值調(diào)節(jié)到1.5～6，然后對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行電透析處理。所述的發(fā)酵液的PH值較佳值為3～6，最佳值是4。在上述PH范圍絕大多數(shù)呈中性狀態(tài)，減少了肌苷在電透析過程中的損失。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是在提高離子交換柱的上柱率的基礎(chǔ)上，提高發(fā)酵液的上柱量到樹脂體積的6倍以上，減小了洗脫殘余損失和外損失，減少了酸堿用量，提高了分離所得的肌苷的濃度，提高了經(jīng)濟(jì)效益，尤其適用于目前國內(nèi)廠家的肌苷生產(chǎn)技術(shù)的改進(jìn)。
下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明

圖1是離子交換柱的洗脫關(guān)系圖?？v坐標(biāo)P代表洗脫流出液的肌苷含量百分比，橫坐標(biāo)Q代表洗脫流出液體積，曲線1代表現(xiàn)有工藝下P隨Q的變化曲線，曲線2代表本發(fā)明的工藝下P隨Q的變化曲線。R代表洗脫接收的低限濃度。打斜線部分代表每次洗脫的殘余損失。
參照附圖將肌苷發(fā)酵液(枯草桿菌發(fā)酵)用酸液處理，調(diào)節(jié)發(fā)酵液的PH值至1.5～6，所用酸液可以是鹽酸、硫酸或硝酸。然后對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行電透析處理，處理的最大電流為3.75A/dm2，10立升經(jīng)4M2陰阻離子膜處理15～20分鐘，得到較純的含肌苷液。不同PH值的發(fā)酵液經(jīng)電透析后肌苷得率D1列成表一。將該含肌苷液上離子交換柱分離，離交柱直徑為45厘米，高為62厘米，樹脂體積為100毫升，型號(hào)可以是001×7樹脂成氫型、DO31樹脂成氫型或docite c-3樹脂成氫型。不同PH值的含肌苷液的上柱率D2列成表二。然后將離交柱用酸或堿洗釋，電透析液和未電透析液的洗脫收率D3列成表三。由于曲線2比曲線1豐滿，代表洗脫殘余損失的打陰影部分面積與總曲線下面積之比較小，亦即洗脫殘余損失小。表四列出了不同PH值發(fā)酵液的總得率D＝D1×D2×D3，將分離所得肌苷經(jīng)炭柱濃縮后真空濃縮。


權(quán)利要求
1、一種肌苷的分離方法，特別是一種從肌苷濃度低，雜質(zhì)離子含量高的微生物發(fā)酵液中分離肌苷的方法，包括對(duì)所述的發(fā)酵液進(jìn)行陽離子柱上柱分離，經(jīng)炭柱濃縮后真空濃縮的處理步驟，其特征在于對(duì)所述的發(fā)酵液進(jìn)行上述處理之前，先將發(fā)酵液的PH值調(diào)節(jié)到1.5～6，然后對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行電透析處理。
2、如權(quán)利要求1所述的一種肌苷的分離方法，其特征在于所述發(fā)酵液的PH值為3～6。
3、如權(quán)利要求1所述的一種肌苷的分離方法，其特征在于所述發(fā)酵液的PH值的最佳值為4。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種高含雜量低濃度的含肌苷發(fā)酵液的分離方法，其要點(diǎn)是先將發(fā)酵液的pH值調(diào)節(jié)劑1.5～6，經(jīng)電透析處理后，再用傳統(tǒng)工藝處理。能提高離交柱的上柱率，明顯提高上柱量，提高肌苷總得率，減小耗酸堿量。尤其適用于國內(nèi)肌苷生產(chǎn)廠家的工藝改進(jìn)。
文檔編號(hào)C07H19/16GK1063873SQ9110059
公開日1992年8月26日 申請(qǐng)日期1991年1月29日 優(yōu)先權(quán)日1991年1月29日
發(fā)明者邢啟宏, 潘美鳳 申請(qǐng)人:杭州市糧油科學(xué)研究設(shè)計(jì)所